Drs. Karleidy Torres, Augusto Soto, Desiré Sandrea, María Villalobos, Agustin Rodríguez,

Manzur Hassanhi, Lic. Luz Mila Mesa.

Maternidad Castillo Plaza, Escuela de Medicina, Cátedra de Inmunología, Cátedra de Micología, Escuela de Bioanálisis,

Facultad de Medicina, Universidad del Zulia, Maracaibo - Estado Zulia.

Objetivo: Determinar evidencias de candidiasis vaginal en pacientes que acuden a la consulta prenatal de la Maternidad Castillo Plaza, utilizando como medio diagnostico el test Intray Colorex Yeast.

Método: Se estudiaron embarazadas primigestas con sospecha clínica de candidiasis vaginal. Las muestras de secreción vaginal se inocularon en el medio Intray Colorex Yeast e incubaron a 37 °C durante 48 a 72 horas.

Ambiente: Maternidad Castillo Plaza de Maracaibo, Estado Zulia.

Resultados: Se demostró que un 38% (24 pacientes) presentaron candidiasis vaginal. Candida albicans fue la especie más frecuente (88%), seguida por glabrata (8%) y krusei (4%).

Conclusión: El desarrollo de colonias verdes, rosado oscuro y rosado claro (albicans, glabrata y krusei respectivamente) sugiere la utilidad del medio Intray Colorex Yeast para la identificación rápida de las principales especies productoras de candidiasis.

Palabras claves: Candidiasis. Embarazadas Primigestas. Medio Cromogénico

Objective: Determine evidence of vaginal candidiasis in first-pregnancy mothers who assisted to pregnancy control to the Maternidad Castillo Plaza, using the test Intray Colorex Yeast as a medium for diagnosis.

Method: We were studied first-pregnancy mothers in prenatal control with clinical suspicion of vaginal candidiasis. The samples of the vaginal secretions were inoculated on Intray Colorex Yeast medium and incubated to 37°C during 48- 72 hours.

Setting: Maternidad Castillo Plaza . Maracaibo, Estado Zulia

Results: The study demostrated that 38% (24 patients) presented vaginal candidiasis. Candida albicans was the most frequently isolated species (88%) followed by glabrata (8%) and krusei (4%).

Conclusion: The development of the green colonies, dark pink and light pink characteristic of albicans, glabrata and krusei suggest the possible use of the Intray Colorex Yeast medium for quickly identification of the Candida species investigated.

Key words: Candidiasis. First-pregnancy mother. Chromogenic medium

    Las levaduras son un grupo de hongos caracterizados por una sola célula, por lo general redondeada, que se reproducen por gemación, algunas de ellas se transforman a una etapa micelial (de moho), bajo ciertas condiciones ambientales.

    El género Candida constituye un grupo de especies de levaduras que con frecuencia ocasionan micosis en el ser humano. El agente etiológico más importante es Candida (C) albicans que se encuentra normalmente en las mucosas del humano y bajo ciertas condiciones se transforma en patógeno. El paciente con candidiasis generalmente tiene alteraciones fisiológicas y de orden inmune que comprometen la integridad de los tejidos y lo hacen más susceptible a las micosis (1).

    En la candidiasis vulvovaginal puede observarse congestión intensa y despulimiento de la mucosa; así como placas blanquecinas que en ocasiones recubren totalmente la vagina, generalmente flujo abundante blanco grumoso, prurito intenso y sensación de quemadura (2).Los factores predisponente más importantes son: condiciones fisiológicas alteradas, el embarazo, y las enfermedades endocrinas como la diabetes, el hiper e hipoparatiroidismo que permiten la sobrecolonización con estas levaduras; edades extremas de la vida, administración prolongada de antibióticos, corticosteroides o anovulatorios; alteraciones básicas del sistema inmune; enfermedades de base que requieren tratamiento con inmunosupresores y citostáticos(1) Durante el embarazo las mujeres experimentan un aumento de las secreciones cervicales y vaginales debido a las modificaciones hormonales de la gestación (3), esto se considera un factor predisponente para la candidiasis vulvovaginal en las embarazadas,al igual que un déficit en la respuesta local (1, 4).

    Es importante la detección de candidiasis vulvovaginal en el curso del embarazo, debido a que las infecciones vaginales, se han asociado con rotura prematura de las membranas, trabajo de parto pretérmino, producido por la colonización de las membranas ovulares por vía ascendente, debilitan las mismas y provocan una serie de fenómenos que conllevan a la solución de continuidad de dichas membranas y a la activación de la fosfolipasa A2 provocando aumento en la síntesis de prostaglandinas e inicio del trabajo de parto. Es importante determinar de forma rápida la presencia de infecciones vaginales, para implementar un tratamiento precoz y evitar las complicaciones antes mencionadas (3).

    La identificación en el laboratorio de las especies de Candida que afectan la región vulvovaginal es necesaria para establecer el pronóstico y la terapéutica adecuada. El medio de Sabouraud es el más utilizado para el aislamiento de Candida, sin embargo en este sustrato la mezcla de colonias en una misma placa de Petri sólo puede ser detectada por un observador experto. La necesidad de establecer diferencias, de fácil observación, ha incentivado el diseño de sustratos para separar las principales especies del género sobre la base del color de las colonias (medio de Nickerson, Saboraud adicionado de trifenil tetrazolium cloride, agar fosfomolibdato) (5-8). Estos medios diferenciales no lograron la aceptación para su uso en la rutina de aislamiento de levaduras de importancia médica. La diferenciación de las especies de levaduras se hace en base a caracteres morfológicos y fisiológicos. Las pruebas morfológicas usadas son la formación de tubos germinativos largos y clamidoconidias, cuya presencia sugiere la identificación de C. albicans.

    En 1994 se desarrolló el medio de cultivo CHROMagar Candida, que detecta e identifica por reacción de color, las especies C.albicans, C.tropicales, C.krusei con alta precisión. Este medio ha permitido el diagnóstico precoz de las principales especies productoras de candidiasis (9-14). Se han formulado nuevos medios de cultivo cromogénicos para la identificación presuntiva de especies de Cándida como Candida ID (BioMerieux, Marcy l`Etoile, France) el cual detecta C.albicans en 24 horas con una sensibilidad mayor (96,8%) que CHROMagar Candida (49,67%). Candiselect médium (Bio-Rad,Marnes Coquette, France) que identifica a C. albicans con 90% de sensibilidad (15). El medio de cultivo Intray Colorex Yeast, proporciona la detección e identificación simultánea de las especies de levadura, produciendo resultados confiables en un plazo de 48 a 72horas. La detección rápida se evidencia por cambios en el color de las colonias, correspondiendo cada uno de estos colores a levaduras específicas como: color verde o verde azulado a C.albicans, rosado oscuro a C.glabrata, rosado con bordes blancos a C.krusei, azul oscuro con halo púrpura a C. tropicalis (16).

    El propósito de esta investigación es determinar la presencia de candidiasis vaginal en pacientes primigestas que acuden a la consulta Prenatal de la "Maternidad Castillo Plaza" de Maracaibo, utilizando como medio diagnóstico el test Intray Colorex Yeast.

    Se estudiaron 63 primigestas con edades comprendidas entre 13 y 35 años, con sospecha clínica de candidiasis vaginal, durante el lapso comprendido entre mayo de 2002 a mayo de 2003. El medio Intray Colorex Yeast de Biomed Diagnostic EE.UU, se utilizó como sustrato para procesar las muestras.

    Para la toma de la muestra se estableció como criterios de inclusión la presencia de flujo blanquecino y grumoso, acompañado o no de prurito vulvovaginal y de exclusión; tratamiento previo con antimicótico, antecedentes de relaciones sexuales dos días antes de la toma de la muestra, duchas vaginales previas, sangrado genital en los tres días previos a la toma de la muestra

    El flujo vaginal se tomó, mediante hisopos estériles, de las paredes de la vagina, cuello uterino y fondos de sacos. Un hisopado de la muestra se extendió en una lámina portaobjetos, se fijó con laca, se tiñó con la coloración de Giemsa para posterior observación microscópica. Un segundo hisopado de la secreción se inoculó en el medio Intray Colorex Yeast e incubó a 37º C durante 72 h, con lectura macroscópica a las 48 y 72h.

    A partir de las colonias desarrolladas en el medio Intray Colorex Yeast se realizó la prueba de filamentización según la técnica de Dalmau, que consistió en inocular la colonia de forma estriada en una placa de Petri con el medio Crema de Arroz Tween 80 agar, luego se cubrió con una lámina cubreobjetos y se incubó a 28º C durante 48-72h para observación microscópica. La filamentización micotorula con clamidoconidias en colonias verdes o verdes azuladas corrobora la identificación de C.albicans; la presencia de pseudohifas con blastoconidias escasas, en cadena simple (candida) en colonias azules, identifica a C. tropicalis. La filamentización negativa (blastoconidias sin arreglo) en colonias rosado oscuro identifica a C. glabrata y la presencia de pseudohifas ramificadas con blastoconidias en verticillo o en cadena (blastodendrium) en colonias rosado oscuro identifica a C. krusei.

    De un total de 63 primigestas 24 (38%) presentaron candidiasis vaginal y 39 (62%) resultaron negativas (Cuadro 1). Del total de casos positivos al cultivo, 12 (50%), mostraron al examen microscópico directo la forma parasitaria de Candida, (pseudohifas y blastoconidias).

    La distribución de los casos de candidiasis vaginal según la edad (Cuadro 2) determinó que el grupo etáreo de 15 a 20 años fue el más afectado, 12 casos (50%).

    La distribución de los casos según las manifestaciones clínicas que presentaron las pacientes, determinó que el flujo blanquecino grumoso estuvo presente en las 24 pacientes que resultaron positivas al cultivo. Es de hacer notar que este signo también se presentó en 39 pacientes (62%) que resultaron negativas al cultivo. El prurito vulvar referido por las pacientes se presentó en igual proporción (16) en los casos de cultivo positivo y negativo.

    Las colonias de Candida desarrolladas en el medio Intray Colorex Yeast permitió el aislamiento de 25 cepas de las cuales 22 (88%) correspondieron a Candida albicans (colonias verdes), también se aislaron 2 cepas (8%) de Candida glabrata (colonias rosado oscuro) y una cepa (4%) de Candida krusei (colonias rosado claro) (Cuadro 3). Del total de muestras procesadas, una presentó 2 especies: C. albicans y C. glabrata.

    En un 75% aproximadamente las mujeres experimentan en su vida un episodio de candidiasis vaginal. El embarazo es un estado fisiológico que predispone a esta afección, por lo tanto es importante un diagnóstico rápido y seguro para instaurar el tratamiento apropiado (1). En el presente estudio se determinó que un 38% (24 casos) de las pacientes embarazadas presentaron candidiasis vaginal; estos resultados corroboran la presencia de candidiasis en el embarazo, lo cual podría estar asociado al papel de la progesterona sobre las células T y sobre la actividad anti-candida de los leucocitos polimorfonucleares (1).

    La positividad de un 50% de los exámenes directos en los casos de cultivo positivo, determina que la negatividad de éste no excluye el aislamiento de Candida. Esta tendencia de la negatividad del directo ha sido reportada previamente en muestras vaginales. (17)

    El alto porcentaje (58,7%) de pacientes con candidiasis en estado de gravidez con 20 o menos años de edad, determina la necesidad de educación sexual, ya que el número de embarazos en adolescentes se ha elevado en los últimos años de manera alarmante. Son embarazos de riesgo tanto para la madre como para el feto; se ha determinado que éstas gestaciones presentan una mayor incidencia de embarazos pretérmino, entre los mecanismos implicados en este evento se encuentran las infecciones vaginales. (18-20)

    La presencia de flujo blanquecino grumoso en el 100% de las pacientes con candidiasis y en el 62 % de las pacientes que resultaron negativas difiere de hallazgos reportados en un estudio epidemiológico de colonización por Candida en 13 914 mujeres embarazadas (20) donde se observó este signo en un 9,9% en los casos positivos y en un 89,7% en los negativos.

    Candida albicans fue la especie más aislada (88%), lo cual coincide con lo reportado por otros autores (21-24). El aislamiento de Candida glabrata (8%) como segunda especie más frecuente, ha sido también observado anteriormente con mayor incidencia: 16,3% y 14,6% (22,23).

    El color de las colonias desarrolladas en el medio Intray Colorex Yeast fue similar al reportado por otros investigadores en el medio CHROMagar Candida (9-14). El medio usado en este estudio (Intray Colorex Yeast) permite al igual que otros medios cromogénicos como Candida ID y BIGGY la identificación de las principales especies productoras de candidiasis. (10, 25,26).

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Correspondencia: Dra.Karleidy Torres; e-mail: kkarleidy@hotmail.com