Boletín de Malariología y Salud Ambiental

50 Años del Boletín de Malariología y Salud Ambiental

**A review of reservoirs of Trypanosoma (Schizotrypanum) cruzi (Chagas, 1909), the etiologic agent of Chagas Disease**

Las parasitosis, circunscritas a grupos animales, como la tripanosomiasis americana o Enfermedad de Chagas, son primariamente enzootias o zoonosis, en las cuales el hombre, como ultimo eslabón de la escala zoológica, participa como un hospedador accidental dentro de la cadena de transmisión. Una de las grandes necesidades planteadas en el estudio de estas parasitosis, es el conocer los hospedadores en cada ecosistema y su rol como reservorios. En la presente revisión, se expondrán algunos puntos tratados por diferentes autores en relación a hospedadores mamíferos primarios o secundarios y su conceptualización. Se ha intentado resumir una lista de especies de mamíferos, naturalmente infectados por Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la Enfermedad de Chagas, con sus respectivas referencias originales.

Animal parasitoses, such as American trypanosomiasis or Chagas Disease, are principally enzootic diseases or zoonoses, in which humans, as the last step in the zoological chain, participate as accidental hosts in the transmission cycle. One of the great needs within the study of these parasitoses is to identify the hosts in each ecosystem where the disease is prevalent and determine their role as reservoirs. In this review, some of the issues and concepts covered by different authors in relation to primary and secondary mammalian hosts are discussed. A list of mammalian species that are naturally infected by Trypanosoma cruzi, the causal agent of Chagas disease, together with the original bibliographical references has been included.

Comparative evaluation of serologic diagnostic tests used to detect Chagas disease in Venezuela

Se presenta la valoración comparativa de 8 técnicas de uso común en el despistaje serológico de la enfermedad de Chagas utilizando muestras de pacientes de diversas procedencias del occidente de Venezuela. En el estudio fueron utilizados métodos serológicos convencionales (TAD, IFI, ELISA) y pruebas de diagnóstico comercialmente expendidas en el país (Pharmatest®, Chagatest ELISA®, Chagatest ELISA Recombinante V.3.0®, Test ELISA para Chagas III® y Chagas Stat PakTM Assay®). La comparación de los resultados no reveló diferencias estadísticamente significativas entre los niveles de sensibilidad y especificidad de las técnicas evaluadas (P>0.05). Se sugiere, para la obtención de un diagnóstico preciso, la implementación de pruebas de rutina y pruebas confirmatorias. El análisis de la relación costo-beneficio reflejó diferencias entre las técnicas evaluadas, sugiriendo su uso de acuerdo a las condiciones de servicio presentes en cada centro diagnóstico, para lo cual se proponen pruebas candidatas para la rutina y la confirmación diagnóstica. Se demuestra la disminución progresiva de reactividad, con el consecuente incremento de resultados erróneos, en una prueba comercial sometida a sucesivos cambios de temperatura en el tiempo.

The comparative evaluation of conventional serologic methods (DAT, IFAT, ELISA) and commercial tests (Pharmatest®, Chagatest ELISA®, Chagatest ELISA Recombinant V.3.0®, Test ELISA for Chagas III®, Chagas stat pakTM assay®) commonly used to detect Chagas disease is presented. Sera samples were taken from chagasic patients and controls from different rural localities of western Venezuela. Statistical comparison of the sensitivity and specificity level, revealed no-significant differences among methods (P > 0.05). To warrant a secure sero-diagnosis the implementation of a routine and a confirmatory test is suggested. The cost-benefit analysis showed significant differences among methods, suggesting its use according to the condition of each diagnostic center. Considering the results obtained in the present study a combination of candidate tests is proposed to be used either as a routine or confirmatory method according to the circumstances. The effect of thermo-shock on the loss of reactivity of a commercial test is demonstrated.

**Congenital transmission of Trypanosoma cruzi in second generation Wistar rats**

Se presentan los resultados de un estudio experimental sobre la transmisión congénita de Trypanosoma cruzi en crías de ratas albinas (Rattus norvegicus), cepa Wistar de segunda generación. El curso de la infección chagásica fue evaluado en las ratas infectadas inicialmente (RII) inyectadas con las formas metacíclicas del parásito, en las crías de la primera (C1ªG) y segunda generación (C2ªG), mediante pruebas de diagnóstico seroparasitológicas y molecular (PCR). En las RII se demostró infección aguda caracterizada por parasitemias patentes entre los 12 y 45 días post-inoculación (pi), e incremento en la respuesta inmune humoral con títulos desde 1:64 y 1:2048; en la fase crónica se evidencio ausencia de parasitemias y mantenimiento de una moderada respuesta humoral en el 100% de las madres. Las C1ªG no presentaron tripomastigotes en la sangre circulante, la prueba de IFI, reveló seropositividad apreciable en el 75% de los sueros. En las C2ªG, los exámenes directos de sangre y el hemocultivo, resultaron negativos; los xenodiagnósticos mostraron un 18,2% de positividad. Las pruebas serológicas empleadas (IFI y ELISA) detectaron un 31,8% y 34,1% anticuerpos circulantes anti-T. cruzi. La PCR aplicada a los sueros, presentó un bajo porcentaje de muestras positivas (6,8%) y en los tejidos (corazón y músculo esquelético) se observó una alta positividad de 54,5% y 45,4%, respectivamente. La presencia de formas flageladas en la sangre, la persistencia de la serología positiva por anticuerpos humorales transferidos vía materna y la permanencia de restos de ADN de T. cruzi en sueros y tejidos en un número importante de crías, confirma la infección congénita a su progenie, en segunda generación. Estos resultados son de gran importancia para una mejor comprensión de la epidemiología de la enfermedad de Chagas congénita.

The results of the experimental study concerning the congenital transmission of Trypanosoma cruzi in second generation strain Wistar albino rats are presented. The course of the Chagas infection was evaluated in rats initially infected with the metacyclic forms of the parasite (RII) in first (C1stG) and second (C2ndG) generation offspring using parasitological, serological and molecular (PCR) diagnostic tests. In the RII, an acute infection characterized by patent parasitemias between 12 and 45 days post-inoculation and an increase in the humoral immune response with titers of 1:64 and 1:2048 in the chronic phase demonstrated the absence of parasitemia and maintenance of a moderate humoral response in 100% of the mothers. The C1stG did not show tripomastigotes in the blood circulation and the IIF test showed considerable seropositive in 75% of the sera. In C2ndG, direct blood and hemoculture exams performed were negative, while 18.2% of the xenodiagnosis were positive. The serological tests used (IIF and ELISA) detected 31.8% and 34.1% anti-T. cruzi circulating antibodies. The PCR applied to the serum presented a low percentage of positive (6.8%) samples and in tissues (heart and skeletal muscle) high positives of 54.5% and 45.4% respectively were observed. The presence of flagellated forms in the blood, the persistence of serological positive for humoral antibodies transferred by the mother and the permanence of remaining DNA of the T. cruzi in serum and tissues in a significant number of offspring confirm the congenital infection to their offspring in the second generation. These results are of great importance for the better understanding of the epidemiology of Chagas disease.

**Quantitative approach to the analysis of the growth and morphometric change in populations of Leishmania chagasi and Trypanosoma cruzi maintained in pure and mixed axenic cultures**

Las relaciones que se establecen entre géneros de la familia Trypanosomatidae en condiciones de coexistencia en el mismo medioambiente pueden estar vinculadas a respuestas compensatorias inter-poblacionales que incluyen cambios morfológicos (diferentes estadios) y morfométricos (diferencias mensurables). El análisis cuantitativo de tales respuestas en cultivos axénicos puros de Leishmania chagasi y Trypanosoma cruzi, así como en isomezclas axénicas de L. chagasi-T. cruzi mantenidas in vitro, no ha sido abordado, desconociéndose por lo tanto, particularidades biológicas. Muestras interdiarias de cultivo se fijaron, colorearon, observaron, digitalizaron y procesaron cuantitativamente. Además de cuantificar las densidades poblacionales, se registraron las magnitudes numéricas de variables morfométricas que, posteriormente, se analizaron con herramientas estadísticas. Los resultados indicaron cambios específicos en las variables investigadas, así como heterogeneidad morfométrica entre los mismos morfotipos de los mismos géneros al ser mantenidos en cultivos puros o mixtos. Los modelos de cambio morfométrico de L. chagasi y T. cruzi en cultivos puros difieren de los modelos de cambio morfométrico en los cultivos mixtos (L. chagasi-T. cruzi). Las metodologías biométricas discriminan, en términos morfométricos, poblaciones del mismo estadio (morfotipo) en ambientes diferentes.

The relations established among genera of the Trypanosomatidae family in coexisting conditions in the same environment may be linked to inter-population compensatory answers that include morphological (differences among stages) and morphometrical (measurable difference) changes. The quantitative analysis of these answers in Leishmania chagasi and Trypanosoma cruzi pure axenic cultures, as well as in L. chagasi - T. cruzi axenic iso-mixtures in vitro maintained has not been approached, and consequently, potentially useful biological particularities in the control of these important human parasites are unknown. Every other day culture samples were fixed, stained, observed, digitalized and quantitatively processed. In addition to quantify, the population densities and the appearance-disappearance stage (morphotypes) dynamics, the numeric magnitudes of the morphometric variables were recorded and later analyzed with multivariate statistical techniques. The results indicate specific changes in the investigated variables, as well as morphometric heterogeneity between the same morphotypes of the same genera when maintained in pure or mixed cultivation. The morphometric change models for L. chagasi and T. cruzi in pure culture differ from the models of morphometric change in mixed cultivation (L. chagasi-T. cruzi). The biometric methodologies discriminate in morphometric terms populations of the same stage (morfotype) in different environments.

Standardization of direct agglutination test using native antigens for diagnosis of visceral leishmaniasis endemic areas of Venezuela

La leishmaniasis visceral es la manifestación clínica más severa de la leishmaniasis ya que puede ser fatal si no se administra el tratamiento adecuado. En Venezuela el foco mas activo es la isla de Margarita, donde principalmente se ven afectados niños de 0 a 9 años. De ahí la importancia de un diagnostico temprano, a menudo difícil en las áreas endémicas. Si bien la prueba de oro para el diagnostico de leishmaniasis visceral es la detección directa de los parásitos, la toma de muestra es bastante invasiva e incomoda para el paciente. Más aún, la mayoría de estas técnicas son costosas, complejas y de larga ejecución. Otros métodos indirectos, como la ELISA (usando antígenos crudos o definidos del parásito) requieren de equipos y personal especializados; lo cual es difícil de cubrir en las zonas endémicas. Recientemente validamos en Venezuela, el uso de una técnica de aglutinación directa (KIT Biomedical Research) evidenciándose una elevada sensibilidad y especificidad. El antígeno empleado en esta prueba es Leishmania donovani. Sin embargo, en nuestro país el agente causal de esta parasitosis es Leishmania infantum (syn. Leishmania chagasi). Otro aspecto a considerar es la variación antigénica regional que sufre un parásito al interactuar con el vector local y con factores del hospedero; además del costo; por lo tanto desarrollamos una prueba de aglutinación directa un antígeno de L. infantum (syn. L. chagasi) obtenido de perros de la isla de Margarita. Éste se comparó con la prueba comercial, ensayando sueros de pacientes de leishmaniasis visceral confirmados y controles. Empleando como patrón de oro el ELISA con rK39, obtuvimos en ambos una sensibilidad del 100%; y una especificidad del 82,85 % para la prueba comercial y 98,78% para el nuestro, lo cual pone en manifiesto la relación específica entre los anticuerpos de pacientes venezolanos y el antígeno predominante del país.

Visceral leishmaniasis is the most severe form of leishmaniasis, and it is deadly if left untreated. Margarita Island is the most active visceral leishmaniasis focus in Venezuela, where most of the affected population are children between 0 to 9 years old. Therefore, an early diagnosis is very important, unfortunately, this is difficult in endemic areas. Although, the gold standard method for visceral leishmaniasis diagnosis is parasite detection; the sample retrieval is very inconvenient for patients. Moreover, most techniques are time-consuming, expensive and difficult to carry out. Other indirect methods, such as ELISA (using crude or define Leishmania antigens), require specialised technicians and equipment, which is unsuitable in the field areas. Recently we validated the performance of a direct agglutination test for the diagnosis of visceral leishmaniasis in Venezuela (KIT Biomedical Research). It showed elevated sensitivity and specificity. Nevertheless, this test includes Leishmania donovani as antigen, whereas visceral leishmaniasis in our country is caused by Leishmania infantum (= L. chagasi). Moreover, parasite antigenic variation as a result of vector-parasite and host-parasite interaction is an important factor to be considered; in addition to the costs. Therefore, we developed a direct agglutination test using L. infantum (syn. L. chagasi) isolated from a naturally infected dog of Margarita Island. This was compared to the available commercial kit, and testing confirmed visceral leishmaniasis patients and healthy controls. Using rK39 ELISA as gold standard, it was found 100% sensitivity for both tests, and 82.85 % specificity for the commercial test and 98.78% for the local one, which shows the relationship between dominant local antigens and antibodys specificity displayed by Venezuelan patients.

Incidence of symptomatic and asymptomatic dengue virus infections in Maracay, Venezuela: 2006 - 2007

Con el objetivo de estimar las tasas de incidencia de infecciones sintomáticas y asintomáticas por virus dengue (DENV) durante un año (octubre 2006-septiembre 2007) en cuatro barrios de Maracay (Venezuela) se realizó un estudio prospectivo consistente de visitas domiciliarias, tres veces por semana, para detectar casos de dengue y de encuestas serológicas semestrales para determinar infecciones asintomáticas probables por DENV. Los sujetos de estudio pertenecían a una cohorte de 2663 personas ≥5 años de edad. El diagnóstico confirmatorio de DENV se realizó mediante la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (RT-PCR). Las pruebas serológicas se realizaron mediante el ensayo inmunoenzimático de captura de IgM anti-dengue (MAC-ELISA). Los resultados determinaron tasas de incidencia de 5,7 y 18,6 por 100 000 personas/día (p/d) para las infecciones sintomáticas y asintomáticas, respectivamente. La tasa de incidencia de las infecciones sintomáticas observada en las personas <15 años de edad fue significativamente mayor que la encontrada en los sujetos ≥15 años (15,8 versus 2,9 por 100 000 p/d). Por otro lado, las tasas de incidencia de las infecciones asintomáticas en ambos grupos de edad fueron similares (17,3 y 18,9 por 100 000 p/d, respectivamente). Se detectaron los cuatro serotipos del DENV en tres de los barrios estudiados. Se observó que la edad y la hiperendemicidad fueron probablemente los factores que más contribuyeron a la incidencia del dengue en los cuatro barrios investigados. Seguramente, las infecciones asintomáticas contribuyeron a incrementar la transmisión viral en el área de estudio.

The incidence rates of symptomatic and asymptomatic dengue virus (DENV) infections in four "barrios" of Maracay, Venezuela, during one-year (October 2006-September 2007) were estimated. A prospective study consisting of house visits three-times a week to detect dengue cases, and semiannual serological surveys to determine probable asymptomatic dengue virus (DENV) infections was conducted. The study subjects belonged to a cohort of 2,663 people ≥5 year-old. Confirmatory diagnosis of DENV infections was carried out by reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). Serological surveys were performed by anti-dengue IgM-capture immunoassay (MAC-ELISA). The results showed that the incidence rates for symptomatic and asymptomatic infections were determined to be 5.7 and 18.6 per 100,000 persons/day (p/d), respectively. The incidence rate of symptomatic infections was significantly higher in persons <15 year-old than that found in subjects ≥15 years (15.8 versus 2.9 per 100,000 p/d). On the other hand, the incidence rates of asymptomatic infections in both age groups were similar (17.3 and 18.9 per 100,000 p/d, respectively). All four DENV serotypes were detected in three of the four "barrios" studied. Finally, age and hyperendemicity were probably the contributing factors to the incidence of dengue in the four "barrios" investigated. Surely, the asymptomatic infections contributed to increase the viral transmission in the study area.

**Enzymatic diversity of enzymes in the soluble fraction of adult worms from a Venezuelan isolate of Paragonimus sp**

Paragonimus sp. es un trematodo que causa inflamación crónica del pulmón en mamíferos carnívoros y en el hombre, constituyendo un problema de salud pública en países asiáticos y latinoamericanos. Los trematodos poseen enzimas que facilitan la penetración y migración en diferentes hospederos a fin de garantizar su ciclo evolutivo. Con el objetivo de evaluar la diversidad enzimática de la fracción soluble (FSPA, 100.000 g) de un aislado venezolano de adultos de Paragonimus sp. se realizaron determinaciones enzimáticas a diferentes pH, usando curvas de calibración (A 405 nm vs. nmol) para interpolar la absorbancia de grupos p-nitrofenol o p-nitroanilina liberados por la hidrólisis de sustratos sintéticos; se utilizaron también sustratos 2-naftilamídicos y 2-naftólicos para determinar esterasas, peptidasas, fosfomonoesterasas y glicosidasas. Se demostró que fosfohidrolasas, glicosidasas y peptidasas están presentes en la FSPA, destacándose la β-NAG (0,55 μmol/h/mg, pH 5,5) y la cistein proteasa (0,4 μmol/h/mg, pH 5,5) como las actividades más elevadas, señalando la importancia funcional de la actividad glicosídica y peptídica en este parásito, las cuales están probablemente relacionadas con su hábitat y su necesidad de degradación de secreciones pulmonares. Estos resultados representan los primeros estudios enzimáticos registrados en vermes adultos de un aislado venezolano de Paragonimus sp. obtenidos del reservorio Didelphis marsupialis.

Paragonimus sp. is a trematode that causes chronic inflammation of the lung in carnivorous mammals and humans, which constitute a public health problem in Asian and Latin American countries. Trematodes have enzymes that facilitate their penetration and migration through different host organs to ensure their life cycle. To evaluate the enzymatic diversity of the soluble fraction (FSPA, 100,000 g) of a Venezuelan isolate of Paragonimus sp. adult worms, several enzyme determinations were conducted at different pH. The activities of enzymes releasing p-nitrophenol or p-nitroanilina from the corresponding dye-related synthetic peptides were assessed by interpolating absorbance (A 405 nm) values in the corresponding calibration curve (A 405 nm vs. nmol); on the other hand, absorbances of 2-naphtylamine and 2-naphtols released from another series of synthetic substrates were read at different wavelengths between 450 nm and 620 nm to assess for the activity of the corresponding hydrolases. Phosphohydrolase, glycosidase and peptidase activities were detected in FSPA, β-N-acetyl-β-D-glucosaminidase (0.55 μmol/h/mg, pH 5.5) and cystein protease (0.4 μmol/h/mg, pH 5.5) being higher than all the other detected activities. These activities are probably related to the adult worm habitat and its need for glycan and peptide degradation of lung secretions. These results represent the first enzymatic study done with a Venezuelan isolate of adult Paragonimus sp. worms collected from the common reservoir Didelphis marsupialis.

Trypanosoma cruzi **infection and cytochrome b polimorphism of mitochondrial dna in Triatoma maculata of Anzoátegui and Portuguesa states, Venezuela**

Con el fin de entender la dinámica poblacional de Triatoma maculata, se analizó el polimorfismo genético y los índices de infección con Trypanosoma cruzi, utilizando triatominos provenientes de ecotopos y regiones geográficas diferentes. El índice de infección parasitaria para T. maculata, fue de 29.8% a través de la observación directa al microscopio y 40.3% utilizando el método de reacción en cadena de la polimerasa. Los niveles de infección encontrados incrementan la importancia de T. maculata como vector involucrado en el ciclo de transmisión de T. cruzi. El análisis del polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción de una región del gen Cyt B, permitió establecer en forma preliminar, diferencias en los patrones de bandas de este gen, según el origen geográfico de cada población. Esto puede asociarse a cambios relacionados con procesos adaptativos involucrados en la colonización de nuevos hábitats. No se observó variación genética para vectores capturados en diferentes ecotopos de una misma localidad. Sin embargo es evidente la participación del vector en el ciclo de transmisión, mostrando que la presencia de T. maculata en las casas no puede ser ignorada.

In order to understand more about the populational dynamics of Triatoma maculata, the genetic polimorphism and the infection indexes of Trypanosoma cruzi were analysed, using triatomine obtained from different ecotopes and geographical regions. The parasitic infection index of T. maculata was 29.8% using the microscope direct observation, and 40.3% by the polymerase chain reaction method. Both methods were important for epidemiological screening of the vectors with low potential of infection. The amplification of one region the Cyt B gene of these organisms, followed by a restriction fragments length polymorphism analysis, allowed us to establish different patterns of bands according to the geographic origin of each population, which indicates the lack of migration between individuals of Portuguesa and Anzoátegui states. These genetic differences may be associated with changes in adaptative events involved in the colonization of new habitats. The lack of polymorphism among vectors collected in different habitats of the same region showed an important genetic flow which has epidemiological implications in the risk of transmission of the disease, showing that the presence of T. maculata in houses cannot be ignored.

Ecological characterization of anophelines and culicines in the indigenous territory of the Lower Caura River, Bolívar State, Venezuela

Se reporta por primera vez una lista de especies de anofelinos y culicinos presentes en el territorio indígena del Bajo Caura, estado Bolívar. Entre larvas y adultos se colectaron en total ocho especies de anofelinos pertenecientes a los subgéneros Anopheles Meigen, Lophopodomyia Antunes, Stethomyia Theobald, Nyssorhynchus Blanchard del género Anopheles Meigen y Chagasia bathana Dyar y 10 géneros de culicinos entre los cuales se identificaron siete especies. Se identificaron y caracterizaron los criaderos con base a la hidrología en arroyo, caño, manantial, laguna, pantano y charco. En colectas de estadíos inmaduros la especie más abundante fue Anopheles triannulatus (Neiva & Pinto), mientras que en colectas de adultos con cebos humanos y trampas CDC la especie más abundante fue el vector de malaria An. darlingi Root. Las trampas de luz ultravioleta resultaron ineficientes para capturar anofelinos y culicinos. Se reporta por primera vez para el estado Bolívar los géneros Coquillettidia Dyar y Johnbelkinia Zavortink, así como las especies Aedes (Ochlerotatus) fulvus (Wiedemann) y Ae. (Och.) serratus (Theobald).

This is the first report of anophelines and culicines species in the indigenous territory of the Lower Caura River, Bolívar State. A total of 8 species of anophelines belonging to the subgenus Anopheles Meigen, Lophopodomyia Antunes, Stethomyia Theobald, Nyssorhynchus Blanchard of the genus Anopheles Meigen and Chagasia bathana Dyar and 10 genera of culicines were collected and 7 species identified. Larval habitats were identified and characterized based on the hidrology in stream, small river, spring, lagoon, swamp and pool. Culicines were also collected in artificial and natural containers. The most abundant species in collections of inmature stages was Anopheles triannulatus (Neiva & Pinto), while in adult collections on human landing catches and CDC light traps the most abundant species was the malaria vector An. darling Root. Ultra violet up draft light traps were inefficient to collect anophelines and culicines. It is reported for the first time the presence in Bolívar State of the genus Coquillettidia Dyar and Johnbelkinia Zavortink, and the species Aedes (Ochlerotatus) fulvus (Wiedemann) and Ae. (Och.) serratus (Theobald).

**Evaluation of the persistence of a comercial formulation of Bacillus sphaericus in malaria vectors anopheline larval hábitats in Bolívar state, Venezuela**

El municipio Sifontes del estado Bolívar es la principal área endémica a malaria de Venezuela. Durante los últimos cinco años se ha reportado en este municipio un promedio anual cercano a 15 mil casos, alcanzándose durante 2009 la cifra de 20.282, lo que constituye una situación de epidemia. En este municipio se evaluó la persistencia de una formulación comercial de Bacillus sphaericus Neide (Vectolex CG 7,5%) en criaderos naturales de Anopheles marajoara, An. triannulatus y An. braziliensis. Para ello se realizaron dos experimentos en los cuales se evaluaron las dosis de 2 y 3 gr/m2 durante 60 y 90 días. Los resultados indican que hay diferencias en la persistencia por tipo de criadero y especie de anofelino. La tendencia general para todas las especies indica que el porcentaje de reducción de la población larvaria fue de 100% durante la primera semana, luego disminuyó paulatinamente hasta más o menos 40% después de los 28 días, para luego recuperarse a alrededor de 60% a los 45 días, manteniéndose así hasta el día 90 con ambas dosis. Este comportamiento es más evidente para An. marajoara, mientras que con An. triannulatus la eficacia se mantiene alrededor de 80% durante 90 días con 3 gr/m2. Sobre An. braziliensis, la eficacia se mantiene en 100% hasta el día 14 con ambas concentraciones, para luego caer abruptamente sin recuperación. Es la primera vez que se evalúa B. sphaericus sobre estas especies de anofelinos en Venezuela, considerándose estos resultados muy prometedores para el control de vectores.

Sifontes municipality in Bolivar state is the main malaria endemic area in Venezuela. During the last five years an annual average of 14,000 cases has been reported, reaching 13,450 during 2008, resulting in an epidemic situation. A commercial formulation of Bacillus sphaericus Neide (Vectolex CG 7.5%), was evaluated in larval habitats of Anopheles marajoara, An. triannulatus and An. braziliensis. Two experiments were carried out in a lagoon and a pasture inundated area, 2 and 3 gr/m2 doses were evaluated during 60 and 90 days. The results point out that there are differences in the persistence depending on the type of larval habitat and anopheline species. The general trend indicated that for all the species the persistence of the Vectolex, therefore the reduction of the larval population was 100% during the first week. However, it felt under 40% after day 28, then recovered by day 45, and remaining around 40% for 90 days with both doses. A similar pattern was observed for An. marajoara, whereas for An. triannulatus the efficacy remained around 80% during 90 days only at 3 gr/m2. With An. braziliensis there was 100% persistence until day 14 with both doses, for then felt abruptly without recovering. This is the first time that B. sphaericus was evaluated for these anopheline species in Venezuela, considering these results promissory for the malaria control program.

Toxicity by organophosphate insecticides of fumigators working on the dengue control campaign in Aragua state, Venezuela, 2008

Un estudio descriptivo sobre las condiciones de salud y su relación con la exposición a plaguicidas, de los "fumigadores" de la campaña contra el dengue en el estado Aragua, fue realizado en una muestra no probabilística de 50 trabajadores, a los cuales se les aplicó una encuesta para investigar: características personales y de trabajo, conocimientos sobre insecticidas y enfermedades asociadas, además de inspeccionar locales, equipos y condiciones de trabajo. De la muestra general, 28% resultaron fumadores. Los grados de instrucción predominantes fueron primaria y secundaria (44%). El promedio de años como fumigador fue de 14,3. Sólo 40% tiene conocimiento de enfermedades producidas por organofosforados, 62% presentó antecedentes de intoxicación. 30% refirieron presentar enfermedades cardiovasculares, gastrointestinales y neurológicas. A mayor cantidad de años de labor, mayor la intensidad de signos y síntomas llegando a producir enfermedades. 38% de los niveles de Acetilcolinesterasa medidos, resultaron alterados. Las variables: grupo de edad, grado de instrucción, fumar, años de labor, falta de conocimiento de enfermedades y antecedentes de intoxicación, se asociaron a valores anormales de colinesterasa, sin presentar significancia estadística (P>0,05). La selección de los trabajadores, su capacitación, dotación de equipos y materiales adecuados, su vigilancia clínica epidemiológica, su evaluación permanente y su respectivo tratamiento deben ser revisados y tenidos en cuenta por la Corporación de Salud del estado Aragua (CORPOSALUD), haciéndolas, normas de obligatorio cumplimiento.

A descriptive study on the conditions of health and their relation to the exhibition to pesticides, and of the "fumigators" of the campaign against dengue in the Aragua state, sampled 50 workers, to whom a survey was applied to investigate: personal characteristics of work, knowledge on insecticides and diseases, besides an inspection the premises, equipment and work environment. From this general sample 28% were smokers. The predominant educational level was elementary school and high school (44%). The fumigator average of working years was of 14.3. Only 40% had knowledge of diseases produced by organophosphate, 62% presented poisoning antecedents. 30% claimed to display cardiovascular, gastrointestinal and neurological diseases. The greater the number of work years, the greater the intensity of signs and symptoms of associated diseases. 38% of the measured levels of acetylcholinesterase were altered. The variables: smoking, years of work, educational level, age group and the lack of knowledge of diseases and intoxication antecedents were associated with abnormal values of acetylcholinesterase, without showing statistical significance. The selection of the workers, their qualification and suitable equipment and materials, their clinical epidemiologic monitoring, their permanent evaluation and respective treatment must be reviewed and taken into account by CORPOSALUD (Corporación de Salud del estado Aragua), making them norms of obligatory fulfillment.

Clinical, epidemiological and treatment aspects of five cases of sea urchin envenomation in Adicora, Paraguaná peninsula, Falcón state, Venezuela

Se realizó un estudio descriptivo y prospectivo para analizar aspectos clínicos, epidemiológicos y de tratamiento de los envenenamientos ocasionados por erizos de mar (Equinodermata) en Adícora, Península de Paraguaná, estado Falcón, Venezuela. Entre Diciembre 2006 y Diciembre de 2007, se atendieron los pacientes que se presentaron en la emergencia ambulatoria por heridas de erizos de mar. Se hizo evaluación clínica e interrogatorio. El tratamiento consistió de aplicación tópica de solución antiséptica yodada; anestésico local, analgésico antiinflamatorio endovenoso, antibiótico terapia per os y toxoide tetánico. Se registró 1 (20%) individuo herido por Lytechinus variegatus (Lamarck, 1816) y 4 (80%) por Echinometra lucunter (Linneaus, 1758), todos los casos eran turistas foráneos: 4 (80%) varones y 1 (20%) del sexo femenino, siendo 3 (60%) niños escolares y 2 (40%) adultos jóvenes. Los accidentes ocurrieron durante los meses de Febrero (3/5; 60%), Agosto (1/5; 20%) y Junio (1/5; 20%), mayormente en horas vespertinas (80%) durante actividades recreativas. Los pacientes asistieron a la emergencia ambulatoria entre 10 a 15 minutos después del accidente, con un tiempo promedio de12 ± 2,74. Las heridas punzantes se presentaron de forma de "puntos negros" con 1-8 espinas, siendo localizadas todas en los miembros inferiores. Las manifestaciones clínicas observadas fueron: dolor intenso, eritema y edema, en 100% de los casos. Se obtuvo una evolución postratamiento satisfactoria entre 20-45 minutos. Los envenenamientos por erizos de mar en Adícora, estado Falcón, Venezuela, se presentaron en una frecuencia baja, con manifestaciones clínicas a nivel local, requiriendo tratamiento sintomático, las cuales si se atienden a tiempo y se retiran las espinas evolucionan sin complicaciones.

A descriptive and prospective survey was conducted to investigate epidemiological, clinical and treatment profiles on injuries caused by sea urchins (Equinodermata). Between December 2006 and December 2007, patients with sea urchin injuries were attended in ambulatory emergency facilities at Adicora, Falcón state, Paraguaná peninsula, a semiarid north-western region from Venezuela. Subjects were clinically examined and interrogated. Treatment consisted of application of topical antiseptic povidona-iodine solution; local anesthetic, anti-inflammatory analgesic administered intravenously, antibiotic therapy per os and tetanus inmunization. Envenomations by the green sea urchin Lytechinus variegatus (Lamarck, 1816) (n=1, 20%) and the black sea urchin Echinometra lucunter (Linneaus, 1758) (n=4, 80%) were recorded. Visitors were involved in all cases: 4 (80%) males and 1 (20%) female, being 3 (60%) scholar age children and 2 (40%) young adults. The accidents occurred during February (3/5; 60%), August (1/5; 20%) and June (1/5; 20%), in the afternoon (80%) when individuals were bathing or swimming at the beach. The time between ambulatory medical assistance and the accident varied from 10 to 15 minutes, with a mean time of 12 ± 2.74. The puncture injuries were located on the lower limbs in all patients, with 1 - 8 spines. Clinical manifestations observed were: intense pain, edema and erythema in all cases, with no systemic compliance. All patients had a satisfactory post -treatment evolution, between 20 to 45 minutes. Injuries by sea urchins in Adicora, Paraguaná peninsula, Falcón state, Venezuela, appeared with a low frequency and local manifestations, requiring symptomatic treatment. Lesions with immediate medical treatment and the complete removal of spines evolved with no complications.

Orally transmitted Chagas disease: epidemiological connection of the index case with an urban outbreak in Venezuela

Se describe el proceso de investigación clínico-epidemiológica y de laboratorio que permitió establecer el nexo entre un caso de Enfermedad de Chagas en fase aguda aislado y una comunidad escolar urbana, así como la estrategia de diagnóstico y tratamiento de una emergencia médica para evitar mayor severidad clínica y mortalidad.

The clinical, laboratory and epidemiological investigations that established the connection between the index case of an acute episode of Chagas disease and an orally acquired outbreak in an urban school in Caracas are described. The strategy used for early diagnosis and treatment of this medical emergency prevented major clinical severity and mortality.

Aedes albopictus (Skuse, 1894): current status and records of an important invasive mosquito species in Spain

Since the first detection of Aedes albopictus (Skuse, 1894) in Spain in 2004 the expansion of this invasive mosquito (Diptera, Culicidae) has been constant through the East of the Iberian Peninsula. All the geo-referenced species records are provided together for the first time in this work. The potential negative implications for the public health as well as the Spanish and European management against the species are also briefly discussed.

Desde la primigenia detección de Aedes albopictus (Skuse, 1894) en España, la expansión de esta especie de mosquito (Diptera, Culicidae) ha sido constante a través del este de la Península Ibérica. En el presente trabajo se reportan por primera vez todos los hallazgos de la especie en España debidamente geo-referenciados. Las implicaciones negativas del establecimiento y expansión de esta especie para la salud pública, así como las principales directrices nacionales y europeas en la lucha contra este vector son también discutidas.

Sentinel surveillance of mosquitoes (Culicidae) using larvitraps in the department of Atlántico (Colombia) 2004-2008

El departamento del Atlántico reúne factores de riesgo para las Enfermedades de Transmisión Vectorial (ETV). Se informa sobre especies de culícidos registradas a través de un sistema de vigilancia entomológico basado en larvitrampas colocadas en áreas urbanas y periurbanas en el departamento del Atlántico - Colombia durante los años 2004 a 2008. Se obtuvo información semanal del material entomológico recolectado en catorce larvitrampas ubicadas en el aeropuerto internacional (2004-2008), cuatro larvitrampas del terminal de transporte (2007-2008) en el municipio de Soledad y diez larvitrampas ubicadas en el batallón militar (2005-2008) del municipio de Malambo. Se recolectaron 83.369 larvas de culícidos: 37.370 (45%) para el aeropuerto internacional, 35.376 (42%) para el terminal de transporte y 10.623 (13%) para el batallón militar. Aedes aegypti fue la especie más abundante (89,21%), seguido de Culex nigripalpus (3,45%), Culex quinquefasciatus (2,46%), Haemagogus equinus (2,25%), Culex coronator (1,19%), Uranotaenia lowii (0,91%), Culex stigmatosoma (0,52%) y Aedes taeniorhynchus, Anopheles albimanus, Toxorhynchites spp con el 0,01% respectivamente. Se confirma la presencia de especies vectoras en áreas urbanas y periurbanas del departamento del Atlántico; es necesario mantener un sistema de vigilancia entomológico continuo que permita tomar medidas de prevención y control a tiempo.

The department of Atlántico presents risk factors for the transmission of vector-borne diseases. The objective of this paper was to report Culicidae species using an entomological system of surveillance based in larvitraps located in urban and periurban areas in the department of Atlántico - Colombia between 2004 and 2008. It was obtained weekly with information of the entomological material collected in fourteen larvitraps located in the international airport (2004-2008) and in four larvitraps placed in the transport terminal (2007-2008) in the municipality of Soledad and in ten larvitraps settled in the army battalion (2005-2008) in the municipality of Malambo. 83.369 mosquitoes larvae (Culicidae) were collected: 37.370 (45%) from the airport, 35.376 (42%), from the transport terminal and 10.623 (13%) from the army battalion. Aedes aegypti was the most abundant species (89,21%), followed by Culex nigripalpus (3,45%), Culex quinquefasciatus (2,46 %), Haemagogus equinus (2,25%), Culex coronator (1,19%), Uranotaenia lowii (0,91%), Culex stigmatosoma (0,52%) and Aedes taeniorhynchus, Anopheles albimanus, Toxorhynchites spp with 0.01 % respectively. It is necessary to maintain a permanent entomological surveillance system in urban and periurban areas of the department of Atlántico, in order to take prevention and control measures on time.

Record of Lutzomyia longipalpis sensu lato associated with a cave, wildlife refuge (State Falcón, Peninsula Paraguaná Venezuela)

Especies del complejo Lutzomyia longipalpis, con distribución neotropical, son los principales vectores de la leishmaniasis visceral. En Venezuela, dos especies del complejo son señaladas Lu. longipalpis sensu lato (especie C2) con distribución al Norte del Orinoco (mayoritariamente), y Lu. pseudolongipalpis (distribuida en el estado Lara). Sin embargo, en este trabajo se señala por primera vez la ocurrencia de ejemplares de este complejo de flebotomíneos, en la región más septentrional del país, la Península de Paraguaná, y en asociación con murciélagos cavernícolas, basado en la colecta de individuos adultos machos.

Lutzomyia longipalpis species complex with neotropical distribution are the main vectors of visceral leishmaniasis. In Venezuela, and the two species of the complex are designated L. longipalpis sensu lato (C2 species) with a distribution north of the Orinoco (mostly) and L. pseudolongipalpis (distributed in Lara state). However, this study shows for the first time the occurrence of specimens of this complex of sand fly in the northernmost region of the country, the Paraguaná Peninsula, and in association with cave bats, based on the collection of sandfly adult males.