Boletín de Malariología y Salud Ambiental

Emergence of the Zika virus in Latin America and the control of Aedes Aegypti

El virus del Zika (VZIK) es uno de los varios arbovirus transmitidos por mosquitos que han emergido rápidamente a escala global en ambiente urbano en los últimos años. En latinoamérica, la epidemia se ha superpuesto a la del reciente virus emergente del chikungunya (VCHIK) y a los 4 (cuatro) serotipos endémicos del virus del dengue (VDEN), determinando que en la región circulen actualmente seis infecciones virales transmitidas por Aedes aegypti (Linnaeus 1762). La epidemia actual del VZIK comenzó en Brasil y se ha extendido a 60 países/territorios en el continente, infectando a más de 2 millones de personas, y demostrando la poca preparación de la región para enfrentar epidemias emergentes. Las altas abundancia de Ae. aegypti en ambiente urbano sin duda alguna explican, entre otros factores, el aumento y expansión explosiva actual del VZIK, hecho que a su vez refleja el fracaso de los programas de control vectorial en Latinoamérica. Sin embargo, aún sin una vacuna antiviral, el control y manejo integrado del vector es la única opción disponible y adecuada para prevenir y mitigar el impacto de las infecciones causadas por los virus del Zika, chikungunya y dengue.

Zika virus is up till now another mosquito-borne virus (arbovirus) that is rapidly emerging in an urban setting, on a global scale. In the Americas, it has emerged on the heels of a recent chikungunya epidemic. Therefore, currently, there are 6 (six) viral infections circulating and transmitted by Aedes aegypti in the continent if we include the 4 (four) endemic serotypes of dengue. A Zika epidemic that began in Brazil in 2015 has now spread rapidly to more than 60 countries in the Americas and the Caribbean, infecting more than 2 million inhabitants. The continuous discovery of the ways of transmission and the clinical and epidemiologic expressions of this virus show the complexity of the virus-host-mosquito interactions. This epidemic currently continues unabated and is partially explained by the high populations of Ae. aegypti that the virus found in the urban settings. Integrate vector management program have been ineffective in control this mosquito in the region; however, they are currently the only way of alleviating the impact of the Zika virus on the health of people in Latin America.

A new Aedes from Ecuador and the updating of the genus for the Country

Se registra por primera vez en el Ecuador Aedes (Howardina) eleanorae Berlin, con base en ejemplares colectados en fase de larvas en la Reserva Biológica Colonso-Chalupas, Napo, Amazonía ecuatoriana. Ae. eleanorae es la octava especie bromelícola del subgénero Howardina reportada para Ecuador y la segunda para la Reserva Biológica. Adicionalmente, se muestra una actualización de la biodiversidad del género Aedes para el país y una generalidad de su distribución regional. El género Aedes presenta una riqueza de 24 especies presentes en las cuatro bio-regiones del país, siendo mayor la diversidad en la región Amazónica, seguida de la Sierra -incluyendo ambas vertientes- y la Costa. Una especie presenta estricta distribución costera, dos especies han sido introducidas en Galápagos y cuatro poseen amplia distribución. Aedes aegypti y Ae. taeniorhynchus, introducidas en Galápagos son de gran importancia como vectores de patógenos al humano, animales silvestres y de riesgo para la biodiversidad insular.

It is recorded for the first time in Ecuador Aedes (Howardina) eleanorae Berlin, based on specimens collected as larvae Biological Reserve Colonso-Chalupas, Napo, Ecuadorian Amazon. Ae. eleanorae is the eighth bromelicolous species of the subgenus Howardina reported for Ecuador and the second for Biological Reserve. In addition, an update of the biodiversity of the genus Aedes for the country and the regional distribution is shown. The genus Aedes presents a richness of 24 species in the four bio-regions of Ecuador, with a greater diversity in the Amazon region, followed by both sides of Andean slopes (Sierra and the Coast). One species has strict coastal distribution, two species have been introduced into Galapagos and four have wide distribution. Aedes aegypti and Ae. taeniorhynchus, introduced in Galapagos are of great importance as vectors of pathogens to human and wildlife and represents a risk for its biodiversity.

Circulation of Chikungunya virus in Aragua state (Venezuela) during the year 2014

El virus chikungunya (CHIKV) es un Alfavirus causante de la fiebre chikungunya (CHIKF). En Venezuela, una región desprovista de inmunidad contra CHIKV y con presencia de Aedes aegypti y Aedes albopictus, el primer caso importado fue reportado por las autoridades sanitarias en junio de 2014. Por la relevancia del hecho, se analizaron 94 muestras de pacientes febriles que acudieron a los centros de salud públicos y privados del estado Aragua entre enero y diciembre de 2014, mediante la detección de los fragmentos de los genes nsP4 (Alfavirus) y E1 (CHIKV) utilizando técnicas moleculares, como Transcripción Reversa acoplada a Reacción en Cadena de la Polimerasa (RT-PCR) y/o secuenciación nucleotídica. Los resultados indicaron positividad en 19,2 % de las muestras analizadas. Se vieron afectados pacientes con edades entre 6 y 66 años, con predominio del sexo femenino (12/18). Clínicamente, todos los pacientes positivos a CHIKV manifestaron signos y síntomas asociados a CHIKF, tales como fiebre (18/18), artralgia (18/18) y erupción (16/18), entre otros. A pesar de que la positividad puede considerarse baja con relación a lo reportado en otras comunidades, este estudio representa el primer reporte local de detección molecular de CHIKV en Venezuela (estado Aragua) durante el año 2014.

Chikungunya virus is an Alphavirus that causes chikungunya Fever (CHIKF). In Venezuela, a region devoid of immunity against CHIKV and presence of Aedes aegypti and Aedes albopictus. The first imported case was reported by health authorities in June 2014. The relevance of the fact, 94 samples of febrile patients who came to the centers of public and private health Aragua state between january and december for detection of the nsP4 (Alphavirus) and E1 (CHIKV) fragments were analyzed by molecular techniques (Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction and/or nucleotide sequencing). The results showed 19.2 % of positivity by CHIKV. Clinically all CHIKV positive patients showed signs and symptoms related with CHIKF, such as fever (18/18), arthralgia (18/18) and rash (16/18), among others. Were affected patients between the ages of 6 and 66 years with a predominance of the female sex (12/18). Although the positivity may be considered low compared to those reported in other communities, this represents the first local report of molecular detection of CHIKV in Venezuela (Aragua state) during 2014.

The bloodsucking biting midges Culicoides (Diptera: Ceratopogonidae) of Yaracuy state, Venezuela

Se presenta una lista comentada y clave para la identificación de 19 especies de Culicoides colectados en el estado Yaracuy, Venezuela. Se presentan dos nuevos registros para el estado C. heliconiae Fox y Hoffman, 1944 y C. jamaicensis Edwards, 1922.

Commented list and a key to for identification of 19 species of Culicoides collected in Yaracuy state, Venezuela. Are presented two new records for the state, C. heliconiae Fox and Hoffman, 1944; C. jamaicensis Edwards, 1922 are reported.

Aspects of the bionomics of three phlebotomine vector species (Diptera: Psychodidae) at El Carrizal, an endemic focus of cutaneous leishmaniasis (CL) in the Venezuelan Andean Region

We studied some aspects of the bionomics of phlebotomine vectors of cutaneous leishmaniasis (CL) at El Carrizal, Municipality Tovar, Venezuela: Lutzomyia youngi, Lutzomyia spinicrassa and Lutzomyia migonei. Monthly catches were performed throughout 2008 using CDC and Shannon traps. We investigated: (i) species richness, (ii) relationships richness-traps-habitats (domestic, peri-domestic and forest), (iii) monthly fluctuations and relationship with climatic variables, (iv) relationship climatic factors-cutaneous leishmaniasis cases at El Carrizal and Municipality Tovar (2000-2008). Females in the Verrucarum group and males of Lu. youngi prevailed. Catches with CDC revealed the predominance of Lu. migonei outdoors where probably they maintains cutaneous leishmaniasis transmission, while females in the Verrucarum group would contribute to maintain it indoors. The greatest abundance of the three species occurred in November after the heaviest peak of rains. The correlation species-climate for Lu. migonei indicated that temperature seems a limiting factor and precipitation a favouring factor, which agreed with results obtained through Ecological Niche Modelling of this species over 23 records at national level. The correlation cutaneous leishmaniasis incidence-climate showed that the greatest number of cases tends to occur, with a month lag, in the months of most rainfall. These data may support the Ministry of Health, since they provide robust information about "when", "where" and "how" to implement target phlebotomine vectors control methods in the Andean Region of Venezuela.

Se estudiaron algunos aspectos de la bionomía de vectores de leishmaniasis cutánea en la localidad El Carrizal, Municipio Tovar, Venezuela: Lutzomyia youngi, Lutzomyia spinicrassa y Lutzomyia migonei. Las capturas mensuales se realizaron a lo largo del año 2008 usando trampas CDC y Shannon. Se investigó: (i) riqueza de especies, (ii) relaciones riqueza-trampa-hábitat (doméstico, peri-doméstico y selvático), (iii) fluctuaciones mensuales y relación con variables climáticas, (iv) relación factores climáticos-casos de leishmaniasis cutánea en El Carrizal y Tovar (2000-2008). Predominaron las hembras del grupo Verrucarum y los machos de Lu. youngi. Las capturas con CDC revelaron el predominio de Lu. migonei en el habitat peridoméstico donde probablemente mantienen la transmisión, mientras que las hembras del grupo Verrucarum contribuirían a mantenerla dentro de las casas. La mayor abundancia de las tres especies ocurrió en noviembre después del pico más alto de lluvias. La correlación especie-clima para Lu. migonei indicó que la temperatura parece ser un factor limitante y la precipitación un factor favorecedor, lo cual coincidió con los resultados obtenidos a través de la Modelación de Nichos Ecológicóos de esta especie sobre 23 registros a nivel nacional. La correlación de incidencia de leishmaniasis cutánea-clima mostró que el mayor número de casos tiende a ocurrir, con un mes de retraso, en los meses de mayor precipitación. Estos datos pueden ser utiles al Ministerio de Salud ya que proveen información sólida sobre "cuándo", "dónde" y "cómo" implementar métodos de control de vectores en la Región Andina de Venezuela.

**Prevalence of asymptomatic Plasmodium vivax infections in the north-eastern focus of malaria of Venezuela**

Malaria remains as a public health problem in Venezuela. In 2015 there were 136,402 cases reported by the Ministry of Popular Power for Health, being the parasite prevalence 73.95% for Plasmodium vivax, 17.6% for Plasmodium falciparum, 0.0095% for Plasmodium malariae and 8.42% mixed infections (P. vivax + P. falciparum). During the period 1999-2002 the number of cases in Venezuela ranged between 21,685 and 29,337, being the Sucre State with highest levels of malaria prevalence, with Plasmodium vivax as the unique specie in this region. In 2002 the Municipality of Cajigal had the highest Annual Parasite Incidence (API) of country, being 260 cases per 1000 inhabitants. In view of the difficulty in controlling malaria in this area, the prevalence of asymptomatic carriers was investigated as one of the epidemiological factors contributing to the persistence of malaria transmission. One hundred fifty people were included in the study, with no history of recent malaria infection, or any symptom and also, not having used antimalarial drugs during the 30 days prior to study entry. To do this, a malaria Rapid Diagnostic Test (mRDTs) was used for the determination of antigenemic (OptiMAL®) and PCR (polymerase chain reaction) in conjunction with the reference "Gold Standard", the conventional thick and thin blood smears (TTBS). It was found a prevalence of infection of 1.33% by mRDTs and TTBS and 8% by PCR which allowed the detection of 10 asymptomatic cases in addition, with a sensitivity and specificity of 100% and 93.4% respectively. The presence of asymptomatic carriers in this area reveals the difficulties that face the Malaria Control Program in the eventual elimination of this specific malaria foci. It is necessary reinforces the maintenance of the epidemiological surveillance using more sensitive diagnostic techniques, as well as to adapt the control measures based on the current findings.

La malaria sigue siendo un problema de salud pública en Venezuela. Para el año 2015 el Ministerio del Poder Popular para la Salud reportó 136.402 casos, siendo la fórmula parasitaria 73,95% para Plasmodium vivax, 17,6% para Plasmodium falciparum, 0,0095 para Plasmodium malariae y 8,42% para infecciones mixtas (P. vivax + P. falciparum). Durante el período 1999-2002, el número de casos en Venezuela estuvo entre 21.685 y 29.337, siendo el Estado Sucre el que mostró los niveles más altos de prevalencia de malaria, con P. vivax como única especie en la región. En el año 2002 el Municipio Cajigal registró el Índice Parasitario Anual (IPA) más alto del país, siendo 260 casos por 1000 habitantes. En vista de las dificultades para controlar la malaria en esta área, se investigó la prevalencia de portadores asintomáticos como uno de los factores contribuyentes en la persistencia de la transmisión malárica. Ciento cincuenta personas fueron incluidas en el estudio sin historia de infección reciente por malaria o ningún síntoma, así como no haber consumido drogas antimaláricas durante los 30 días anteriores de ingresar al estudio. Para ello, se usó la prueba rápida de diagnóstico para malaria (PRDxm) para la determinación de antígenemia (OptiMAL®) y la técnica de biología molecular basada en la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), conjuntamente con la "prueba oro," como método convencional, la Gota Gruesa y Extendido de Sangre (GGES). Se encontró una prevalencia de infección de 1,33% por GGES y por prueba rápida de diagnóstico OptiMAL® y 8% mediante PCR. La técnica de PCR permitió la detección adicional de 10 casos asintomáticos con una sensibilidad y especificidad del 100% y 93,4% respectivamente. La presencia de portadores asintomáticos en esta área revela las dificultades que enfrenta el Programa de Control de la Malaria en la eliminación eventual de esta parasitosis en este foco. Es necesario reforzar el mantenimiento de la vigilancia epidemiológica usando técnicas de diagnóstico más sensibles, así como adoptar medidas de control basadas en estos hallazgos.

Prevalence of hemoparasites in wild birds, in the eastern zone of the Falcon state, Venezuela 2013-2015

Los parásitos sanguíneos son transmitidos por vectores hematófagos y pueden ocasionar impactos negativos en los hábitos del hospedador y como consecuencia, desbalances en la diversidad biológica de las especies de vida silvestre. El objetivo de este estudio fue estimar la prevalencia de hemoparásitos en aves silvestres de la zona oriental del estado Falcón, Venezuela entre 2013-2015. Para ello, se seleccionaron siete localidades, con características de pasos migratorios que presentaban vegetación fragmentada, considerando los dos períodos climáticos. Para la captura de las aves se emplearon redes de neblinas y su clasificación taxonómica se basó en los caracteres físicos en campo y en los registros fotográficos en el laboratorio. La población estudiada consistió de 797 individuos de 85 especies y 25 familias. Se tomaron muestras sanguíneas de la vena ulnar, para la posterior realización de extendidos que fueron coloreados con la solución de Giemsa. El diagnóstico parasitológico se realizó por microscopía de luz (1000x), identificándose 144 individuos positivos con una prevalencia general del 18,07%; para el género Plasmodium 9,66 %, Haemoproteus 8,66%, Trypanosoma 0,75% y microfilarias 1,00%; siendo la familia más afectada Columbidae y los individuos susceptibles fueron Thryothorus rutilus y Nemosia pileata. En esta encuesta se incluyeron 8 nuevos registros de hospedador-hemopárasito, se evidenció la periodicidad estacional, además de infecciones en aves residentes y juveniles, cuyo rango de vuelo son cortos por lo que se infiere que en las localidades en estudio están presentes los elementos de la triada epidemiologia, hospedador, vectores y parásitos.

Blood parasites are transmitted by hematophagous vectors and can cause negative impacts on host habits and as a consequence, imbalances in the biological diversity of wildlife species. The objective of this study was to estimate the prevalence of hemoparasites in wild birds of eastern Falcon state, Venezuela between 2013-2015. For this, seven localities were selected, with characteristics of migratory steps that presented fragmented vegetation, considering the two climatic periods. For the capture of the birds, mist networks were used and their taxonomic classification was based on the physical characters in the field and the photographic records in the laboratory. The study population consisted of 797 individuals from 85 species and 25 families. Blood samples were taken from the ulnar vein, for the later realization of stretches that were colored with the solution of Giemsa. The parasitological diagnosis was performed by light microscopy (1000x), identifying 144 positive individuals with a general prevalence of 18.07%; for the genus Plasmodium 9.66%, Haemoproteus 8.66%, Trypanosoma 0.75% and microfilariae 1.00%; Being the family most affected Columbidae and the susceptible individuals were Thryothorus rutilus and Nemosia pileata. In this survey, 8 new host-hemopatraase registers were included, seasonal periodicity was evidenced, as well as infections in resident and juvenile birds, whose ranges of flights are short so it is inferred that in the study sites are present the elements of The triad epidemiology, host, vectors and parasites.

Apical cardiac aneurism in acute chagasic aged patient: A case report

Se presenta el caso de un paciente de la tercera edad mostrando cuadro agudo sintomático con complicaciones cardiacas evidenciadas por detección de fibrilación auricular, miopericarditis, derrame pericárdico moderado, sin signos de taponamiento cardíaco, fracción de eyección del ventrículo izquierdo (FEVI) < 30% y aneurisma, detectados mediante estudios electro y eco cardiográficos, respectivamente. El despistaje parasitológico reveló la presencia de Trypanosoma cruzi en muestra de sangre circulante y líquido pericárdico, con hemocultivo positivo y detección de ADN específico del parásito por ensayos de PCR. Asimismo, la presencia de altos niveles de anticuerpos circulantes anti-T. cruzi detectados con dos pruebas serológicas (TAD, IFI) y la observación de altos niveles IgM, corroboran el diagnóstico de un cuadro de enfermedad de Chagas en fase aguda de la infección. Además, la procedencia del paciente de una localidad andina del occidente de Venezuela, donde la enfermedad de Chagas es endémica, unido al hallazgo de ejemplares adultos de triatominos en la vivienda del paciente confirman el diagnóstico. Se discute la significación del presente hallazgo y se detallan las observaciones durante la re-evaluación en el seguimiento post tratamiento.

A Clinical case from an aged patient with evidence of suffering heart failure showing arrhythmia, atrial fibrillation and pericarditis, pericardial effusion and left ventricle aneurism detected by electrocardiogram and echocardiogram respectively, is reported. Parasitological examination revealed presence of Trypanosoma cruzi in blood and pericardial fluid samples. In addition, hemoculture was positive and PCR assay revealed specific T. cruzi DNA. Serological techniques (DAT, IFAT) showed anti-T.cruzi circulating antibodies, including high level IgM. The sero-parasitological and molecular (PCR) findings confirmed the presumptive clinical diagnosis for Chagas disease acute infection. The significance of the present findings is discussed and clinical details observed during re-evaluation post-treatment, are included.

Development and characterization of IgY antibodies against synthetic peptides from Brucella abortus OMP25 and BP26 proteins

Brucellosis is a zoonose produced by bacterial species from the Brucella genus. Its isolation and identification in food using classical microbiological techniques is not practical due to its slow growth rate. Therefore, it is necessary to establish fast and specific methods for the detection of the bacteria in food. The goal of this work was the production and characterization of monospecific polyclonal antibodies in chicken (IgY) against synthetic peptides from Brucella abortus OMP25 and BP26 proteins, suitable for an antigen-capture assay. Conformational as well as antigenic predictions were performed using the ANTHEPROT package. Chemical synthesis was carried out by the multiple manual synthesis using the t-boc strategy. The peptides were used as antigens for the preparation of polyclonal antibodies in chicken. Experimental animals produced specific antibodies against the OMP25 and BP26 peptides constructs determined by ELISA and MABA assays showing correspondence between the predictive study and the immunogenicity obtained in chicken. The IgY proved to be able to recognize B. abortus by MABA assays. The binding activity and specificity of antibodies was determined by Western blot with cell extract from B. abortus. In this study, we demonstrated that OMP25 and BP26 peptides constructs are good candidates for production of specific IgY antipeptide antibodies capable of recognizing proteins from sonicated B. abortus strain S19, indicating the potential usefulness of the IgY antibody for development of immunoassays for detection of Brucella abortus.

La brucelosis es una zoonosis producida por especies del género Brucella. El aislamiento e identificación de la bacteria en alimentos usando las técnicas clásicas de microbiología no es práctico debido a su lenta tasa de crecimiento. Por lo tanto, es necesario establecer métodos rápidos para la detección de la bacteria en alimentos. En el presente trabajo se desarrollaron y caracterizaron anticuerpos policlonales monoespecíficos en gallinas (IgY) contra péptidos sintéticos de las proteínas OMP25 y BP26 de Brucella abortus, que puedan ser utilizados en un ensayo de captura. Para ello, se realizaron estudios conformacionales y de predicción de epítopes en la selección de los péptidos, los cuales se utilizaron como antígenos para la producción de las IgY. Los animales desarrollaron anticuerpos específicos contra los péptidos, mostrando correspondencia entre los estudios predictivos y la inmunogenicidad obtenida. Las IgY reconocieron a B. abortus en un ensayo de MABA y la actividad de unión y especificidad fue determinada por western blot con extracto celular de B. abortus. En este estudio, demostramos que los péptidos de las proteínas OMP25 y BP26 de B. abortus son buenos candidatos para la producción de anticuerpos IgY especificos capaces de reconocer proteínas de extracto de B. abortus cepa S19, indicando el potencial uso de anticuerpos IgY para el desarrollo de inmunoensayos para la detección de Brucella abortus.

Physicochemical and microbiological quality of swimming pool water of two recreational complexes in Zulia State

La presente investigación tuvo como objetivo analizar la calidad fisicoquímica y microbiológica del agua de piscinas de dos complejos recreacionales ubicados al oeste de la ciudad de Maracaibo, estado Zulia, de acuerdo con lo establecido en las normas sanitarias venezolanas (Gacetas Oficiales 4044 y 36395). Se realizó un muestreo en veinte (20) piscinas destinadas a actividades recreativas ubicadas en dos complejos. Los parámetros que se midieron para analizar la calidad sanitaria del agua de piscinas fueron: color verdadero, conductividad eléctrica, sólidos totales, sólidos disueltos totales, turbidez, alcalinidad total, cloro libre residual, dureza total, pH, coliformes totales, coliformes fecales y organismos heterótrofos. Los parámetros fisicoquímicos sólidos disueltos, turbidez y color verdadero presentaron concentraciones promedios menores a los establecidos por las normas sanitarias vigentes; sin embargo, los valores promedios de cloro residual y pH se encontraron fuera de los rangos recomendados. Los parámetros microbiológicos mostraron que un 30% de las piscinas analizadas presentaron un valor promedio de organismos heterótrofos de 1107 UFC/mL, mayor al límite establecido por la normativa venezolana. Con respecto a los coliformes, un 75 y 60% de las piscinas presentaron al menos un tubo positivo durante la prueba de coliformes totales y fecales, respectivamente.

The present study had as objective to analyze the quality physical-chemical and microbiological of the water of swimming pools of two recreational complexes located in west of the city of Maracaibo, Zulia state, in accordance with the established in the sanitary Venezuelan procedure, the official gazettes 4044, and 36395. Sampling was conducted in twenty (20) aimed at recreational pools located on two recreational complex. The parameters were measured to analyze the quality of water in swimming pools were true color, electrical conductivity, total solids, total dissolved solids, turbidity, total alkalinity, residual free chlorine, total hardness, pH, total coliforms, fecal coliforms and heterotrophic organismes. The physicochemical parameters: dissolved solids, turbidity and electrical conductivity presented average concentrations less than those established by the sanitary standards; however, the mean values of residual chlorine and pH were found outside the recommended ranges. The microbiological tests showed that 30% of the pools tested had an average value of heterotrophic organisms of 107 CFU / mL, higher than the limit set by Venezuelan law. 75 and 60% of the pools presented at least one positive test tube for total and fecal coliforms, respectively

Distribution of freshwater mollusks (Gastropoda) of medical importance in Venezuela

El presente trabajo describe la distribución geográfica actual de las principales especies de caracoles de agua dulce incriminadas como hospedadoras intermediarias de Schistosoma mansoni (4 especies de Biomphalaria), Fasciola hepatica (4 especies de Galba y Pseudosuccinea columella) y Paragonimus sp. (Aroapyrgus vivens) en Venezuela. Adicionalmente, se discute el status epidemiológico así como el hábitat de ocurrencia de cada una de estas especies, a fin de brindar información base para la vigilancia, manejo y control de los hospedadores intermediarios que participan en los ciclos vitales de los agentes causales de la esquistosomiasis, fascioliasis y paragonimiasis, que constituyen enfermedades desatendidas actualmente en Venezuela.

This study describes the current distribution patterns of the main species of freshwater mollusks incriminated as intermediate hosts of Schistosoma mansoni (Biomphalaria, 4 species), Fasciola hepatica (Galba, 4 species and Pseudosuccinea columella), and Paragonimus sp. (Aroapyrgus vivens) in Venezuela. Additionally, the epidemiological status and the main aquatic habitats of each species are discussed in order to bring basic information to help the surveillance and control of these neglected tropical diseases in Venezuela.

Molecular diagnosis of dengue virus infections in samples collected on filter paper

Dengue virus infections (DENV) are a severe public health problem due to the high rates of morbidity and mortality involved, and the fact that no clinical treatment or vaccines are available. In order to strengthen the laboratory diagnosis for surveillance systems in tropical countries with low resources, we report an optimized method using filter paper for blood spotting and subsequent molecular diagnosis of DENV serotypes. Control strains of all serotypes, as well as 35 whole blood patient samples dispensed on filter paper, were stored at room temperature for as long as 36 months. RT-PCR of 5UTR-C fragment was amplified through adapted protocols to diagnose all dengue serotypes. Results showed amplification for all four viral serotypes, including control viral strains and 88.6 % of the samples. These results allowed determining the utility of filter paper for the preservation of samples regularly obtained from patients with clinical suspicion of dengue in settings where low resources do not permit an immediate analysis of the samples. Likewise, this study evidence the possibility of molecular diagnosis of DENV from multiple areas of the world where there are no laboratories with the capacity to confirm DENV cases.

Las infecciones por virus Dengue (DENV) representan un grave problema de salud pública debido a las altas tasas de morbilidad y mortalidad que causan, además no cuentan con tratamiento clínico específico, ni vacuna. Con el fin de reforzar el diagnóstico de laboratorio para los sistemas de vigilancia epidemiológica en países tropicales con recursos económicos limitados, se optimizó una metodología utilizando papel de filtro para la recolección de muestras y el subsiguiente diagnóstico molecular de los serotipos de DENV. Se emplearon cepas controles correspondientes a todos los serotipos virales, así como 35 muestras de sangre total dispensadas en papel de filtro que fueron mantenidas a temperatura ambiente por 36 meses. Las muestras fueron analizadas mediante RT-PCR para la amplificación de la región del genoma correspondiente a 5´UTR-C de los DENV. Los resultados mostraron la amplificación de los mencionados fragmentos en 88,6% de las muestras analizadas, así como de las cepas controles. Estos resultados evidenciaron la utilidad del papel de filtro para conservación de muestras obtenidas de pacientes con sospecha clínica de dengue ubicados en zonas donde no es posible realizar análisis de laboratorio de forma inmediata, así como su uso para el diagnóstico molecular. De este modo se reforzaría la vigilancia en áreas, donde no hay laboratorios con capacidad para confirmar casos de DENV.

Larvicidal action of alcoholic extracts of the seed of **Annona Muricata (soursop) on Aedes Aegypti y Aedes Albopictus**

Cada vez es más frecuente el reporte de resistencia de diferentes especies de vectores a los insecticidas usados en los programas de control; por ello existe un interés creciente en el desarrollo de productos eficaces, económicos y más amigables con el medio ambiente que permitan el control de los vectores de enfermedades como el dengue. Los extractos crudos obtenidos a partir de diferentes plantas han demostrado poseer actividades larvicidas. El objetivo de esta investigación fue evaluar la actividad larvicida de dos extractos alcohólicos (etanólico y metanólico) obtenidos a partir de las semillas de Annona muricata (guanábana) sobre Ae. aegypti (cepa Rockefeller) y Ae. albopictus exponiéndolas durante 24 h a diferentes diluciones de cada extracto. Las concentraciones letales (CL50) fueron las siguientes: a) para Ae. aegypti 41,8 mg L-1 (LC0,95=34,5-49,2 mg L-1) con el extracto etanólico y 32,8 mg L-1 (LC0,95=27,4-38,4 mg L-1) con el extracto metanólico; y b) para Ae. albopictus 299,6 mg L-1 (LC0,95=224,9-377,3 mg L-1) con el extracto etanólico y 326,1 mg L-1 (LC0,95=209,5-442,4 mg L-1) con extracto metanólico. El análisis de los resultados demostró que el efecto tóxico de ambos extractos sobre las larvas de Aedes fue similar y depende de la especie y de la concentración utilizada. Los resultados apuntan a que los extractos alcohólicos obtenidos a partir de A. muricata son una alternativa para el control de las especies de Aedes presentes en Venezuela.

Reports of resistance of different species of vectors to insecticides used in control programs are every time more frequent. Therefore, there is a growing interest to control harmful vectors (that transmit diseases such as dengue) by developing products that are effective, economical and environment friendly. Crude extracts obtained from different plants have demonstrated larvicidal activities. The objective of this research was to evaluate the larvicidal activity of two alcoholic extracts (ethanol and methanol) obtained from the seeds of Annona muricata (soursop) on Ae. aegypti (strain Rockefeller) and Ae. albopictus, exposed for 24 h to different dilutions of each extract. Lethal concentrations (LC50) were as follows: a) For Ae. aegypti 41.8 mg L-1 (LC0.95 =34.5 to 49.2 mg L-1) with ethanolic extract and 32.8 mg L-1 (LC0.95 =27.4 to 38.4 mg L-1) with methanolic extract; and b) For Ae. albopictus 299.6 mg L-1 (LC0.95=224.9 to 377.3 mg L-1) with ethanolic extract and =326.1 mg L-1 (LC0.95=209.5 to 442.4 mg L-1) with methanolic extract. The analysis of the results showed that the toxic effect of both alcoholic extracts on Aedes was similar and depends on the species and the concentration used. The results suggest that the alcoholic extracts obtained from A. muricata are an alternative for control of Aedes species present in Venezuela.

Anophelism in representative wetlands of Teruel province (Northern Spain)

Se analiza parte de la palúdica de un territorio endémico de malaria en el pasado en España, como es la provincia de Teruel. Los humedales más representativos del área de estudio, con datos históricos de morbi-mortalidad palúdica, fueron muestreados entre los meses de junio y octubre de 2014 para profundizar en el conocimiento de las especies de anofelinos vectores allí presentes. Un total de 5 especies del género Anopheles fueron capturadas, entre las que destacan transmisores constatados de la parasitosis como Anopheles atroparvus o Anopheles claviger. Otro notable vector de plasmodios humanos, la especie Anopheles plumbeus, fue también recolectada por primera vez para la provincia de Teruel. Pese a que el contexto eco-epidemiológico de la malaria en España hace poco probable su resurgencia, la diversidad y densidad de los vectores de la enfermedad en ciertos territorios obliga a mantener sistemas de vigilancia entomológica para minimizar posibles complicaciones sanitarias.

Malaria receptivity of a formerendemic disease area in the past in Spain (Teruel Province) has been analyzed. The most representative wetlands in the study area were sampled between June and October 2014 to deep into the knowledge of anopheline vector species present. A total of 5 species of Anopheles were collected. Among these mosquitoes, some species are efficient malaria transmitters like Anopheles atroparvus or Anopheles claviger. Another capable vector, Anopheles plumbeus, was also identified forf irst time in the province of Teruel. Although the eco-epidemiological context of malaria in Spain makes it unlikely the disease resurgence, diversity and density of vectors incertain territories should for ceto maintain entomological surveillances y stems to minimize possible health complications.

Gregorio Ulloa Mota ...Malariólogo venezolano

Un Adiós a Jose Vicente Scorza (1924-2016)