Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología

A sesenta años de la aplicación del DDT en la lucha contra la malaria en Venezuela

Beatriz Migdalia Nieves Blanco

Acinetobacter spp: Aspectos microbiológicos, clínicos y epidemiológicos

Las especies de Acinetobacter se encuentran ampliamente diseminadas en la naturaleza, siendo el agua y el suelo sus principales nichos ecológicos. Se han aislado de numerosos focos y fuentes, incluyendo leche y sus derivados, aves de corral y comida congelada, además, de piel, conjuntiva, leche humana, garganta y uretra de sujetos sanos. A. baumannii es la especie más implicada en la colonización e infección hospitalaria de pacientes críticos o inmunosuprimidos, se ha aislado de una gran variedad de infecciones nosocomiales, incluyendo bacteriemia, meningitis secundarias a malformaciones congénitas o infecciones previas por otros microorganismos e infección del tracto urinario, pero su papel predominante es como agente causal de neumonía nosocomial, particularmente en pacientes con neumonía asociada a ventilación mecánica, recluidos en unidades de cuidados intensivos. Tales infecciones son, la mayoría de las veces, difíciles de tratar por la resistencia de estas bacterias a diversos antibióticos. Dada la importancia que ha adquirido este microorganismo, a nivel mundial, en los últimos años, se realizó esta revisión con aspectos relevantes de dicho género, tales como su ubicación taxonómica actual, epidemiología y su papel como patógeno nosocomial

Abstract The Acinetobacter species are widely disseminated in the nature, being water and soil their main habitat. Acinetobacter spp. have been isolated from a great variety of sources including lactic products, poultries and frozen food, and others such as skin, conjunctiva, human milk, throat and urethra of healthy subjects. A. baumannii is so far the most relevant specie in colonization and infection of critical or immunosuppressed patients. It has been isolated from a great variety of nosocomial infections, including bacteremia, secondary meningitis or urinary tract infections; but, it is the main causative agent of nosocomial pneumonia, specially in patients with ventilator associated pneumonia, in intensive care units. Such infections are usually difficult to treat because these bacteria present high levels of resistance to different antibacterial agents. Due to the worldwide relevance that has acquired this microorganism in the latest years, the present review provides an overview of current knowledge, paying special attention to the actual taxonomy, epidemiology and the role as nosocomial pathogen

Staphylococcus aureus: estado de portador en personal de enfermería y patrones de susceptibilidad antimicrobiana

Para detectar el estado de portador de S. aureus y los patrones de susceptibilidad antimicrobiana de las cepas aisladas, se procesaron muestras de exudado nasal e hisopado de manos de 126 profesionales de la enfermería. El aislamiento e identificación bacteriana se hizo siguiendo la metodología convencional y se determinó la susceptibilidad antimicrobiana mediante el método de difusión del disco. Se determinó la producción de β-lactamasas, resistencia a oxacilina, concentración inhibitoria mínima a oxacilina, vancomicina y penicilina G y producción de PBP2. 18.25% (23) de los individuos muestreados resultó portador. Para penicilina G se obtuvo 86.79% de resistencia y 18.87% para oxacilina. La presencia de cepas SAMR fue observada en la UCIA (26.09%). 84.91% de las cepas resultó β-lactamasa-positivas y 16,98%, productoras de PBP2. El estado de portador nasal representa un importante reservorio hospitalario para S. aureus, no encontrándose ningún perfil de resistencia específico entre las cepas aisladas

Abstract In order to determine carrier state and antimicrobial susceptibility patterns of S. aureus, nasal and hands swabs coming from 126 professional nurses, were processed. Isolation and bacterial identification were made by conventional methodology and antimicrobial susceptibility was determined by disk diffusion method. β-lactamases production, oxacillin screening test, minimal inhibitory concentration to oxacillin, vancomycin and penicillin G, and PBP2 production were also determined. 18.25% (23) of the individuals were S. aureus carriers. For penicillin G resistance was 86.79% and 18.87% to oxacillin. The presence of MRSA strains was observed in the adult intensive care units (26.09%). 84.91% of the strains were β-lactamase positive and 16.98% PBP2 producers. Nasal carriage represents an important hospital reservoir of S. aureus; none specific resistance profile was found among the isolated strains

Aislamiento e identificación de micobacterias mediante métodos bacteriológicos y de biología molecular

La tuberculosis constituye un problema de salud a nivel mundial y se necesitan esfuerzos concertados para lograr un diagnóstico oportuno. Las infecciones por micobacterias no-tuberculosas (MNT) se agregan al reto diagnóstico. En este trabajo mostramos el aislamiento e identificación de micobacterias, usando métodos bacteriológicos y moleculares a partir de 256 muestras clínicas obtenidas de 188 pacientes con impresión diagnóstica de tuberculosis. De las 41 muestras en las cuales hubo aislamiento (16% del total), 24 fueron baciloscopia positiva (BK+), 58,5% y 17 BK- (41,5%). M. tuberculosis representó el 58,14% de los aislados y MNT el 37,2%: 6 M. chelonae, 4 M. marinum, 3 M. fortuitum, 3 no identificadas. La correlación entre la identificación bacteriológica y molecular fue del 93%. La presencia de un alto porcentaje de MNT aisladas de pacientes clínicamente enfermos señala la importancia de incluirlas en el diagnóstico clínico diferencial y la necesidad de implementar el cultivo como herramienta obligatoria de diagnóstico bacteriológico

Abstract Tuberculosis constitutes a worldwide major health problem and concerted effort to obtain an opportune diagnosis is needed. The infections caused by non-tuberculous mycobacteria (NTM) add to the diagnosis challenge. In this work we isolated and identified mycobacteria, using bacteriological and molecular methods, from 256 clinical samples obtained of 188 patients with diagnostic impression of tuberculosis. From forty one samples with isolation (16%), 24 were baciloscopy positive (BK+), 58,5% and 17 were BK- (41,5%). M. tuberculosis represented 58.14% of all isolated mycobacteria and NTM were present in 37,2%: 6 M. chelonae, 4 M. marinum, 3 M. fortuitum, 3 no identified. The correlation between the bacteriological and molecular identification methods was 93%. The presence of a high percentage of NTM obtained from clinically ill patients indicates the importance to include them in the differential clinical diagnosis and implementation the culture as obligate bacteriological diagnostic tool

Actividad de fosfolipasas y protesasas en aislados clínicos de Candida spp

El objetivo de este trabajo fue determinar y comparar la actividad de fosfolipasas y protesasas de cepas de Candida spp., así como correlacionar la actividad enzimática con el sitio de aislamiento de las levaduras. Se emplearon 95 cepas de Candida spp. aisladas de diferentes muestras clínicas. La actividad de fosfolipasas se evaluó de acuerdo al ensayo de Polak, utilizando dos medios de cultivo a base de yema de huevo. La actividad de protesasas se evaluó según el ensayo de Aoki y col., utilizando un medio de cultivo a base de albúmina sérica bovina. Para el análisis estadístico se utilizaron las pruebas de ANOVA y t de Student para muestras pareadas. Se pudo establecer que las cepas de Candida albicans poseen más actividad de protesasas que las especies de Candida no albicans, así como una relación entre la actividad de protesasas y el sitio de aislamiento de las levaduras. No se obtuvieron diferencias estadísticamente significativas al evaluar la actividad de fosfolipasas entre Candida albicans y Candida no albicans y no se pudo establecer una relación entre la actividad de fosfolipasas y el sitio de aislamiento de las levaduras. Los medios de cultivo sólidos son una alternativa viable y fácil de usar para evaluar la actividad enzimática de proteasas y fosfolipasas en un laboratorio de micología, unido a pruebas de rutina como el examen directo y el cultivo, para la identificación de especies de Candida. Su uso puede tener una gran aplicabilidad, ayudando a establecer si existe una relación entre la producción de estas enzimas y la patogenicidad de estas levaduras, asociado al sitio de aislamiento de las mismas

Abstract The objectives of this work were to determine and to compare the phospholipase and protease activity of Candida spp. strains, and to correlate the enzymatic activity with the place of yeasts isolation. 95 Candida spp. strains isolated of different clinical samples were used. Phospholipase activity was performed according to Polak, using two egg yolk agar culture media. Protease activity was assayed according to Aoki et al., using bovine serum albumin agar plates. For the statistical analysis ANOVA test and paired samples Students t test were used. It could be settled down that Candida albicans strains posses more protease activity than Candida non albicans species, as well as a relationship between protease activity and yeasts isolation place. No statistically significant differences were obtained when Candida albicans and Candida non albicans phospholipase activity were evaluated and could not settled down a relationship between the phospholipase activity and yeasts isolation place. Solid culture media are a viable and easy-to-use alternative, to evaluate protease and phospholipase enzymatic activity in a mycology laboratory, for the identification of Candida species, together with routine tests like direct exam and culture, and would help to establish if a relationship exists between yeasts pathogenicity and enzymes production, associated with the isolation place of the same ones

Especies de Aeromonas en vegetales frescos que se expenden en un mercado popular de Maracaibo

Las especies de Aeromonas son patógenos emergentes que se pueden recuperar de una gran variedad de alimentos. El objetivo de esta investigación fue determinar la frecuencia de Aeromonas spp. en vegetales frescos que se expenden en Maracaibo. Se analizaron 150 muestras: 50 lechuga, 50 cilantro y 50 perejil. Para el aislamiento se utilizó agua peptonada alcalina (medio de enriquecimiento), agar almidón ampicilina y DNasa-azul de toluidina-ampilcilina agar (medios selectivos). La identificación se realizó empleando pruebas bioquímicas. La frecuencia de Aeromonas spp. fue de 37 (24,67%), siendo las muestras de cilantro las que presentaron el mayor número de aislamiento 24 (52,00%). A. caviae fue la especie mas recuperada 27 (72,97%), seguida de A. hydrophila 10 (27,03%). Estos resultados evidencian que los vegetales analizados presentan elevados niveles de contaminación por Aeromonas, lo cual indica que se deben tomar medidas para minimizar los riesgos microbiológicos que representan estos alimentos para los consumidores

Abstract Aeromonas species are emergent pathogens that can recover of a great variety of foods. The objective of this investigation was to determine the frequency of Aeromonas spp. in fresh vegetables that are expended in Maracaibo. 150 samples were analyzed: 50 lettuce, 50 cilantro and 50 parsley. For the isolation alkaline peptone water (enrichment medium), ampicillin starch agar and DNasa- toluidine blue-ampicillin agar (selective media) were used. The identification was made by using biochemical tests. The frequency of Aeromonas spp. was of 37; (24,67%), being the coriander samples those that presented the biggest isolation number 24 (52,00%). A. caviae was the most frequent species 27 (72,97%), followed by A. hydrophila 10 (27,03%). These results evidence that the analyzed vegetables present high levels of contamination for Aeromonas that which indicates that they should take measures to minimize the microbiological risks that represent these foods for the consumers

Klebsiella pneumoniae y K. oxytoca aisladas de niños con diarrea:: adherencia y citotoxicidad en líneas celulares

La capacidad de adherencia y citotoxicidad de cepas de Klebsiella pneumoniae y Klebsiella oxytoca sobre líneas celulares intestinales HT-29 y CaCo-2, fue medida a partir de cepas aisladas de heces de niños de 0 a 5 años cuyas principales características son la pobreza y desnutrición, los cuales son factores importantes en problemas de salud publica en Venezuela. Cinco de las seis cepas estudiadas son adherentes y citotóxicas para ambas líneas celulares. Estos resultados confirman que las cepas de K. pneumoniae y K. oxytoca presentan dos mecanismos de enteropatogenicidad: uno de adherencia específico y otro de citotoxicidad en líneas celulares intestinales HT-29 y CaCo-2

Abstract The capacity of adherence and citotoxicity of K. pneumoniae and K. oxytoca upon cell lines HT/29 and CaCo-2. was tested in diarreic stools samples from 0-5 years old children whose main characteristics were poverty and malnutrition, which represent two of the most important public health problems in Venezuela. From six strains stadied, five were adherent and citotoxic for both lines. These results confirm that the strains of K. pneumoniae and K. oxytoca showed two enteropathogenicity mechanisms: one of specific adherence and another of citotoxicity to the HT-29 and CaCo-2 cell lines

Seroprevalencia de anti-VHC en pacientes de la Unidad Regional de Inmunología Clínica del Estado Aragua. 2003-2004

Se determinó la seroprevalencia de anti-VHC en 1615 sueros de pacientes referidos a la Unidad Regional de Inmunología Clínica (URIC) del Estado Aragua, Venezuela. Las muestras de suero fueron colectadas y analizadas mediante un inmunoensayo enzimático (ELISA), siguiendo las instrucciones del fabricante del equipo. En 90 muestras de suero se detectó anti- VHC lo que representó una seroprevalencia de 5,57% de la población estudiada. Predominó ligeramente el género masculino (53,33%), con respecto al femenino (46,67%) y la edad promedio de estos pacientes fue 36,12 años. La mayoría de los pacientes procedían del Municipio Girardot (41,56%). Sólo el 11,24% de los sueros de los pacientes con anti-VHC pertenecían a personas hospitalizadas. Concluyendo que le seroprevalencia de anti-VHC es muy elevada en la población estudiada

Abstract The anti-HCV seroprevalence was determined in 1615 serums of patients referred to the Clinic Inmunology Regional Unit of the State Aragua, Venezuela. The samples of serum were collected and analyzed by ELISA test, following the manufacturers instruction. In 90 patients anti-HCV was detected, what represented a seroprevalence of 5,57% in the studied population. It prevailed lightly in males (53,33%) with regard to female (48,51%). The age average of these patients was 36,12 years old. Most of the patients came from the Girardot Municipality (41,56%). Only 11,24% of the serums of the patients with anti-HCV belonged to hospitalized people. We conclude that in the studied population the anti-HCV seroprevalence is very high

Candidemia en el Hospital Universitario de Maracaibo, Estado Zulia, Venezuela 2000-2002

El objetivo de este estudio fue realizar la caracterización fenotípica y conocer la distribución de las especies de Candida aisladas en 92 pacientes con candidemia (niños y adultos) internados en el Hospital Universitario de Maracaibo (Servicios UCI y No UCI), Edo. Zulia, Venezuela, de Marzo de 2000 a Septiembre de 2002. La identificación de las levaduras aisladas de los hemocultivos fue realizada mediante el uso de CHROMagar Candida y métodos tradicionales; en algunos casos se aplicó API 20C e ID32. Los resultados indican la presencia de C. albicans (33,7%) y Candida no albicans (66,3%): Candida tropicalis (30,4%), Candida parapsilosis (21,7%), Candida guilliermondii (5,4%), Candida pelliculosa (5,4%), Candida famata (2,2%) y Candida glabrata (1,1%). Entre los niños (n=70) internados en la UCI y servicios no UCI, predominaron aislamientos de C. parapsilosis y C. albicans respectivamente. Por otra parte, Candida tropicalis fue la levadura más frecuentemente aislada en adultos en los servicios evaluados. El predominio de Candida no albicans observado en este estudio, ha sido reportado en América Latina

Abstract The phenotypic characterization and the distribution of Candida spp. isolates coming from 92 patients with Candidemia (adults and children) that were hospitalized in the ICU and non ICU Services at The University Hospital of Maracaibo, Zulia State, Venezuela, from March 2000 to September 2002, was the aim of this study. Hemocultures isolated yeasts identification were done using CHROMagar Candida and traditional methods; in some cases were applied API 20C and ID32. The results showed the presence of Candida albicans (33,7%) and Candida non albicans (66,3%): Candida tropicalis (30,4%), Candida parapsilosis (21,7%), Candida guilliermondii (5,4%), Candida pelliculosa (5,4%), Candida famata (2,2%) and Candida glabrata (1,1%). The isolates from children (n=70) located in ICU and non ICU services showed predominance of C. parapsilosis and C. albicans respectively. On the other hand, C. tropicalis was the most frequent isolate in both adult services. The predominance of Candida non albicans observed in this study has been reported in Latin American countries

Extracción simplificada de ADN en especies de Candida

La pared de doble contorno de las levaduras hace difícil que se realice la lisis para la extracción del ADN genómico en Candida spp. Existen numerosos protocolos que se basan en métodos enzimáticos y/o físicos. Sin embargo son laboriosos y relativamente caros. El objetivo de este trabajo fue simplificar la extracción de ADN para usar el homogenato obtenido en la amplificación aleatoria de segmentos de ADN (RAPD) asimétrico con un cebador reverso corto CAND R de la secuencia repetitiva de C. albicans CARE 2. Mediante choque térmico se logró obtener suficiente cantidad de ADN de las diferentes especies de Candida para reproducir los diferentes patrones de bandas características de cada una de las especies

Abstract The double membrane of pathogenic yeast make the extraction of genomic DNA difficult. The aim of this study was to simplify the extraction of yeast DNA. We report that the use of heat is an easy, efficient and time-saving technique to obtain a homogenate containing high yields of good quality DNA. The use of these technique also prevents the use of toxic components, where small traces may be inhibit the random amplified polymorphic DNA technique. Using a reverse primer (CAND-R), a sequence of 20 oligonucleotides present in the repetitive sequence CARE-2 of C. albicans, we were able to reproduce several bands patterns of different Candida species

Nivel 4 de Bioseguridad (II): Para manejo de animales

El nivel 4 de bioseguridad para manejo de animales de experimentación debe utilizarse para trabajar con microorganismos exóticos de alta peligrosidad , capaces de producir infecciones graves y hasta mortales en el personal, transmitidos por aerosol y agentes relacionados con riesgos de transmisión desconocida. Para todas las actividades a este nivel se requieren combinación de prácticas especiales, equipos de seguridad y requisitos de las instalaciones del Nivel 4 para manejo de animales de experimentación

Abstract Animal biosecurity level 4 should be applied to work with exotic agents of highly hazardous, able to produce serious and mortal infectious diseases in the laboratory personnel, with high risk of aerosol transmitted infections and unknown transmission. For all the activities at this level , combination of special practices, safety equipment, animal facilities and animal practices applicable to work on animals infected with agents assigned to corresponding biosecurity level 4 are required.