Revista Científica

Investigación en tiempos de crisis

Tiempo de supervivencia in vivo y criopreservación de Trypanosoma Vivax

Uno de los problemas más comunes del trabajo con Trypanosoma vivax, es la supervivencia y criopreservación de este protozoario, lo cual origina pérdida de aislados de campo y errores en exámenes parasitológicos. Se propone evaluar la supervivencia in vivo en condiciones de campo y criopreservación de T. vivax. Para determinar la supervivencia, la sangre se sometió a temperatura ambiente y refrigeración a 4°C, luego se determinó la sobrevivencia en el tiempo. Para el estudio de criopreservación, se emplearon dos crioprotectores de diferente naturaleza química: glicerol 10% y DMSO 5% de concentración final. Además, la criopreservación se realizó bajo tres condiciones de almacenamiento en nitrógeno líquido: 1) fase gaseosa 2) líquida y 3) combinación de ambas. Durante la evaluación de la supervivencia, se observó que la sobrevivencia de T. vivax en sangre refrigerada disminuyó significativamente (P<0,01), en comparación con aquellas sometidas a temperatura ambiente. Sin embargo, la sobrevivencia de éstos últimos comienza a disminuir luego de 6 horas, aunque algunos hemoparásitos permanecieron viables hasta 24 horas post-recolección. Para evaluar la criopreservación, al cabo de dos semanas, se descongelaron los crioviales, se determinó la sobrevivencia, resultando negativas las muestras sometidas a congelamiento directo en fase líquida. Los otros dos métodos empleados, resultaron similares (estadísticamente no significativos), el glicerol 10% resultó con mayor número de parásitos viables. En conclusión, se determinó que, las muestras infectadas con T. vivax deben evaluarse antes de 8 horas post-recolección y mantenerlas a temperatura ambiente. Por otra parte, el congelamiento debe realizarse en primera instancia en fase gaseosa o combinación gaseosa/líquida, empleando glicerol 10%. Estos resultados, permiten sugerir la mejor metodología a ser empleada para la supervivencia de los parásitos antes de exámenes parasitológicos directos, así como también las condiciones óptimas para la criopreservación del Trypanosoma vivax.

One of the common problems working with Trypanosoma vivax is its survival and cryopreservation, which originates loss of field isolates and parasitological examinations mistakes. The aim of this paper was to study the best methodologies for in vivo survival under field conditions and cryopreservation of the T. vivax. In order to study complete blood survival of T. vivax, two surviving conditions were tested at: room temperature and refrigeration at 4°C. The result shows that surviving in cooled sampled diminished significantly (P<0.01) compare with room temperature. Nevertheless, surviving of room temperature parasite begins to diminish after 6 hours, although some parasites remained viable up to 24 hours post-harvesting. Cryopreservation studies were made under three liquid nitrogen storage conditions: 1) gaseous phase 2) liquid and 3) gaseous/ liquid phase combination (glycerol 10% and DMSO 5%, were used as cryoprotectants). After two weeks and defrost the survive of T. vivax from cryovials determined. The result show that: a) direct freezing in liquid phase samples were negative and b) the other two methodology were positive and statistically similar, glycerol 10% resulted with the greatest number of viable parasites. In conclusion, these results suggest that the best methodologies for conservation under field conditions, were that the samples infected with T. vivax must be evaluated before 8 hours post-harvesting at room temperature and cryopreservation condition of the T. vivax, must be made in gaseous phase or gaseous/liquid phase combination.

**Caracterización molecular de Trypanosoma Vivax en ovinos naturalmente infectados en dos hatos de los municipios San Fernando y Biruaca, estado Apure, Venezuela**

Este estudio tuvo como objetivo efectuar una caracterización molecular de Trypanosoma vivax en ovinos de dos hatos en los cuales estos rumiantes, conjuntamente con vacunos y búfalos de agua, comparten la misma área agroecológica, estableciendo el potencial papel de los ovinos como fuente de infección de tripanosomosis por T. vivax para los grandes rumiantes. La técnica de microcentrifugación capilar (TMC) fue usada para establecer el porcentaje de infecciones activas por tripanosomas existente en los animales evaluados. Se empleó un ensayo de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para confirmar la identificación de especie, mientras que un ensayo de PCR-RFLP (polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción) permitió evaluar la variabilidad intraespecífica entre los aislados de T. vivax detectados en ovinos vs. aquellos provenientes de bóvidos (vacunos y búfalos de agua), colectados en la misma área de producción. De las 320 muestras de sangre de ovinos colectadas, la TMC detectó positividad en 11 (4,35%), lo que es de gran relevancia epidemiológica debido a la baja sensibilidad de esta metodología. Los resultados de PCR permitieron caracterizar a T. vivax como la especie presente en todas las infecciones activas detectadas. Todos los animales infectados mostraron un valor de hematocrito inferior (P<0,05) al registrado en animales no infectados (22,435 vs. 31,450). El ensayo de PCR-RFLP permitió observar la existencia de perfiles de restricción similares entre los aislados de T. vivax evaluados, sugiriéndose la ausencia de variación intraespecífica para el marcador molecular en estudio, independientemente del origen de hospedador del que provino la muestra (ovinos, vacunos, búfalos de agua). Estos resultados permiten sugerir que los aislados de T. vivax que infectan ovinos, vacunos y búfalos de agua en el área de estudio pudiesen estar estrechamente relacionados desde un punto de vista genético y, consecuentemente, los ovinos pudiesen desempeñar un importante papel en la epidemiología de la tripanosomosis bovina en esta área de estudio, recomendándose que éstos sean incorporados en los programas terapéuticos y preventivos contra tripanosomosis.

This study was made to achieve a molecular characterization of Trypanosoma vivax in two Venezuelan farms where both small ruminants (mainly ovines) and bovines (cattle and water buffaloes) share the same agroecological area. In addition, it was made to assess the role of sheep as source of T. vivax infection for cattle and buffalo herds. The microhematocrit centrifugation technique (MHC) was used to establish the percentage of current trypanosome infection. A PCR-based assay was used to confirm the species identification while a PCR-RFLP assay was used for studying intra-specific variation among T. vivax from sheep vs. those from other livestock from the same area. From 320 sheep blood samples, MHC detected 11 (4,35%) which is of remarkable epidemiological significance due to the low sensitivity of this method. Based on PCR results, T. vivax was characterized as the only species responsible for all sheep infections. All infected animals showed a lower packed cell volume value (P<0,05) when compared with the non-infected (22,435 vs. 31,450). The PCR-RFLP technique revealed similar profiles among T. vivax isolates suggesting a non intra-specific variation within the molecular marker amplified regardless the host (sheep water buffaloes or cattle). Thus, it was suggested that T. vivax infecting sheep, cattle, and buffaloes in the study area could be genetically closely related. These findings show that sheep may play an important role in the epidemiology of livestock trypanosomiasis in this area and they might be incorporated into therapeutic and preventive programs against livestock trypanosomiasis.

Niveles séricos de Tetrayodotironina Libre (T₄L), mediante el Método de Electroquimioluminiscencia en caninos

El presente estudio establece valores de referencia para niveles séricos de tetrayodotironina libre (T4L) en caninos mediante el método de electroquimioluminiscencia. Se utilizaron 180 caninos que fueron divididos en grupos según la edad y el sexo. Se encontraron diferencias altamente significativas (P<0,0001) relacionadas con la edad, sin encontrarse diferencias significativas con respecto al sexo para dicha hormona. Los resultados de este estudio sugieren que las concentraciones séricas de tetrayodotironina libre (ng/L) en caninos menores de 1año, de 1 a 7 años y mayores de 7 años, oscilan entre 9,90-11,74 ng/L, 8,51-11,74 ng/L y 7,48-8,64 ng/L, respectivamente. La determinación de T4L mediante electroquimioluminiscencia, puede considerarse útil como ayuda diagnóstica de posibles alteraciones tiroideas.

The present study establishes references values for free Tetraiodotironine (FT4) in canines using eletrochemiluminescence method. Blood samples from 180 canines divided in six groups of age (males and females), 30 animals for each group were used. Significant differences (P<0.0001) was found between age groups but not between sex groups. The canine average values for FT4 using this technique were as follow: younger than 1 year of age , 9.9 - 11.7 ng/L; from 1 to 7 years of age, 8.1 - 11.7 ng/L; older than 7 years of age 7.4- 8.6 ng/L. The electrochemiluminiscence method for measuring FT4 is valuable diagnostic tool in canine medicine.

Obstrucción estrangulante del intestino grueso en equinos: evaluación clínica y tratamiento quirúrgico en dos casos

La obstrucción estrangulante es la combinación de obstrucción simple del tracto gastrointestinal del equino acompañado de bloqueo del abastecimiento circulatorio, lo cual causa severa enfermedad intestinal. Esta afección es comúnmente conocida como Síndrome Abdominal Agudo o Cólico. La incidencia de esta afección es considerada baja con una mortalidad alta dependiendo del segmento anatómico involucrado y del tiempo con que se intervenga quirúrgicamente el paciente. En el presente trabajo se reportan los hallazgos clínicos e histopatológicos, el tratamiento quirúrgico, la evolución clínica y el manejo medico post-quirúrgico de dos casos de obstrucciones estrangulantes del colon mayor en equinos referidos a la Clínica Veterinaria Dr. Luis Medina. La historia, sintomatología clínica y pruebas de laboratorio orientaron el diagnóstico, el cual fue confirmado a través de laparotomía exploratoria, la resolución de cada caso fue acompañada con un estudio histológico del segmento intestinal afectado. La resolución en el caso número uno fue por enterotomía de vaciado, mientras que el caso dos fue tratado con reseción del colon mayor con entero anastomosis latero-lateral. Ambos casos sobrevivieron, observándose mejor progreso clínico post-quirúrgico en el caso número dos.

Strangulation obstructions are external vascular constriction with simultaneous blockage of intestinal lumen. It has also been referred cause severe intestinal disease in the horses and commonly related colic. The incidence of this lesion is low with high fatality influenced by anatomic segment involved and rapid surgical intervention at the horse. This paper report the history, clinical signs, histopathologic findings, surgical ma- nagement, clinical progress and post-surgical treatment in two case of strangulation of the large colon in horses sent to the veterinary clinic Dr. Luis Medina. History, physical examination, laboratory test and exploratory laparatomy were used for diagnostic purpose. The resolution of each case has been completed with a histopatlogic study of the anatomic segment involved. The resolution in the case number one was for pelvic flexure enterotomy to decompress the colon torsion. The case number two was threatened with large colon resection and sideto-side anastomosis of left dorsal and ventral colons. Both cases survived however the case two have better clinical progress post-surgical.

**Contaminación por Toxocara spp. en parques de Tulyehualco, México.**

La toxocariasis es una parasitosis que afecta a los niños, en particular aquellos que juegan con tierra. Con el objetivo de identificar la presencia o incidencia de huevos de Toxocara spp., en parques de Tulyehualco, México, se realizó un análisis en muestras de suelos, heces depositadas en parques y muestras de heces de perros con propietario mediante un procedimiento de flotación-sedimentación. Los resultados mostraron una elevada contaminación por Toxocara, encontrando una contaminación de 60,0% en las muestras del suelo colectadas en los parques, 67,5% en heces colectadas en parques y 63,36 en heces de perros con propietarios. En los perros muestreados, no se encontraron diferencias por edad (P=0,27; menores de un año 65,47%; mayores de un año 55,55%), ni por sexo (¨P=0,5; hembras 55,55%; machos 63,45%). Se recomiendan algunas medidas para reducir la contaminación en suelos y disminuir la transmisión al hombre.

The toxocariasis is a parasitism that affects children, particularly those who play with soil. In order to identify the presence or egg incidence of Toxocara spp., in parks of Tulyehualco, Mexico; an analysis was conduced in samples of soils, feces deposited in parks and feces obtained from dogs with owners by a flotation-sedimentation procedure. The results demonstrated a high contamination by Toxocara, finding a contamination of in soil samples collected in the parks 60.0%, 67.5% in fecal samples collected in parks, and 63,36 in those obtained from dogs with owner, respectively. In sampled dogs, there were not differences by age (P=0.27; younger than 1 year 65.47%; older than one year 55.55%), neither by sex (¨P=0.5; female 55.55%; male 63.45%). Some measures are recommended to reduce the soil contamination and to diminish the transmission to the men.

**Linfoma multicéntrico O LINFOSARCOMA MULTICÉNTRICO en Búfalo de agua (Bubalus bubalIs): Estudio Anatomopatológico. Reporte de un caso**

La leucosis enzoótica bovina (LEB), también conocida como leucosis viral bovina (LVB), es una enfermedad neoplásica de origen viral, producida por un oncornavirus tipo C (retroviridae) que ocurre con o sin formación de nódulos neoplásicos. La leucosis bovina (LB) en Venezuela ha sido diagnosticada clínicamente en base a las manifestaciones y evidencias clínico patológicas, así como sobre los cambios anatomopatológicos que han sido descritos en algunos casos, pero ninguno publicado. Se han hecho reportes de esta enfermedad en bovinos de leche, evidenciando la presencia de casos sin formación de nódulos neoplásicos, los cuales han sido considerados sospechosos, en razón de no haber realizado pruebas serológicas en el laboratorio. De igual forma, se han descrito casos de leucosis con formación de nódulos neoplásicos en diferentes órganos y han sido reportados como casos sospechosos de LB. La literatura refiere la existencia de cuatro (4) formas de leucosis: multicéntrica adulta, juvenil poco común, tímica y cutánea. Esta clasificación, es referida a los casos con presencia de nódulos neoplásicos constituidos por tejido linfoide anaplástico, sobre el cual se fundamenta el diagnóstico anatomopatológico. En el presente trabajo se reporta un caso de linfoma o linfosarcoma multicéntrico que se describe como sospechoso de LB en una búfala de agua de 10 años de edad en el estado Mérida, Venezuela, fundamentado en el diagnóstico anatomopatológico, con descripción de los cambios macro y microscópicos observados. Adicionalmente se reporta una ocurrencia de 2% de positividad a LB mediante las técnicas ELISA y AGID en el rebaño (300 búfalos) de la misma procedencia del caso descrito.

Bovine Enzootic Leukosis (BEL), also known as Viral Bovine Leukosis (VBL), is a viral, oncornavirus type C (retroviridae), neoplasic disease which occurs with or without neoplasic nodules. The disease has been clinically and morphologically diagnosed as suspicious cases in Venezuela since lab serological tests were not performed. Macroscopic and microscopic changes have been described in a few cases with neoplastic nodules and referred as a Bovine leukosis (BL), but none has been published. Bovine leucosis has also been referred in milking cows with or without neoplasic nodules, most cases have not been diagnosed by blood serum analysis and considered to be only suspicious cases. There are four distinct forms of BL (adult mullticentric, juvenile uncommon, thymic and cutaneous) have been reported in the literature around the world, this classification is based upon the presence of neoplasic nodules composed of anaplastic lymphoid tissue. This work reports a case of multicentric form of bovine lymphoma which could be suspicious of BL, in a 10 years old female water buffaloe in Mérida State, Venezuela. This report of one case of lymphosarcoma is supported by macroscopic and microscopic changes described. Aditionally, a frequency of 2% of positive cases diagnosed by ELISA and AGID tests is reported in the herd (300 buffaloes) of similar procedence of the described case.

**Nuevo foco de infección de Oxyspirura mansoni en gallos de pelea de municipios del estado Zulia, Venezuela**

El propósito de esta investigación fue determinar la existencia de un foco de infección de Oxispirurosis cuyo agente etiológico es un nematodo Thelazzidae: Oxyspirura mansoni (Cobbold, 1879). Este nematodo es responsable de la filariosis ocular de las aves. Este estudio se refiere a gallos de pelea ubicados en los siguientes municipios: Maracaibo, San Francisco, Mara y Jesús Enrique Lossada del estado Zulia. Venezuela. Estos parásitos están localizados debajo de la membrana nictitante de los ojos ocasionando absoluta ceguera. En el presente estudio el muestreo fue tomado de gallos de pelea de cuatro Municipios para un total de 630 aves. En una gallera del municipio Maracaibo, sector La Rotaria, 50,77% de los animales evaluados resultaron positivos. Los parásitos fueron extraídos directamente de los ojos después de haberles colocado una gota de ivermectina solución oftálmica (1%), mientras que otra gallera ubicada en el sector Delicias, 20% de las muestras de las aves estuvieron positivas; en una gallera del sector Lacteos San José, los animales estaban negativos; en el municipio San Francisco y en el sector Los Cortijos, 32% de las aves resultaron positivas. En el municipio Jesús Enrique Lossada las aves muestreadas resultaron negativas y en el municipio Mara, sector Los Lirios, 35 muestras resultaron negativas. Fueron colectadas numerosas cucarachas en las jaulas de los gallos infectados, identificadas y clasificadas: en el Orden: Dictyoptera, Suborden: Blattaria, Familia Blattidae, especie: Picnoscelus surinamensis, designada hospedador intermediario, la disección demostró larvas del nematodo Oxyspirura mansoni en la cavidad general. En las galleras negativas no estuvieron presentes los insectos. Se concluye que la cucaracha colectada en las galleras es la misma especie (Picnoscelus surinamensis) asociada con la enfermedad del primer trabajo reportado, pero las lesiones de las aves fueron relativamente moderadas.

The purpose of this research was to determine the existence of the source of an Oxispirurosis infection which ethiological agent is a nematode known as Thelaziidae: Oxyspirura mansoni (Cobbold, 1869). This nematode is responsible of ocular filariosis of birds. This study is related with gamecock birds located in the following Municipalities: Maracaibo, San Francisco, Jesus Enrique Lossada and Mara of Zulia State, Venezuela. These parasites are located under the nictitante membrane of the eye causing an absolute blindness. In the present study samples were taken from cocpits of four Municipalities of Zulia State with a total of 630 gamecock birds sampled. In Maracaibo, La Rotaria sector, 50.77% of evaluated animals were positive. The parasites were directly extracted from the eyes after treatment with an ivermectine ophthalmic solution (1%). In other cockpits located in Las Delicias sector, 20% of sampled birds were positive. In the San Francisco Municipality, Los Cortijos sector, 32% of sampled birds were positive, while in the second cockpit Lacteos San Jose the animals were negative. In the Jesús Enrique Lossada Municipality, all sampled birds resulted negative; in the Mara Municipality, Los Lirios sector, all 35 samples were negative. Were found in the cages of the gamecock birds that were positive, many cockroachs were identify and classified (Dictyoptera, Blattaria, Blattidae, specie: Picnoscelus surinamensis).This cockroach has been designated as the intermediary host. Larvae of nematode Oxyspirura mansoni were found in the general cavity of the cockroach. In the negative cockpits, the cockroachs were not present. It was concluded that the same cockroach species (Picnoscelus surinamensis) is associated with the disease as in previous work, but the degree of the lesions was relatively moderated.

**Patología UltraestructuraL del músculo gluteus medius de Caballos Criollos en los llanos venezolanos infectados naturalmente por el virus de la anemia infecciosa equina**

La Anemia Infecciosa Equina (AIE) es una enfermedad viral, de curso agudo a crónico, que afecta a los équidos en general en los llanos venezolanos. Hasta el momento, no se han analizado los posibles efectos que pueda tener la AIE sobre el músculo esquelético. En la presente investigación se realizó un estudio ultraestructural de las fibras musculares del músculo Gluteus medius, de caballos seropositivos al test de Coggins, teniendo animales seronegativos al citado test como controles de campo. Las biopsias musculares se procesaron por las técnicas convencionales de corte fino para la microscopía electrónica de transmisión. El análisis de las micrografías electrónicas de animales seropositivos mostró cambios subletales y letales. Como alteraciones subletales, se observaron en el sistema contráctil, atrofia y trazo irregular de la línea Z. En el sistema sarcotubular se evidenció edema de las cisternas terminales. Las mitocondrias exhibieron una matriz con diferentes densidades electrónicas y la presencia de gránulos electrón densos. Se observaron variadas estructuras lisosomales. Por su parte, las alteraciones letales se distinguieron por diferentes grados de hipercontracción, pérdida total de la organización de los sistemas contráctil y sarcotubular, degeneración de las mitocondrias, ruptura del sarcolema y necrosis segmental. Los capilares intramusculares exhibieron alteraciones como el engrosamiento y reduplicación de la membrana basal, prolongaciones del citoplasma endotelial hacia la luz y pérdida de la continuidad de la pared endotelial. Se evidenciaron también pericitos, unos aparentemente normales, otros con alteraciones. El infiltrado celular consistió en macrófagos y neutrófilos. Los presentes hallazgos permiten sugerir que los mismos se corresponden con lo reportado por otros autores en relación a los efectos de las enfermedades autoinmunes sobre la ultraestructura del músculo esquelético.

The equine infectious anemia (EIA) is a viral disease of acute response and progress to chronic course which affects equine of Venezuelan plains. Until now, there is no information about the possible effect of EIA on skeletal muscle ultrastructure. The aim of the present investigation was to study the ultrastructure of muscle Gluteus medius from horses positive to Coggins test and animal control negative to the test. Muscle biopsies were processed by routine techniques for transmission electron microscopy. Muscle alterations varied from slight to severe, including atrophy, swelling of sarcotubular system and mitochondria. Mitochondria showed a matrix with different electron densities and the presence of electron dense granules. There were observed different kinds of lysosomes. More severe alterations included hypercontraction and complete loss of myofilaments, rupture of sarcolemma and segmental necrosis. Intramuscular capillaries exhibited endothelial cell cytoplasm infoldings into the lumen and partially or totally occluded lumen. Basement membrane was widened and reduplicated. Some capillaries showed widened endothelial cell cytoplasm, mitochondria and rough endoplasmic reticulum swelling and even degenerated. Others showed ruptured endothelial wall. Pericytes exhibited a cytoplasm which varied from normal to a proliferative one. The mononuclear cell infiltrate consisted of macrophages and neutrophils. Most of observed alterations have been described in muscle disorders with an autoimmune component.

Bacterias patógenas potenciales al inicio del período seco de vacas doble propósito con mastitis subclínicas

**Cambios en el peso corporal durante la lactancia de vacas B. Taurus x B. Indicus en un sistema de doble propósito en el trópico Mexicano**

El objetivo de este estudio fue evaluar los cambios de peso corporal (PC) durante la lactancia de vacas Holstein x Cebú (HC) y Suizo x Cebú (SC) en un sistema de doble propósito en el bosque tropical húmedo de México. Vacas de tres hatos comerciales se pesaron al parto y cada mes hasta el secado. Los datos comprendieron 3.356 pesajes de 234 vacas tomados durante los años de 2002 a 2005. Un análisis preliminar, no mostró diferencias entre grupos genéticos, por lo tanto, los datos se analizaron según el número de parto (1; 2; 3 y 4 o más partos), utilizando modelos mixtos para medidas repetidas. Los modelos incluyeron los efectos fijos de hato, año de parto y mes de medición y los efectos aleatorios de vaca y residual. La gráfica de PC de las vacas mostró un ligero incremento continuo en las primeras dos lactancias y una tendencia a mantenerse constante en los grupos de vacas con 3 y 4 o más partos. El peso al parto (PP) y el promedio de todos los pesos de una vaca durante la lactación (PVL) incrementaron con el número de parto. El peso adulto de las vacas se alcanzó en la tercera lactancia. Los coeficientes de correlación de los PC de una misma lactancia para los cuatro grupos de parto fluctuaron de 0,51 a 0,89 (P<0,05).

The objective of this study was to evaluate the body weight (BW) changes during lactation of Holstein x Zebu and Brown Swiss x Zebu cows in a dual-purpose system in the forest humid tropics of Mexico. Cows from three commercial herds were weighed at calving and every month until drying. Data included 3.356 measurements from 234 cows, during the years of 2002 to 2005. Repeated measures data were analysed by parity number (1, 2, 3 and 4 or more calvings) using mixed model procedures, which included the fixed effects of herd, year of calving, month of measure, and the random effects of cow and residual. The depicted graphic of the BWs showed a continuous slight increase in the first two lactations and a trend to keep their BW constant in the group of cows with 3 or 4 or more lactations. BW at calving (BWC) and the average of all BW during the lactation for a cow (ABW) increased with parity. The adult BW of the cows was reached at the third lactation. The correlation coefficients between the BWs of a given lactation for the four group of parity ranged from 0.51 to 0.89 (P<0.05).

Distribución de partos por estación en ovejas de razas de pelo y cruces en un ambiente tropical húmedo

Datos de 4203 registros de parición desde 1997 a 2005 provenientes de tres grupos raciales de ovejas de pelo, se utilizaron para determinar la distribución de partos en condiciones de un sistema de apareamiento continuo a través del año. Los grupos raciales fueron Blackbelly (BB), F1 Pelibuey x Blackbelly (F1 P x BB) y un grupo de hembras híbridas denominado Cruce (Cruce), resultado del apareamiento de los grupos indicados anteriormente con carneros Dorper y Katahdin. El manejo reproductivo incluyó la presencia continua del macho. Las ovejas fueron expuestas a un apareamiento continuó con carneros adultos. Las épocas climáticas de partos fueron: seca (febrero a abril), lluvias uno (mayo a julio), lluvias dos (agosto a octubre) y nortes (noviembre a enero). El número de partos dentro de cada grupo racial fue primíparas y multíparas. Los datos se analizaron con la prueba de Ji-cuadrado. La distribución de partos fue diferente (P<0,01) entre épocas climáticas de parto. La frecuencia de partos fue mayor durante la época de nortes con relación a las otras épocas climáticas. La época climática influyó (P<0,01) sobre la frecuencia de partos en los grupos raciales estudiados. Los tres grupos raciales estudiados mostraron mayor frecuencia de partos en nortes que en las otras épocas. Las ovejas primíparas F1 P x BB y Cruce tuvieron menor frecuencia de partos (P<0,01) en lluvias que en las otras épocas. Las ovejas multíparas de los grupos BB, F1 P x BB y Cruce tuvieron mayor frecuencia de partos en nortes que en las otras épocas. La eficiencia de parición de ovejas de pelo en condiciones de apareamiento continuo muestra variación estacional, las ovejas primíparas y multíparas mostraron un pico de parición en la época de nortes. La época climática afecta la frecuencia de parición en los grupos raciales estudiados.

Data of 4203 lambing records from 1997 to 2005 of three breed groups of hair sheep were used to determine the lambing distribution under a continuous breeding system throughout the year. The breed groups were Blackbelly (BB), F1 Pelibuey x Blackbelly (F1 P x BB) and a group of females hybrids denominated Cruce (Cruce) as a result of groups crossings above indicated with Dorper and Katahdin rams. Reproductive management included the continuous presence of the male. Ewes were exposed to continuous breeding with adult rams. The climatic lambing season were: dry (February to April), rainfall one (May to July), rainfall two (August to October) and rainfall and winds (November to January). The parity orders within each breed group were primiparous and multiparous. Data were analysed with the Chi- square test. The lambing distribution was different (P<0.01) among climatic lambing seasons. The lambing frequency was greater during the rainfall and wind season than the others climatic seasons. Climatic season influenced (P<0.01) the lambing frequency in the breed groups studied.The three breed groups studied showed higher lambing frequency in rainfall and wind season than the other seasons. The F1 P x BB and Cruce primiparous ewes had lower lambing frequency (P<0.01) in rainfall than the other seasons. The BB, F1 P x BB and Cruce multiparous ewes had higher lambing frequency (P<0.01) in rainfall and wind season than the other seasons. The lambing performance of hair sheep under a continuous breeding system had seasonal variation, the primiparous and multiparous ewes showed a peak lambing in rainfall and wind seasons. The climatic seasons affected the lambing frequency in the breed groups studied.

Aislamiento y rendimiento del GMP mediante precipitación de lactosuero con ácido tricloroacético

Durante la elaboración del queso, la k-caseína es hidrolizada por la renina (Quimosina E.C.3.4.23.4) en el enlace peptídico Fen105-Met106 generando dos fracciones: la para-k-caseína y el glicomacropéptido (GMP) que se libera al lactosuero. El GMP presenta una estructura química particular donde predominan los aminoácidos con cadena lateral ramificada, no presenta aminoácidos aromáticos y contiene carbohidratos unidos a residuos de treonina; por esta razón se le ha atribuido una variedad de actividades biológicas. Se ha estimado que en Venezuela se generan alrededor de 713 toneladas de lactosuero anualmente. Un volumen considerable de este subproducto se produce en el estado Zulia, constituyéndose esto en una fuente de péptidos y proteínas de alta calidad nutricional que está siendo subutilizada. Con el propósito de evaluar el aislamiento y rendimiento del GMP a partir de la precipitación de lactosuero de ricotta con ácido tricloroacético 50%, se realizaron 6 extracciones con este ácido a 50 mL de cada tipo de suero analizado: suero ricotta, suero comercial resuspendido y suero ácido (control negativo). Se verificó mediante pruebas químicas y PAGE-SDS 15% de manera indirecta, la presencia de GMP en las preparaciones obtenidas. Se observaron bandas de 6,5; 18,3 y 19,0 kDa en suero ricotta y suero comercial resuspendido. Las bandas de 18,3 y 19,0 posiblemente correspondan a la forma trimérica del péptido. El rendimiento del GMP en términos de proteínas fue en promedio 1,17 mg/50mL (1,17%) y 4,51 mg/50mL (0,81%), para suero ricotta y suero comercial, respectivamente. Los resultados indican que es factible obtener preparaciones del GMP, sin embargo, para plantear la producción a escala industrial de este péptido para su aprovechamiento, se requiere evaluar otros procedimientos donde se obtenga a bajo costo una preparación purificada del GMP.

During cheese manufacturing k-casein is hydrolyzed by rennin (Quimosine E.C.3.4.23.4) on peptidic bond Fen105- Met106 releasing two fractions: para-k-casein and glycomacropeptide (GMP). GMP shows a particular chemical structure in which ramified lateral chain aminoacids prevail, without aromatics aminoacids, but with carbohydrates short chains linked to some threonine residues; because of this, a variety of biological activities have been attributed to molecule. It has been considered that in Venezuela, 713 tons of whey are generated annually. An important volume of this byproduct is produced in the Zulia State, becoming itself a source of peptides and proteins of high nutritional quality that has been subused. With the purpose of evaluating GMP isolation and yield from ricotta whey precipitation with 50% trichloroacetic acid treatment, 6 extractions where performed with this acid to 50 mL of each analyzed whey: ricotta whey, resuspended commercial whey and acid whey (negative control). By means of chemical tests and PAGE-SDS 15%, indirect presence of GMP was verified in all preparations. Bands of 6.5, 18.3 and 19.0 kDa were observed in ricotta and commercial whey. Bands of 18.3 and 19.0 possibly correspond to the peptide trimeric structure. GMP yield in terms of protein content was 1.17 mg/50mL (1.17%) and 4.51 mg/50mL (0.81%), for ricotta and commercial whey, respectively. Results show that it feasible to obtain preparations of GMP, however, in order to produce this peptide industrially for its use, evaluation of low cost procedures for GMP purification is required.

**Evaluación de la calidad alimentaria de la harina de Lemna obscura como ingrediente en la elaboración de alimento para tilapia roja (Orechromis spp.)**

El presente trabajo se realizó con la finalidad de evaluar la calidad nutricional de la harina de lenteja de agua (Lemna obscura) como ingrediente en la elaboración de alimento para tilapia roja (Oreochromis spp.). Se prepararon 3 dietas con niveles de inclusión de 15% (dieta A), 25% (dieta B) y 35% (dieta C) y una dieta control exenta de harina de Lemna. Estas fueron isocalóricas e isoproteicas con un nivel de 30% de proteína. Además se utilizó una dieta comercial (dieta D), con 40% de proteína, para compararla con las dietas experimentales. Los alevines se alimentaron durante 10 semanas consecutivas y cada catorce días, se evaluaron los parámetros más importantes como ganancia de peso, alimento consumido, factor de conversión alimentaria (FCA) y la relación eficiencia-proteica (REP). La comparación estadística reveló que no hubo diferencias significativas (P>0,05) en los valores de los resultados finales de la conversión entre las dietas Control A, B, C y D. En relación al peso promedio final, hubo diferencias significativas (P<0,05) entre los peces alimentados con la dieta B, con respecto a la dieta control y dieta comercial. No hubo diferencias significativas entre las dietas experimentales (P>0,05). Se demuestra en este estudio que la dieta con un 25% de inclusión resultó ser más eficiente en cuánto a los parámetros evaluados que la dieta control. Los excedentes de Lemna crecidos en el lago de Maracaibo o cultivados pueden ser utilizados como harina en las dietas para tilapia roja y representa una alternativa para reducir los costos de alimentación, siempre y cuando se utilice en combinación con otros ingredientes de alto contenido proteico.

The present work was carried out with the purpose to evaluate the nutritional quality of duckweed (Lemna obscura) meal as ingredient in the food elaboration for red tilapia (Oreochromis spp.). Three diets were prepared with inclusion levels of 15% (diet A), 25% (diet B) and 35% (diet C) and a control diet free of Lemna meal. The diets were isocaloric and isonitrogenous with 30% of protein. Furthermore, commercial diet (diet D) with 40% protein was used to compare with experimental diets. The fingerlings were fed during 10 weeks consecutive and fourteen days, were evaluated the most important parameters as weight gain, consumed food, feed convertion ratio (FCR) and the protein efficiency ratio (PER). The statistical comparison revealed that there were no significant differences (P>0.05) in the values of final results of convertion among diets control, A, B, C and D. In relation to weight average final there were significant differences (P<0.05) among the fish fed with the diet B with respect to the control diet and commercial diet. There were no significant differences among experimental diets (P>0.05). This study showed that diet with inclusion level 25% resulted to be more efficient in how much to the evaluated parameters that the diet control. The excesses of Lemna grown in the Maracaibo lake or cultivated can be used as meal in the diets for red tilapia and represents one alternative to reduce the feeding costs, as long as it used in combination with other ingredients of high protein content.

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