Scielo RSS <![CDATA[Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología]]> http://ve.scielo.org/rss.php?pid=1315-255620130001&lang=pt vol. 33 num. 1 lang. pt <![CDATA[SciELO Logo]]> http://ve.scielo.org/img/en/fbpelogp.gif http://ve.scielo.org <![CDATA[<b>Biblioteca científica Scielo</b>: <b>15 años</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100001&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt <![CDATA[<b>Slavia Ryder</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100002&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt <![CDATA[<b>Determination of the gene which codifies the APH-(3’)-VIa enzyme in <i>Acinetobacter</i> 13TU:RUH1139 isolates of nosocomial origin</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100003&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt El objetivo de este trabajo fue evaluar el fenotipo de resistencia y la presencia del gen aminoglucósido-O-fosfotransferasa-3´-VIa (aph-(3´)-VIa) en 23 aislamientos identificados como Acinetobacter 13TU:RUH 1139, provenientes de neonatos y soluciones parenterales, administradas a los mismos, en la Unidad de Alto Riesgo Neonatal (UARN) del Instituto Autónomo Hospital Universitario de Los Andes (IAHULA). Para la determinación de la susceptibilidad antimicrobiana se probaron seis aminoglucósidos mediante la prueba de difusión en agar (amikacina, gentamicina, tobramicina, netilmicina, dibekacina y neomicina), así como kanamicina y estreptomicina por dilución en agar. Todos los aislamientos resultaron resistentes a estreptomicina, más del 90% de los mismos mostraron resistencia ante amikacina, gentamicina y tobramicina, y el 82,6% fue resistente a netilmicina y dibekacina. Se detectó el gen aph-(3´)-VIa en 15 aislamientos de los neonatos y en 2 provenientes de las soluciones parenterales. Debido al elevado porcentaje de aislamientos resistentes a los aminoglucósidos, así como la presencia del gen aph-(3´)-VIa en Acinetobacter 13TU:RUH 1139, el uso de estos antimicrobianos como monoterapia debe ser restringido en el IAHULA y es necesario vigilar continuamente la diseminación genética de dicha resistencia.<hr/>The purpose of this work was to evaluate the resistance phenotype and the presence of aminoglucoside-0-phosphotransferase-3’-VIa (aph-(3’)-VIa) in 23 isolates identified as Acinetobacter 12TU:RUH 1139, obtained from neonates and parenteral solutions administered to them, at the Neonatal High Risk Unit (NHRU) of the Instituto Autónomo Hospital Universitario de Los Andes (IAHULA). Six aminoglucosides were examined for determination of antimicrobial susceptibility by the agar-diffusion test (amikacin, gentamycin, tobramycin, netilmycin, dibekacin, and neomycin), as well kanamycin and streptomycin by the agar-dilution test. All the isolates were streptomycin resistant, and over 90% of them showed resistance to amikacin, gentamycin, and tobramycin, and 82.6% was resistant to netilmycin and dibekacin. Gene aph-(3`)-VIa was detected in 15 isolates from neonates and in 2 from the parenteral solutions. Due to the high percentage of aminoglucoside-resistant isolates, as well as the presence of the gene aph-(3’)-VIa in Acinetobacter 13TU:RUH 1139, the use of these antimicrobials as monotherapy should be restricted at the AUHLA, and it is necessary to constantly survey the genetic dissemination of this resistance. <![CDATA[<b>Study of antibiotic susceptibility of <i>Mycobacterium abscessus</i> clinical isolates</b>: <b>Preliminary report</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100004&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Mycobacterium abscessus posee una elevada resistencia a los antibióticos, lo cual limita las opciones terapéuticas para tratar las infecciones causadas por este microorganismo. En este estudio se determinó la susceptibilidad antimicrobiana de 26 cepas de M. abscessus de origen clínico frente a 14 antibióticos, mediante el método de microdilución en caldo (MDC) de acuerdo al procedimiento descrito por el CLSI (2011). Todas las cepas fueron sensibles a la amikacina, seguidas de claritromicina (62%) e imipenem (46%), mientras que el porcentaje de sensibilidad a ciprofloxacina, ampicilina/sulbactam, meropenem, ceftriaxona, amoxacilina y doxiciclina osciló entre 0 y 8%. Nueve diferentes patrones de resistencia fueron observados, representados por la asociación de 4 a 12 antibióticos. La combinación de 8 y 10 marcadores de resistencia constituyeron los patrones más frecuentes (28% cada uno). La amikacina fue el antibiótico con mayor actividad inhibitoria frente a las cepas estudiadas (0,5 - 16 µg/mL). Los patrones de resistencia observados sugieren la necesidad de utilizar las pruebas de susceptibilidad como herramientas que permitan orientar y optimizar las conductas terapéuticas en infecciones producidas por M. abscessus.<hr/>Mycobacterium abscessus has a high antibiotic resistance, which limits therapeutic options for treating infections produced by this microorganism. In this study we determined the antimicrobial susceptibility of 26 M. abscessus strain of clinical origin towards 14 antibiotics through the broth microdilution method (BMD) according to the procedure described by the CLSI (2011). All the strains were sensitive to amikacine, followed by clarithromycin (62%), and imipenem (46%), while the percentage sensitivity to ciprofloxacin, ampicillin/sulbactam, meropenem, ceftriaxone, amoxicycillin, and doxicycline varied between 0 and 8%. Nine different resistant patterns were observed, represented by the association of 4 to 12 antibiotics. The combination of 8 and 10 resistance markers constituted the most frequent patterns (28% each). Amikacin was the antibiotic with the highest inhibitory activity towards all the strains studied (0.5 - 16 µg/mL). The resistance patterns observed indicate the need of using susceptibility tests as tools that allow to guide and optimize the therapeutic approach to M. abscessus produced infections. <![CDATA[<b>Variants of the EPIYA motif of <i>Helicobacter pylori</i> CagA protein in gastric biopsies from patients with chronic gastritis from the center-occidental region of Venezuela</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100005&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Helicobacter pylori es una bacteria que coloniza la mucosa del estómago produciendo enfermedades gástricas crónicas. Las cepas que expresan el factor de virulencia CagA se unen al epitelio gástrico e inyectan en él esta proteína, la cual es activada por fosforilación en residuos de tirosina ubicados en el motivo EPIYA. Dependiendo del número y tipo de motivo EPIYA (EPIYA-A, B, C y D), se inducen transformaciones celulares que juegan un papel importante en el desarrollo de enfermedades gastroduodenales asociadas con H. pylori. El objetivo de este trabajo fue determinar la frecuencia de las variantes de EPIYA en cepas de H. pylori cagA positivas de la región centroccidental de Venezuela. Se estudiaron 81 muestras de ADN extraídas de biopsias gástricas tomadas de individuos con gastritis crónica. El tipo de motivo EPIYA fue determinado por PCR y secuenciación. Solamente se detectaron variantes de EPIYA descritas para países occidentales: ABC (58,0%), ABCC (38,3%) y ABCCC (3,7%). La baja prevalencia detectada de cepas de H. pylori con tres repeticiones de EPIYA-C, las cuales se conocen por generar un mayor riesgo a cáncer gástrico, puede encontrase entre las razones que expliquen la escasa incidencia de cambios histológicos severos en las muestras de gastritis crónica analizadas.<hr/>Abstract: Helicobacter pylori is a bacterium that colonizes stomach mucous tissue producing chronic gastric disease. The strains that express the CagA virulence factor adhere to the gastric epithelium and inject this protein, which is activated by phosphorilation at tyrosine residues located in the EPIYA motif. Depending on the number and type of EPIYA motif (EPIYA-A, B, C, and D), cellular transformations are induced which play an important role in the development of H. pylori associated gastro duodenal diseases. The objective of this work was to determine the frequency of the EPIYA variants in cagA positive H. pylori strains from the center-occidental region of Venezuela. The study included 81 DNA samples extracted from gastric biopsies taken from individuals with chronic gastritis. The type of EPIYA motif was determined by PCR and sequencing. Only EPIYA variants described for occidental countries were detected: ABC (58.0%), ABCC (38.3%) and ABCCC (3.7%). The low prevalence of H. pylori strains with three EPIYA-C repetitions detected, which are known to generate a higher gastric cancer risk, could be one of the reasons that explain the low incidence of severe histological changes in the chronic gastric samples analyzed. <![CDATA[<b>Immunomodulating capacity of potentially probiotic <i>Lactobacillus</i> strains isolated from human breast milk and lactating children feces</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100006&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt El objetivo del estudio fue evaluar la capacidad inmunomoduladora de dos cepas de L. paracasei (66 y 71) y una de L. rhamnosus (75) aisladas de leche materna y heces de lactante, en Mérida, Venezuela, caracterizadas como potencialmente probióticas en estudios previos. Las bacterias fueron administradas a ratones BALB/c en el agua de bebida durante 7 días. Con los fluidos intestinales se realizaron pruebas de ELISA para determinar los valores de las citoquinas IFN-γ e IL-10. Se realizó la coloración de hematoxilina-eosina a cortes histológicos del intestino delgado para observar posibles reacciones inflamatorias. Para el análisis estadístico, se utilizó la prueba de ANOVA de una vía, seguido del test post hoc de Tukey, considerando a p<0,05 como significativo. Se observaron incrementos significativos, por encima del grupo control, en las concentraciones de IFN-γ e IL-10 en el fluido intestinal de los ratones alimentados con las cepas 71 y 75. No se observaron reacciones inflamatorias en el intestino delgado. Al inducir un aumento en la producción de las citoquinas, estas cepas fueron capaces de estimular el sistema inmune manteniendo la homeostasis, por lo que pueden ser utilizadas como adyuvantes del sistema inmune intestinal, sin producir efectos secundarios indeseables.<hr/>The objective of this study was to evaluate the immunomodulating capacity of two L. paracasei strains (66 and 71), and one L. rhamnosus (75) isolated from breast milk and lactating children feces in Mérida, Venezuela, characterized as potentially probiotic in previous studies. The bacteria were administered to BALB/c mice in their drinking water during 7 days. Intestinal fluids were tested by ELISA to determine IFN-γ and IL-10 cytokines values. Histological sections of the small intestine were stained with hematoxilin-eosin to detect possible inflammatory reactions. The statistical analysis was done by a one way ANOVA, followed by the Tukey post hoc test, considering p<0.05 as significant. There were significant increases, as compared with the control group, of INF-γ and IL.10 concentrations in the intestinal fluid of mice fed with strains 71 and 75. There were no inflammatory reactions of the small intestine tissue. By inducing an increase in cytokine production, these strains were capable of stimulating the immune system maintaining homeostasis, due to which they can be used as adjuvant of the immune intestinal system, without producing undesirable side effects. <![CDATA[<b>Partial characterization of enterocins produced by an <i>Enterococcus</i> <i>faecium</i> strain isolated from ovine milk</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100007&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Los enterococos son constituyentes de la microflora de quesos artesanales y contribuyen a sus características organolépticas. También producen enterocinas que pueden prevenir el crecimiento de patógenos alimentarios. En este estudio se aislaron 27 cepas de enterococos a partir de leche y queso ovinos provenientes de la Patagonia (Argentina) y se investigó la producción de bacteriocinas. De las 27 cepas aisladas, 22 cepas de Enterococcus faecium y 1 cepa de E. faecalis inhibieron el crecimiento de Listeria innocua ATCC 33090. E. faecium Tw6 mostró la mayor actividad antimicrobiana entre las cepas estudiadas y se seleccionó con el propósito de caracterizar el principio activo y su espectro de inhibición. La tripsina abolió la actividad antilisteria, lo que sugiere que el compuesto activo es de naturaleza proteica; resultó ser estable al calor, resistente al pH y permaneció estable durante más de 12 meses. La masa molecular determinada mediante electroforesis fue aproximadamente de 5,6 KDa. La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) mostró la presencia de múltiples secuencias de enterocinas (entA, entB, entP y entL50A/B). Las características físico-químicas y bioquímicas de las enterocinas producidas por E. faecium Tw6 las convierten en potenciales candidatas para ser utilizadas en la conservación de alimentos.<hr/>Enterococci are part of the microflora of artisan type cheese and contribute to their organoleptic characteristics. They also produce enterocins which can prevent the growth of food pathogens. In this study 27 enterococci strains were isolated from ovine milk and cheese produced at the Argentine Patagonia and they were investigated regarding their bacteriocin production. Of the 27 strains isolated. 22 Enterococcus faecium and one E. faecalis inhibited the growth of Listeria innocua ATCC 33090; E. faecium Tw6 showed the highest antimicrobial activity among the strains studied and it was selected with the purpose of characterizing the active principle and its inhibition spectrum. Trypsin abolished antilisteria activity, which suggests that the active component has a protein nature; it was heat stable, pH resistant, and it remained stable during more than 12 months. The molecular mass determined by electrophoresis was approximately 5.6 KDa. The polymerase chain reaction (PCR) showed the presence of multiple enterocin sequences (entA, entP, and ent50A/B). The physicochemical and biochemical characteristics of the enterocins produced by E. faecium Tw6 identify them as a potential candidates for use in food preservation. <![CDATA[<b>Biological activity of extracts from three plants over bacteria pathogenic for human beings</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100008&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt El objetivo de esta investigación fue determinar la actividad biológica de extractos de tres plantas sobre bacterias patógenas para el humano. Se determinó la citotoxicidad de extractos y fracciones de Parinari sprucei, Couepia paraensis y Lantana camara L. y se evaluó su actividad antibacteriana mediante el ensayo colorimétrico del 3-(4,5-dimetiltiazol-2yl)-2,4-difenilbromuro de tetrazolio (MTT), utilizando sólo concentraciones inocuas en todos los ensayos realizados. La CMI se determinó con el ensayo de micro dilución MTT y se evaluó la actividad de los posibles agentes antimicrobianos por el método de difusión en agar de Kirby-Bauer. La CMI de los extractos metanólico de C. paraensis y diclorometano/etanol de P. sprucei sobre Staphylococcus aureus fue 25 µg/mL, mientras que la CMI con el extracto etanólico de P. sprucei fue 50 µg/mL. La CMI de la fracción 19 de L. camara L. sobre Acinetobacter haemolyticus y S. aureus fue 50 µg/mL. Los halos de inhibición obtenidos con los extractos metanólico de C. paraensis, y diclorometano/etanol y etanólico de P. sprucei sobre S. aureus fueron de 8, 9 y 7 mm, respectivamente. Los extractos de la familia Verbenaceae no presentaron actividad antibacteriana, mientras que los de la familia Chrysobalanaceae inhibieron la replicación de bacterias grampositivas.<hr/>The citotoxicity of extracts and fractions obtained from three plants was determined, and their antibacterial activity was evaluated through a colorimetric assay with tetrazolium 3-(4,5-dimethilthiazol-2yl)-2,4-diphenilbromide (MTT)), using only innocuous concentrations in all the assays carried out. The MIC was determined by the MTT micro dilution assay, and the activity of the possible antimicrobial agents by the Kirby-Bauer agar diffusion test. The MIC of a methanol extract from Couepia paraensis, and a dichloromethanol/ethanol from Parinari sprucei over S. aureus was 25 µg/mL, while the MIC with the ethanol extract from P. sprucei was 50 µg/mL. The MIC of fraction 19 of Lantana camara L. over A. haemolyticus and S. aureus was 50 µg/mL. The inhibition halos obtained with the C. paraensis methanol extracts, and the P. sprucei over S. aureus dichloromethanol/methanol and ethanol extract, were 8, 9 and 7 mm respectively. The Verbenaceae family extracts did not present any antibacterial activity, while those of the Chrysobalanaceae family inhibited replication of gram positive bacteria. <![CDATA[<b>Fecal contamination of the superficial water of the microbasin of Rio Purires, Costa Rica, 2010-2011</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100009&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt La contaminación fecal de las aguas superficiales es un problema importante para la salud pública, dada la transmisión de microorganismos patógenos. Se estima que las poblaciones ubicadas cerca de costas, ríos o lagos con elevada contaminación fecal, tienen mayor riesgo de desarrollar enfermedades infecciosas gastrointestinales. En esta investigación se analizó durante un año, la contaminación fecal en las aguas superficiales de la microcuenca del río Purires, ubicada en una zona de alta densidad poblacional en Costa Rica. En el 100% de las muestras se detectó contaminación fecal, siendo el punto de muestreo 3 el que mostró los niveles más altos, en promedio 2,2 x 10(4) Número Más Probable(NMP)/100()mL. Aunque los puntos 1 y 2 presentaron menor contaminación fecal, en promedio 6,4 x 10² NMP/100 mL y 6,3 x 10³ NMP/100 mL respectivamente, estos valores indican también mala calidad de las aguas. Con estos resultados se pretende llamar la atención sobre la problemática ambiental de alta contaminación fecal en las aguas superficiales de esta microcuenca. Esta información es un insumo para desarrollar acciones de control sobre las fuentes de contaminación que afectan la calidad de las aguas y por ende, la salud de las poblaciones ubicadas en su cercanía.<hr/>Fecal contamination of the superficial waters is an important public health problem due to the presence of pathogenic microorganisms- It has been estimated that populations located close to coasts, rivers of lakes with an elevated fecal contamination have a higher risk of developing communicable gastrointestinal diseases. This investigation analyzed the fecal contamination of the superficial waters of the microbasin of the Rio Purires, located in a highly populated area of Costa Rica. Fecal contamination was detected in 100% of the samples, and sample point 3 was the one that showed the highest levels, with an average of 2.2 x 10(4) Most Probable Number (MPN)/100mL. Even thought points 1 and 2 presented a lower fecal contamination, an average of 6.4 x 10² MPN/100mL and 6.3 x 10³ MPN/100mL, respectively, these values also indicate low quality water. With these results we intend to alert regarding the problem of a high fecal contamination of superficial waters of this microbasin. This information is an input for developing control actions over the contamination sources which compromise the quality of water and, therefore, the health of the populations located in its vicinity. <![CDATA[<b>Validation of the inoculum by densitometry for antifungal susceptibility testing in <i>Fusarium</i> species</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100010&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt El objetivo de este trabajo fue validar la preparación del inóculo por densitometría para las pruebas de susceptibilidad a los antifúngicos en especies del género Fusarium. Se emplearon 15 aislamientos clínicos de Fusarium spp. para preparar los inóculos por espectrofotometría y contaje de unidades formadoras de colonias en cámara de Neubauer, siguiendo los protocolos establecidos por los documentos de referencia M38-A2 del Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio (CLSI) y E.DEF 9.1 del Comité Europeo para Pruebas de Susceptibilidad a los Antimicrobianos (EUCAST), respectivamente. En paralelo se determinaron las lecturas por densitometría para ambos procedimientos. Se estableció un rango de 0,5-0,7 unidades McFarland para la preparación del inóculo por densitometría según el CLSI, y un rango de 0,2-0,8 unidades McFarland para la metodología descrita por el EUCAST. Con este estudio, se logró validar la preparación del inóculo para las pruebas de susceptibilidad en Fusarium spp., utilizando la densitometría como método alternativo de los procedimientos descritos internacionalmente, con considerables ventajas para ser implementado en los laboratorios de microbiología clínica. La variabilidad en cuanto a la capacidad de esporulación y tamaño de las conidias, sobre todo en especies poco frecuentes de Fusarium, sugiere la necesidad de validar el inóculo por especie.<hr/>The purpose of this work was to validate the preparation of the inoculum by densitometry for antifungal susceptibility testing in Fusarium species. Fifteen clinical isolates of Fusarium spp. were used to prepare the inocula by spectrophotometry and counting of colony forming units in a Neubauer chamber, according to the protocols established by the reference documents M38-A2 of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), and E.DEF 9.1 of the European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST), respectively. Densitometry readings were determined in parallel for both procedures. A range of 0.5-0.7 McFarland units was established for inocula preparation by densitometry according to the CLSI, and a range of 0.2-0.8 McFarland units was established for the methodology described by EUCAST. This study allowed validating the preparation of the inocula for antifungal susceptibility testing in Fusarium spp., using densitometry as an alternative method for other procedures described internationally, with considerable advantages that can be implemented at clinical microbiology laboratories. The variability regarding sporulation capacity and conidia size, especially in less frequent Fusarium species, suggests the need of validating inocula per species. <![CDATA[<b>Etiologia dos casos de candidíase cutânea atendidos no serviço de micologia da Universidade Federal Fluminense, Brasil</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100011&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Neste trabalho foram estudadas 64 amostras oriundas de 56 pacientes com suspeita clínica de candidíase cutânea, coletadas de novembro de 2008 a agosto de 2009, no serviço de Diagnóstico Micológico Humano e Veterinário do Departamento de Microbiologia e Parasitologia, Instituto Biomédico da Universidade Federal Fluminense. Foram isoladas espécies de Candida em 58 amostras de 51 pacientes, trinta e oito mulheres e treze homens, com a seguinte distribuição: 15 C. parapsilosis, 11 C. famata, 9 C. albicans, 7 C. haemulonii, 5 C. ciferrii, 4 C. guilliermondii, 4 C. lipolytica e 3 C . tropicalis. As onicomicoses representaram mais de 75% das manifestações clínicas. Nos casos em que não foi Candida isolada como o agente etiológico, foram identificados dois Cryptococcus laurentii, um Trichosporon mucoides e um Trichosporon asahii. Este trabalho é uma contribuição para o entendimento da etiologia de candidíase cutânea no serviço de Micologia da Universidade Federal Fluminense.<hr/>En este trabajo se estudiaron 64 muestras procedentes de 56 pacientes con sospecha clínica de candidiasis cutánea, recolectadas entre noviembre de 2008 a agosto de 2009 en el servicio de Diagnóstico Micológico Humano y Veterinario del Departamento de Microbiología y Parasitología, Instituto Biomédico de la Universidad Federal Fluminense. Se aislaron especies del género Candida en 58 muestras de 51 pacientes, treinta y ocho mujeres y trece hombres, con la siguiente distribución: 15 C. parapsilosis, 11 C. famata, 9 C. albicans, 7 C. haemulonii, 5 C. ciferrii, 4 C. guilliermondii, 4 C. lipolytica y 3 C . tropicalis. Las onicomicosis representaron más del 75% de las manifestaciones clínicas. En los casos donde no se aisló Candida como agente etiológico se identificaron dos Cryptococcus laurentii, un Trichosporon mucoides y un Trichosporon asahii. Este trabajo es una contribución al conocimiento de la etiología de la candidiasis cutánea en el Servicio de Micología de la Universidad Federal Fluminense.<hr/>This work corresponds to the study of 64 samples from 56 patients with clinical suspicion of cutaneous candidiasis, collected between November 2008 and August 2009 at the Human and Veterinarian Diagnostic Service of the Department of Microbiology and Parasitology of the Instituto Biomédico of the Universidad Federal Fluminense, Brazil. Candida genus species were isolated in 58 samples from 51 patients (38 women and 13 men), with the following distribution: C. parapsilosis 15, C. famata 11, C. albicans 9, C. haemulonii 7, C. guilliermondii 4, C. ciferrii 5, C. lipolytica 4, and C. tropicalis 3. Onicomycoses represented over 75% of the clinical manifestations. In cases where Candida was not isolated as etiologic agent, two Cryptococcus laurentii, one Trichosporum mucoides, and one Trichosporum asahii were identified. This work is a contribution to the knowledge of the etiology of cutaneous candidiasis at the Mycology Service of the Universidade Federal Fluminense. <![CDATA[<b>Use of cultures for the diagnosis of <i>Blastocystis</i> sp.</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100012&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Se realizó un estudio para comparar el rendimiento del cultivo con el examen directo y la sedimentación espontánea en el diagnóstico de Blastocystis sp. Para el cultivo de Blastocystis sp. se utilizó una modificación del medio de Boeck y Drbohlav. Se emplearon 100 muestras fecales procedentes de habitantes de la comunidad indígena Itopoicon, municipio Heres, estado Bolívar. De las 100 muestras cultivadas y sometidas a examen directo y sedimentación espontánea, en 90 se diagnosticó Blastocystis sp. De ellas, 83 resultaron positivas en el cultivo; mientras que 60 fueron positivas en el examen directo y 57 en la sedimentación espontánea. En conclusión, el cultivo presentó un mayor rendimiento (83%) que el examen directo (60%) y la sedimentación espontánea (57%) en el diagnóstico de Blastocystis sp.<hr/>A study for comparing the yield of cultures by direct examination and by spontaneous sedimentation for the diagnosis of Blastocystis sp. was carried out. Blastocystis sp. was cultured in a modification of the Boeck and Drbohlav medium. The material used corresponded to 100 fecal samples from inhabitants of the Itopoicon indigenous community, Heres municipality, Bolivar State. Of the 100 samples cultured and submitted to direct examination and spontaneous sedimentation, 90 gave a diagnosis of Blastocystis sp. Of these 90, 83 were positive in culture, while 60 were positive at direct examination, and 57 in spontaneous sedimentation. In conclusion, culture showed a higher yield (83%), than direct examination (60%) and spontaneous sedimentation (57%), for the diagnosis of Blastocystis sp. <![CDATA[<b>Prevalence of Blastocystis sp. and other commensal protozoa in individuals from Santa Rosa del Agua, Zulia State</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100013&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Con la finalidad de determinar la prevalencia de Blastocystis sp. y especies de protozoarios comensales intestinales del hombre según diferentes aspectos como la edad y el sexo, se evaluaron muestras de heces de 111 individuos varones y mujeres de todas las edades, pobladores de Santa Rosa de Agua, Maracaibo, estado Zulia. Cada muestra fecal se analizó a través de un examen al fresco, tinción de lugol y técnica de concentración de Ritchie. Se utilizó la tinción de hematoxilina férrica para identificar trofozoitos de Dientamoeba fragilis. Las especies del complejo Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar se diferenciaron mediante técnicas de PCR. Blastocystis sp. fue la especie predominante (45,6%), seguida por Entamoeba coli (17,9%), Endolimax nana (14,8%), Chilomastix mesnili (6,2%), Entamoeba dispar (5,6%), Dientamoeba fragilis, Pentatrichomonas hominis, Iodamoeba butschlii (3,1%) respectivamente y Entamoeba hartmanni (0,6%). Hubo afinidad parasitaria entre las especies Entamoeba coli y Endolimax nana. No se demostró asociación entre presencia de infección y sexo. Los grupos etarios preescolares y escolares demostraron asociación significativa con la infección parasitaria. Se determinó una elevada prevalencia de Blastocystis sp. y especies comensales intestinales, todas indicadoras de contaminación fecal, donde probablemente factores ambientales y socioculturales promovieron su transmisión.<hr/>With the purpose of determining Blastocytis sp. and other commensal intestinal protozoa species prevalence according to different aspects such as age and sex, we evaluated 111 feces samples from male and female individuals of all ages, living at Santa Rosa del Agua, Maracaibo, Zulia State, Venezuela. Each fecal sample was analyzed fresh, stained with lugol, and by Ritchie’s concentration test. We used ferric hematoxilin stain to identify Dientamoeba fragilis trophozoites. Species belonging to the Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar complex were differentiated through PCR techniques. Blastocytis sp. was the predominant species (45.6%), followed by Entamoeba coli (17.9%), Endolimax nana (14.8%), Chilomastix mesnili (6.2%), Entamoeba dispar (5.6%), Dientamoeba fragilis, Pentatrichomonas hominis, Iodamoeba butschlii (3.1%, respectively), and Entamoeba hartmanni (0.6%). There was parasitic affinity between the Entamoeba coli and Endolimax nana species. There was no association between presence of infection and sex. Pre-school and school age groups showed a significant association with parasite infection. A high prevalence of Blastocystis sp. and intestinal commensal species was determined, all indicative of fecal contamination, where environmental and sociocultural factors probably promote transmission. <![CDATA[<b>The amastigote stadium precedes epimastigote evolution during <i>in vitro</i> <i>Trypasnosoma cruzi</i> epimastigogenesis</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100014&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt La transformación de tripomastigotas sanguíneos de Trypanosoma cruzi en epimastigotas, ocurre naturalmente en el intestino del insecto y se identifica como epimastigogénesis. Aquí reportamos que durante la epimastigogénesis in vitro, los tripomastigotas se transforman en formas redondeadas, biológica y antigénicamente equivalentes al estadio amastigota; con un tiempo de persistencia dependiente de la altura del medio de cultivo. Formas tripomastigotas procedentes de cultivo de tejidos infectados se incubaron en envases con diferentes alturas de medio LITB (3 y 83 mm), y se compararon las cinéticas de transformación hacia epimastigotas. Para la obtención de antígenos se colectaron masas de parásitos a diferentes tiempos de diferenciación. Los cambios morfológicos, incremento del inóculo y resistencia a complemento, se estudiaron por microscopía de contraste de fases y extendidos coloreados con Giemsa. Los cambios antigénicos se analizaron mediante Western Blot usando anticuerpo IgY anti-amastigotas. Los resultados mostraron que las formas redondeadas resisten la lisis por complemento, expresan antígenos amastigota-específicos y la velocidad de transformación hacia epimastigotas depende de la altura del medio sobrenadante en el cultivo. Las evidencias sugieren que además de caída de la temperatura, una baja tensión de oxígeno disuelto y una alta densidad de parásitos por área, aceleran el proceso de diferenciación.<hr/>Transformation of blood Trypanosoma cruzi tripomastigotes into epimastigotes occurs naturally at the insect gut and is identified as epimastigogenesis. Here we report that during in vitro epimastigogenesis, tripomastigotes transform into rounded forms, biologically and antigenically equivalent to the amastigote stadium, with a persistance time which depends on the height of the culture medium. Tripomastigote forms from cultures of infected tissues were incubated in flasks with different LITB medium heights (3 and 83 mm), and kinetics of transformation to epimastigotes were compared. Masses of parasites at different differentiation times were collected for antigen production. Morphological changes, inoculum increase and resistance to complement were studied by phase contrast microscopy and Giemsa stained smears. Antigenic changes were analyzed through Western Blot using an IgY anti-amastigote antibody. Results showed that rounded forms resist lysis by complement, express amastigote-specific antigens, and that the speed of transformation to epimastigotes depends on the height of the supernatant medium in the culture. Evidences suggest that apart from a temperature fall, a low dissolved oxygen tension and a high parasite per area density accelerate the differentiation process. <![CDATA[<b><i>Sarocladium oryzae:</i></b><b> causative agent of the rotting of the rice sheath in Venezuela</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100015&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt En las zonas productoras de arroz en Venezuela se ha observado una enfermedad caracterizada por manchas oblongas e irregulares, de color marrón grisáceo, en la hoja envainadora de la panícula. El objetivo de este trabajo fue determinar cuál es el agente causal de la pudrición de la vaina del arroz en Venezuela. Se tomaron muestras de plantas de arroz variedad Venezuela 21 con las características descritas. Secciones de la interfase tejido sano-enfermo se sembraron en cajas de Petri con agar papa dextrosa y cajas de Petri con papel de filtro estéril humedecido con agua destilada estéril respectivamente, y se incubaron en el laboratorio hasta observar crecimiento de estructuras fúngicas. La identificación del hongo se realizó mediante la comparación de sus características micro y macroscópicas con las descritas en la literatura especializada. Esto permitió identificar los aislamientos como Sarocladium oryzae, y se pudo concluir que esta especie es el agente causal de la enfermedad de la pudrición de la vaina del arroz en Venezuela.<hr/>In the rice producing areas of Venezuela, a disease characterized by oblong and irregular spots of a grayish-brownish color on the sheath which covers the particle has been observed. The purpose of this work was to determine the causative agent of the rotting of the rice sheath in Venezuela. After taking samples of the rice plants of the Venezuela 21 variety with the above characteristics, sections of the interphase healthy-diseased tissue were inoculated into Petri dishes with potato-dextrose agar, and Petri dishes with sterile filter paper dampened with distilled water, and they were incubated in the laboratory until there was growth of fungal structures. The identification of the fungus was done by comparing its micro and macroscopic characteristics with those described in specialized literature. By this method it was possible to identify the isolates as Sarocladium oryzae, and it was concluded that this species is the causative agent of the rotting disease of the sheath of rice in Venezuela. <![CDATA[<b>DNA extraction from paraffin embedded samples without using xylene for HPV detection and typing</b>]]> http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-25562013000100016&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt En el presente trabajo se llevó a cabo la extracción de ADN de biopsias cervicales con informe citológico de lesión intraepitelial cervical, incluidas en bloques de parafina, utilizando el “QIAamp DNA mini kit” (QIAGEN, Alemania) y la detección del Virus de Papiloma Humano (VPH). En el procedimiento original se eliminó la incubación en xilol, reduciendo los lavados del material biológico; la calidad de los ADNs extraídos fue probada mediante PCR para la detección del gen de la β-globina y del VPH, obteniéndose 84,3% y 28,1% de positividad, respectivamente. Estos resultados fueron comparables a los de otros trabajos similares y evidencian la obtención de ADN celular amplificable por PCR a partir de muestras parafinadas, que pudo ser utilizado eficientemente en procedimientos moleculares, eliminando la toxicidad del xilol y disminuyendo la manipulación del material biológico al reducir los lavados.<hr/>In the present study, DNA from cervical biopsies with a cytological report of intraepithelial cervical lesion and embedded in paraffin blocks was extracted using the “QIAamp DNA mini kit” (QIAGEN, Germany), and the Human Papyloma Virus (HPV) was detected. In the original procedure, the xylene incubation was eliminated, therefore reducing the washes of the biological material; the quality of the DNA extracted was tested by PCR for detecting the β-globine gene and HPV, with 84.3% and 28.1% positivity, respectively. These results were comparable to those of other similar studies, and they demonstrate that it is possible to obtain PCR amplifiable cellular DNA from paraffin embedded samples which can be used efficiently for molecular procedures, eliminating xylene toxicity, and decreasing the manipulation of the biological material by reducing washes.