Revista de la Facultad de Ciencias Veterinarias

Minimally invasive surgery of the thyroid gland: Experimental study in the dog

El objetivo de este estudio fue determinar si la lobectomía tiroidea video-asistida, realizada en el modelo canino, reduce el tiempo operatorio, el sangramiento, lesiones de las estructuras nerviosas, y mejora los resultados cosméticos de la cicatriz cervical, en comparación con la lobectomía convencional. Se intervinieron 36 perros adultos mestizos sanos, desparasitados, de ambos sexos, procedentes del bioterio del Instituto de Cirugía Experimental de la Universidad Central de Venezuela. Los animales fueron asignados al azar simple, a dos grupos de estudio: lobectomía tiroidea convencional (LTC) y lobectomía video - asistida (LTVA), sin insuflación de gas. Los resultados estéticos fueron evaluados por los cirujanos de acuerdo a una escala (excelentes, buenos, regulares y malos), observándose los mejores resultados (P<0,05) en el grupo LTVA (promedio ± DE; 9,2 ± 0,5), que en el grupo LTC (promedio ± DE, 5,8±0,7; P<0,001). En el grupo LTVA el promedio de tiempo fue 81±3 min mejor que en el LTC 62±4. El sangramiento fue mayor en el LTC (34±5 mL) que en el LTVA (23±5 mL). No se observaron diferencias significativas en cuanto a la paresia o parálisis de los pliegues vocales, o infección de la herida operatoria. La lobectomía tiroidea video-asistida es una alternativa válida a la cirugía convencional, resultando en un modelo experimental factible y seguro. Se deberían realizar en Medicina humana estudios comparativos y multicéntricos, para determinar la seguridad y eficacia de estas técnicas.

A study was conducted to determine if the video-assisted lobectomy performed on a canine model, reduces surgical time, bleeding volume, nerve structures injuries; and improves the cosmetic results of the cervical scar, when compared to conventional lobectomy. Thirty-six adult crossbred dogs of either sex from the animal facility of the Institute of Experimental Surgery, Universidad Central de Venezuela were used. The animals were randomly allocated into two experimental groups: Group A: Eighteen dogs who underwent conventional thyroid lobectomy (CTL); Group B: Eighteen dogs who underwent video-assisted thyroid lobectomy (VATL) without gas insulation. Cosmetic results were assessed by surgeons according to a scale, as follows: excellent, good, average, and bad. The results of the experiment show that dogs operated with the VATL technique exhibited significantly (P<0.05) the highest improvements (9.2±0.5), when compared to the CTL technique (5.8±0.7). Surgical time lasted longer (P<0.001) in dogs under VATL (81±3 min) than in dogs subjected to CTL (62±4 min). Bleeding volume was significantly higher in CTL (34±5 mL) than in VATL (23±5 mL). No statistically significant differences were found regarding paralysis of vocal cords or surgical wound infections. The VATL is a valid alternative in conventional surgery, becoming a feasible and safe experimental model. Comparative and multicentric studies should be carried out in human subjects to determine both safety and efficacy of these techniques.

Morphology of the urinary pathways of the male spectacled cayman (Caiman crocodilus crocodilus)

Con el fin de establecer las características morfológicas de las vías urinarias del Caiman crocodilus crocodilus, se realizó el estudio morfológico de las vías urinarias de nueve babas macho adultas, usando las coloraciones Hematoxilina-Eosina y Tricrómica de Mallory. Se concluye que la presencia de túnica muscular a partir de los túbulos colectores puede relacionarse con la necesidad de movilizar pequeñas cantidades de orina cargada de uratos precipitados mediante movimientos peristálticos, lo cual se asociaría con la necesidad de este reptil de producir volúmenes reducidos de orina isosmótica, por lo cual se reduce la pérdida de líquido a nivel renal. Posiblemente, esto implica la secreción de mucinas lubricantes a lo largo de vías urinarias, como un mecanismo facilitador del transporte de los uratos precipitados.

A study was conducted with the purpose of establishing the morphologic characteristics of the urinary pathway of the male spectacled caiman (Caiman crocodilus crocodilus). A total of nine adult caimans were used. Samples of the urinary tract were collected and stained with Hematoxilyn-Eosin and Mallorys trichromic stains. The results of the present study reveal that the presence of a muscular layer, departing from the collecting tubules, could be associated to the need of mobilizing small amounts of urine loaded with precipitated urates, by means of peristaltic movements, which may be associated with the need of this reptile of producing reduced volumes of isosmotic urine. This would lead to a reduction of fluid loss at a renal level. This possibly implies the secretion of mucines along the urinary tract, as a facilitator mechanism for the transport of precipitated urates.

Mucins and Lipids Histochemistry of the Urinary System in the Spectacled Cayman (Caiman crocodilus crocodilus)

Se realizó un estudio histoquímico de mucinas y lípidos del aparato urinario de nueve babas adultas de sexo masculino y de un ejemplar adulto de sexo femenino, utilizando las coloraciones PAS, PAS-Azul alciano a pH 2,5 y 1,0; Aceite Rojo O y el Método de Schulz para esteroides. Los hallazgos más relevantes fueron la presencia de mucinas neutras en el borde en cepillo y gotas citoplasmáticas de todos los túbulos de la nefrona y en la superficie apical del urotelio, así como presencia de sialomucinas desde el túbulo distal hasta el uréter. Se detectaron gotas lipídicas compuestas por ácidos grasos libres en el citoplasma de las células del segmento intermedio de la nefrona. Se discute la importancia de estas mucinas como protectores de las mucosas y como lubricantes de las vías urinarias. Estos estudios parecen demostrar la ausencia de porciones de la nefrona del Caiman crocodilus crocodilus que intervengan en la secreción de líquido seminal o que sean análogos del segmento sexual de los lagartos y serpientes.

A histochemical study of mucins and lipids of the urinary tract of the spectacled caiman was conducted, using PAS stain, PAS-Alcian blue stain (at pH values of 2.5 and 1.0, respectively), O red oil stain, and Shultz method for steroids. Nine mature males and one mature female were used. The results of the present study show that the most relevant findings were the presence of neutral mucins in the brush border and of cytoplasmic droplets in all tubular nephrons and in the apical surface of the urothelium, as well as the presence of sialomucins from the distal tubule to the ureter. Lipid droplets composed of free fatty acids were observed in the cytoplasm of the cells of the intermediate segment of the nephron. The importance of mucins as mucosal protectors and urinary tract lubricants is discussed. The results of the study in the Caiman crocodilus crocodilus, appear to demonstrate the absence of portions of the nephron that either participate in the secretion of seminal fluid or are similar to the sexual segment of lizards and snakes.

Characterization of Enzymatic Additives Obtained by Monoculture (Aspergillus niger) and Coculture (Aspergillus niger-Saccharomyces cerevisiae) and their Effects on Productive Performance of Broiler Chicks

Se obtuvieron y caracterizaron las propiedades nutricionales, enzimáticas y ocratoxigénicas de aditivos enzimáticos obtenidos de residuos húmedos del procesamiento de la pasta alimenticia, fermentados mediante el monocultivo de Aspergillus niger (A1) y el cocultivo de Aspergillus niger - Saccharomyces cerevisiae (A2). Se utilizaron 150 pollitos raza Cobb-500 para evaluar el efecto de la inclusión de los aditivos A1 y A2 en 30 ppm y 3000 ppm, respectivamente, durante 21 d sobre los parámetros productivos, utilizando un diseño completamente aleatorizado. Los resultados demuestran que las actividades de las α-amilasas y glucoamilasas en el A2 fueron superiores en 42% y 69% a las del A1, respectivamente. La composición fisicoquímica y las propiedades enzimáticas de los aditivos, revelaron que éstos están compuestos principalmente por almidón y proteína, con una actividad amilolítica similar 16020 y 15540 (FAU/g), respectivamente. Sin embargo, el A2 presentó actividad de glucoamilasa (U/g) y de fitasas (U/g) superior en 58%, respecto al A1. Los niveles de ocratoxina A de 2.10-4 y 2.10-2 ppb para A1 y A2, respectivamente, fueron inferiores a la dosis letales medias (DL50) para pollos y a los límites establecidos por la FAO/OMS. Adicionalmente, la viabilidad de Aspergillus niger en A1 y A2 fue de 3.10³ UFC/mL y de 2.10² UFC/mL en las células de levadura, respectivamente. La inclusión de 3000 ppm de A1 y de 30 ppm de A2, mejoró significativamente (P<0,05) la conversión alimenticia (11-13%) y el consumo de alimento (6-8%), al compararse con el grupo control. La ganancia de peso no fue afectada significativamente por los tratamientos.

A study was conducted to obtain and characterize the nutritional, enzymatic, and ocratoxigenic properties of enzyme additives obtained from fermentation of moist residues of commercial production of pasta, of both a monoculture of Aspergillus niger (A1) and a mixed culture (coculture) of Aspergillus niger-Saccharomyces cerevisiae (A2). The effects on productive performance parameters were assessed, during 21 d. A total of 150 broilers (Cobb-500) were used and fed with diets which included the additives A1 and A2 in the amount of 30 and 3000 ppm, respectively, using a completely randomized design. The results show that both α-amylase and glucoamylase activities in A2 were 42 and 69% higher than those of A1, respectively. The physicochemical composition of additives revealed that they are mainly composed of starch and protein. Both A1 and A2 showed a similar amylase activity (15540 and 16020 FAU/g, respectively). However, the A2 exhibited higher glucoamylase and phytase activities (U/g) 58% than the A1. The ocratoxin A levels for A1 (2.10-4 ppb) and A2 (2.10-2 ppb), respectively, were below the median lethal dose (LD50) for chickens and for the limits established by FAO/WHO. Additionally, the viability of Aspergillus niger in A1 and A2 was 3.10³ UFC/mL and of 2.10² CFU/mL in yeast cells, respectively. The inclusion of 30 ppm of A1 and 3000 ppm of A2, respectively significantly (P<0.05) improved feed conversion (11-13%) and feed intake (6-8%), when compared to control animals. The treatments did not significantly affect weight gain.

Anatomopathological Description of Equine Skin Pythiosis

La presente investigación tuvo por objetivo describir macroscópica y microscópicamente, la pitiosis cutánea en el caballo criollo venezolano que habita la región de los llanos venezolanos en la zona correspondiente a los estados, Apure, Barinas y Portuguesa. Para ello, se realizaron visitas a distintos hatos durante los períodos de sequía y lluvioso, en el lapso comprendido entre enero 2008 a diciembre 2009. Se tomaron muestras de 8 animales con lesiones cutáneas compatibles con pitiosis, se realizó su descripción macroscópica y se obtuvieron varios fragmentos de tejido, los cuales se fijaron en formol buferado al 10%. Posteriormente, fueron procesadas para histopatología, coloreadas con hematoxilina y eosina, metenamina de plata de Grocott y finalmente se observaron bajo microscopia óptica. Todas las muestras presentaron hallazgos histopatológicos compatibles con pitiosis, lo cual fue confirmado a través de cultivo microbiológico. Los resultados obtenidos demostraron que la pitiosis cutánea es una enfermedad presente en el caballo criollo de los llanos venezolanos, caracterizada macroscópicamente por un aumento de volumen en forma de placa ulcerada, sangrante e irregular de color blanco amarillento, con apariencia de tejido de granulación, al corte superficial a profundo. Eventualmente, fueron halladas zonas de necrosis que contenían concreciones irregulares de color amarillento, duras, de superficie arenosa, que se correspondieron con las estructuras sólidas kunkers. Por otra parte, el estudio microscópico reveló una dermatitis granulomatosa, eosinofilica de difusa a multifocal.

An experimental research was conducted to describe both macroscopically and microscopically skin pythiosis in the Venezuelan Creole horse, which dwells in the Venezuelan plains of the States of Apure, Barinas, and Portuguesa. Visits were made to different farms between January 2008 and December 2009. Samples of eight horses with a skin disease consistent with skin pythiosis were taken and macroscopically analyzed. For the histopathological description, several tissue fragments were obtained and fixed in 10% buffer formalin. Subsequently, samples were stained with Hematoxylin-Eosin and Grocotts silver methenamine, and observed under the light microscope. All samples showed histopathological findings consistent with skin pythiosis, which was confirmed through microbiological cultures. The results show that skin pythiosis is a dermatosis commonly seen in the Creole horse that populates the Venezuelan plains. Macroscopically, the lesions were characterized as irregular plaque-shaped, ulcerated, increased in volume, hemorrhagic, with a white-yellowish color, and a granulation tissue appearance, when examined both superficially and profoundly. Eventually, necrotic areas that contained irregular, yellowish, hard, sandy surfaces, which corresponded to kunker structures, were found. Conversely, the microscopic study revealed a diffuse to multifocal eosinophilic, granulomatous dermatitis.

Preliminary Study of Cytokines in Sera from Dogs with Visceral Leishmaniasis from a Venezuelan Endemic Area

Diversos estudios en modelos de ratones han demostrado que la inmunidad protectora frente a Leishmania es mediada por linfocitos T, células presentadoras de antígeno y citocinas. Sin embargo, pocos estudios se han realizado para evaluar citocinas en perros infectados en forma natural con Leishmania infantum/chagasi. El perro doméstico es el principal reservorio del parásito, en tal sentido, el objetivo de este trabajo fue determinar las citocinas en suero de 33 perros con Leishmaniasis Visceral Canina (LVC), provenientes del estado Nueva Esparta, Venezuela (foco endémico). Los perros fueron clasificados en sintomáticos o asintomáticos, de acuerdo al análisis de los signos clínicos de la enfermedad, coincidentes con los títulos de anticuerpos contra las kinesinas recombinantes de Leishmania rK39 y rK26. Otros dos grupos incluyeron: 10 perros de la misma zona endémica como grupo control endémico (CE) y 10 perros de la zona no endémica como control sano (CS). Las concentraciones (pg/mL) de las citocinas solubles IFN-γ, TNF-α, IL-10, IL-6, IL-4 e IL-2 se determinaron por citometría de flujo (Kit CBA Hu Th1/Th2, BD TM). Los resultados mostraron concentraciones estadísticamente mayores (p<0,05) de IFN-γ (69,93±7,46), IL-4 (7,51±2,68), TNF-α (3,86±1,46) e IL-2 (39,85±3,84) en el grupo de perros asintomáticos, con respecto a los perros sintomáticos (60,8±10,6; 5,28±0,80; 2,76±0,72 y 36,04±3,61, respectivamente) y los perros sanos (51±14; 4,65±0,2; 3,21±0,89 y 32,65±5,86, respectivamente). Los perros asintomáticos también presentaron mayor concentración de IL-6 (4,9±0,55) que los CS (4,02±0,64) (p<0,01). Estos resultados demuestran que los perros en estado asintomático exhiben mayor proporción de citocinas de activación celular y proinflamatorias. Los resultados señalan a la medición de citocinas séricas como reflejo del estado inmunológico de los caninos en futuros estudios orientados a vacunación o terapia.

Different experimental murine models have shown that protective immunity against Lesihmania depends upon T cells, cytokines, and antigen presenting cells. However, the role of cytokines in naturally-infected hosts like domestic dogs is controversial. Few studies have evaluated cytokines in dogs naturally-infected with Leishmania infantum/chagasi. Since the domestic dog is the main reservoir of the parasite, a study was conducted to determine cytokines in serum of 33 dogs with Canine Visceral Lesihmaniasis from endemic areas of the State of Nueva Esparta, Venezuela. Dogs were classified as symptomatic (SD) and asymptomatic (AD), according to the expression of three or more clinical signs and levels of antibodies for rK39 and rK26. Ten non-infected, rK39 negative controls were included from an endemic area (EA) and ten dogs from a non-endemic area were used as healthy controls (HC). The following cytokines (pg/mL) were measured in serum by flow cytometry (CBA Hu Th1/Th 2, BD TM kit): IFN-γ, TNF-α, IL-10, IL-6, IL-4 and IL-2. Results show a higher concentration (P<0.05) of IFN-γ (69.93±7.46), IL-4 (7.51±2.68), TNF-α (3.86±1.46), and IL-2 (39.85±3.84) in AD when compared with SD (60.8±10.6; 5.28±0.80; 2.76± 0.72; and 36.04±3.61, respectively); and HC (51±14; 4.65±0.2; 3.21±0.89, and 32.65±5.86, respectively). The AD also showed higher levels (P<0.01) of IL-6 (4.9±0.55) compared with HC (4.02±0.64). Results show that AD exhibit a higher proportion of cellular activation and proinflammatory cytokines. Results indicate that measuring of serum cytokines could reflect the immunological status in dogs in future clinical trials oriented to either vaccination or therapy.

**Hematology, Blood Metabolites and Organ Weights of Growing Pigs Fed Peach-Palm Meal (Bactris gasipaes H.B.K.) and Lysine**

Para evaluar la hematología, los metabolitos sanguíneos y el peso de órganos de cerdos en crecimiento alimentados con harina de pijiguao (HP) y lisina sintética (LS), se utilizaron 72 cerdos machos castrados, del cruce de las razas Yorkshire x Landrace de 30 ± 0,5 kg. Los cerdos fueron distribuidos en seis tratamientos en un diseño al azar con arreglo factorial 2x3: dos niveles de LS (0 y 0,27%) y tres de HP (0, 25, y 50%), con cuatro réplicas por tratamiento y tres cerdos por unidad experimental. El estudio se condujo durante seis semanas y se tomaron muestras sanguíneas al inicio, en la tercera y sexta semana. Se evaluaron variables hematológicas: hemoglobina, recuento de eritrocitos y leucocitos, fórmula leucocitaria, hematocrito, volumen corpuscular medio (VCM) y concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM). Los metabolitos evaluados fueron, proteínas plasmáticas totales, enzimas alanina aminotransferasa (ALT) y aspartato aminotransferasa (AST), úrea, glucosa y fructosamina. Al final del experimento, se sacrificaron 24 cerdos (cuatro por tratamiento) y se pesaron los pulmones, corazón, estómago, páncreas, intestino delgado, intestino grueso, hígado, bazo y riñones. La interacción HPxLS no afectó ninguna de las variables estudiadas. La LS no afectó la hematología, mientras que la HP (25 y 50%) redujo el recuento de eritrocito (P<0,05), el hematocrito (P<0,05) y la hemoglobina (P=0,09), sin variaciones significativas sobre la VCM, CHCM y el recuento de leucocitos con respecto al grupo sin HP. Las proteínas totales fueron menores en los cerdos alimentados con HP (P<0,01) y la úrea disminuyó por efecto de la LS (P<0,05). La AST fue menor (P=0,01) en los cerdos con LS con respecto al grupo sin LS. Los cerdos que consumieron dietas con 25% HP tendieron a presentar (P=0,10) estómagos más pesados que el grupo de la dieta basal y el que recibió 50% HP (P= 0,06). El bazo resultó menos pesado (P<0,01) en los cerdos alimentados con 25 y 50% HP, que el grupo sin HP. La HP conjuntamente con LS en las dietas de cerdos en crecimiento no ocasionaron efectos negativos sobre la hematología, los metabolitos sanguíneos y el peso de los órganos.

To evaluate the hematology, blood metabolites, and organ weights in growing pigs fed peach-palm meal (PPM) and synthetic lysine (SL), 72 crossbred (Yorkshire x Landrace) barrows (30±0.5 kg) were used. Pigs were allotted into six treatments in a completely randomized design with a 2 x 3 factorial arrangement, with two levels of SL (0 and 0.27%) and three levels of PPM (0, 25 and 50%), with four replications per treatment and three pigs per experimental unit. The study lasted six weeks and blood samples were collected at the onsent of the assay and at third and sixth weeks. The hematological variables evaluated were hemoglobin, erythrocytes and leukocyte count, total leukocyte count, hematocrit, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC). Blood metabolites evaluated were: total plasma proteins, urea, glucose, fructosamine, alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST). At the end of the trial, 24 pigs were slaughtered (four/treatment) and the lungs, heart, stomach, pancreas, small intestine, liver, spleen, and kidneys were weighed. The PPM x SL interaction did not significantly influence the variables studied. The SL did not affect hematology, while PPM (25 and 50%) significantly decreased erythrocyte count (P<0,05), hematocrit (P<0,05) and hemoglobin (P=0.09), without significant variations in MCV, MCHC, and leukocyte count, when compared to pigs that were fed no PPM. Pigs fed PPM had lower total proteins(P<0.01) and the SL reduced urea (P<0.05). The AST was lower (P=0.01) in pigs fed SL than in pigs without SL. Pigs that consumed 25% PPM tended to have (P=0.10) heavier stomachs than those fed basal diet or 50% PPM (P=0.06). Pigs fed 25 and 50% PPM exhibited the lightest spleens (P<0.01), compared to those without PPM. The PPM together with SL in the diet of growing pigs had no detrimental effects on hematological variables, blood metabolites, and organ weights.