Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología

Venezuela en SciELO Citation Index

Luis Segundo Jordán Meneses

Perfil de susceptibilidad de cepas de Enterococcus spp. aisladas en animales destinados al consumo humano, criados en los estados Monagas y Anzoátegui

Enterococcus spp. es un género intrínsecamente resistente a varias familias de antimicrobianos de uso clínico humano. En vista de su difícil tratamiento cuando causa infecciones graves y su fácil diseminación a través de la cadena alimentaria, se determinó el perfil de susceptibilidad de cepas de Enterococcus spp. aisladas en animales destinados al consumo humano, criados en los estados Anzoátegui y Monagas. Las muestras fueron recolectadas de forma no probabilística, intencional durante el año 2009. El perfil de susceptibilidad fue realizado por la prueba de difusión en disco para glicopéptidos, aminoglucósidos de alta carga, eritromicina, cloranfenicol, ciprofloxacina, rifampicina y ampicilina. Por ser vancomicina uno de los antimicrobianos de mayor uso en medicina humana, se hizo la búsqueda de alto nivel de resistencia a glicopéptidos en todas las cepas. La mayoría de los aislados fueron enterococos móviles (vanC). Los antimicrobianos con mayor resistencia fueron aminoglucósidos y macrólidos. La detección de cepas bacterianas resistentes a antimicrobianos de uso clínico humano, en los animales de consumo humano, pudiera traducirse en una transmisión alimenticia de este tipo de cepas en el ambiente extrahospitalario, llegando a causar, bajo circunstancias apropiadas, infecciones graves en el hombre ya que son patógenos oportunistas.

Enterococcus spp. is a genus intrinsically resistant to several antimicrobial families clinically used in humans. Due to their difficult treatment when they produce serious infections and their easy dissemination through the food chain, the susceptibility profile of Enterococcus spp. strains isolated from animals destined for human consumption raised at Monagas and Anzoátegui States was determined. Samples were collected in a intentionally non-probabilistic form during the year 2009. The susceptibility profile was done using the disk diffusion test for glycopeptides, high charge aminoglycosides, erythromycin, chloramphenicol, cyprofloxacin, rifampicin and ampicillin. Since vancomycin is one the antimicrobials most used in human medicine, the high resistance level to glycopeptides was determined for all strains. Most of the isolates were mobile enterococci (vanC). The most resistant antimicrobials were aminoglycosides and macrolids. The detection of bacterial strains resistant to antimicrobials clinically used in humans in animals destined for human consumption could be translated into an a food transmission of these type of strains in extra-hospital environments, leading to originate, under appropriate circumstances, serious infections in man, since they are opportunistic pathogens.

Caracterización de la microbiota nativa del queso Oaxaca tradicional en tres fases de elaboración

El queso Oaxaca tradicional goza de gran reconocimiento y consumo a nivel nacional, al ser elaborado con leche cruda de vaca es considerado como factor de riesgo para la salud, sin embargo, contiene flora natural no patógena como las bacterias lácticas (BAL), que le proporciona características extraordinarias y su reconocida tipicidad siendo importante su caracterización. Se realizó el conteo, aislamiento y caracterización fenotípica (pruebas morfológicas, bioquímicas, factores de crecimiento y fermentación) de coliformes totales, BAL, levaduras y Staphylococcus spp.en las etapas de leche, cuajada y queso. Todos los recuentos se encontraron fuera de la normativa mexicana (NOM-243-SSA1-2010); se observó diferencia (p<0,05) entre la etapa de leche y queso para coliformes totales, BAL y levaduras. Se aislaron 43 cepas de BAL, 38 de coliformes, 24 de levaduras y 16 de Staphylococcus spp. El 72,1% de las BAL correspondió al género Lactococcus y el 27,9% a Lactobacillus, se detectó la presencia de E. coli, Staphylococcus aureus y Rhodotorula spp. Los resultados muestran deficientes prácticas de higiene en la elaboración de queso Oaxaca, siendo importante la identificación de la microbiota autóctona y monitoreo en toda la cadena productiva a fin de obtener un producto artesanal inocuo y de mejor calidad.

The traditional Oaxaca cheese is highly regarded nationally and its consumption, being made from raw cows milk is considered as a risk factor to health, however is nonpathogenic natural flora and lactic acid bacteria (LAB), which provides unique characteristics and typicality recognized to be important characterization. Count was performed, isolation and phenotypic characterization (morphological and biochemical tests, growth factors and fermentation) of total coliforms, LAB, yeasts and Staphylococcus in the stages of milk, curd and cheese. All counts were found outside Mexican standards (NOM-243-SSA1-2010), was difference (p<0.05) between the stage of milk and cheese for total coliforms, LAB and yeasts. 43 strains were isolated from BAL, coliform 38, 24 yeasts, and 16 Staphylococcus. The 72.1% of the BAL corresponded to the genus Lactococcus and 27.9% for Lactobacillus, we detected the presence of E. coli, Staphylococcus aureus, and Rhodotorula spp. The results show poor hygiene practices in Oaxaca cheese making and it is important to identify the indigenous microbiota and monitoring throughout the production chain in order to get a handmade product safe and of better quality.

Transferencia horizontal de marcadores de resistencia a metales pesados y antibióticos entre bacterias indígenas, que colonizan lagunas de cola contaminadas con mercurio en el sur de Venezuela, y especies patógenas para el ser humano

Bacteria colonizing heavily polluted tailing ponds in Southern Venezuela exhibit multiple resistances against mercurial compounds and antibiotics. The corresponding genetic determinants, mainly acquired through horizontal gene transfer, might also be transferred to pathogenic bacteria, an issue which represents an important risk to public health. In this work we show that indigenous, mercury-resistant bacterial strains isolated from a model tailing pond, located in El Callao (Bolivar State, Venezuela) and exhibiting a high concentration of soluble Hg, were able to transfer in vitro both heavy metal- and antibiotic resistance markers to potential human- and animal- pathogens (i.e. Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa). The frequencies of transfer ranged between 1.2x10-6 and 5.5x10-7 transconjugants per recipient. Transconjugants were also detected in the field, in model biofilms previously grown in natural sponges (Luffa cylindrica) and submersed in the ponds, at frequencies ranging from 1x10-4 to 5x10-3 transconjugants per recipient. These results are of particular relevance from the public health viewpoint, especially in light of the potential risk of horizontal flow of antibiotic resistance genes between indigenous bacteria and potential human pathogens.

Las bacterias que colonizan lagunas de cola altamente contaminadas en el sur de Venezuela, presentan resistencia a compuestos mercuriales y múltiples antibióticos. Los determinantes genéticos responsables de estas resistencias, adquiridos principalmente a través de transferencia horizontal de genes, pueden ser transferidos a bacterias patógenas. En este trabajo mostramos que cepas bacterianas indígenas, resistentes al mercurio y aisladas a partir de una laguna de cola modelo, localizada en El Callao (Estado Bolívar, Venezuela) conteniendo una alta concentración de Hg soluble, fueron capaces de transferir in vitro marcadores de resistencia a metales y antibióticos a cepas potencialmente patógenas para el hombre y animales (ej. Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa). Las frecuencias de transferencia variaron entre 1,2x10-6 y 5,5x10-7 transconjugantes por receptora. Los transconjugantes también fueron detectados en el campo, utilizando un modelo de biopelículas desarrollado en esponjas naturales (Luffa cylindrica) sumergidas en lagunas contaminadas, con frecuencias que variaron entre 1x10-4 y 5x10-3 transconjugantes por receptora. Estos resultados presentan una relevancia particular desde el punto de vista de salud pública, especialmente en vista del riesgo potencial de transferencia horizontal de genes de resistencia a antibióticos entre las bacterias indígenas y bacterias potencialmente patógenas para el hombre.

Disponibilidad de fósforo soluble en ensilado experimental fermentado con una cepa de Lactococcus lactis subsp. lactis con alta actividad de fitasa

El fitato es la forma principal de almacenamiento de fósforo en semillas y granos, pero el fósforo unido a fitato resulta inaccesible para los peces. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la eficacia de Lactococcus lactis subsp. lactis Tw34 para liberar fósforo de fitato en un alimento experimental que contenía harina de cereal. La bacteria inoculante del ensilado biológico se seleccionó por su alta actividad de fitasa y las mezclas se prepararon con productos de descarte de merluza (Merluccius hubbsi). Las harinas de girasol, maíz, trigo y cebada se mezclaron con desechos picados de merluza hasta alcanzar el 25% y se inocularon con la bacteria citada. Después de 7 días de fermentación a 18 ºC los mejores resultados se obtuvieron cuando se utilizó harina de cebada. La cepa fue capaz de reducir el valor del pH a 4,4 y aumentar cuatro veces la concentración inicial de fósforo libre. Los resultados sugieren que la fitasa de Lactococcus lactis subsp. lactis Tw34 puede aumentar la accesibilidad del fósforo en dietas basadas en harina de cereales, evitando los efectos negativos del ácido fítico en la biodisponibilidad de minerales y proteínas, y disminuyendo la liberación de residuos de fósforo.

Phytate is the main phosphorous storage form in grains and seeds, but phytate linked phosphorous is inaccessible for fishes. The purpose of this wok was to study the efficacy of Lactococcus lactis subsp. lactis Tw34 for liberating phosphorous in an experimental feed which contained cereal flour. The inoculating bacterium of the biological silage was selected due to its high phytase activity, and the mixtures were prepared with waste hake products (Merluccius hubbsi). Sunflower, corn, wheat and barley flours were mixed with waste ground hake products up to 25% and inoculated with the bacterium mentioned. After 7 days fermentation at 18 oC, the best results were obtained when barley flour was used. The strain was able to reduce the pH value to 4.4 and increase four times the initial concentration of free phosphorous. The results suggest that Lactococcus lactis subsp. lactis Tw34 can increase phosphorous accessibility in cereal flour based diets, avoiding the negative effects of phytic acid on the bioavailability of minerals and proteins, and decreasing the liberation of phosphorous residues.

Efecto de medios de cultivo preparados con agua de mar sobre indicadores sanitarios en aguas marinas de balnearios de Chichiriviche, estado Falcón, Venezuela

Debido a su uso por humanos y para preservar la salud pública, los ambientes marinos recreacionales, deberían cumplir requisitos de calidad fisico-química y microbiológica. Sin embargo, actividades antropogénicas, tales como agricultura, ganadería, industriales, turísticas y domésticas, pueden descargar aguas servidas en playas marinas. La metodología vigente para evaluar la carga bacteriana de aguas recreacionales, no pareciera satisfactoria, particularmente en la detección de microorganismos patógenos debido a la presencia, en aguas marinas, de bacterias viables pero no cultivables (VBNC). Este estudio evaluó la carga bacteriana de aerobios mesófilos, coliformes totales/fecales y enterococos, en playas de Chichiriviche, Falcón, Venezuela y el efecto de concentraciones de agua marina sobre las densidades bacterianas. Las determinaciones se efectuaron en agar nutritivo, Mac Conkey y KF, preparados con agua destilada (MAD) o con agua de mar 10% v/v, (MAM). La carga bacteriana se incrementó entre 20 y 47 veces cuando los medios de cultivo se suplementaron con agua de mar. Las diferencias en las cargas bacterianas entre MAD y MAM, para aerobios mesófilos, coliformes totales y fecales fueron estadísticamente significativas (p≤0,05). El oxígeno disuelto y pH, en ambos medios presentaron valores permisibles.

Due to their use by humans and to preserve public health, recreational marine environments should fulfill physico-chemical and microbiological quality prerequisites. Nevertheless, anthropogenic activities such as agriculture, cattle raising, industrial, touristic and domestic, can discharge contaminated water at marine beaches. The present methods for evaluating the bacterial load of recreational waters does not appear satisfactory, especially concerning the detection of pathogenic microorganisms due to the presence, in marine waters, of viable but not cultivable bacteria (VNCB). This study evaluated the bacterial load of mesophilic aerobials, total and fecal coliforms, and enterococci at the Chichiriviche beaches, Falcon State, Venezuela, and the effect of marine water concentrations over the bacterial densities. The determinations were done in nutrient, Mac Conkey and KF agar prepared with distilled water (MAD) or with sea water (MSW). The bacterial load increased between 27 and 47 times when the culture media were supplement with sea water. The differences of the bacterial loads between MAD and MSW for mesophilic aerobials, total and fecal coliforms were statistically significant (p≤0.05). Dissolved oxygen and pH presented permissible values in both media.

Enterococcus spp. aislados de queso de oveja: resistencia a los antimicrobianos de utilización clínica

En Enterococcus spp. aislados de quesos de oveja se investigó la resistencia in vitro a antimicrobianos de utilización clínica. Se determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM) para gentamicina, estreptomicina, vancomicina, teicoplanina, ampicilina, imipenem, linezolid y tigeciclina. Se detectó la producción de β-lactamasa y se realizaron experimentos de conjugación para transferir resistencia a gentamicina. En un aislamiento de E. faecalis y en 10 de E. faecium se observó resistencia a ampicilina; se demostró la producción de β-lactamasa en un E. faecalis. En E. faecium, 15 aislamientos fueron resistentes a imipenem; 4 a linezolid y 5 a glucopéptidos. En 4 aislamientos de E. faecalis se demostró alto nivel de resistencia plasmídica a gentamicina. No se observaron aislamientos resistentes a tigeciclina. El queso de oveja es un reservorio de enterococos resistentes con potencial diseminación al hombre a través de la cadena alimentaria.

In vitro resistance to clinically used antimicrobials was investigated in Enterococcus spp. isolated from goat cheese. The gentamycin, streptomycin, vancomycin, teicoplanin, ampicillin, imipenem, linezolid and tigecyclin minimum inhibitory concentration (MIC) was determined. Β-lactamase production was detected and conjugation experiments were carried out for transferring gentamycin resistance. In one E. faecalis and in 10 E. faecium isolates there was ampicillin resistance and β-lactamase production was demonstrated in one E. faecalis. Fifteen E. faecalis were imipenenem resistant; 4 linezolid resistant and 5 glucopeptide resistant. There was a high level of plasmidic resistance to tigecyclin in 4 E. faecalis isolates. There were no tigecyclin resistant isolates. Goat cheese is a reservoir of resistant enterococci with potencial human dissemination through the food chain.

Condiciones de cultivo que fomentan la producción de sustancias antimicrobianas en actinomicetos patógenos y del suelo

En el presente estudio fueron evaluadas 300 cepas de actinomicetos (140 de origen clínico y 160 del suelo). La producción de sustancias antimicrobianas del total de las cepas de actinomicetos fue evaluada utilizando los siguientes caldos: Bennett (M1), (M2), y el caldo levadura extracto de malta-dextrosa YMD (M3). Se ajustaron las condiciones óptimas de cultivo para lograr altas concentraciones de los metabolitos bioactivos. El proceso de fermentación fue utilizado en tiempos de incubación que variaron entre 5 hasta 10 días. La mayor producción de metabolitos bioactivos se obtuvo cuando se utilizó el medio de producción M2. La actividad antimicrobiana se vio favorecida con la adición de dextrosa, peptona proteosada y extracto de levadura y fosfato de potasio (K2P04), sulfato de magnesio (MgSO4) x 7H2O y carbonato de calcio (CaCO3). Se relacionaron los patrones de crecimiento, la actividad antimicrobiana y la producción de biomasa en las cepas de actinomicetos en los tres medios de cultivo utilizados. Las cepas que presentaron fuerte actividad antimicrobiana contra la mayoría de las bacterias grampositivas, gramnegativas y hongos, fueron seleccionadas para futuros estudios donde se realizará la extracción, purificación y caracterización de los metabolitos bioactivos producidos.

The present study evaluated 300 actinomyces strains (140 from clinical samples and 160 from soil samples). The production of antimicrobial substances by the total actinomyces strains was evaluated using the following broths: Bennet (M1), (M2), and malt-dextrose yeast extract broth YMD (M3). Cultures were adjusted to optimal conditions in order to obtain high bioactive metabolite concentrations. The fermentation process was used with incubation periods which varied between 5 and 10 days. The highest bioactive metabolite production was obtained when the M2 medium was used. Antimicrobial activity was favored with the addition of dextrose, proteose peptone, yeast extract, potassium phosphate (K2PO4), magnesium sulfate (MgSO4) x 7H2O and calcium carbonate (CaCO2). Growth patterns, antimicrobial activity, and biomass production of the actinomyces were related to the three culture media used. The strains which showed strong antimicrobial activity against most gram positive and gram negative bacteria and fungi were selected for future studies where the bioactive metabolites produced will be extracted, purified, and characterized.

Aislamiento y susceptibilidad a fluconazol y voriconazol de especies de Candida provenientes de pacientes recluidos en la Unidad de Cuidados Intensivos, Hospital Universitario de Coro, estado Falcón, Venezuela

El objetivo de este trabajo fue determinar la frecuencia de aislamiento de Candida spp. en muestras clínicas de pacientes ingresados en una unidad de cuidados intensivos y evaluar su perfil de susceptibilidad in vitro a fluconazol y voriconazol. Se evaluaron 60 pacientes, procesándose 194 muestras: 98 hemocultivos, 48 urocultivos cuantitativos, 46 secreciones traqueales y 2 puntas de catéter, mediante siembra en agar cromogénico para Candida. El género y especie fue confirmado mediante las características macroscópicas de crecimiento, producción de clamidoconidias, hidrólisis de la urea y asimilación de carbohidratos. Para la evaluación de la susceptibilidad antifúngica se utilizó el método de difusión en disco M44-A del Clinical and Laboratory Standard Institute. Se aislaron 37 levaduras (73,0% de urocultivo en recuento significativo, 24,3% de secreción traqueal y 2,7% de punta de catéter). C. tropicalis fue la especie más frecuente (43,2%) seguida de C. glabrata (21,6%) y C. albicans (13,5%), evidenciándose una distribución diferente a la reportada en la literatura. El 73% de los aislados fue sensible a fluconazol y el 89,2% al voriconazol. La frecuencia observada de candiduria, sugiere que el urocultivo cuantitativo pudiera emplearse como estudio rutinario en pacientes recluidos en UCI, a fin de establecer estrategias terapéuticas y profilácticas adecuadas.

The aim of this work was to determine the frequency of isolation of Candida spp. in patients hospitalized in an intensive care unit and evaluate their in vitro susceptibility to fluconazol and voriconazol. Sixty patients were evaluated through 194 samples, 98 hemocultures, 48 quantitative urocultures, 46 tracheal secretions, and 2 catheter tips inoculated in Candida chromogenic agar. The genus and species was confirmed by the macroscopic growth characteristics, clamydoconidia production, urea hydrolysis, and carbohydrate assimilation. The antifungal susceptibility was determined by the disk diffusion method M44-A of the Clinical and Laboratory Standard Institute. Thirty seven yeasts were isolated (73.0% from urocultures with significant counts, 24.3% from tracheal secretion, and 2.7% from catheter tips). The most frequent species was Candida tropicalis (43.2%), followed by C. glabrata (21.6%) and C. albicans (13.5%), showing a different distribution from that reported in the literature. Regarding sensitivity, 73% of isolates were fluconazol sensitive and 89.2% voriconazol sensitive. The frequency of Candida in the urine suggests that quantitative urocultures could be used as a routine study of patients hospitalized in an ICU so as to establish adequate therapeutic and prophylactic strategies.

Prevalencia de Blastocystis sp. en preescolares y escolares del municipio Maracaibo, Venezuela

Se analizaron 74 muestras fecales pertenecientes a niños de ambos sexos de una institución educativa del municipio Maracaibo, estado Zulia con edades entre 3 y 11 años para determinar la prevalencia de Blastocystis sp. Cada muestra fue sometida a un examen coproparasitológico directo con solución salina 0,85%, tinción temporal de lugol y método de concentración formol-éter. La prevalencia de enteroparásitos en la población estudiada fue de 41,9%; de éstos 80,6% correspondió a Blastocystis sp. En relación a esta especie y su asociación al grupo etario, se reportó un mayor porcentaje de niños parasitados a los 10 años de edad (9,4%), mientras que el parasitismo por otras especies en toda la población estudiada presentó una prevalencia de 19,4%. La forma evolutiva vacuolar predominó, presentándose el mayor número de casos en heces pastosas. Se encontró relación significativa entre las variables parasitismo y edad, más no fue significativa al evaluar las variables parasitismo y sexo. La alta prevalencia de este protozoario en escolares plantea la necesidad de evaluar el comportamiento en la higiene alimentaria y el abastecimiento de agua.

Seventy four fecal samples obtained from children of both sexes at an educational institution of the Maracaibo Municipality, Zulia State, with ages between 3 and 11 years, were analyzed in order to determine the prevalence of Blastocystis sp. Each sample was submitted to a direct coproparasitologic examination with an 0.85% saline solution, temporal lugol staining, and formalin-ether concentration method. Enteroparasite prevalence in the population studied was 41.9%, and of these, 80.6% corresponded to Blastocystis sp. Regarding this species and its association with an age group, a higher percentage of parasitized children was reported in the 10 years age group (9.4%), while parasitism by other species in all the population studied showed a 19.4% prevalence. There was predominance of the vacuolar evolutionary form, and the highest number of cases was seen in tarry stools. There was a significant relationship between parasitism variables and age, but not in the parasitism and sex variables. The high prevalence of this protozoan in school children indicates the need of evaluating the status of food and water supply hygiene.

Prevalencia de enteroparásitos y anticuerpos IgG anti-Entamoeba histolytica en indígenas de la comunidad de Toromo, estado Zulia, Venezuela

Para determinar la seroprevalencia de anticuerpos contra Entamoeba histolytica y la prevalencia de los enteroparásitos en indígenas de la comunidad de Toromo, estado Zulia, Venezuela, se estudiaron 69 individuos de ambos sexos, de 1 a 60 años de edad, en el año 2012. Se recolectaron muestras de heces y suero; a todas las muestras fecales se les realizó examen microscópico con solución fisiológica y lugol, concentración con formol-éter y coloración de Kinyoun; para la detección de anticuerpos IgG anti-Entamoeba histolytica en suero, se empleó una técnica de ELISA comercial. El 98,6% de los individuos estudiados estaban parasitados, predominando el poliparasitismo (88,2%), detectándose asociaciones de hasta 10 especies parasitarias. Entre las especies encontradas están, Ascaris lumbricoides el principal helminto (65%), y Blastocystis sp. (59%) el protozoario más frecuente. Entamoeba histolytica/dispar/moshkovskii se detectó por microscopia en 25 individuos (36% de prevalencia), donde se incluyó un caso de infección por Entamoeba histolytica, por haberse encontrado trofozoítos hematófagos. Se observó una seroprevalencia de anticuerpos contra E. histolytica, del 83%. De los resultados obtenidos, se concluye que existe una elevada seroprevalencia de anticuerpos contra E. histolytica, así como una alta prevalencia de enteroparásitos en la población indígena estudiada.

In order to determine the seroprevalence of antibodies against Entamoeba histolytica and intestinal parasites in the indigenous community of Toromo, Zulia state, Venezuela, 69 individuals of both sexes, from 1 to 60 years of age were studied during the year 2012. Stool and serum samples were collected. Microscopic study of fecal specimens was carried out by saline solution dilution, Lugol staining, formol-ether concentration and Kinyouns stain. For determination of anti-Entamoeba histolytica IgG antibodies, a commercial ELISA technique in serum was used; 98.6% of the population were parasitized, predominating the polyparasitism (88.24%) and finding up to 10 different parasite species were associated. The main parasitic species found were: Ascaris lumbricoides (65%), followed by Blastocystis sp. (59%). Entamoeba histolytica/dispar/moshkovskii was detected by microscopy in 25 individuals (36% prevalence), which included a case of infection by Entamoeba histolytica as hematophagous trophozoites were observed. A seroprevalence of 83% for IgG anti-Entamoeba histolytica antibodies in the individuals studied was found. According to the results it is concluded, that there is a high seroprevalence of antibodies against E. histolytica, as well as a high prevalence of intestinal parasites in the indigenous population studied.

Optimización de la técnica de PCR reversa para la detección del VIH en plasma de pacientes infectados

Aunque la técnica convencional para el diagnóstico del VIH es la PCR a partir de ADN proviral, la técnica RT-PCR cualitativa podría constituir una herramienta de apoyo en el diagnóstico del VIH en pacientes infectados, ya que una de sus principales ventajas es el uso de muestras de plasma, en lugar de sangre total, lo cual facilitaría su transporte entre las distintas regiones del país. En este estudio se planteó como objetivo evaluar las condiciones óptimas, en cuanto al uso de cebadores y enzima transcriptasa reversa, para síntesis de ADN complementario (RT-PCR) de la región de envoltura del VIH, a partir de muestras de plasma de pacientes VIH positivos. Los resultados obtenidos en este trabajo sugieren que la utilización de cebadores azarosos, en una mezcla de reacción con la enzima RT SuperScript TM (200 U/mL), permite maximizar la eficiencia de amplificación del gen de la envoltura de VIH-1, en comparación con cebadores específicos. Esto permite ofrecer una alternativa metodológica a partir de muestras de plasma, para la detección del VIH en aquellas personas que por diversas razones no pueden trasladarse a la institución de referencia.

Even though PCR is the conventional technique for HIV diagnosis in proviral DNA, the qualitative RT-PCR technique could constitute a support tool for HIV diagnosis in infected patients since one of its main advantages is the use of plasma samples instead of whole blood, which facilitates its transportation from the various regions of the country. The main objective of this study was the evaluation of the optimal conditions regarding use of primers and reverse transcriptase enzyme, for the synthesis of complementary DNA (RT-PCR) of the HIV sheath in plasma samples of HIV positive patients. The results obtained in this study suggest that the use of random primers, in a reactive mixture with the RT SuperScript enzyme TM (200 U/mL), allows maximizing the amplifying efficiency of the HIV-1 sheath gene, as compared with specific primers. This offers a methodological alternative using plasma samples for HIV detection in those persons who due to various reasons cannot travel to the reference institution.

Seroprevalencia de la diarrea viral bovina en rebaños lecheros de dos municipios del estado Barinas, Venezuela

Este estudio tuvo como objetivo determinar la seroprevalencia de la diarrea viral bovina (DVB) en bovinos lecheros, sin antecedentes de vacunación, representativos de los municipios Pedraza y Barinas del estado Barinas, Venezuela, durante el periodo comprendido entre mayo y noviembre 2007. Se determinó la presencia de anticuerpos (Acs) específicos contra el virus de la DVB (VDVB) en suero, mediante la prueba de ELISA indirecta, asociando la seropositividad entre sexos, grupos etarios y número de partos, mediante la prueba de Chi cuadrado. Un total de 223 de 353 sueros resultaron positivos a la presencia de Acs específicos contra el VDVB, indicando una alta prevalencia (63,2%). La proporción de seropositivos en ambos municipios analizados demostró ser no significativa (p=0,1572). Con respecto a la proporción de hembras que resultaron seropositivas (63,1%) y la de machos seropositivos (63,6%), revelan que el sexo no está relacionado con la infección por el virus (p=1,0000). La mayor edad y número de partos mostraron una mayor seropositividad (p=0,0111 y p=0,0086, respectivamente). La presencia de actividad viral en la zona aunada al manejo inadecuado de los animales contribuyen a la difusión y transmisión de la enfermedad.

The purpose of this study was to determine seroprevalence of bovine viral diarrhea (BVD) in milk producing bovines with no vaccination background, representative of Pedraza and Barinas municipalities at Barinas State, during the May-November 2007 period. The presence of specific antibodies (Abs) against the BVD virus (BVDV) in serum through the indirect ELISA test was determined, associating seropositivity to sex, age group, and number of births with the Chi square test. A total of 223 from 353 sera were positive for Abs against the BVDV, indicating a high prevalence (63.2%). The difference of the ratio of seropositives between both municipalities was not significant (p=0.1572). The rates of seropositive females (63.1%) and seropositive males (63.6%) reveal that sex is not related to the viral infection (p=1.0000). Older age and larger number of births showed greater positivity (p=0.0111 and p=0.0086 respectively). The presence of viral activity in the area together with the inadequate handling of the animals contribute to the diffusion and transmission of the disease.

Catálogo del Centro Venezolano de Colecciones de Microorganismos