Investigación Clínica

Consideraciones sobre revisores y autores de los trabajos sometidos a publicación en Investigación Clínica

Epidemiología molecular de aislados clínicos de Klebsiella pneumoniae productores de carbapenemasas tipo KPC provenientes de dos hospitales públicos en los estados Carabobo y Zulia, Venezuela

Klebsiella pneumoniae productora de carbapenemasas tipo KPC es uno de los principales agentes causante de infecciones nosocomiales a nivel mundial. En Venezuela se han identificado aislados de esta bacteria, sin embargo, se conoce poco sobre su dispersión. El objetivo de este estudio fue realizar la epidemiología molecular de aislados de K. pneumoniae productores de KPC provenientes de dos hospitales públicos ubicados en los estados Carabobo y Zulia. Se seleccionaron 32 aislados de K. pneumoniae clasificados fenotípicamente como productores de KPC, se les realizó la detección del gen bla KPC así como su ubicación en el transposón Tn4401 a través de PCR. El producto de PCR del gen blaKPC se secuenció para identificar los alelos circulantes. El análisis genotípico se realizó empleando las técnicas de amplificación por PCR de las secuencias repetidas extragénicas palindrómicas (rep-PCR) y la secuenciación de múltiples loci (MLST). Mediante ensayos de conjugación, se determinó si los genes bla KPC se encontraban en moléculas plasmídicas.Los resultados indican que los 32 aislados contenían la variante del gen bla KPC-2 asociada a la isoforma Tn4401 b y se distribuyeron en 9 secuencias tipo (ST), siendo una de ellas nueva. Los ensayos de conjugación indican que el 87,5% de los aislados tienen al gen bla KPC en plásmidos movilizables. En estos hospitales el gen bla KPC-2 se está dispersando a través de plásmidos que llevan al transposón Tn4401 b. Las ST más comunes pertenecen a los Complejos Clonales CC258 y CC147, que desempeñan un papel importante en la dispersión de la resistencia a carbapenemes a nivel mundial.

Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC)-producing bacteria ( K. pneumoniae carbapenemase ) are the most important causative agents of nosocomial infections worldwide. These isolates have been identified in Venezuela, but little is known about their local spread. The aim of this study was to perform molecular epidemiology of KPC-producing K. pneumoniae isolated from two public hospitals in the Carabobo and Zulia states of Venezuela. Thirty-two K. pneumoniaei solates, phenotypically classified as KPC producers were subjected to PCR to detect the presence of bla KPC genes and their location within transposon Tn4401 , and the bla KPC product was sequenced to identify the KPC allele. Genotypic analysis was performed using repeated extragenic palindromic PCR (rep-PCR) and Multi Locus Sequence Typing (MLST). Finally, a conjugation assay determined whether the bla KPC genes were carried on transferable plasmids. The results indicate that the 32 isolates contained the bla KPC-2 variant associated with isoform Tn4401 b, and were distributed in nine sequence types (ST), one of which was new. Conjugation assays indicate that 87.5% of the isolates contain the gene bla KPC on mobilizable plasmids. In these hospitals, the bla KPC-2 gene is spreading through the plasmids carrying the transposon Tn4401 b. The most common ST belongs to Clonal Complexes CC258 and CC147, which play an important role in the dispersion of resistance to carbapenems worldwide.

Efecto inotrópico y cronotrópico del propranolol sobre aurículas extraídas de ratas con insulina-resistencia inducida por fructosa

La insulina-resistencia (IR) es una deficiencia metabólica asociada princi palmente con diabetes tipo 2 y comúnmente relacionada a la etiopatogenia de enfermedades cardiovasculares, siendo el factor determinante del síndrome metabólico. La investigación pretende conocer los efectos cronotrópico e inotrópico del propranolol sobre aurículas de ratas IR. Para ello, 16 ejemplares Sprague-Dawley, fueron divididos en Grupo control, alimentado ad libitum con alimento para perros Perrarina® y Grupo experimental, alimentado con Perrarina®-manteca vegetal, y suministro de agua con fructosa (20%)-sacarosa (20%) durante ocho meses. Al finalizar este periodo, se verificó la insulina-resistencia y las aurículas extraídas se mantuvieron en solución Krebs (37ºC, pH 7,4; 95% O2 - 5% CO2), en baño de órganos aislados marca Letica®, conectado a un polígrafo Grass®, registrándose la frecuencia de los latidos y evaluando las diferencias a través de la prueba t de Student (grado de significancia p<0,05). Se establecieron curvas dosis-respuesta acumulativas con isoproterenol y previa incubación de 15 minutos con propranolol (1x10 -6 M), registrándose un efecto cronotrópico negativo en el grupo control mas no así en las ratas IR, estableciéndose diferencias significativas entre el porcentaje de incremento de los latidos/seg en ambos grupos (Control 58,81±4,08; IR 68,84±4,16; p<0,001). La máxima fuerza de contracción auricular alcanzada por el grupo IR con propranolol (278,47±11,22), generó diferencias significativas (p<0,001), en comparación con el grupo control (42,60±3,13), evidenciándose que el propranolol no generó bloqueo sobre los receptores beta-adrenérgicos auriculares de las ratas insulina-resistentes.

Insulin resistance (IR) is a metabolic deficiency associated with type 2 diabe tes and commonly related to the pathogenesis of cardiovascular diseases, being the determining factor of the metabolic syndrome. This research aims to understand the chronotropic and inotropic effects of Propranolol in isolated atrium of rats with fructose-induced insulin-resistance. For this reason, 16 male Sprague-Dawley rats were assigned to two groups and given ad libitum access to one of the following diets: Perrarina® dog chow or Perrarina® dog chow supplemen ted with vegetable shortening and with fructose (20%) and sucrose (20%) added to the water supply. Both groups were maintained on their respective dietary regimens for eight months. At the end of this period insulin resistance was verified by routine blood test. The rat hearts were rapidly removed, and the atria were dissected and kept in Krebs solutions (37ºC, pH 7.4; 95% O2 - 5% CO2) in an isolated organ bath Letica®, connected to a polygraph Grass®, registering atria frequency. The Student ́s t-test was used to evaluate statistical differences between the two groups (p<0.05). Cumulative dose-response curves with isoproterenol were established in basal condition, and after fifteen minutes of pre-incubation with propranolol (1x10 -6 M). A significant positive chronotropic effect was observed in IR rats (8.84±4.16 vs 58.81±4.08 beats/sec of control; p<0.001). The maximum force of atrial contraction after pre-incubation with propranolol was significantly higher in the IR group (278.47±11.22 atrial contraction percentage; p<0.001). These findings suggest that a blunted response of atrial β-adrenoceptor to propranolol exists in rats with fructose-induced insulin-resistance.

Prehipertensión: la influencia del estrés psicológico en adolescentes

Se examinó la asociación entre el estrés psicológico (EP) y la prehiperten sión (PH) en adolescentes. La muestra estuvo conformada por 690 adolescentes: 260 varones y 430 hembras, con una media de edad de 15 años, (DE=1,5), a quienes se les determinó su presión arterial (PA) en la escuela, en posición sentada y usando el método oscilométrico (Dinamap). Todos, sin excepción, completaron una encuesta sobre eventos de vida y evaluación de ajuste social, ambas escalas asociadas con estresores vitales en adolescentes. Los partici pantes se clasificaron de acuerdo a los niveles de PA en prehipertensos (PH) y normotensos (N). La presencia de EP se evaluó como graves acontecimientos estresantes en su vida. Se utilizó la prueba de Chi cuadrado para estudiar la asociación entre EP y la presencia de PH. Los resultados arrojaron la presencia de EP en 70 varones (26,9%) y 155 hembras (36,0%), mientras que la prevalencia de prehipertensión fue de 9,2% (n=24) en varones y 3,5% (n=15) en hembras. Al aplicar la prueba estadística de Chi cuadrado en todos los adolescentes no se demostró asociación significativas entre EP y la condición de prehipertensión (PH con EP = 15 vs. N con EP = 24 (P = 0,42)). Sin embargo, al clasificar los sujetos por género, se encontró una asociación significativa entre EP y PH en las hembras (PH con EP = 9 vs. N con EP = 6, (P = 0,04)). El resultado anterior sugiere que, a edades tempranas, las mujeres pueden ser más vulnerables que los hombres al EP como un factor determinante a la condición de PH.

The article examines the association between psychological stress (PS) and prehypertension (PH) in 690 adolescents, 260 males and 430 females, whose average age was 15.2 years (SD = 1.5). Their blood pressure (BP) was measured on separate days at school, by the oscillometric method (Dinamap) in a seating position. All of them completed a survey assessing life events and social readjustment (both scales associated with life stressors in adolescen ce). Participants were classified according to BP levels in prehypertensive (PH) and normoten sive (N). The presence of PS was evaluated as severe stressful life events. The Chi-square test was used to study the association between PS and the presence of PH. The results showed the presence of PH in 9.2% (n = 24) in males and 3.5% (n = 15) in females, while the presence of PS ocurred in 70 males (26.9%) and 155 females (36.0%).When applied to the whole data, the Chi-square statistical test showed no association between PS and the condition of prehyperten sion (PH with PS = 15 vs. N with PS = 24, (P= 0.42)). However, when subjects were classified by gender, there was a significant association between PS and PH in female adolescents (PH with PS = 9 vs N with PS = 6 (P = 0.04)). This result suggests that, at early ages, female adolescents may be more vulnerable than males to PS as a determining factor to the condition of PH.

Asociación de la proteína C-reactiva ultrasensible con la composición de la dieta en niños escolares mexicanos

La proteína C-reactiva ultrasensible (PCR-us) es un marcador de riesgo cardiovascular. En niños mexicanos sanos hay escasa evidencia que asocie los niveles séricos de este marcador con la dieta. El objetivo fue asociar los niveles séricos de PCR-us con la composición de la dieta en niños escolares mexicanos. El estudio fue transversal e incluyó 300 niños aparentemente sanos de 10 a12 años de edad. La cuantificación de PCR-us se realizó mediante nefelometría. La dieta se cuantificó con un cuestionario validado de frecuencia de consumo alimentos. Mediante el paquete estadístico SPSS v18, se realizaron pruebas de estadística descriptiva, correlación y modelos de regresión multivariada. El 53,7% fueron niñas y el 46,3% niños. La mediana de la PCR-us fue de 0,3 mg/L (rango: 0,3-6,8 mg/L). Se observó una correlación directa significativa entre la concentración sérica de la PCR-us con la ingesta de proteínas (rho= 0,126, p= 0,029), ácidos grasos totales (rho= 0,128, p= 0,027), ácidos grasos saturados (rho= 0,159, p= 0,006). Mediante el análisis de regresión múltiple se asoció la PCR-us con la ingesta de proteínas (β= 0,203, p=0,037) e inversamente con los granos enteros (β=-0,175, p= 0,002). Con el resto de las variables no se observó asociación significativa. La concentración sérica de la PCR-us se asoció directamente con el consumo de proteínas, ácidos grasos totales y saturados e indirectamente con el consumo de granos enteros.

The high-Sensitivity C-Reactive Protein (hs-CRP) is a cardiovascular risk marker. In healthy Mexican children, there islittle evidence that shows any relationship between serum levels of this marker with diet. The objective of this studywas to associate serum levels of hs-CRP with the diet composition in Mexican school children. The cross-sectional study included 300 seemingly healthy children of 10 to 12 years of age, 53.7% were girls and 46.3% boys.hs-CRP quantification was determined by nephelometry. The diet was quantified with a validated food frequency questionnaire. A descriptive statistical analysis, correlation and multivariate regression models were performed by using the SPSS v18 statistical software. The median of the hs-CRP was 0.3 mg / L (range: 0.3 to 6.8 mg / L). A significant direct correlation was found between serum hs-CRP with protein intake (rho=0.126, p=0.029), total fatty acids (rho = 0.128, p = 0.027) and saturated fatty acids (rho = 0.159, p = 0.006). hs-CRP was associated with the intake of protein (β = 0.203, p = 0.037) by multiple regression analysis, and inversely with whole grains (β = -0.175, p = 0,002). No significant association was found with the rest of the other variables. The serum concentration of hs-CRP was directly associated with the consumption of protein, total and saturated fatty acids and was indirectly proportional with the consumption of whole grains.

Estudio Venezolano de Salud Cardio-Metabólica (EVESCAM): Diseño e Implementación

The EVESCAM (EstudioVenezolano de Salud Cardio-Metabólica) is the first national, population survey in Venezuela, designed to examine the prevalence of diabetes and cardio-metabolic risk factors and its relationship with lifestyle. It is a cross-sectional, cluster sampling study, which recruited 4454 participants aged ≥ 20 years. The data were collected in community health-care centers by trained health professionals and medical students. The data collected from each subject included, after informed consent, structured questionnaires (clinical, demographic, physical activity, nutritional and psychological), anthropometric measurements (weight, height and waist circumference), body fat by bioelectrical impedance, hand grip, blood pressure, electrocardiogram, and biochemical measurements (standard 75 g oral glucose tolerance test, total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol and triglycerides). The data will be used to estimate the prevalence of overweight, obesity, prediabetes, diabetes, hypertension, dyslipidemias, sarcopenia and metabolic syndrome; and to examine their relationships with lifestyle factors. The risk of coronary heart disease and impaired glucose regulation will be estimated using the Framingham Coronary Heart Disease Risk Score and the Latin America adaptation of the Finnish Diabetes Risk Score (LA-FINDRISC), respectively. These results will guide national cardiovascular and diabetes prevention strategies, and will be available for government agencies to help in the implementation of public health policies.

El EVESCAM (Estudio Venezolano de Salud Cardio-Metabólica) es el primer estudio poblacional de muestreo nacional en Venezuela diseñado para examinar la prevalencia de diabetes y factores de riesgo cardio-metabólico, y su relación con el estilo de vida. Se trata de un estudio transversal de muestreo por conglomerados, reclutando 4454 participantes de 20 años o más. Los datos fueron recogidos en centros de salud de la comunidad por profesionales de salud y estudiantes de medicina entrenados. Después del consentimiento infor mado, los datos recolectados en cada sujeto incluyeron: cuestionarios estructurados (clínico, demográfico, actividad física, nutricional y psicológico), medidas antropométricas (peso, talla y circunferencia de cintura), grasa corporal por impedancia bioeléctrica, fuerza de aprehensión de la mano, presión arterial, electrocardiograma y medidas bioquímicas (prueba de tolerancia a la glucosa oral estándar con 75 g de glucosa, colesterol total, colesterol HDL, colesterol LDL y triglicéridos). Los datos se utilizarán para estimar la prevalencia de sobrepeso, obesidad, prediabetes, diabetes, hipertensión arterial, dislipidemias, sarcopenia y síndrome metabólico; y para examinar sus relaciones con factores de estilo de vida. El riesgo de cardiopatía coronaria y de alteración de la regulación de la glucosa se calculará utilizando la puntuación de riesgo de la enfermedad coronaria de Framingham y la adaptación para Latinoamérica de la puntuación finlandesa del riesgo de diabetes (LA-FINDRISC), respectivamente. Estos resultados guiarán las estrategias nacionales de prevención cardiovascular y diabetes, y estarán disponibles para que las agencias gubernamentales ayuden en la implementación de las políticas de salud pública.

Mutación c.3037G>A en el gen FBN1 causa sindrome de Marfan con fenotipo atípico severo

Marfan syndrome is a pleiotropic connective tissue disease inherited as an autosomal dominant trait, mostly caused by mutations in the FBN1 gene, which is located on chromosome 15q21.1 and encoding fibrillin 1. We report a case of Marfan syndrome presen ting with severe ocular and systemic manifestations, such as cardiac congenital anomalies. The patient underwent a multidisciplinary approach and his clinical diagnosis was associated with a c.3037G>A mutation in the FBN1 gene. Identification of this genetic alteration should instigate a prompt multidisciplinary assessment and monitoring, in order to prevent devasta ting consequences such as cardiac and ocular phenotype. Molecular modeling of the mutation highlighted the importance of the preservation of the calcium-dependent structure of an epidermal-growth-factor-like domain of fibrillin-1 and consequently the microfibrillar formation process. This report aims to highlight the importance of an early clinical and molecular diagnosis and once more, the importance of the multidisciplinary approach of this genetic entity.

El síndrome de Marfan es una enfermedad pleitrópica del tejido conjuntivo que exhibe un patrón de herencia autosómico dominante, en su mayoría causado por mutacio nes en el gen FBN1 , que se encuentra en el cromosoma 15q21.1 y codifica a la fibrilina 1. Se presenta un caso de síndrome de Marfan que cursa con manifestación sistémica severa cardíaca y principlamente ocular. El paciente presentó una valoración multidisciplinaria y su diagnóstico clínico fue asociado con la mutación c.3037G>A en el gen FBN1 . La identificación de esta alteración genética debe promover una pronta evaluación y supervisión con el fin de evitar las desvastadoras consecuencias, tales como el fenotipo cardíaco y ocular. El modelado comparativo de proteínas resalta la importancia de la conservación de la estructura del dominio de la fibrilina-1 dependiente de calcio similar al factor de crecimiento epidérmico y por lo tanto el proceso de formación microfibrilar. Este informe tiene como objetivo resaltar la importancia de un diagnóstico clínico y molecular temprano y el enfoque multidisciplinariode esta entidad genética.

Evidencias para el uso combinado de ácido acetilsalicílico (aspirina) y clopidogrel en síndromes coronarios agudos

Las enfermedades tromboembólicas siguen siendo una de las causas más importantes de morbilidad y mortalidad en todo el mundo. El mecanismo fisiopatológico subyacente en los síndromes coronarios agudos es la trombosis coronaria. Por eso, la base de su tratamiento se ha centrado en los fármacos antiplaquetarios, fibrinolíticos y anticoagulantes. En un número importante de individuos deben emplearse medidas adicionales como, por ejemplo, el intervencionismo percutáneo coronario (angioplastia y la colocación de los llamados stentsintracoronarios). La aspirina se ha considerado como el fármaco de primera elección en la prevención de las afecciones tromboembólicas. La combinación aspirina-clopidogrel ha representado una terapéutica sumamente eficiente en el tratamiento de los eventos tromboembólicos. La introducción de tabletas de combinación fija representa un avance para facilitar el cumplimiento de la terapia.

Thromboembolic diseases remain one of the most important causes of morbidity and mortality worldwide. The pathophysiologic mechanism underlying the acute coronary syndromes is coronary thrombosis. That is why the basis of its treatment has focused on antiplatelet, fibrinolytic and anticoagulant drugs. In a significant number of individuals, additional measures must be used, such as, for example, the coronary percutaneous intervention (angioplasty and placement of the so-called intracoronary stents). Aspirin has been regarded as the drug of first choice in the prevention of thromboembolic diseases. The combination aspirin-clopidogrel has represented a highly efficient therapeutic measure for thromboembolic events. The introduction of fixed combination tablets represents a step forward in order to facilitate therapeutic compliance.