Investigación Clínica

La causalidad formativa

Utility of chromosome banding with ALU I enzyme for identifying methylated areas in breast cancer

El cáncer es un conjunto de trastornos que comparten la característica común de un crecimiento celular descontrolado, teniendo la facultad de comenzar en las células, generando dos procesos sucesivos: el aumento de la proliferación celular (tumor o neoplasia) y la capacidad invasiva de estas células, proliferando y colonizando otros tejidos (metástasis). La metilación del DNA es un proceso epigenético que recurrentemente ha sido involucrado como un factor importante en la patogenia de esta enfermedad el cual participa en la regulación de la expresión génica directamente al impedir la unión de factores de trascripción, e indirectamente propiciando la estructura cerrada de la cromatina. El objetivo de este trabajo fue determinar regiones hipermetiladas en muestras de extendidos cromosómicos mediante la utilización de la endonucleasa de restricción Alu I y relacionar estas regiones con sitios de localización de genes supresores de tumores relacionados con el cáncer de mama. Se analizaron 60 muestras de sangre periférica de mujeres con diagnóstico de cáncer de mama a las cuales se les realizó cultivo celular; los extendidos cromosómicos fueron teñidos con Giemsa previamente digeridos con la enzima Alu I. Se observaron cromosomas con regiones centroméricas y no centroméricas teñidas en el 37% de los casos, comprobándose que en el 95,46% de los casos existen genes asociados descritos, como metilados en cáncer de mama. Ejemplo de ellos son los localizados en los cromosomas 1q, 2q, 6q, y regiones centroméricas no teñidas usualmente como en los cromosomas 3, 4, 8, 13, 14, 15, y 17. Se sugiere la importancia de esta técnica ya que permite la visualización total del genoma, pudiendo localizar genes metilados relacionados con cáncer de mama y, de esta manera dirigir la terapia de forma específica, logrando una mejor respuesta terapéutica

Cancer is a group of disorders characterized by uncontrolled cell growth which is produced by two successive events: increased cell proliferation (tumor or neoplasia) and the invasive capacity of these cells (metastasis). DNA methylation is an epigenetic process which has been involved as an important pathogenic factor of cancer. DNA methylation participates in the regulation of gene expression, directly, by preventing the union of transcription factors, and indirectly, by promoting the closed structure of the chromatine. The objectives of this study were to identify hypermethyled chromosomal regions through the use of restriction Alu I endonuclease, and to relate cytogenetically these regions with tumor suppressive gene loci. Sixty peripheral blood samples of females with breast cancer were analyzed. Cell cultures were performed and cytogenetic spreads, previously digested with Alu I enzyme, were stained with Giemsa. Chromosomal centromeric and not centromeric regions were stained in 37% of cases. About 96% of stained hypermethyled chromosomal regions (1q, 2q, 6q) were linked with methylated genes associated with breast cancer. In addition, centromeric regions in chromosomes 3, 4, 8, 13, 14, 15 and 17, usually unstained, were found positive to digestion with Alu I enzime and Giemsa staining. We suggest the importance of this technique for the global visualization of the genome which can find methylated genes related to breast cancer, and thus lead to a specific therapy, and therefore a better therapeutic response

Determination of copper, magnesium and zinc in mononuclear leukocytes by flame atomic absorption spectrometry

En este trabajo se evaluó un nuevo microinyector de inyección en flujo para la determinación de Cu, Mg y Zn en células mononucleares de la sangre. Este dispositivo permitió analizar muestras en el orden de microlitros mediante espectrometría de absorción atómica con llama, es fácil de construir y adaptar al inyector convencional del espectrofotómetro de absorción atómica. En la determinación de Cu, Mg y Zn se obtuvieron límites de detección de 106, 65 y 37 µg L-1,respectivamente. En las pruebas de recuperación de estos elementos en leucocitos mononucleares se encontraron porcentajes de recuperación entre 98 y 110%

In this paper we evaluated a new micro-flow injector for the determination of the concentrations of Cu, Mg and Zn in mononuclear blood cells. This device analyzed sample volumes in the order of microliters by flame atomic absorption spectrometry; it is inexpensive, and easy to build and to adapt to the conventional injector of the atomic absorption spectrophotometer. Detection limits of 106, 65 and 37 µg L-1 for Cu, Mg and Zn were obtained, respectively. The percentages of recovery tests were found between 98 and 110%

Prevalence of attention deficit/hyperactivity disorder in Venezuelan college students. Preliminary findings

El objetivo de la presente investigación que estuvo dirigido a determinar la frecuencia del trastorno por déficit de atención-hiperactividad [TDAH] en estudiantes universitarios. La muestra estuvo constituida por 411 estudiantes universitarios de ambos sexos, con edades comprendidas entre 17 y 47 años, cursantes entre el 1er y 5to semestre de la Escuela de Educación de la Universidad del Zulia de la ciudad de Maracaibo. Para la identificación de los casos probables se utilizó el cuestionario de cribado ASR-S v1.1 y el FASCT. Los universitarios con puntajes positivos en ambas escalas de tamizaje, se seleccionaron para ser evaluados con la M.I.N.I plus. Los resultados indicaron que la prevalencia estimada en estudiantes universitarios es de 4,8%, caracterizándose el predominio de síntomas de impulsividad-hiperactividad. La comorbilidad asociada al diagnóstico de TDAH en la muestra estudiada fue de 35%. El estimado de prevalencia de 4,35% debe ser considerado como un signo de alerta de la necesidad de diagnóstico y tratamiento para esta población

The aim of this study was to estimate the frequency of the attention deficit/hyperactivity disorder in college students. The sample was constituted by 411 college students, ages between 17 and 47 years, attending the School of Education at the Universidad del Zulia, 1st thru 5th semester. The identification of probable cases was performed by using the ASR-S v1.1 and FASCT as screening instruments. For the second part of the diagnostic process, students with positive scores in both screening measures were selected to be interviewed using the M.I.N.I plus. Results indicated that the estimated prevalence of ADHD in college students is 4.8%, with a behavioral profile which suggests that hyperactivity-impulsivity symptoms were predominant in this sample. Comorbidity related to the ADHD diagnosis was 35%. A prevalence estimate of 4.35% should be considered as an alert sign for the need of diagnostic and treatment of this population

**Nested PCR reveals elevated over-diagnosis of E. histolytica in Barcelona, Venezuela**

The aim of this study was to identify the presence of Entamoeba histolytica and E. dispar by nested PCR in children attending the Dr. Luis Razetti Hospital, Barcelona, Anzoátegui State. Of the 1,141 fecal samples coproparasitologically evaluated by conventional microscopy, 150 were diagnosed positive for E. histolytica in 0-10 year-old-children, of both sexes. The signs, symptoms and a full coproparasitological report were obtained from all of these and nested PCR was performed to identify E. histolytica and E. dispar. The conventional microscopy results showed a diagnostic frequency of E. histolytica in 13.2% of the cases, of which 79.3% were positive only for this pathogen. However, nested PCR showed that of these, only 28% (42/150) were actually infected by Entamoeba spp., revealing a high over-diagnosis of E. histolytica. We also identified 9.3% E. histolytica, 4% E. dispar and 4.7% mixed infections. Diarrhea was the most common symptom, followed by abdominal pain and fever. Bloody stools were statistically associated with E. histolytica, but were also found for E. dispar infections. This study demonstrates that molecular techniques complementary to conventional methods enable the correct identification of Entamoeba spp., thus contributing to an improved epidemiological assessment of these parasites and implementation of the appropriate treatment

Esta investigación planteó detectar por nested PCR Entamoeba histolytica y E. dispar en niños del Hospital Dr. Luis Razetti de Barcelona, estado Anzoátegui y su asociación con síntomas clínicos. De 1.141 muestras fecales evaluadas parasitológicamente por microscopía convencional, 150 fueron positivas a E. histolytica en niños de 0-10 años y de ambos sexos. Se obtuvo información de signos, síntomas y reporte parasitólogico completo de cada uno de los pacientes y se realizó nested PCR para identificar E. histolytica y E. dispar. Los resultados de la microscopía convencional demostraron una frecuencia de diagnóstico de E. histolytica del 13,2%. En el 79,3% de estas positivas se reportó esta especie como único patógeno. Sin embargo, la nested PCR evidenció que sólo 28,0% (42/150) de las mismas presentaron infecciones por Entamoeba, evidenciándose un elevado sobrediagnóstico de E. histolytica. Además se identificaron 9,3% infecciones por E. histolytica, 4,0% E. dispar, y 4,7%infecciones mixtas. La diarrea fue el síntoma más común, seguido de dolor abdominal y fiebre. La presencia de sangre demostró asociación estadísticamente significativa con E. histolytica, pero también se reportó en infecciones por E. dispar. Este estudio demuestra que las técnicas moleculares complementarias a los métodos convencionales, permiten la identificación correcta de especies de Entamoeba, contribuyendo con una mejor evaluación epidemiológica de estos parásitos y la aplicación adecuada del tratamiento

Electrocardiography repolarization abnormalities are characteristic signs of acute chagasic cardiomyopathy

Chagas disease is a tropical parasitic disease caused by the protozoan Trypanosoma cruzi (T. cruzi), whose reemergence as oral outbreaks is currently a public health problem in Venezuela. T. cruzi infection induces myocardial damage; which according to the microvascular theory, is derived from parasite-mediated disruption of the endothelium, inducing platelet aggregation and ischemia. In order to determine whether ventricular repolarization disorders observed in human patients are characteristic signs of the disease that can be reproduced in NMRI mice; we studied 12 patients with a well documented diagnosis of acute Chagas disease, based on epidemiological, clinical, parasitological and molecular data. Also, T. cruzi isolates from the blood of human patients from other Venezuelan geographical regions were characterized and inoculated in albino NMRI mice. A standard 12-lead and bipolar electrocardiogram configuration were done in human patients during the acute phase of the disease and in mice, after three weeks of infection. Results in human showed repolarization disorders, characterized by: negative, bimodal or biphasic T waves, ST segment depression or elevation and early repolarization. In mice a significant increase in T wave amplitude, increased QT interval duration and elevation or depression of ST segment were observed. These findings were evidenced in all infected mice, suggesting that electrocardiographic repolarization abnormalities in a well documented clinical and epidemiological context are signs that increase the sensitivity for the diagnosis of acute Chagas´ disease

La enfermedad de Chagas es una hemoparasitosis causada por Trypanosoma cruzi (T. cruzi), cuya re-emergencia como epidemias por contaminación oral es actualmente un problema de salud pública en Venezuela. La infección por T. cruzi causa miocarditis; que de acuerdo con la teoría microvascular deriva del daño del endotelio vascular, al inducir agregación plaquetaria e isquemia. Con el objetivo de demostrar que los trastornos de repolarización son signos propios de la miocarditis chagásica aguda (MChA) reproducibles en modelos animales, estudiamos 12 pacientes humanos con diagnostico bien documentado de MChA, basado en datos epidemiológicos, clínicos, parasitológicos y moleculares. A partir de la sangre de los pacientes obtuvimos los aislados de T cruzi, los caracterizamos molecularmente y los inoculamos en ratones albinos NMRI; paralelamente, aislados de T cruzi provenientes de otras regiones de Venezuela fueron también ensayados. Tanto en los pacientes humanos como en los ratones con Chagas agudo, se realizaron estudios electrocardiográficos en 12 derivaciones estándares y en configuración bipolar, respectivamente. En humanos observamos trastornos de la repolarización ventricular caracterizados por: onda T negativa, bimodal o bifásica; elevación o depresión del segmento ST y despolarizaciones tempranas. En ratones observamos incrementos en la amplitud de la onda T, aumento en la duración del intervalo QT y elevación o depresión del segmento ST. Estos hallazgos fueron evidenciados en todos los ratones infectados con los diferentes aislados, sugiriendo que los trastornos de repolarización, en un adecuado y bien documentado contexto epidemiológico y clínico, son signos que aumentan la sensibilidad para el diagnóstico de MChA

Clinical and molecular study of the Noonan syndrome

El síndrome de Noonan es una entidad autosómica dominante relativamente común, clínicamente variable y genéticamente heterogénea, caracterizado por reducción del crecimiento postnatal, dismorfismo facial distintivo, alteraciones cardíacas y déficit cognitivo variable. El gen PTPN11 se encuentra localizado en el brazo largo del cromosoma 12 y es el principal responsable de los casos clínicamente diagnosticados de esta entidad. Se reporta el caso de un lactante mayor masculino, de 18 meses de edad, evaluado de forma multidisciplinaria con diagnóstico clínico y molecular de síndrome de Noonan, con la mutación en sentido errado del gen PTPN11, G503R (c.1507 G>A). Se discutieron los diversos hallazgos clínicos y las alteraciones genéticas asociadas con esta mutación

Noonan syndrome is a relatively common autosomal dominant entity, clinically variable and genetically heterogeneous; characterized by postnatally reduced growth, distinctive facial dysmorphism, cardiac defects and variable cognitive deficits. The PTPN11 gene is located on the long arm of chromosome 12 and is primarily responsible for the clinically diagnosed cases of this entity. We report the case of a 18 month-old boy, evaluated in a multidisciplinary way, with clinic and molecular diagnosis of Noonan syndrome, with the missense mutation in PTPN11 gene, G503R (c.1507 G>A). Several clinical features and the genetic alterations associated with this mutation are discussed

Two cases of pituitary metastases as initial presentation form of small cell lung cancer

Las metástasis en la silla turca son raras y se encuentran en muchas ocasiones incidentalmente o en necropsias. Solo un 7% de los casos son sintomáticos. Las manifestaciones clínicas más frecuentes son la diabetes insípida, la clínica compresiva y los síntomas derivados de déficit hormonales de la adenohipófisis. Se presentan los casos de 2 varones con un carcinoma microcítico de pulmón cuya manifestación clínica inicial correspondía a afectación metastásica de la silla turca. Un caso debutó con invasión del seno cavernoso y panhipopituitarismo, y el otro con una diabetes insípida. Ambos casos presentaron una rápida progresión de su enfermedad neoplásica, con escasa respuesta al tratamiento sistémico en uno de los casos y fueron éxitus a los pocos meses. Las metástasis hipofisarias se presentan con mayor frecuencia en mujeres con cáncer de mama y hombres con neoplasias de pulmón. La presencia de poliuria y polidipsia en un paciente oncológico debe hacer sospechar una diabetes insípida, siendo necesario un estudio de imagen de la silla turca. El tratamiento de estos tumores incluye la cirugía, la radioterapia, la quimioterapia y el tratamiento hormonal sustitutivo. A pesar que el tratamiento quirúrgico no se ha asociado a un aumento de la supervivencia, algunos pacientes pueden mejorar su calidad de vida

Metastases in the sellar region are rare and are frequently found incidentally or in necropsies. Only 7% are reported to be symptomatic. Diabetes insipidus, anterior pituitary dysfunction, visual field defects, headache/pain and ophthalmoplegia are the most commonly reported symptoms. We present the cases of two male patients with a small-cell lung carcinoma whose first clinical symptoms were due to pituitary metastasis. One case presented with symptoms of cavernous sinus invasion and panhypopituitarism and the other case with diabetes insipidus. Both patients had a rapid progression of their disease despite chemotherapy and died after a few months. Pituitary metastases occur most commonly with breast cancer in women and lung cancer in men. The presence of polyuria and polydipsia in an oncologic patient should alert the physician for diabetes insipidus and, if confirmed, an imaging procedure of the pituitary gland is mandatory. Treatment for these tumors is often multimodal and includes surgery, radiation therapy, chemotherapy and hormone replacement. Although surgical series have not shown any significant survival benefits given by tumor resection, the patients quality of life may be improved

Application of platelet rich plasma (PRP) and its derivatives in dental implantologie and plastic surgery

El Plasma Rico en Plaquetas (PRP), como su nombre lo indica, posee una alta concentración de trombocitos; es un preparado autólogo, no tóxico y no alergénico, obtenido por centrifugación de la sangre a baja velocidad. Su función está directamente ligada a la liberación por parte de las plaquetas de Factores de Crecimiento (FC). Estos factores tienen propiedades de inducción de la regeneración de los tejidos. Para la elaboración del presente trabajo se realizó una búsqueda bibliográfica en diferentes fuentes documentales utilizando los descriptores: Plasma rico en plaquetas, PRP, Factores de crecimiento, FC, Odontología y Cirugía estética. En este artículo se realiza una descripción de algunos aspectos relevantes del PRP y su aplicación en las áreas de Odontología y Cirugía estética

The platelet rich plasma (PRP), as its name implies, has a high concentration of thrombocytes; is a non-toxic and non-allergenic autologous preparation, obtained by blood centrifugation at low speed. Its function is directly linked to the release of growth factors (FC) by platelets. These factors have properties of induction of tissue regeneration. For the preparation of the present work, a literature search was performed in different documentary sources using the following descriptors: platelet rich plasma, PRP, growth factors, GF, dentistry and cosmetic surgery. This article is a description of some relevant aspects of the PRP and its application in the areas of dentistry and cosmetic surgery

Estudio clínico-epidemiológico de coccidiosis intestinales en una población rural de región semiárida del estado Falcón. Venezuela