Níveis de energia digestível na dieta de piauçu (Leporinus macrocephalus) no desenvolvimento testicular em estágio pós-larval

Rodrigo Diana Navarro^1*, Sérgio Luis Pinto da Matta², Eduardo Arruda Teixeira Lanna¹, Juarez Lopes Donzele¹, Sirlene Souza Rodrigues², Rodrigo Fortes da Silva², Leonardo Luiz Calado² e Oswaldo Pinto Ribeiro Filho³

¹Departamento de Zootecnia, Universidade Federal de Viçosa (UFV). Av P.H. Rolfs, CEP: 36570-000, Viçosa, Minas Gerais, Brasil. *E-mail: rddnavarro@yahoo.com.br

²Departamento de Biologia Geral, UFV. Viçosa, Minas Gerais, Brasil.

³Departamento de Biologia Animal, UFV. Viçosa, Minas Gerais, Brasil.

Resumo

Objetivando-se determinar o efeito do nível de energia digestível da dieta no desenvolvimento testicular de piauçu (Leporinus macrocephalus) foram utilizados 600 peixes com peso e comprimento médio inicial de 0,33 ± 0,11 g e 2,94 ± 0,39 cm, respectivamente. Foram realizados quatro tratamentos (2.600, 2.700, 2.800 e 2.900 kcal de ED/kg de ração). Verificou-se que o nível de energia não influenciou o peso corporal médio final e comprimento total. Foi verificado efeito quadrático (P<0,02) no peso da gônada aos 60 dias. Foi verificado efeito quadrático (P<0,02) no índice gonadossomático aos 60 dias. Os peixes do tratamentos com 2.800 e 2.900 kcal de ED/kg apresentaram nítida formação de cistos de espermatogônias primárias e secundárias. Os animais dos grupos com 2.600 e 2.700 kcal de ED/kg apresentaram formação de cistos de espermatogônias primária, apenas.

Palavras-chave: desenvolvimento testicular, índice gonadossomático, energia, piauçu.

Dietary digestible energy levels on the gonad development of Piauçu (Leporinus macrocephalus) in post larvae stage

Summary

The objective of this study was to evaluate the effect of energy levels on testicular development of the piauçu (Leporinus macrocephalus). Six hundred fishes, averaging initial weight and length of 0.33 ± 0.11 g and 2.94 ± 0.39, respectively, were utilized. The experiment was carried out according to a completely randomized design, with 4 treatments (2600, 2700, 2800, and 2900 kcal DE/kg). Energy level did not significantly affect average final body weight and total length. Quadratic effect on gonads weight (P<0.02) at 60 days was verified. Quadratic effect on the gonad-somatic index (P<0.02) at 60 days was verified. The treatments with 2800 and 2900 kcal DE/kg showed the primary and secondary spermatogonia rounded by Sertoli cells in a typical cyst formation. The treatments with 2600 and 2700 kcal DE/kg showed development of primary spermatogonia cyst only.

Keywords: gonadal development, gonad-somatic index, energy, piauçu.

Recibido: 14/04/05  Aceptado: 30/03/06

Introdução

O cultivo de peixes em sistemas intensivos vem sendo praticado por aqüicultores em função das demandas do mercado consumidor brasileiro, que tem exigido um produto de boa qualidade. Dentre as espécies nativas com possibilidades de serem aproveitadas nesse tipo de cultivo, o piauçu tem-se destacado em função do seu alto potencial reprodutivo e da sua adaptação ao cativeiro.

O piauçu, pertencente à família Anastomidae e ao gênero Leporinus sp é pouco conhecido do ponto de vista zootécnico. O L. macrocephalus apresenta maior porte dentro do gênero e tem sido o de maior importância econômica para pesca no Pantanal mato-grossense, onde é conhecido como “piavussu” (Garavello, 1979; Garavello e Bristski, 1988; Castagnolli, 1992; Carvalho et al., 2000; Peruca et al., 2000). Quanto aos aspectos reprodutivos existem poucos trabalhos para L. macrocephalus, podendo ser citado Amaral (1999), que determinou o ciclo reprodutivo do piauçu, evidenciando a importância do macho no desempenho reprodutivo da espécie, pois, pequeno número de animais é responsável pela fecundação de grande quantidade de fêmeas. Por se tratar de espécie reofílica, sua reprodução em cativeiro precisa ser induzida por estimulação hormonal.

Os componentes essenciais na formação celular e os níveis nutricionais de proteína e energia são de máxima importância na composição da dieta para o pleno desenvolvimento e crescimento animal. A utilização de lipídios de boa qualidade, na ração da maioria das espécies de peixes, deve ser cuidadosamente dosada visto que os efeitos indesejáveis são decorrentes das excessivas perdas na taxa de crescimento e também de problemas nutricionais e até patológicos (Martino, 2003). Os óleos vegetais de maior destaque para pesquisa são os de soja, de canola e de linhaça sendo o primeiro, formado, predominantemente por ácido graxo de cadeia longa, o mais utilizado (Mascarenha, 2001).

A influência da dieta sobre o desempenho reprodutivo dos peixes permite a escolha de ingredientes em níveis mais adequados aos processos metabólicos do animal. Embora recentes estudos venham sendo conduzidos nessa linha, no sentindo de melhorar o aproveitamento do potencial da piscicultura, poucos trabalhos relacionam nutrição e parâmetros reprodutivos (Luquet e Watanabe, 1986; Gunasekera et al., 1995; Gunasekera e Lam, 1997; Al- Hafedh et al., 1999; Fernández-Palacios et al., 1997).

A relação entre as exigências nutricionais e o desenvolvimento testicular em espécies nativas, tanto em condições naturais quanto em condições de cativeiro, é de fundamental importância para o manejo adequado das populações apesar da pouca informação, especialmente em relação à interferência da energia digestível na reprodução de peixes nativos. O objetivou foi avaliar o efeito do nível de energia na dieta sobre o desenvolvimento testicular de piauçu (Leporinus macrocephalus) na fase pós-larval.

Material e Métodos

O experimento foi conduzido na estação de Hidrobiologia e Piscicultura do Departamento de Biologia Animal da Universidade Federal de Viçosa, no período de 27/12/2002 a 27/02/2003.

Foram utilizadas 600 pós-larvas de L. macrocephalus, com peso e comprimento médios iniciais de 0,33 g e 2,94 cm, respectivamente. Os animais foram distribuídos em 4 tanques de concreto, com capacidade de 25.000 L cada, na densidade de 6 peixes/m³. Foram conduzidos quatro tratamentos variando-se os níveis de energia digestível na ração (2.600, 2.700, 2.800 e 2.900 kcal ED/kg de ração), sendo cada peixe considerado a unidade experimental. A duração do experimento foi de 60 dias e, ao final desse período, foram coletados para análise histológica, 60 alevinos de piauçu sendo 15 animais de cada tratamento.

As dietas experimentais foram formuladas para serem isoprotéicas, com 28% de PB, para atingirem os níveis de energia digestível exigidos; variaram apenas óleo e inerte. As suas composições percentuais químicas encontram-se apresentadas na Quadro 1.

As dietas experimentais foram peletizadas e oferecidas de forma controlada em três refeições diárias (9:30, 13:30 e 17:30 horas). A oferta de ração foi de 5% do peso vivo, sendo ajustada a cada 15 dias. Foram realizadas despescas através de rede de malha de 3 cm entre nós, sendo capturados 15% dos animais. As biometrias foram realizadas utilizando-se um paquímetro e balança de precisão.

Durante o experimento, a água dos tanques foi renovada diariamente e a determinação da temperatura realizada às 9:00 e 17:00 horas. O pH, o oxigênio dissolvido (O₂D), a condutividade elétrica e a transparência da água foram verificados a cada 7 dias, às 9:00 horas, utilizando-se medidor portátil de pH, oxímetro, condutivímetro e disco de secchi.

Ao final do experimento todos os animais, após jejum de 24 horas, foram insensibilizados em água e gelo, pesados, medidos e abatidos. Após o abate, os mesmos foram eviscerados e, posteriormente, a carcaça, as vísceras e as gônadas foram pesadas em balança de precisão (0,001g). Em seguida, as gônadas foram processadas histologicamente.

As preparações histológicas, assim como as análises morfológicas, foram realizadas no laboratório de Biologia Estrutural do Departamento de Biologia Geral da UFV. Os testículos foram coletados e pesados após a retirada da gordura associada. Procedeu-se a fixação em líquido em Bouin e a posterior desidratação em série alcoólica crescente. Os testículos foram incluídos em glicolmetacrilato, seccionados na espessura de 3 mm com navalha de vidro em micrótomo rotativo, e corado com azul de toluidina 0,5 % + borato de sódio a 1%. As preparações foram montadas em Entellan e observadas em microscópio Olympus BX 4. Fotomicrografias foram realizadas em fotomicroscópio CX 31 Olympus, utilizando-se filme T-max- ASA 100 Kodak.

Foram registrados, qualitativamente, os estádios de desenvolvimento gonadal através de análise histológica e calculado o índice gonadossomático (IGS), que indica o estado de desenvolvimento gonadal do peixe, utilizando-se a fórmula:

IGS = PG/PC x 100, 

onde

PG = peso da gônada

PC = peso corporal

As análises estatísticas foram realizadas através do programa SAEG – Sistema de Análises Estatísticas e Genéticas. Os efeitos dos níveis de energia foram analisados mediante o uso dos modelos de regressão linear, quadrática ou descontinuo “Linear Response Ploteon” (LRP), conforme o melhor ajustamento obtido para cada variável, com base na significância dos coeficientes de regressão pelo teste, no coeficiente de determinação, na soma de quadrado dos desvios e nos fenômenos em estudo.

Resultados e Discussão

Os parâmetros físico-químicos da água dos tanques experimentais encontravam-se dentro da faixa ótima (Quadro 2) para peixes tropicais (Castagnolli, 1992; Boyd, 1982; Tavares, 1994; Kubitza e Ono, 1997) e provavelmente não influenciaram no resultado do experimento.

Os testículos de L. macrocephalus são pares, alongados e individualizados em quase toda a sua extensão unindo-se apenas na extremidade caudal, para formar o ducto espermático comum. Localizam-se dorsalmente ao trato digestivo e ventrolateralmente à bexiga gasosa. Segundo Amaral (1999), a superfície externa do testículo imaturo é lisa, mas cheia de pequenos sulcos e reentrâncias, quando elas estão maduras. São ricamente vascularizados, sendo percorridos no sentido longitudinal, por um grande vaso sangüíneo, que se ramificam lateralmente em inúmeros pequenos vasos. Essa característica também foi observada no presente experimento, em animais mais jovens. Nos animais dos tratamentos 2.600 e 2.700 kcal de ED/kg, esses testículos eram finos e transparentes, caracterizando estágio de desenvolvimento inicial. Nos tratamentos de 2.800 e 2.900 kcal eles se mostraram mais espessos e esbranquiçados, caracterizando estágio mais avançado.

Aos 60 dias, não se observaram diferenças significativas entre os tratamentos, tanto para peso corporal quanto para o comprimento total (Quadro 3). Em experimento semelhante, Camargo (1995) encontrou maior peso final em tambaqui (Colossoma macropomum) para animais alimentados com 3.300 kcal de EM/kg.

Foi verificado efeito quadrático (P<0,02) no peso da gônada aos 60 dias. Com base nesse resultado pode-se inferir que a relação energia:proteína de 10,35, dessa ração estaria mais ajustada as exigências dos animais para peso de gônada. O peso testicular é diretamente relacionado com a produção espermática e assim sendo quanto maior o testículo, maior produção de espermatozóides. Porém a quantidade de espermatozóides produzidos é sempre maior que o número necessário para fecundação (França e Russell, 1998).

Os resultados de diferentes níveis de energia da dieta sobre o peso corporal final, comprimento total, peso da gônada e índice gonadossomático encontram-se na Quadro 3. Foi verificado efeito quadrático no IGS (P<0,02) no peso da gônada aos 60 dias. Frenkel e Goren (1997), trabalhando com Aphanius dispar, com diferentes níveis de alimentação, observaram redução no IGS quando diminuiu a taxa de alimentação. Gunasekera e Lam (1997), trabalhando com tilápia do Nilo e verificando a recuperação desse animal após a desova, obtiveram IGS maior fornecendo 35% de PB, indicando também desenvolvimento gonadal mais avançado que os outros tratamentos.

Os efeitos dos níveis de energia da dieta sobre a morfologia macroscópia, microscópia e o estágio de desenvolvimento testicular em função dos diferentes tratamentos são apresentados na Quadro 4.

Aos 60 dias, os animais dos tratamentos com 2.800 e 2.900 kcal de ED/kg exibiram desenvolvimento gonadal mais avançado em relação aos outros grupos apresentando mais espermatogônias por campo. Também foi observada nítida formação de cistos de espermatogônia primária (EG1) e espermatogônias secundárias (EG2) circundadas por maior quantidade de células de Sertoli (Quadro 4). Observaram-se também agrupamentos de células intersticiais juntamente com vasos sanguíneos. Animais dos tratamentos com 2.600 e 2.700 kcal de ED/kg apresentaram gônadas menos desenvolvidas com, a população de espermatogônias reduzida em relação aos grupos de maiores níveis de energia digestível. Grupos de células intersticiais em torno de vasos sangüíneos também foram observados nesses tratamentos (Quadro 4). Resultados similares foram encontrados por Shearer e Swanson (2000) que, utilizando nível de 22% de lipídio, obtiveram 45% dos machos de salmão (Oncorhynchus tshawytscha) maturos sexualmente. Além disso, esses autores relataram que os machos maduros tiveram menor percentagem de lipídio na carcaça, e que esse resultado é comumente esperado, visto que, na época de reprodução, ocorre mobilização de energia para o crescimento e amadurecimento das gônadas.

Al-Hafedh et al. (1999), trabalhando com tilápias do nilo (Oreochromis niloticus) com níveis de 25, 30, 35, 40 e 45% de PB, observaram que machos alimentados com uma dieta de 45 % de PB, no período de 14 semanas, apresentaram desenvolvimento gonadal mais avançado em relação a outros tratamentos. Esses autores, trabalhando também com tilápia fêmeas, observaram que apenas com 18 semanas foi detectado um avanço na maturação gonadal, usando uma dieta com 45% de PB. Gunasekera e Lam (1997), trabalhando também com tilápia nilótica (O. niloticus), verificaram que utilizando 35% de PB na dieta houve recuperação gonadal mais rápida, logo após a desova, em relação ao desenvolvimento dos estádios reprodutivos.

No presente estudo, os animais alimentados com dietas contendo 2.800 e 2.900 kcal de ED/kg, apresentaram espermatogônias secundárias com 8 semanas. Com base nesses resultados, pode-se inferir que esses níveis de energia na dieta estariam mais ajustados às exigências dos animais, proporcionando aceleração do processo espermatogênico.

Conclusões

Os resultados obtidos indicam que o nível de energia digestível de 2.800 e 2.900 kcal de ED/kg refletiu maior desenvolvimento testicular. A exigência energética para piauçu, de 0,30 a 120g, é de 2.800 e 2.900 kcal de ED/kg e a relação energia:proteína foi de 10 e 10:35.

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