Salus

Las publicaciones científicas y el acceso abierto

Avances en la especialidad Ginecología Infanto Juvenil: A propósito de la celebración del Congreso Internacional. FECOLSOG

Cambios metabólicos durante la epimastigogénesis in vitro de Trypanosoma cruzi

La epimastigogénesis de Trypanosoma cruzi es la transformación del tripomastigota sanguícola en epimastigota que ocurre en la porción anterior del tracto intestinal del insecto vector. Se ha reportado la activación de cisteín proteasas durante la epimastigogénesis in vitro en condiciones axénicas, sugiriendo la utilización de aminoácidos como fuente de carbono para la obtención de energía. El objetivo del presente trabajo fue estudiar a través de indicadores los cambios metabólicos producidos durante la diferenciación tripomastigota-epimastigota. Se partió de un 100% de tripomastigotas sobrenadantes de células Vero, incubados en medio LITB a 27ºC en condiciones de alta (epimastigogénesis horizontal) y baja (epimastigogénesis vertical) tensión de oxígeno. Se realizó contaje de parásitos (Cámara de Neubauer) y recuento diferencial (Giemsa) a diferentes tiempos de incubación (0, 1, 2, 4, 6, 8, 11 y 12 días). A cada tiempo se determinó en los sobrenadantes del medio de cultivo las concentraciones de glucosa y amoníaco, así como los valores de pH. Los resultados mostraron que: 1) Independientemente de la tensión de oxígeno se evidenció formas en diferenciación y amastigotas durante el proceso, siendo la aparición de epimastigotas más tardía en alta tensión de oxígeno; 2) El incremento poblacional fue significativamente mayor en condiciones de alta tensión de oxígeno, registrándose alta mortalidad de amastigotas durante los primeros días de incubación en la epimastigogénesis vertical; 3) El consumo de glucosa fue concomitante con la aparición de epimastigotas en ambas condiciones, siendo mayor en alta tensión de oxígeno; 4) No se registró liberación de amoníaco en ninguno de los casos estudiados; 5) Los valores de pH fueron similares hasta el sexto día en ambas condiciones, evidenciándose una acidificación gradual del medio de cultivo en alta tensión de oxígeno. Todo parece sugerir que durante la epimastigogénesis de T. cruzi, los parásitos involucrados en los procesos de diferenciación no muestran activación de las diferentes rutas metabólicas.

The epimastigogenesis of Trypanosoma cruzi is the transformation from bloodstream trypomastigote to epimastigote that occurs in the anterior portion of the intestinal tract of the insect vector. It has been reported cysteine proteases activation during axenic epimastigogenesis in vitro, suggesting the use of amino acids as a carbon source for the production of energy. The aim of this work was to study through indicators metabolic changes produced during the trypomastigote-epimastigote differentiation. We started with a 100% trypomastigotes derived from Vero cell supernatants, incubated in LITB medium at 27°C under high (horizontal epimastigogenesis) and low (vertical epimastigogenesis) oxygen tension. We estimated parasites number (Neubauer chamber) and differential morphology (Giemsa) at different incubation times (0, 1, 2, 4, 6, 8, 11 and 12 days). Each time was determined in the supernatants of the culture medium glucose and ammonia concentrations as well as the pH values. The results showed that: 1) Regardless of the oxygen tension it was evidenced differentiation forms and amastigote during the process, with the later occurrence of epimastigotes in high oxygen tension; 2) Population growth was significantly greater in high oxygen tension, registering high mortality of amastigotes during the firsts incubation days in the vertical epimastigogenesis; 3) Glucose consumption was concomitant with the appearance of epimastigotes in both conditions, being higher in high oxygen tension; 4) There was no ammonia release in any of the cases studied; 5) The pH values were similar to the sixth day in both conditions, showing gradual acidification of the culture medium at high oxygen tension. Everything seems to suggest that during the epimastigogenesis of T. cruzi parasites involved in differentiation processes show no activation of different metabolic pathways.

**Morfología y respuesta de anticuerpos IgM e IgG anti-Blastocystis sp. en pacientes con síntomas gastrointestinales**

Es importante definir criterios diagnósticos que permitan dilucidar el papel patógeno de Blastocystis sp. Se evaluó morfología y se estimó el diámetro de las formas, número de parásitos por campo y por gramo de heces y los anticuerpos IgM e IgG anti- Blastocystis sp. mediante ELISA, en sujetos con sintomatología general y portadores sanos. Se encontró 77% de muestras positivas para Blasctocystis sp, 52% provenientes de pacientes con síntomas como flatulencia 6 (24%), dolor abdominal 5 (20%), náuseas 2 (8%), diarrea 6 (24%) y estreñimiento 6 (24%). Los rangos de parásitos por campo más frecuente en sintomáticos fueron 0-3 (74%) y 10-12 (26%), mientras que 100% de los pacientes asintomáticos presentaron Blastocystis sp. en el rango 0-3. Los pacientes asintomáticos presentaron menor número de parásitos por gramo de heces, en el rango de 0-3 y el rango 7-10 con altas cargas parasitarias solo fue observado en sintomáticos. Se encontró menor cantidad de formas granulares en ambos grupos, en el rango 0-3 en sintomáticos: 85% vacuolares y 15% granulares; 76% vacuolares y 24% granulares, en asintomáticos. En el rango 10-12, 98% vacuolares y 2% de granulares, en sintomáticos. El diámetro promedio de las formas vacuolares fue 11,9±2 μm en los pacientes sintomáticos y 7,9±3,7 μm en asintomáticos. En los granulares fue 9,3±2,3 μm en sintomáticos y 8,2±0,1 μm en asintomáticos. Observándose diferencias significativas entre las formas vacuolares de ambos grupos (P=0,000026), pero no en los granulares (P=0,346). El 3,5% de los pacientes sintomáticos presentaron anticuerpos IgG anti-Blastocystis sp. El estudio morfológico empleado contribuyó en la optimización del diagnóstico, mientras que las técnicas inmunoenzimáticas resultaron de baja sensibilidad.

It is important to define diagnostic criteria to elucidate the pathogenic role of Blastocystis sp. Morphology was assessed and diameter of the shapes, number of parasites per field and per gram of faeces and Blastocystis sp. IgM and IgG antibodies was estimated by ELISA in subjects with constitutional symptoms and healthy carriers. Seventy percent Blasctocystis sp positive samples were found, 52% from patients with symptoms such as flatulence 6 (24%), abdominal pain 5 (20 %), nausea 2 (8%), diarrhea 6 (24%) and constipation 6 (24%). Ranges of parasites per field found more frequently in symptomatic patients were 0-3 (74%) and 10-12 (26%), while 100% of asymptomatic patients had Blastocystis sp. in the range 0-3. Asymptomatic patients showed lower number of parasites per gram feces in the range of 0-3 and the 7-10 range with high parasitic load was only observed in symptomatic. Less granular forms in both groups was found, in the range 0-3 in symptomatic patients: 85% vacuolar and 15% granular; 76% vacuolar and 24% granular in asymptomatics. In the range 10-12, 98% vacuolar and 2% granular in symptomatic patients. The average diameter of the vacuolar forms was 11.9 ± 2 μm in symptomatic patients and 7.9 ± 3.7 μm in asymptomatics . In the granular form was 9.3 ± 2.3 μm in symptomatic and 8.2 ± 0.1 μm in asymptomatics. Significant difference was found among vacuolar forms of both groups (P= 0.000026), but not in the granular form (P= 0.346). Only 3.5 % of symptomatic patients had IgG antibodies to Blastocystis sp. The morphological study employed contributed to the diagnosis optimization while immunoenzymatic techniques were of low sensitivity.

El factor de crecimiento del endotelio vascular hepático en la infección murina por Schistosoma mansoni

Los antígenos secretados por los huevos de S. mansoni inducen la proliferación de células endoteliales in vivo, así como la producción del Factor de Crecimiento del Endotelio Vascular (VEGF), sugiriendo que la patogénesis en la esquistosomiasis se relaciona con eventos angiogénicos. Se evaluó la expresión del VEGF, como una medida de angiogénesis estimulada por los huevos y los gusanos de S. mansoni, en la infección Bisexual (BIS) y los gusanos adulto (infección UNI) en el hígado de ratones Balb/c, antes y después del tratamiento con PZQ. Los resultados indican que tanto la infección UNI como BIS son capaces de estimular la producción de VEGF en tejido hepático, lo que explica la vascularizacón anómala durante este cuadro infeccioso. Este proceso se acompaña con la presencia de un elevado número de infiltrados leucocitarios en los sitios donde se observa lesión tisular; la producción de VEFG remite tras 48 de tratamiento con PZQ. Estos resultados indican que la producción anómala de VEGF junto con la intensa respuesta pro-inflamatoria asociada no solo a la actividad de VEGF sino también a los infiltrados leucocitarios observados en el tejido hepático, causada tanto por los huevos secretados como por las formas adultas de S. mansoni son los mecanismos que subyacen a las lesiones granulomatosas observadas durante el curso de la esquistosomiasis, pudiendo al menos revertirse el incremento en la vascularización mediante el uso de PZQ.

The antigens secreted by eggs of S. mansoni induce the proliferation of endothelial cells in vivo, as well as the production of Factor Vascular Endothelial Growth factor (VEGF), suggesting that the pathogenesis of schistosomiasis relations with angiogenic events. We evaluated the expression of VEGF, as a measure of angiogenesis stimulated by the eggs and worms S. mansoni in infection bisexual (BIS) and adult worms ( UNI infection ) in the liver of BALB / c mice before and after treatment with PZQ. These results indicate that abnormal production of VEGF with intense pro-inflammatory response not only associated with the activity of VEGF but also leukocyte infiltrates observed in the liver tissue caused by both secreted and eggs by adult forms S. mansoni are the mechanisms underlying granulomatous lesions observed during the course of schistosomiasis, and can be reversed at least the increased vascularization by using PZQ .

Efecto biocida in vitro del extracto foliar de Azadirachta indica en Staphylococcus sp y Pseudomonas sp

El Neem es una planta de interés etnobotánico, por las potenciales propiedades medicinales, en enfermedades de distinto origen, corroborándose el efecto de sus extractos en estudios in vitro e in vivo. Se evaluó la actividad antimicrobiana del extracto etanólico foliar del Neem (5-80%), cualitativamente por la turbidez del cultivo en medio líquido y cuantitativamente en unidades formadoras de colonia (UFC) en medio sólido, determinando la concentración mínima inhibitoria (CMI), bactericida (CMB) y fungicida (CMF) en 50 μl del inoculo de microorganismos de interés clínico a 37ºC a 24 y 48 h. Las cepas evaluadas fueron el complejo Candida albicans, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus y Streptococcus mutans. Encontrándose a las 24 horas, una CMI de 30, 40 y 45% y una CMB de 35, 45 y 50%, para S. aureus, S. mutans y P. aeruginosa, respectivamente, mientras que en el complejo C. albicans, no se detectó efecto fungicida pero si fungistático parcial. A las 48 horas de exposición S. mutans no creció a ninguna concentración, considerándose la CMB 5%, mientras que la CMI para S. aureus fue de 25%, para el complejo C. albicans de 30% y en P. aeruginosa de 35%, en tanto que la CMB para S. aureus fue de 30%, en P. aeruginosa de 40% y la CMF para el complejo C. albicans fue a 35%. El mayor tiempo de exposición del extracto a bajas concentraciones, tiene un gran potencial biocida para estos microorganismos tan importantes clínicamente, lo que sugiere la posibilidad de utilizarlo para el tratamiento tópico de afecciones causadas por los mismos.

Neem is a plant of ethnobotanical interest, for its medicinal properties in diseases of different origin, corroborating the effect in vitro and in vivo of extracts. This study evaluated the antimicrobial activity, in the ethanol extract of neem leaf (5-80%), qualitatively by the turbidity of the culture in liquid medium and quantitatively in colony forming units (CFU) on solid medium, determining the minimum inhibitory concentration (MIC), bactericidal (BIC) and fungicidal (FIC), in 50 ul of the inoculum of microorganisms of clinical interest at 37°C at 24 and 48 h: The strains tested were complex Candida albicans, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus and Streptococcus mutans. Found that at 24 hours, MIC was 30, 40 and 45% and BIC was 35, 45 and 50% for S. aureus, S. mutans and P. aeruginosa, respectively, whereas to complex Candida albicans not detected fungicidal but fungistatic partial. After 48 hours of culture S. mutans did not grow at any concentration, 5% considered bactericidal, while 25% for S. aureus, 30% in complex Candida albicans and 35% P. aeruginosa were MIC, being 30 and 40% for S. aureus and P. aeruginosa were BIC respectively and fungicidal for C. albicans was 35%. The longer exposure to low concentrations of the extract, has great potential as a biocide for these clinically important microorganisms, can be effectively used in the production of generic drugs of low economic value to treat conditions caused by them.

**Aplicación terapéutica del Aloe vera L. en Odontología**

El Aloe vera L. es una planta de la familia Asphodelaceae usada de manera empírica desde hace más de 4000 años, para múltiples usos medicinales. En 1936, se publica la primera aplicación medicinal, lo que marca el inicio de su estudio científico riguroso, validando acciones farmacológicas antimicrobiana, antiinflamatoria, antioxidante y efectos cicatrizante, protector gástrico, antineoplásico, hipoglucemiante y hepatoprotector, entre otros. Por su acción antibacteriana, antiinflamatoria y cicatrizante se ha investigado su uso en el tratamiento de la enfermedad periodontal; en la prevención de gingivitis, caries dental y mucositis; así como en la formación de puente dentinario, en la regeneración de tejido óseo y mucoso, y en patologías como la fibrosis múltiple y el liquen plano bucal, entre otros. Esta revisión bibliográfica presenta una breve descripción botánica y de la composición química de la planta, así como de sus acciones farmacológicas, con énfasis en su aplicación Odontológica, donde las investigaciones en esta área son escasas, además de no contar en Venezuela con productos para tal fin. Su uso como biomaterial puede ser una alternativa a los fármacos convencionales en el tratamiento de la enfermedad periodontal de alta prevalencia mundial, en la pulpectomía, así como cicatrizante post exodoncia y en la prevención de caries dental, gingivitis y mucositis, basado en los resultados de las investigaciones reseñadas.

Aloe vera L: is a plant of the family Asphodelaceae, which is used in herbal medicine empirically for more than 4000 years ago, because of its many medicinal uses. The first research of its medicinal use was in 1936, where he began his rigorous scientific study, validating their pharmacological actions antimicrobial, anti-inflammatory, antioxidant and healing effects, gastric protection, anticancer, hypoglycemic and hepatoprotective. By its antibacterial action, anti-inflammatory and healing was investigated for use in the treatment of periodontal disease in the prevention of gingivitis, dental caries and mucositis; in dentinal bridge formation, and the regeneration of bone tissue and mucosal and in diseases such as multiple fibrosis and oral lichen planus, among others. Thus, this article presents an literature review with a This literature review provides a brief botanical description and chemical composition of the plant, and its pharmacological actions, with emphasis on its application Dentistry, besides not having to Venezuela with products such end. Its use as a biomaterial can be an alternative to conventional treatment of periodontal disease highly prevalent worldwide in pulpotomy and post extraction healing and prevention of dental caries, gingivitis and mucositis based on research results outlined.

El trabajo especial de grado: Dos momentos en la escuela de medicina

El trabajo especial de grado juega un papel fundamental en el egresado de Medicina por propiciar competencias de investigación en el ámbito de la ciencia e innovación. El objetivo fue evaluar lo que opinan los estudiantes sobre el proceso de la realización del trabajo especial de grado. Metodológicamente lainvestigación fue comparativa con diseño univariado de perspectiva evolutiva pasada. El muestreo fue circunstancial de voluntarios en dos momentos con una diferencia de 10 años: en los años 2002 y 2012. Los resultados indican que debe realizarse el trabajo de grado en 5año con horario establecido y catalogaron las tutorías en la escala de mucha y extrema importancia; los estudiantes opinan además que los análisis estadísticos fueron mayoritariamente realizados con ayuda del Tutor Metodológico; la mayor limitante a las asistencias de tutorías fue medicina comunitaria en el año 2002 y coincidencia de horarios en el 2012; la investigación es importante y extremadamente importante, para el médico en las dos cohortes. Se concluye que debe realizarse trabajo especial de grado, con horario asignado. La investigación es de gran importancia para la vida profesional del médico y para lograrla se requiere del aporte de las tutorías, tanto del especialista como del metodólogo. También es importante el aporte del trabajo especial de grado en el rol de investigador. Existen experiencias negativas que obligan a la revisión del proceso de construcción de los trabajos de investigación.

The thesis plays an important role for the medical graduates that develop research skills in the field of science and innovation. The objective was toassess what medical graduates think about the process of making the thesis. Methodologically, the research design was univariate with apast evolutionary perspective. Sampling was taken with circumstantial volunteers, in two different moments, within 10 years: year 2002 and 2012. The results indicate that thesis must be done in the 5th year of the career with a fixed schedule. Also, they stated that tutorial sare extremely important. Graduates, as well, believe that statistical analyzes were mostly done with the help of a methodological tutor. The biggest limitation to the assistance of tutoring was the subject Community Medicine in the year 2002 and matching schedules in 2012. Research is important and extremely important for the physician in the two cohorts. In conclusion thesis must be done with fixed schedule classes. Research is very important for the physicians professional life and for obtains it; it requires the contribution of both specialist and methodological tutoring. Also it is important, the contribution of the thesis in the role of the researcher. There are negative experiences that require the review of the construction process of the research.

Efecto del bloqueo de canales ionotrópicos voltaje dependiente de calcio sobre las descargas neuronales mecanorreceptivas

El presente trabajo evaluó las modificaciones en los patrones de descarga neuronal mecanoreceptiva inducidas por la nifedipina (inhibidor de canales voltaje-dependientes de calcio tipo L) en el modelo de la pata de la cucaracha P. americana. Se disecaron las patas metatoráxicas de adultos machos, sumergiéndolas en solución Ringer(RIN) o enRinger más nifedipina (100μg.mL-1) por 5 minutos, luego se realizó el registro electrofisiológico durante actividad espontánea (10min) y estimulación mecánica con flexióntibio-femoral (desplazamiento=5mm; aplicación 10s; retiro 10s, por 10min). Los registros multiunitarios se amplificaron y digitalizaron a 11,8KHz. Se analizaron los registros convencionalmente y por procesos puntuales durante laactividad espontánea y con estimulación.Se usó pruebas no paramétricas con significancia en P<0,05. En 44 experimentos con 1000 a 5000 espigas multiunitarias cada uno, se observó quetodas las distribuciones de intervalos interespiga (IIE) se ajustaron a funciones poissonianas, la desviación estándar fue mayor a la media de los IIE,característico de descargas en salvas. No se evidenciaron efectos de la nifedipina sobre los IIE en actividad espontánea (P=0,72) o estimulada (P=0,47), ni sobre los valores de descargas en salvas espontáneas (P=0,32) o estimuladas (P=0,37). Sin embargo, se evidenció una disminución significativa en la frecuencia de descarga del mecanoreceptor durante la fase de inicial de la aplicación del estímulo y un retraso en la fase de adaptación mecanoreceptiva (P<0,001), evidenciando el efecto de la nifedipinay su acción sobre los canales de calcio tipo L en los mecanoreceptores. Esto podría explicar los reportes de pacientes con efectos colaterales durante el uso de la nifedipina en relación a la propiocepción.

Changes of neuronal mechanoreceptive discharge pattern induced by nifedipine (voltage activated L-type calcium channel inhibitor) were evaluatedin the cockroach (P. americana) leg model. Methathoracic legs from male adult insects were dissected and submerged in Ringer solution (RIN) or Ringer with nifedipine (100μg.mL-1) for 5 minutes, thereafter, electrophysiological recordings were made in background activity (10min) and during mechanical tibio-femoral flexion (displacement=5mm; 10s:10s on:off for 10min). Multiunitary recordings were amplified and digitalized at 11.8KHz. Conventional and Point process techniques were used for analysis. Non parametrical test with significance at P<0.05 were used. From 44 experiments with 1000 to 5000 multiunitary spikes recorded on each one, all interspike intervals (ISI) distributions fit to a poissonian function. ISI Standard deviation > ISI arithmetic mean which point out to burst discharges. No evidence of nifedipine effect were found on ISI during background activity (P=0.72) nor mechanical stimulation (P=0.47) not even on burst discharge values (P=0.32 and P=0.37 respectively). However, nifedipine induced a significant reduction on the mechanoreceptor discharge frequency during the early phase of the stimulus and a lengthening of the adaptation phase (P<0.001) which evidences the effect of nifedipine and L-type calcium channel on mechanoreceptors. These could explain sensory and proprioceptive collateral effects reported by patient using nifedipine.