Boletín de Malariología y Salud Ambiental

Molecular epidemiology of Dengue virus

El dengue es la enfermedad viral más importante transmitida por mosquitos a humanos por su alta morbimortalidad y el potencial de diseminación de su vector Aedes aegypti. Además, la falta de una vacuna y medicamentos antivirales específicos, así como el incremento progresivo de las infecciones secundarias y la hiperendemicidad en diferentes países, hacen de esta enfermedad un problema de salud pública. Existen cuatro serotipos del virus del dengue (DENV), dentro de cada serotipo se han descrito varios genotipos, constituidos a su vez por diferentes linajes o clados. La epidemiología molecular combina los análisis filogenéticos de los DENV detectados en un área geográfica, en un tiempo definido, con la información clínica y epidemiológica disponible. El objetivo de estos estudios es tratar de establecer asociaciones entre genotipos o linajes virales con el origen (ancestros), procedencia geográfica, ruta de transmisión viral, severidad de la enfermedad, grupos poblacionales afectados, y la intensidad y extensión de los brotes epidémicos. La epidemiología molecular ha generado información relevante como la etiología del DENV genotipo Asiático en los casos graves de dengue de la epidemia ocurrida en Venezuela en 1989, y la identificación de cambios nucleotídicos puntuales en el genoma viral asociados a propiedades biológicas fundamentales. En la actualidad se hace necesario realizar análisis exhaustivos del genoma viral completo, conjuntamente con el análisis bioinformático, biológico, clínico y epidemiológico de los cuatro serotipos circulantes en los países endémicos, así como instaurar en los laboratorios adscritos a los sistemas de vigilancia epidemiológica del dengue, la vigilancia molecular para la identificación de genotipos (o linajes) circulantes, lo que contribuiría entre otros aspectos al control efectivo de la enfermedad por DENV.

Dengue is the most important viral disease transmitted by mosquitoes to humans in tropical and subtropical regions of the world. This is the result of its high morbidity and mortality, the spread potential of the vector Aedes aegypti, the lack of effective vaccines and specific antiviral drugs, the gradual increase in secondary infections and hyperendemicity differences in distinct countries. There are four serotypes of dengue virus which are phylogenetically grouped in genotypes and subdivided in lineages or clades. Molecular epidemiology combines phylogenetic analysis of DENV detected in particular geographic areas within a defined time with the available clinical and epidemiologic information. The objective of these studies is to look for relationships between genotypes or lineages, viral origin, geographical spreading and routes of viral transmission, disease severity, population groups affected, and the intensity, speed and extent of outbreaks. Also, molecular epidemiology has generated relevant information such as the Asian genotype DENV etiology in cases of the severe dengue epidemic in Venezuela in 1989, and the identification of specific nucleotide changes in the viral genome associated with its fundamental biological properties. However, analysis of the complete viral genome, together with bioinformatic, biological, clinical and epidemiological analysis corresponding to the four serotypes circulating in endemic countries should be performed. Molecular surveillance for the identification of genotypes (or strains) circulating should be implemented in the laboratories responsible for the epidemiological surveillance of dengue, which would improve the effective control of DENV.

Detection of Leishmania braziliensis in a mucosal lesion with 16 years of evolution: A case report

Se registra, en un paciente masculino de 48 años, la detección de Leishmania (Viannia) braziliensis en muestra de lesión mucosa crónica con 16 años de evolución clínica. El caso presentado cursa con perforación del tabique nasal no evidenciándose lesión cutánea primaria sugestiva de leishmaniasis. Por su ocupación el paciente ha frecuentado, por largos períodos, bosques en áreas endémicas para leishmaniasis en el occidente de Venezuela. Continuas evaluaciones clínicas, inmunológicas e histopatológicas realizadas durante varios años fallaron en establecer un diagnóstico certero incrementando la severidad del caso. Exámenes recientes realizados en nuestro laboratorio revelan la presencia de amastigotes en muestras de la lesión nasal activa en extendidos coloreados con tinción de Giemsa. La identificación del parásito como L. braziliensis y la verificación de la infección por este parásito en el paciente, fue lograda por ensayos de PCR y Western Blot, respectivamente. Se concluye que el caso presentado sufre una leishmaniasis mucocutánea de vieja data con una baja respuesta inmunológica, a juzgar por la frecuente negatividad en pruebas de IDR y/o la detección de anticuerpos circulantes anti-Leishmania. Se discute sobre la imprecisión diagnóstica en el caso presentado y se advierte sobre el riesgo epidemiológico potencial de casos similares.

The detection of Leishmania (Viannia) braziliensis from a chronic mucosal lesion with 16 years of clinical evolution in a 48 years old male patient is reported. The patient showed destruction of the nasal septal cartilage with no evidence of primary leishmanial lesion. Due to his professional work he frequently visited areas of western Venezuela where leishmaniasis is endemic. Frequent clinical, immunologic and histopathologic evaluations carried out during several years failed to establish a right diagnosis, increasing the severity of the mucosal lesion. The finding of a sparse number of amastigotes in a sample from the mucosal lesion stained by Giemsa stain, suggested a mucosal infection by Leishmania. The identification of the parasite as L. braziliensis and the verification of the infection by this parasite in the reported case were carried out using a PCR assay and a Western Blot test, respectively. It is concluded that the patient was suffering a long-lasting, reluctant to heal and severe lesion with a low immunological response due to infection by L. braziliensis causing mucocutaneous leishmaniasis (MCL). The fail in the diagnosis of this particular case of MCL and the potential epidemiological risk in similar cases are discussed.

Standardization of ELISA technique for the immunological diagnosis of human toxocariasis

La toxocariasis o síndrome de larva migrans visceral es causada por un nemátode del género Toxocara, parásito de animales domésticos (perros y gatos). El hombre es un hospedador accidental, al contaminarse con huevos embrionados del parásito. Las larvas invaden la pared intestinal y son transportadas a vísceras, musculatura o globo ocular, donde son atacadas por una reacción granulomatosa del hospedador. El diagnóstico de la enfermedad es complicado debido a la sintomatología inespecífica y que las larvas solo pueden ser evidenciadas por biopsias, que es un método invasivo. Los métodos inmunológicos son una alternativa, en tal sentido en esta investigación se planteó como objetivo estandarizar una técnica inmunológica para la determinación de anticuerpos anti-T.canis para el diagnóstico de toxocariasis humana. Los parásitos adultos expulsados por cachorros infectados se identificaron por microscopia óptica y electrónica, se obtuvieron los huevos, los cuales se hicieron embrionar para la liberación de las larvas, y éstas se mantuvieron en cultivo, para luego obtener y purificar los antígenos de excreción/secreción. Se estandarizaron las condiciones de reacción de la ELISA, obteniéndose como concentraciones óptimas 2 μg/mL de antígeno, dilución de suero y conjugado fueron de 1/400 y 1/20000 respectivamente. Los índices diagnósticos fueron: sensibilidad 100%, especificidad 98,9%, valor predictivo positivo 94,4% y valor predictivo negativo 100%. Con la técnica estandarizada se pudieron diferenciar los sueros de pacientes con Toxocariasis, con respecto a los de pacientes con otras helmintiasis y muestras de suero de individuos sanos, logrando el diagnóstico de Toxocariasis humana.

The toxocariasis or visceral larva migrans syndrome is caused by a nematode of the genus Toxocara, a parasite of domestic animals (dogs and cats). Man is an accidental host, by oral contamination with embryonated eggs of the parasite. The larvae invade the intestinal wall and are transported to the viscera, muscle or eyeball, where they are attacked by a granulomatous reaction of the host. The diagnosis of the disease is complicated by nonspecific symptoms and the larvae can only be demonstrated by biopsy which is an invasive method. Immunological methods are an alternative. The objective of this study was standardizing an immunological technique for the determination of anti-T. canis antibodies for diagnosis of human Toxocariasis. We identified by optical and electron microscopy, adult worms expelled by infected pups and we obtained eggs, which became embryos that released the larvae. These were maintained in culture. Excretion/secretion antigens (E/S) were purified from the culture. Subsequently, we standardized reaction conditions of the ELISA technique, obtaining as optimal concentrations 2 mg/mL of antigen, serum dilution and conjugate 1/400 and 1/20000 respectively. With the standard technique we evaluated 17 serum samples from patients with confirmed Toxocariasis, 50 patients with other helminth infections and 40 healthy individuals. The diagnostic indexes were sensitivity 100%, specificity 99%, 94% positive predictive value and negative predictive value 100%. The diagnostic indexes obtained show that the ELISA using excretion/secretion antigen of the parasite is suitable for immunodiagnosis of human Toxocariasis.

Spatio-temporal hierarchical models for mapping relative risks of dengue in the Municipality of Girardot, Aragua State , Venezuela

Los modelos Bayesianos jerárquicos espaciotemporales han sido usados en el mapeo de enfermedades, estudios de contaminación ambiental, contaminación industrial, entre muchos otros. Bajo esta metodología, los datos están asociados con un punto en una localidad E y con un instante de tiempo t. El objetivo de este trabajo es modelar el riesgo relativo de contraer dengue en el municipio Girardot del estado Aragua, Venezuela, durante el periodo epidemiológico del año 2009. Se proponen tres estructuras de modelos, un Binomial que toma en cuenta la variabilidad en el conteo de la ocurrencia de la enfermedad en las parroquias del municipio. Una segunda propuesta incluye un modelo Binomial como primer nivel de jerarquía, más un segundo nivel que introduce el efecto espacial, el efecto temporal y la interacción espacio-tiempo. Finalmente, un tercer modelo espacial que combina el modelo Poisson en el primer nivel de jerarquía para el número de casos, y en el segundo nivel de jerarquía se relaciona el riesgo relativo con las covariables a través de la función logaritmo más un efecto aleatorio. Los datos fueron recopilados por semanas y clasificados de acuerdo a las parroquias del municipio. Se utilizó el criterio de información de deviancia (DIC) para seleccionar el mejor modelo, resultando el modelo Poisson el más adecuado para representar el riesgo relativo de contraer dengue en la zona bajo estudio, confirmando que los patrones de alto riesgo se encuentran en las parroquias ubicadas al sur y suroeste del municipio Girardot, colindando algunas de ellas con el lago de Valencia.

Hierarchical Bayesian space-time models have been used in the mapping of disease, studies of environmental pollution and industrial pollution, among many others. Under this methodology, the data is associated with point in a locality E and an instant in time t. The aim of this work is to model the relative risk of dengue in Girardot Municipality, Aragua State, Venezuela, during the epidemic period 2009. In that sense, we propose three models. First, a binomial model that measures the variability in the count of occurrence of the disease in the parishes of the municipality. A second model includes the binomial model as a first hierarchical level, plus a second level which introduces the spatial effect, the temporal effect and spacetime interaction. Finally, a third spatial model that follows a Poisson model at the first level of hierarchy for the number of cases, and in the second level of hierarchy relates the relative risk associated with covariates through the logarithm function over a random effect. Data were collected for weeks and classified according to the parishes of the municipality. The Deviance Information Criterion (DIC) was used to select the best model. The Poisson model was best suited to represent the relative risk of contracting dengue in the area under study, showing that high-risk patterns were found in the parishes located in the south and southwest of the Girardot municipality, some of them bordering the lake of Valencia.

Intraspecific phylogeny and genetic variability of Culex quinquefasciatus Say (Diptera: Culicidae) with mitochondrial genes ND5 and COI

Culex quinquefasciatus Say (Diptera; Culicidae) es un mosquito perteneciente al complejo Pipiens con distribución amplia en el mundo y en Venezuela tanto en zonas urbanas como rurales; es acentuadamente antropofílico y vector de varios virus y parásitos mantenidos en la naturaleza en un ciclo enzoótico ave-mosquito-ave. Dicha distribución y ocupación de hábitats larvales de origen antropogénico podría sugerir la presencia de subpoblaciones geográficas que pudieran participar en forma diferencial en la transmisión de patógenos. Los análisis filogenéticos y redes de haplotipos de éste trabajo, con secuencias de los genes mitocondriales (Subunidad I del Citocromo oxidasa y Subunidad 5 de la NADH deshidrogenasa) de poblaciones de Cx. quinquefasciatus colectadas en nueve localidades (cementerios) de Venezuela sugieren alta homogeneidad genética inter-poblacional y una sola entidad filogenética (monofilia). Se demostró que el fragmento del gen COI tiene mayor resolución en la definición de la filogenia de especies cercanas y a nivel de géneros y ajustado con la clasificación actual. El gen ND5 con alta variación es más útil para estudios poblacionales, sin embargo muestra parafilia entre Cx. corniger y Cx. quinquefasciatus, que representa una evidencia de posible homogenización por entrecruzamiento, introgresión o infección por Wolbachia. Las redes de haplotipos sugieren poblaciones en expansión con alta variabilidad haplotípica y heterogeneidad genética intra poblacional y homogeneidad inter poblacional, con implicaciones evolutivas en la dispersión de sus poblaciones y el éxito en áreas urbanas, así como evidencia de posible cuello de botella en poblaciones producto de marcadas campañas de aplicación de insecticidas, información útil en la planificación de futuras estrategias de control sanitario.

Culex quinquefasciatus Say (Diptera, Culicidae) is a mosquito belonging to the Pipiens complex with wide distribution in the world and in Venezuela, both urban and rural. Besides, it is a markedly anthropophilic vector of several viruses and parasites maintained in nature in a cycle enzootic bird-mosquito-bird. The wide distribution and occupation of larval habitats of anthropogenic origin may suggest the presence of geographical subpopulations, which may differentially participate in the transmission of pathogens. Phylogenetic analysis and haplotype networks with sequences of mitochondrial genes (cytochrome oxidase subunit I and subunit 5 of NADH dehydrogenase) of populations collected in nine locations (cemeteries) of Venezuela showed high interpopulation genetic homogeneity and a single phylogenetic entity (monophyly). It demostrated that the COI gene fragment had a higher resolution in the definition of the phylogeny of closely related species and genera level and correlated with the current classification. The ND5 gene variation is highly useful for population studies. However, this gene showed paraphyly between Cx. corniger and Cx. quinquefasciatus as an evidence of possible homogenization by inbreeding, introgression or infection with Wolbachia. The haplotype networks suggest expanding populations with high haplotype variability and genetic heterogeneity occurred within populations. Moreover, the analysis, showed homogeneity among populations with evolutionary implications in the dispersion of their populations and successful occupation in urban areas, as well as evidence of possible population bottleneck as consequence of insecticide control campaigns.

Field trials on the efficacy and persistence of three formulations of Bacillus sphaericus against larvae of Anopheles aquasalis Curry in mangroves of Mariño municipality, Sucre state, Venezuela.

Anopheles aquasalis Curry es el principal vector de malaria de la región nororiental de Venezuela. Un estudio sobre el control biológico de la especie fue realizado en Rio Chiquito Abajo, municipio Mariño, estado Sucre. El objetivo del mismo fue evaluar en condiciones de campo, la eficacia y persistencia de tres formulaciones comerciales de Bacillus sphaericus contra larvas de An. aquasalis. Los criaderos típicos de esta especie son humedales de agua dulce con vegetación herbácea emergente y manglares salobres estacionales con vegetación arbórea (Avicennia germinans). El hábitat seleccionado para realizar los bioensayos fue un típico manglar de Avicennia germinans. En este criadero de An. aquasalis, se evaluaron estas formulaciones de B. sphaericus: dos formulaciones liquidas (GRISELESF-Cepa 2362 y VECTOLEX® WGD-51,2%) y una formulación granulada (VECTOLEX® CG-7,5%). En cada prueba, se aplicó un diseño completamente al azar con 4 repeticiones por tratamiento y por control. Los resultados fueron expresados como porcentajes de reducción larval, después de aplicar la formula de Mulla. De acuerdo con los resultados obtenidos, la formulación granulada VECTOLEX® CG-7,5% con dosis de 30 Kg/ha (3 g/m²), resultó ser altamente eficaz hasta 7 días post-aplicación con 92,3% de reducción, la misma fue menos efectiva después de 14 días post-aplicación con 74,8%. Al aumentar la dosis a 40 Kg/ha (4 g/m²), la eficacia después de 7 días de la aplicación fue de 93,9 %, es decir muy similar que a la dosis anterior. Ambas dosis presentaron la misma eficacia contra larvas de An. aquasalis. Por otra parte, la otra formulación VECTOLEX® WGD-51,2%, con la dosis de 2,0 Kg/ ha, resultó ser eficaz hasta 8 días post-aplicación con 85,2% de reducción larval; la misma produjo 13,3% de reducción a los 16 días post-tratamiento; sin embargo, esta formulación con la dosis de 2,5 Kg/ha, fue altamente eficaz hasta 16 días postaplicación con más de 90% de reducción larval. En cambio, en el mismo manglar el producto GRISELESF fue menos eficaz tanto a 2,0 Kg/ha como a 2,5 Kg/ha, obteniéndose porcentajes de reducción muy bajos a los 8 y 16 días post-aplicación.

Anopheles aquasalis Curry is the main vector of malaria in northeastern Venezuela. A study of biological control of An. aquasalis larvae was carried out in Río Chiquito Abajo, Sucre State, Venezuela. The objective of this study was to evaluate effectivity and persistence of three formulations of Bacillus sphaericus against larval populations of An. aquasalis. The main breeding-sites of An. aquasalis are seasonal brackish mangrove with Avicennia germinans and semi-permanent freshwater wetlands with herbaceous emergent vegetation. A typical seasonal brackish mangrove with Avicennia germinans was selected. In these breeding-sites of An. aquasalis, three commercial formulations of B. sphaericus: VECTOLEX® CG-7.5%, VECTOLEX® WGD-51.2% and GRISELESF were evaluated in field trials. According to the results obtained VECTOLEX® CG-7.5% was effective against An. aquasalis larvae during 7 days post-treatment at rates not lower than 30 Kg/ha (3 g/m²), producing a larval reduction greater than 92.3%. This granular formulation provided very good larval control during 7 days. The two dosages (30 and 40 Kg/ha) had the same efficacy against An. aquasalis larvae. The second commercial formulation VECTOLEX® WGD-51.2% was effective against An. aquasalis larvae at dose of 2.0 Kg/ ha, producing a larval reduction greater than 85 % during 8 days post-treatment, and only 13.3 % larval reduction at 16 days after treatment; but the same formulation with at dose of 2.5 Kg/ha was more effective, producing a larval reduction greater than 90 % during 16 days posttreatment. In the same brackish mangrove, GRISELESF at rates not lower than 2.0 and 2.5 Kg/ha, appears to be less effective against An. aquasalis larvae, producing very low larval reduction at 8 and 16 days post-treatment.

Oral pathogenicity of an autochthonous isolate of the entomopathogenic fungus **Beauveria bassiana in mice (Mus musculus, strain NMRI)**

Se evaluó a concentración de 1x10(8) conidias/mL por vía oral en ratones albinos NMRI, la patogenicidad del aislamiento fúngico LF14 de Beauveria bassiana, el cual posee una elevada virulencia hacia Rhodnius prolixus y Triatoma maculata (Triatominae), vectores de enfermedad de Chagas en Venezuela. Se hicieron observaciones clínicas diarias. Se estimó el aclaramiento fúngico mediante examen directo y cultivo de muestras de heces, y de infectividad con la toma de muestras de tejidos y estudio histopatológico. No se registró muertes ni alteraciones clínico-patológicas, y el comportamiento en todos los animales fue activonormal. El peso promedio corporal, tanto en los animales expuestos a LF14 B. bassiana como los controles, se incrementó con el tiempo, siendo sólo las diferencias entre sexos estadísticamente significativas (P<0,0000). Se obtuvieron conidias viables en heces hasta el día 7 después del consumo del hongo. No se detectó anormalidades en la inspección anatomopatológico ni conidias germinadas en ninguno de los órganos estudiados, sin ninguna reacción tisular patológica, sugiriendo que no existe evidencia de multiplicación fúngica. Los resultados obtenidos permiten concluir que el aislamiento LF14 de B. bassiana no es patogénico cuando se administró por vía oral en ratones albinos NMRI.

This study evaluated concentrations of 1x10(8) conidia/mL orally administered in white mice (NMRI strain, males and females), pathogenicity of a native isolate LF14 of Beauveria bassiana (Fungi: Ascomycota), highly virulent to Rhodnius prolixus and Triatoma maculata (Triatominae), vectors of Chagas disease in Venezuela. Clinical evaluations were done daily. Clearance of fungus in the faeces was estimated by direct examination and culturing, and infectivity by performing mycological and histopathological tests.Animals showed no discernible pathological changes or death and had 100% active-normal behaviour. In all the mice groups, including control ones, there was an increase in the mean weight gained through time, with statistically significance difference between the sexes (P<0,0000). Viable conidia were observed in faeces until 7 days after consuming the fungus. Anatomopathological changes or germinated conidia were not detected in analysed organs, with normal tissue reactions, suggesting no evidence for fungal multiplication. Results obtained allowed us to conclude that isolate LF14 B. bassiana orally administered is safe and non pathogenic in white mice (NMRI strain).

Biofilms formation and antimicrobial susceptibility among coliforms isolated in bottled drinking water in Carabobo, Venezuela

Bacterias indicadoras de contaminación tales como bacterias heterótrofas, coliformes totales y termotolerantes fueron enumeradas en agua potable embotellada usando métodos estándar y filtración a través de membrana. El desarrollo de biopelículas y la susceptibilidad antimicrobiana (método de Kirby-Bauer) fueron evaluados sobre sesenta aislados de coliformes seleccionados de forma aleatoria. De 50 muestras, en un elevado porcentaje (94), se observó niveles de bacterias heterotróficas por encima de 100 UFC/mL de agua, 38 % presentó al menos una UFC/100 mL de coliformes totales o termotolerantes, mientras que, 30 % y 28 %, presentaron más de diez UFC/100 mL para ambos indicadores, respectivamente. Las especies de coliformes identificadas en mayor proporción fueron, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Escherichia coli y Klebsiella oxytoca. Usando un ensayo in vitro para detectar la formación de biopelículas se determinó que entre un 75,8 y 79,2 % de los coliformes totales y termotolerantes, respectivamente, fueron descritos como moderados o fuertes formadores de biopelículas. No se observaron diferencias significativas (P>0,05) con respecto a la capacidad de formación de biopelículas entre los dos grupos. La mayoría de los aislados resultaron susceptibles frente a los antimicrobianos evaluados, únicamente dos especies presentaron fenotipos de resistencia no naturales. Perfiles de multiresistencia, típicos de especies asociadas con actividades clínicas o veterinarias, fueron identificados en un aislado de Enterobacter cloacae (betalactamasas tipo AmpC derreprimida) y un aislado de Escherichia coli fue resistente a ampicilina. Este estudio sugiere que el agua potable en botellones plásticos que se expende en algunas áreas urbanas de Carabobo, Venezuela, puede representar un riesgo para la salud.

Pollution indicator bacteria such as heterotrophic bacteria, total and thermotolerant coliforms were quantified in bottled drinking water using standard method and membrane filter procedure. Biofilm formation and antimicrobial susceptibility (Kirby-Bauer method) were tested on sixty randomly selected coliform strains. Among 50 water samples, a large percentage (94) were found with heterotrophic bacteria levels above 100 CFU/mL, 46 % showed at least one CFU/100 mL of thermotolerant or total coliformes whereas 28 % and 30 % showed more than ten CFU/100 mL for both indicators. Coliform species found in higher proportion were, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Escherichia coli and Klebsiella oxytoca. Using an "in vitro" assay for biofilms formation it was determined that between 75.8 y 79.2 % of total and thermotolerant coliforms, respectively, were found to be moderate or strong biofilm formers. There were no significant differences (P>0.05) between both groups regarding the capacity for biofilm formation. Most of the isolates were susceptible against the antibiotics tested and only two species showed unnatural resistance phenotypes. Multiresistance profiles, typical of strains associated with human clinical or veterinary activities were identified in one Enterobacter cloacae isolated (derepressed AmpC beta-lactamases) and one Escherichia coli strain was ampicilin resistant. This study suggests that the water sold in some plastic bottles in some urban areas near by Carabobo, Venezuela, may be a risk to health.

Sanitary quality of the hydrographic basin of the Cataniapo river, Atures municipality, Amazonas state, Venezuela

La calidad bacteriológica del agua es importante por cuanto es uno de los parámetros usados para la clasificación de las fuentes de agua. En este trabajo se logró determinar la calidad bacteriológica de muestras de agua del río Cataniapo, en 11 puntos distribuidos a lo largo de su cuenca media, baja, y alta, mediante muestreos mensuales realizados, durante julio a diciembre de 2005. Se determinó el Número Más Probable (NMP) de coliformes totales y coliformes fecales presentes en el agua, mediante la técnica de fermentación en tubos múltiples. Se aislaron e identificaron enterobacterias presentes en las muestras de agua de las diferentes estaciones de la cuenca del río Cataniapo. Las menores densidades de coliformes totales y fecales, se evidenciaron durante el período de lluvia: julio - septiembre y las máximas durante el período de sequía: octubre - diciembre. Los resultados del análisis de varianza doble mostraron que existen diferencias significativas entre meses y estaciones para coliformes totales, y diferencias significativas entre estaciones para coliformes fecales; encontrándose que los puntos 1 y 3 de la cuenca baja, presentaron las densidades más altas para este grupo bacteriano, sobrepasando el límite permitido para aguas clasificadas para contacto humano, parcial ó total. La especie Escherichia coli fue identificada con mayor frecuencia en todas las estaciones.

The bacteriologiocal quality of water is an important parameter used for the classification of water supplies. We analyzed the bacteriological quality of the water from the Cataniapo river at 11 stations distributed along the low, middle and high basin, by monthly sampling conducted from July till December 2005. The total and fecal coliforms in the water where determined by the Most Probable Number (MPN) method, using the Multiple Tube Fermentation technique. The Enterobacteriaceae were isolated and identified in samples of water from different stations at Cataniapo river. The lowest density of total and fecal coliforms were evident during the rainy season (July to September) and the highest during the drought period (October to December). The quantity of total coliforms differed significantly between the different stations at the Cataniapo river and amongst the different months sampled, while for fecal coliforms we found only significant differences only between the stations. We also found that the points 1 and 3 of the lower basin, had the highest densities for fecal coliforms, exceeding the stablished limit for human contact (total or partial). The Escherichia coli species was identified as the most frequent amongst all stations.

Eco-epidemiological profile of snakebite accidents in Monagas state, Venezuela (2002-2006)

El accidente causado por animales venenosos representa un problema global, especialmente en las áreas subtropicales y tropicales del mundo. En Venezuela, es endémico para varias regiones incluyendo la zona nororiental. Con el objetivo de ampliar y actualizar el perfil eco-epidemiológico del ofidismo en el estado Monagas, se evaluó su comportamiento, en cada municipio, durante 5 años de registro (2002 - 2006). Se contabilizaron 339 accidentes ofídicos (con promedio de 68 anuales). El incidente ocurrió con mayor frecuencia en agricultores, adultos jóvenes y de género masculino, durante sus labores en el campo y en el periodo diurno. La incidencia siguió un patrón estacional bimodal con predominio en épocas de alta y baja pluviosidad. Los envenenamientos botrópicos (28,6%) fueron más frecuentes que los crotálicos (14,5%), con proporción 2:1. El 87,9% recibió sueroterapia específica. La incidencia promedio anual en la entidad se ubicó en 11,30 casos por 100.000 habitantes, siendo Punceres (46,29), Acosta (20,91) y Bolívar (19,52) los municipios con mayor impacto. El estado Monagas presentó un mapa de endemicidad distribuido en municipios de (1) muy alta endemicidad, (2) alta endemicidad, (3) mediana endemicidad, (4) baja endemicidad y (5) muy baja endemicidad. Durante el período analizado no se registró muerte por esta causa en el estado. Los hallazgos sugieren la importancia del accidente por serpientes en Monagas, con especial importancia en la mitad norte de la entidad.

The accidents caused by venomous animals are a global problem, especially in subtropical and tropical regions of the world. In Venezuela, they are endemic in several regions including the northeast. In order to expand and update the ecoepidemiological profile of snake bites in Monagas state, their behavior was assessed in each municipality for 5 years (2002 -2006). There were 339 ophidian accidents (on average 68 per year). The bites occurred more frequently in young adult male farmers, while working in the field and during daytime. The incidence followed a bimodal seasonal pattern with predominance in high and low rainfall periods. Bothropic envenoming (28.6%) were the most frequent followed by Crotalic ones (14.5%), with a 2:1 ratio. 87.9% received specific serum therapy. The annual average incidence in the state was 11.30 cases per 100,000 inhabitants. Punceres (46.29), Acosta (20.91) and Bolivar (19.52) were the municipalities with the highest impact. Monagas state showed an endemicity map with municipalities having (1) very high endemicity, (2) high endemicity, (3) medium endemicity, (4) low endemicity and (5) very low endemicity. In the studied period there were no deaths from this cause in the state. The findings suggest the importance of snake accidents in Monagas, especially in the northern half of the state.

Dengue virus types identified in patients attended at Medical Center Dr. Rafael Guerra Méndez, Valencia, Carabobo, Venezuela

En esta investigación se llevó a cabo un estudio descriptivo de 114 muestras serológicas de pacientes con sospecha clínica de dengue, según criterios establecidos por la Organización Mundial para la Salud (OMS), que se recibieron durante el mes de junio de 2010 en el Centro Médico Dr. Rafael Guerra Méndez, de la ciudad de Valencia, Estado Carabobo. Las muestras se trasladaron al Instituto de Investigaciones Biomédicas de la Universidad de Carabobo (BIOMED-UC) y se analizaron por la técnica de RT-PCR anidada. Los resultados indicaron positividad en 46 muestras y la presencia de los 4 tipos del virus dengue. Los tipos detectados con mayor frecuencia fueron DEN-4 (34,8%), seguido por el DEN-3 (32,6%), sobre todo en niños ≤ 12 años que representaron el 54% del total de las muestras.

This research conducted a descriptive study of 114 serum samples from patients with clinical suspicion of dengue, according to criteria established by the World Health Organization (WHO) who were received during the month of June 2010 at the Medical Center Dr. Rafael Guerra Mendez in the city of Valencia, Carabobo State. Samples were transported to the Institute of Biomedical Research of the University of Carabobo (BIOMED-UC) and analyzed by RT-nested PCR. The results showed positivity in 46 samples and the presence of the 4 types of dengue virus. The most frequently detected types were DEN-4 (34.8%), followed by DEN-3 (32.6%) which were, especially in children ≤ 12 years and accounted for 54% of total samples.

Current state of the presence and distribution of triatomine in the department of Atlántico-Colombia: 2003-2010

El departamento del Atlántico es considerado no endémico para la enfermedad de chagas; sin embargo, existen factores de riesgo asociados a la presencia de especies vectoras. Según el último registro de distribución de especies de triatominos en Colombia, para este departamento solo se reporta la presencia de la especie Triatoma maculata. El presente artículo tiene como objetivo actualizar la presencia y distribución de especies de triatominos en áreas urbanas, periurbanas y rurales del departamento del Atlántico-Colombia. Se realizó un estudio retrospectivo que consistió en analizar los datos de registros de triatominos para el departamento del Atlántico entre los años 2003 al 2010. Durante el periodo estudiado se registraron las especies Panstrongylus geniculatus en los municipios de Piojó, Tubará, Puerto Colombia, Barranquilla, Soledad y Luruaco, Eratyrus cuspidatus en los municipios de Piojó y Tubará y T. maculata en el municipio de Puerto Colombia; ampliando de esta forma la distribución para el departamento del Atlántico y la región del caribe colombiana.

The department of Atlántico in Colombia is considered non-endemic for Chagas disease, however there are risk factors associated with the presence of vector species. According to the last record of distribution of triatomine species in Colombia, this department only reported the presence of Triatoma maculata. The objective of this article a is to update the presence and distribution of triatomine species in urban and rural areas in Atlántico-Colombia. A retrospective study was performed based on Atlántico´s records of triatomines between the years 2003 to 2010. During the period studied the following species were recorded: Panstrongylus geniculatus in the municipalities of Piojó, Tubará, Puerto Colombia, Barranquilla, Soledad and Luruaco; Eratyrus cuspidatus in the municipalities of Piojó and Tubará and T. maculata in Puerto Colombia. These results broaden the distribution of triatomines in Atlántico department and Colombian Caribbean region.

Presence of Meccus longipennis and Triatoma recurva in the state of Durango, Mexico

Se reporta por primera vez la recolecta de ejemplares de Meccus longipennis (Usinger) y de Triatoma recurva (Stål) en el estado de Durango. La búsqueda de triatominos se realizó durante 12 meses (septiembre 2010-agosto 2011) en cuatro comunidades de dos municipios (Pueblo Nuevo y Mezquital) del estado de Durango. Se recolectaron 71 ejemplares de M. longipennis y seis de T. recurva provenientes mayoritariamente del interior de las viviendas humanas (recámaras). La presencia de M. longipennis en el área abre la posibilidad de un riesgo potencial de transmisión de Trypanosoma cruzi Chagas a las poblaciones humanas del área estudiada.

The collection of Meccus longipennis (Usinger) and of Triatoma recurva (Stål) in the state of Durango is reported for the first time. Both species were collected during twelve months (from September 2010 to August 2011) in four localities of two municipalities (Pueblo Nuevo y Mezquital) in the state of Durango. Seventy one specimens of M. longipennis and six of T. recurva were collected mostly from indoors of human dwellings (bedrooms). Presence of M. longipennis means a potential risk of transmission of Trypanosoma cruzi Chagas to human populations in the study area.

Panstrongylus rufotuberculatus (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae) infected with Trypanosoma cruzi in the state of Anzoátegui (Venezuela) Antonio Morocoima

En el caserío rural Mundo Nuevo, municipio Pedro María Freites, estado Anzoátegui (Venezuela) se capturaron en la pared externa de una vivienda cuatro ejemplares adultos de Panstrongylus rufotuberculatus (Champion, 1899) (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae), uno de los cuales mostró infección por Trypanosoma cruzi, evidenciada por examen directo del contenido intestinal. El comportamiento del aislado en ratones NMRI presentó parasitismo tisular en 47% de 12 tejidos estudiados. La especie T. cruzi fue confirmada por PCR-ADNk y PCR ADN satélite. Se demuestra por primera vez la presencia de esta especie silvestre en el estado Anzoátegui

In the rural village Mundo Nuevo, municipality Pedro Maria Freites, Anzoátegui state (Venezuela), four adults of Panstrongylus rufotuberculatus (Champion, 1899) (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae) were captured in the external wall of a human dwelling. One triatomine was infected by Trypanosoma cruzi. The isolate inoculated in NMRI mice showed parasites in 47% of 11 studied tissues. T.cruzi was confirmed by PCR-kDNA and PCR satellite DNA.The presence of this species represents, to our knowledge,the first report for this state.