Investigación Clínica

Virus Zika: ¿Otro arbovirus emergente en Venezuela?

Sensibilidad in vitro de aislados del complejo Paracoccidioides spp a antifúngicos sistémicos utilizando el método de microdilución

El método de referencia, microdilución en caldo, recomendado por el Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorios (CLSI), no está disponible para hongos dimórficos, como los del género Paracoccidioides. En este trabajo se evaluó la sensibilidad in vitro del Complejo Paracoccidoides (n=19) frente a los antifúngicos sistémicos: anfotericina B, 5-fluorocitosina, ketoconazol, itraconazol, fluconazol, voriconazol y caspofungina empleando el método de microdilución (Documento M27-A3 y M27-S3), con algunas modificaciones: tiempo de cultivo en medio de Sabouraud dextrosa agar (7-10 días), medio RPMI 1640 suplementado con glucosa al 2%, tiempo de incubación (7, 8 y 18 días). La sensibilidad in vitro fue variable; la mayoría de los aislados de Paracoccidioides fueron sensibles a ketoconazol (73,7%), seguido de voriconazol (68,4%), itraconazol (63,1%), anfotericina B (52,6%), fluconazol (47,4%), 5-fluorocitosina (42,1%) y caspofungina (5%). La resistencia global fue mayor ante caspofungina (94,7%), seguido de 5-fluorocitocina (52,6%) and anfotericina B (47,4%). El 53% de los aislados fue sensible dosis dependiente a fluconazol, 15,7%, itraconazol y 5,3% a 5-fluorocitosina. Anfotericina B, itraconazol y voriconazol fueron los antifúngicos más potentes contra Paracoccidioides spp (CMI: 0,03-1µg/mL). Basándose en estos resultados, se propone tentativamente un protocolo de ensayo de microdilución para las pruebas de sensibilidad de Paracoccidioides spp frente a fármacos antimicóticos. Esta metodología podría ser clínicamente útil para predecir el desarrollo de resistencias, aunque son necesarios más estudios.

Broth microdilution, the reference method recommended by the Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI), is not available for use with dimorphic fungi, such as those of the Paracoccidioides genus. In this work, in vitro susceptibility of the Paracoccidioides complex (n=19) to systemic antifungals: amphotericin B, 5-flucytosine, ketoconazole, itraconazole, fluconazole, voriconazole and caspofungin, was evaluated using the microdilution method (Document M27-A3, M27-S3), with some modifications such as: culture time in Sabouraud dextrose agar (7-10 days), RPMI 1640 medium supplemented with 2% glucose and the incubation time (7, 8 and 18 days). The sensitivity in vitro was variable; the majority of Paracoccidioides isolates was susceptible to ketoconazol (73.7%), followed by voriconazole (68.4%), itraconazole (63.1%), amphotericin B (52.6%), fluconazole (47.4%), 5-flucytosine (42.1%) and caspofungin (5%). The overall resistance was mainly to caspofungin (94.7%), followed by 5-flucytosine (52.6%) and amphotericin B (47.4%). Fifty-three percent of the isolates were susceptible-dose dependent to fluconazole followed by itraconazole (15.7%) and 5-fluorocytosine (5.3%). Amphotericin B, itraconazole and voriconazole were the most potent antifungal drugs against Paracoccidioides spp (CMI: 0.03-1µg/mL). Based on these results, we tentatively propose a microdilution assay protocol for susceptibility testing of Paracoccidioides spp to antifungal drugs. This method may be clinically useful to predict resistance, even though further studies are needed.

Estacionalidad de la infección por rotavirus en Venezuela: relación entre la incidencia mensual de rotavirus y los índices pluviométricos

Se ha establecido en los países tropicales que la infección por rotavirus muestra actividad durante todo el año. Sin embargo, estudios realizados en Venezuela y Brasil sugieren un comportamiento estacional de la infección. Por otro lado, algunos trabajos relacionan la estacionalidad de la infección con variables climáticas como la precipitación. El presente estudio tiene como objetivos analizar el patrón de comportamiento de la infección por rotavirus en el estado Carabobo-Venezuela (2001-2005), asociar la estacionalidad de la infección con la precipitación y según el patrón estacional, estimar la edad de mayor riesgo para sufrir la enfermedad. El análisis de las series temporales rotavirus y precipitación acumulada se realizó con el paquete SPSS. La infección mostró dos períodos: uno de alta incidencia (noviembre-abril) y otro de baja incidencia (mayo-octubre). La serie de precipitación acumulada presentó un comportamiento opuesto. La mayor frecuencia (73,8% 573/779) de eventos para los nacidos en la estación de baja incidencia del virus se registró a más temprana edad (media edad 6,5 ± 2,0 meses) al compararla con los nacidos en la estación de alta incidencia (63,5% 568/870, media edad 11,7 ± 2,2 meses). Se demostró la estacionalidad de la infección y la relación inversa entre la precipitación y la incidencia del virus. Además, se comprobó cómo el período de nacimiento determina la edad y riesgo de sufrir la infección. Esta información generada durante el período prevacuna será de mucha ayuda para medir el impacto de la inmunización contra el rotavirus.

In general, it has been reported that rotavirus infection was detected year round in tropical countries. However, studies in Venezuela and Brazil suggest a seasonal behavior of the infection. On the other hand, some studies link infection with climatic variables such as rainfall. This study analyzes the pattern of behavior of the rotavirus infection in Carabobo-Venezuela (2001-2005), associates the seasonality of the infection with rainfall, and according to the seasonal pattern, estimates the age of greatest risk for infection. The analysis of the rotavirus temporal series and accumulated precipitation was performed with the software SPSS. The infection showed two periods: high incidence (November-April) and low incidence (MayOctober). Accumulated precipitation presents an opposite behavior. The highest frequency of events (73.8 % 573/779) for those born in the period with a low incidence of the virus was recorded at an earlier age (mean age 6.5 ± 2.0 months) when compared with those born in the station of high incidence (63.5% 568/870, mean age 11.7 ± 2.2 months). Seasonality of the infection and the inverse relationship between virus incidence and rainfall was demonstrated. In addition, it was found that the period of birth determines the age and risk of infection. This information generated during the pre-vaccine period will be helpful to measure the impact of the vaccine against the rotavirus.

Tratamiento profiláctico en la hemofilia en países de la región Latinoamericana. Un reporte del Grupo Latinoamericano para el Impulso del Tratamiento de la Hemofilia (GLAITH)

La profilaxis en el tratamiento de la hemofilia ha sido crucial en la mejoría del pronóstico y calidad de vida en las personas con hemofilia (PCH). A pesar de ello, no está globalmente implementado y no ha sido ejecutado satisfactoriamente en Latinoamérica, donde es difícil evaluar la situación, y el manejo de las PCH no se ajusta a los estándares ideales. El grupo GLAITH (Grupo Latino Americano para el Impulso del Tratamiento de la Hemofilia) discutió el problema a través de una encuesta entre sus integrantes. Los hallazgos fueron discutidos en Bogotá en mayo del 2013 en donde los participantes definieron los puntos esenciales a comunicar en un llamado a la acción. Las proporciones de casos de hemofilia A reportados fueron entre 75 y 90% y entre 10 y 25%, los de hemofilia B. La hemofilia grave representó entre el 26 y el 55% de los casos. Un alto porcentaje de PCH tiene artropatía hemofílica. La atención de PCH varía en cada país, sólo se cubre entre el 50 y 60% del tratamiento, que es a demanda en el 85 a 95% de los casos. Sólo 5 a 15% reciben profilaxis, la mayoría secundaria. Pocos países tienen programa nacional o registros homogéneos. En llamado a la acción y conclusión para la región se recomienda: establecimiento de un registro latinoamericano unificado; estudios prospectivos de costo efectividad y evaluación de criterios en profilaxis secundaria; estudios comparativos de calidad de vida, individualización del tratamiento e implementación de la profilaxis en forma global en Latinoamérica.

Prophylactic treatment in the management of hemophilia has been a crucial factor in improving the prognosis and quality of life for people with hemophilia (PCH). However, it is not globally implemented. In Latin America it is difficult to assess the status of PCH and the its management does not conform to ideal standards. The GLAITH group discussed the problem in Latin America. A survey of its members and its findings were discussed at a meeting in Bogota in May 2013. Proportions of hemophilia A and B were 75-90% and 10-25% respectively. Severe hemophilia represents 26-55% of cases. A high percentage of PCH have hemophilic arthropathy. The general care and specific treatments of PCH vary by country, only 50-60% of the treatment is covered and in 85-95% of the cases are performed on an ondemand basis. Just 5-15% receives prophylaxis, most of them secondary. Few countries have a national program or homogeneous records. Finally the GLAITH group proceeded to develop a conclusion and call to action for the region where the following points are recommended: the establishment of a unified Latin American registry; prospective cost-effectiveness studies and evaluation criteria related to secondary prophylaxis; comparative studies of quality of life with and without prophylaxis in the region; promotion of individualization of treatment and, the increase of primary and secondary prophylaxis globally in Latin America.

Distribución de especies y susceptibilidad antifúngica de Candida spp. causantes de micosis superficiales. Coro, estado Falcón, Venezuela

Las especies de Candida distintas a C. albicans se describen con frecuencia como agentes causales de micosis superficial y presentan una mayor resistencia al tratamiento con los azoles. Con la finalidad de determinar la distribución de especies y la susceptibilidad antifúngica in vitro de Candida spp., se realizó un estudio ambispectivo donde se analizaron 18 aislados de levaduras obtenidas de muestras de pacientes con diagnóstico de micosis superficial. La identificación taxonómica se realizó mediante la visualización de las características macroscópicas de crecimiento en agar cromogénico y por métodos convencionales. La susceptibilidad a fluconazol y voriconazol se evaluó por el método de difusión en disco. El 88,8% de los aislados provenía de muestras de uñas. C. parapsilosis fue la especie más frecuente, seguida de C. tropicalis, C. albicans y C. krusei, lo cual confirmó el predominio de especies no albicans como causa de micosis superficial. El patrón de susceptibilidad a fluconazol y voriconazol fue similar: todos los aislados de C. parapsilosis y C. albicans resultaron sensibles, mientras que el 83,3% de C. tropicalis mostró sensibilidad a ambos antifúngicos. C. krusei, especie resistente a fluconazol, presentó sensibilidad intermedia al voriconazol. El uso de agar cromogénico permitió detectar infecciones mixtas en muestras de uñas, involucrando en uno de los casos a Candid spp. y C.tropicalis, esta última con resistencia tanto a fluconazol como a voriconazol. Los resultados obtenidos demuestran la importancia de la identificación de especies y la realización de pruebas de susceptibilidad con el fin de evitar fracasos terapéuticos en micosis superficiales. Autor de correspondencia: Leyla Humbría-García. Laboratorio de Micología

Candida species other than C. albicans are often described as causative agents of superficial mycosis and are more resistant to treatment with azoles. In order to determine the distribution of species and in vitro antifungal susceptibility of Candida spp., one ambispective study, which analyzed 18 yeast isolates obtained from samples from patients diagnosed with superficial mycosis, was performed. Taxonomic identification was performed by macroscopic visualization of the growth characteristics in chromogenic agar and by conventional methods. The susceptibility to fluconazole and voriconazole was evaluated by the disc diffusion method. Most of the isolates (88.8%), came from nail samples. C. parapsilosis was the most common species, followed by C. tropicalis, C. albicans and C. krusei, which confirmed the prevalence of non-albicans species as a cause of superficial mycoses. The pattern of susceptibility to fluconazole and voriconazole was similar: all isolates of C. parapsilosis and C. albicans were susceptible, while 83.3% of C. tropicalis showed sensitivity to both antifungals. C. krusei, fluconazole-resistant species showed intermediate susceptibility to voriconazole. The use of chromogenic agar allowed to detect mixed infections in nail samples, involving Candida spp. and C. tropicalis in one case, the latter with resistance to both fluconazole and voriconazole. The results demonstrate the importance of species identification and susceptibility testing to avoid therapeutic failures in superficial mycoses.

Polimorfismo C677T del gen de la metilentetrahidrofolato reductasa en madres de niños afectados con defectos del tubo neural

Los defectos del tubo neural (DTN) son las alteraciones congénitas más frecuentes del sistema nervioso central. El mecanismo de transmisión hereditario de los DTN aislados es multifactorial, se debe a la interacción de factores ambientales y genéticos. El polimorfismo 677C>T del gen de la metilentetrahidrofolato reductasa (MTHFR) ha sido implicado como factor de riesgo para DTN. El objetivo de este trabajo fue investigar la asociación del polimorfismo 677C>T del gen de la MTHFR como factor de riesgo en los DTN. Se analizaron muestras de ADN de 52 madres con antecedente de al menos un hijo con DTN y de 119 madres controles. A través de la reacción en cadena de la polimerasa se amplificó un fragmento de 198 pb, el cual se sometió a digestión con la enzima HinfI. La frecuencia alélica de la MTHFR en los grupos problema y control fue de 51,92% y 34,45%; para el alelo T y 48,08% y 65,55%; para el C respectivamente. Se encontró diferencia significativa entre las frecuencias del alelo T y del alelo C (p: 0,002), así como entre las frecuencias genotípicas (p: 0,007) al ser comparadas en ambos grupos. El odds ratio (OR) para el genotipo TT vs CC se estimó como OR: 4,9 [IC 95%: 1,347-6,416] p: 0,002; CT+TT vs CC: OR: 2,9 [IC 95%: 1,347-6,416] p: 0,005; TT vs CT+CC: OR: 2,675 [IC 95%: 1,111-6,441] p: 0,024. Los presentes datos aportan una asociación significativa entre el polimorfismo 677C>T de la MTHFR y riesgo aumentado en las madres con antecedente de hijos con DTN.

Neural tube defects (NTD) are the most common congenital anomalies of the central nervous system, with a multifactorial pattern of inheritance, presumably involving the interaction of several genetic and environmental factors. The methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene 677C>T polymorphism has been implicated as a risk factor for NTD. The main objective of this research was to investigate the association of the 677C>T polymorphism of the MTHFR gene as a genetic risk factor for NTD. Molecular analysis was performed in DNA samples from 52 mothers with antecedent of NTD offspring and from 119 healthy control mothers. Using the Polymerase Chain Reaction, a 198 bases pairs fragment was digested with the restriction enzyme HinfI. 677T MTHFR allele frequencies for the problem and the control groups were 51.92% and 34.45%, respectively, and 677C MTHFR allele frequencies were 48.08% and 65.55%, respectively. There were significant differences in allele (p: 0.002) and genotype (p: 0.007) frequencies between these two groups. The odds ratio (OR) to the TT genotype vs the CC genotype was estimated as OR: 4.9 [95% CI: 1,347-6.416] p: 0.002; CT+TT vs CC: OR: 2.9 [95% CI: 1.347-6.416] p: 0.005; TT vs CT+CC: OR: 2.675 [95% CI: 1,111-6.441] p: 0.024. The data presented in this study support the relationship between MTHFR 677C>T polymorphism and risk in mothers with antecedent of NTD offspring.

Duodenal gossypiboma: a case report and literature review

Gossypiboma is a retained surgical cotton matrix material in the body after a surgical procedure. Cases are rarely reported due to medico-legal concerns. Although infrequent, it causes serious morbidity and even mortality if left undiagnosed. We present the case of a trans-mural migration of gossypiboma and a review of the literature. Gossypibomas trans-duodenal migration is a rare complication of retained gauzes. Cases reported in the literature were easy to diagnose based on clinical grounds and endoscopic studies.

La palabra gossypiboma define una gasa o matriz de algodón retenida en el organismo después de un procedimiento quirúrgico. Se reportan con poca frecuencia debido a las implicaciones médico-legales. A pesar de ser poco frecuentes, pueden ser causa de morbilidad si no se diagnostican. En el presente trabajo se reporta un caso de un gossypiboma con migración transduodenal. La migración transduodenal de un gossypiboma es una complicación rara que suele diagnosticarse sin dificultad con base a la clínica y a la endoscopía.

Asociación de fistula rectovaginal congénita con ano normal (Fístulas Tipo H) y atresia rectal en una paciente. Reporte de un caso y breve revisión de la literatura

Las malformaciones ano-rectales del tipo de fístulas recto-urogenitales congénitas con ano normal y atresia rectal son anomalías poco frecuentes. Se discute el caso de una niña con la asociación de estas dos entidades, acompañada además de una vagina doble, quien fue llevada a la consulta a los siete días de vida por la expulsión de heces a través de los genitales. Las malformaciones fueron corregidas a través de un abordaje sagital posterior, con descenso del recto hasta el ano sin disección perineal. El tabique vaginal fue resecado a través de la vulva. En la actualidad no hay evidencia de recurrencia de la fístula recto-vaginal.

Congenital recto-urogenital type fistulas with a normal anus and rectal atresia, represent both anorectal malformations that are infrequently seen in clinical practice. We describe the case of a girl with an association of these two anomalies, together with a double vagina who, on her seventh day of life, expelled feces through her genitals. The malformations were corrected by means of a posterior sagittal approach, descending from the rectum to the anus without perineal dissection. The vaginal septum was resected thru the vulva. There is no evidence of recurrence of the recto-vaginal fistula.

Adenosin deaminasa en la tripanosomiasis experimental: futuras implicaciones

La adenosin deaminasa representa un punto de control en la regulación de los niveles extracelulares de adenosina, desempeñando así un papel fundamental en la modulación de las respuestas purinérgicas a ciertos eventos patofisiológicos. Diversos estudios señalan que los niveles séricos y plasmáticos de la enzima se elevan en algunas enfermedades causadas por microorganismos, lo cual podría representar un mecanismo compensatorio como consecuencia de la elevación de las concentraciones de adenosina y la liberación de mediadores inflamatorios. Recientes investigaciones indican que la actividad de la adenosin deaminasa disminuye e influye en los parámetros hematológicos de animales infectados con Trypanosoma evansi, de manera que tales alteraciones podrían tener implicaciones en la patogénesis de la enfermedad. Adicionalmente, la enzima ha sido detectada en este parásito; lo que permite inferir que podría estar asociada a las funciones vitales del mismo, de manera similar a lo que ocurre en los mamíferos. Este conocimiento puede ser útil al asociar la quimioterapia con inhibidores específicos de la enzima en futuros estudios.

The adenosine deaminase represents a control point in the regulation of extracellular adenosine levels, thus playing a critical role in the modulation of purinergic responses to certain pathophysiological events. Several studies have shown that serum and plasma enzyme levels are elevated in some diseases caused by microorganisms, which may represent a compensatory mechanism due to the elevated levels of adenosine and the release of inflammatory mediators. Recent research indicates that adenosine deaminase activity decreases and affects hematological parameters of infected animals with Trypanosoma evansi, so that such alterations could have implications in the pathogenesis of the disease. In addition, the enzyme has been detected in this parasite; allowing the inference that it could be associated with the vital functions of the same, similar to what occurs in mammals. This knowledge may be useful in the association of chemotherapy with specific inhibitors of the enzyme in future studies.

Hepatotoxicidad asociada a hierbas y productos nutricionales de origen botánico

Las hierbas y otros productos de origen botánico, han sido utilizados por siglos en diversas culturas con fines medicinales y dietéticos. Contrario a la creencia de ser productos naturales y seguros, su potencial hepatotóxico es reconocido en diversos estudios a nivel mundial, lo que constituye un problema de salud que amerita mayor atención. La prevalencia reportada de hepatotoxicidad asociada a productos botánicos es variable y depende de diversos factores como población estudiada, período y diseño del estudio. Se han reportado un total de 60 productos a base de hierbas con fines medicinales y dietéticos, que pueden causar lesión hepática; sin embargo, el mecanismo fisiopatológico no está completamente dilucidado. Su cuadro clínico y características histológicas, no difieren de la lesión hepática asociada a medicamentos y la mayoría de los pacientes tienen un patrón de lesión hepatocelular. El diagnóstico se hace por exclusión, representando un desafío clínico importante, por lo que resulta fundamental la sospecha clínica y el diagnóstico diferencial de otras patologías agudas y crónicas. De allí que las investigaciones futuras están orientadas a mejorar los métodos diagnóstico existentes e introducir nuevas tecnologías toxicológicas, genéticas e inmunológicas. El manejo es complejo y representa un reto para el especialista puesto que no existe antídoto; el manejo se basa en suspender el uso del producto y en el tratamiento sintomático que disminuya la progresión a la falla hepática aguda fulminante.

Herbs and other botanicals have been used in different cultures with medicinal and dietary purposes for centuries. Contrary to the belief of being natural and safe products, their hepatotoxic potential is recognized in several studies worldwide, and represent a health problem that deserves greater attention. The reported prevalence of hepatotoxicity associated with botanicals is variable and depends on various factors such as population, period and design of the study. There have been reports of a total of 60 products with herbal medicinal and dietary purposes, which may cause liver damage; however, the pathophysiological mechanisms involved are not fully elucidated. Their clinical and histological features, not unlike liver injury associated with drugs in most patients, have a pattern of hepatocellular injury. Diagnosis is by exclusion, and represents a clinical challenge. It is essential the clinical suspicion and the differential diagnosis with other acute and chronic conditions. Hence, future researches are aimed at improving existing diagnostic methods and introducing new toxicological, genetic and immunological technologies. Treatment is complex and presents a challenge for the specialist, as there are no antidotes. Management based on the discontinued use of the product and in the symptomatic treatment, decreases the progression to an acute fulminant hepatic failure.

Reports alleged to be associated with an Herbalife food product are not properly evaluated for alternative etiologies