Asociación del gen ELMO1 (snp rs1345365) con el desarrollo de diabetes mellitus tipo 2 en población mestiza Mexicana.

Sergio Alberto Ramirez-Garcia¹ Claudia Charles-Niño², Manuel Mazariegos-Rubí³, Luz Rosalba Topete-González⁴, Luis Javier Flores-Alvarado⁴, Jaime Leyva Santiago⁵, Clemente Mosso-González⁵ y Nory Omayra Dávalos-Rodríguez². Grupo Multidisciplinario para el Estudio Integral de las Enfermedades Metabólicas e Infecciosas en población Mexicana

¹ Instituto de Investigaciones Sobre la Salud Pública, Universidad de la Sierra Sur, Oaxaca, México.

² Instituto de Genética Humana, “Dr. Enrique Corona Rivera”, Departamento de Biología Molecular y Genómica, Centro Universitario de Ciencias de la Salud (CUCS), Universidad de Guadalajara, Jalisco, México.

³ Universidad de Guadalajara, Jalisco, México.

⁴ Doctorado en Genética Humana, Universidad de Guadalajara, Jalisco, México.

⁵ Maestría en Salud Pública, Universidad de la Sierra Sur, Oaxaca. México.

Autor de correspondencia: Nory Omayra Dávalos-Rodríguez, Instituto de Genética Humana, Dr. Enrique Corona Rivera del Departamento de Biología Molecular y Genómica, Centro Universitario de Ciencias de la Salud (CUCS), Universidad de Guadalajara. Guadalajara, Jalisco, México. Teléfono 045+9511777250. Correo electrónico: sergio7genetica@hotmail.com.

Resumen. El locus g.37190613 en 7p14.2-14.1 del gen ELMO1 presenta un polimorfismo el cual consiste en un cambio G>A(rs1345365). Esta variante, entre otras, de ELMO1, ha sido asociada con nefropatía diabética en diferentes poblaciones. En México son limitados los estudios de asociación de diabetes mellitus con genes candidatos. Por ello, el objetivo del presente trabajo fue determinar la asociación del SNP rs1345365 del gen ELMO1 con el desarrollo de diabetes mellitus tipo 2 (DM2). Para ello se analizaron 148 pacientes con DM2, 156 individuos sin diabetes pero con factores de riesgo cardiovascular y 269 personas sanas sin DM2. El polimorfismo se identificó por PASA (PCR AMPLIFICATION ALLELE SPECIFIC) y PAGE teñida con nitrato de plata. La asociación se estableció por diferentes modelos de epidemiología genética; el modelo dominante mostró una asociación positiva (p=0,0006) como factor protector y el para-dominante mostró al estado heterocigoto como factor de riesgo. En conclusión el estudio reveló la asociación del SNP rs1345365 del gen ELMO1 con DM2 en una población mestiza Mexicana.

Palabras clave: Gen ELMO1; DM2; estudio de asociación; matriz extracelular; nefropatía diabética.

Association of the ELMO1 gene (snp rs1345365) with development of type 2 diabetes mellitus in the Mexican mestizo population.

Abstract. The g.37190613 locus on 7p14.2-14.1 in the ELMO1 gene has a G>A polymorphism (SNP rs1345365) that has been associated with diabetic nephropathy in different populations. The genetic-association studies in type 2 diabetes mellitus (DM2) on the Mexican population are limited. The aim of this study was to estimate whether the polymorphism G>A of ELMO1 gene is associated with the development of DM2. We included 148 DM2 individuals, 156 individuals with cardiovascular risk factors without diabetes and 269 healthy proband without DM2. The polymorphism was identified by PCR amplification specific allele (PASA), PAGE and silver staining. The association was established by genetic epidemiological models; the dominant model showed a positive association (p=0.0006) as a protective factor, and the para-dominant model to heterozygous, as risk factor. In conclusion, this study revealed the association of the SNP rs1345365 of the ELMO1 gene in a Mexican population.

Key words: ELMO1 gen; Type 2 diabetes mellitus; association study; extracellular matrix; diabetic nephropathy.

Recibido: 9-07-2014 Aceptado: 24-09-2015

INTRODUCCIÓN

La diabetes mellitus tipo 2 (DM2) es una enfermedad multifactorial con umbral, que depende de la interacción entre genes y el medio ambiente. Dado que la DM2 es un problema de salud pública, se han identificado prioritariamente numerosos factores de riesgo. Una de las estrategias empleadas en la búsqueda de genes candidatos son los estudios epidemiológicos. En este sentido existen diferentes ejes como factores de predisposición, tales como la resistencia a la insulina, disfunción de las células beta así como defectos del sistema incretínico (1). Sin embargo, hay que considerar que la complejidad de la DM2 estriba en la sobre-posición, en una misma familia, con otras formas de diabetes. Las frecuencias de formas puras así como de co-herencia de diabetes no se han estimado, de tal manera que muchos de los estudios de asociación reportados arrojan cierto sesgo de información (2). Por otra parte, trabajos de genes asociados a DM2 en México están justificados considerando dos premisas; la primera es la diversidad genética de la población, también teniendo en cuenta que los estudios previos no evidencian la exclusión de formas superpuestas. En una revisión que recopila los resultados de los estudios realizados de la genética en DM2 durante los últimos 15 años se muestra que, en México, los estudios de genes candidatos han sido enfocados en estudiar variantes polimórficas relacionadas con el desbalance energético, metabolismo de lípidos, resistencia a la insulina, disfunción de las células beta, así como morfogénesis del páncreas (2). Entre los genes asociados encontrados están: CPN10 en población/cohorte de la región del norte-oeste, APOE, BGLAP, CPN10, hIAPP, SCARB1, así como TNFA que se identificaron en poblaciones de la región occidente. En la región del centro del país los genes ABCA1, APOE, CPN10, LOC87761, MGEA5 y TCFL2. Mientras que en el sur están asociados CPN10, INS, IRS1 e INRS; se conocen a la fecha más de 50 genes asociados(2-15).Dado el componente poligénico de la DM2 que muestra una gran heterogeneidad molecular, se requiere explorar nuevos genes relacionados con otras vías metabólicas. En este sentido, un eje de trabajo retomado en el estudio de la DM2 son los genes candidato relacionadas con el metabolismo de la matriz extracelular (ME).

La ME está conformada por moléculas interactuantes de la membrana celular y del citoesqueleto. Algunas de ellas son: colágena tipo I, fibronectina, elastina, fribrilina, laminina A/C. La evidencia que sugiere la participación de estas proteínas en la DM2 son los reportes de variantes en LMNA. Estas mutaciones producen lipodistrofia congénita con resistencia a la insulina y la progeria de Hutchinson-Gilford, que cursa con rasgos del síndrome metabólico (16-18). Por lo anterior se propone al gen ELMO1 (engulfment and cell motility protein 1) como candidato para DM2 por los siguientes motivos: 1. la proteína de inmersión y motilidad celular es regulada por los niveles de glucosa; 2. porque media la activación transcripcional del TGFβ1, el cual a su vez incrementa la expresión de mas genes de la ME como colágena tipo 1, LMNA y fibronectina (19-20); 3. porque ELMO1 presenta diferentes polimorfismos localizados en los intrones 13, 19, 18 y 17 (rs1345365, rs1558688, rs741301 y rs7799004), algunos de ellos identificados previamente como factores de riesgo para nefropatía diabética como el SNP rs1345365 (19-22). Sin embargo, no se ha establecido asociación de esta variante con DM2. Por ello en el presente estudio, el objetivo fue estudiar si el polimorfismo rs1345365 de ELMO1 es un factor de susceptibilidad para el desarrollo de DM2.

PACIENTES Y MÉTODOS

a) Selección de pacientes. De un total de 900 pacientes masculinos diabéticos de recién diagnóstico captados en enero de 2003, con seguimiento mensual a diciembre 2013, se seleccionaron 148 diabéticos tipo 2 con los siguientes criterios: Grupo 1 (n=296 cromosomas); evolución de la diabetes de 9 años o más, edad de inicio entre los 35-55 años, manejo exclusivo con metformina (850 mg/cada 12 h, hemoglobina glucosilada A1c del 6,5%, historia familiar negativa para DM tipo 1, DM con sordera, DM neonatal, DM latente autoinmune, así como para diabetes del adulto en jóvenes (MODY). También se consideró historia familiar negativa de lupus eritematoso, tiroiditis, endocrinopatías, DM gestacional, enfermedad renal terminal o hepatopatía crónica. En cuanto a los estudios de laboratorio, se eligieron aquellos que presentaran datos negativos o dentro del rango normal los siguientes: auto-anticuerpos contra la descarboxilasa del ácido glutámico (GAD65), auto-anticuerpos contra el receptor de insulina y auto-anticuerpos contra la tiroperoxidasa (anti-TPO). La prueba para la detección de microalbuminuria y mucopolisacáridos (MPS) urinarios negativos durante los últimos 5 años en su control bimestral. Peso al nacimiento entre 2,8-3,5 kilogramos.

Por otra parte, para formar 2 grupos control, se incluyeron 425 pacientes con edad comprendida entre 35-55 años con los mismos antecedentes heredo familiares que el grupo anterior; un primer grupo conformado por 156 pacientes (312 cromosomas) sin diabetes pero con tres o más factores de riesgo cardiovascular (síndrome metabólico o SM) (23) durante los últimos 10 años en su historia clínica (colesterol total >220 mg/dL, triglicéridos totales >170 mg/dL, presión arterial ≥140/90 mmHg, índice de masa corporal >25, AST (aspartato amino transferasa) y ALT (alanina amino transferasa) tres veces aumentadas sobre el valor normal). Un segundo grupo conformado por 269 (538 cromosomas) personas sanas. Ambos grupos con test negativos para anticuerpos anti-GAD65, anti-TPO, anti-receptor de insulina, mircroalbuminuria y MPS. Este último grupo corresponde a personas previamente enroladas en el estudio “Polimorfismo g.37190613 G>A del gen ELMO1 en población mexicana, marcador potencial para la patología clínico-quirúrgica”

Todas las personas incluidas en el presente estudio fueron de ancestria mestiza, nacidas en México, con un apellido de origen español y ancestros de origen mexicano tres generaciones hacia atrás. Todos firmaron la carta de consentimiento informado. Este trabajo formó parte del proyecto Estudio de Tamizaje Poblacional para la Identificación de Factores de Riesgo Ambientales y Genéticos Asociados al Desarrollo de Enfermedades Complejas Relacionadas con la Nutrición en Población del Sur y del Occidente de México, con número de registro IISSP/BAMM/03, aprobado por los comités de Investigación, Ética y Bioseguridad. El presente estudio se llevó a cabo acorde a la declaración de Helsinki, revisada en el 2008.

b) Caracterización bioquímica. La cuantificación de colesterol, triglicéridos totales AST y ALT fueron determinados espectrofotométricamente usando los kits de Biosytem, la hemoglobina glucosilada A1c se cuantificó por turbimetría y la microalbuminuria se detectó por tira reactiva MicroalbuPHAN. Los anticuerpos anti-GAD65 (normal 0,0-1,45 U/mL), contra el receptor de insulina (<0,5 U/mL) y anti-TPO (Normal 0,0-39U/mL) se realizaron por radioinmunoanálisis, el primero y los dos últimos por enzimo-inmuno ensayo. La identificación de MPS en orina se realizó mediante la prueba de la albúmina ácida, y el aislamiento de mucopolisacáridos se realizó por la precipitación con el cloruro de cetilpiridinio, bajo las condiciones reportadas por Pennock y Graddock (24-26).

c) Caracterización molecular. Se obtuvieron cinco mililitros de sangre periférica de cada probando y se transfirieron en un tubo con EDTA para posteriormente aislar el DNA mediante un kit comercial (Gene Catcher, Invitrogen). El SNP rs1345365 se determinó por PCR amplification of specific alleles (PASA) con los iniciadores, programa de amplificación, mezcla de reacción y electroforesis en geles de poliacrilamida (PAGE), reportadas previamente (27,28). Iniciadores: 5´CACTTCTTCCCCTACAACACTGA´3,R35´GAGGAACTTTAGAAGAATGTA-3´.En los controles, así como población general, las reacciones de PCR y electroforesis fueron realizadas por triplicado para corroborar el genotipificado. Programa de amplificación: 25 ciclos; 95ºC 3 min (desnaturalización inicial), 95ºC, 30 seg (desnaturalización), 52ºC, 45 seg (hibridación), 72ºC, 30 seg (polimerización), extensión final de 72ºC, 3 min. Mezcla de reacción: KCl 1,5 μL (1X), MgCl2 0,45 μL (1,5 mM), 0,3 μl de dNTP´s (0,2 mM), 1 μL de cada iniciador (12,5 pmoles), 2 μL de templado de ADN (200ng), DNA Pol Taq 0,3 μL (1,5 U) (Invitrogen), 10,45 μL de agua. Electroforesis: Los productos de PCR se analizaron en geles de poliacrilamida, proporción 19:1 al 7%, con buffer TBE 1X, con un corrimiento de 2,5 horas a 180 volts y 66 mA. La visualización de los productos de PCR en los geles, se realizó mediante tinción con nitrato de plata 0,1 g/100 mL. Los productos se diferenciaron por los tamaños; el de 198 pb corresponde al alelo G, mientras que el de 203 pb reveló al alelo A.

d) Análisis estadístico. Se estimó la frecuencia alelica y genotípica en los grupos de estudio por conteo directo; su distribución en los grupos de estudio analizados se evaluó al considerar las diferencias en las frecuencias observadas así como las esperadas mediante una X²>3,84 y una p<0,05. El equilibrio Hardy Weinberg (EHW) se consideró cuando las diferencias en las frecuencias genotípicas observadas y esperadas no fueron significativas, con un valor de X²<3,84, p>0,05 (29).

Desde el punto de vista epidemiológico se analizaron dos aspectos; por una parte, la medición de la asociación del SNP rs1345365 con el desarrollo de DM2 y, por otra, la identificación del impacto -como factor de riesgo- que tienen los alelos y/o genotipos derivados de este SNP (30).

La evaluación de la asociación se realizó bajo diferentes modelos; dominante, recesivo, sobre dominante, para-dominante, co-dominante así como aditivo para obtener la razón de riesgo (31). El grado de asociación se estableció acorde a la escala de Hanler para la razón de riesgo (ORs) (32). Para este caso, se consideraron significativos valores de X²>9,21, p<0,01 para dos colas; el intervalo de confianza aceptable fue de 99%.

El impacto del SNP rs1345365 se realizó estimando el valor relativo de la fracción prevenible en la población (FPP), fracción prevenible en expuestos (FPE), así como la tasa de desarrollo o fracción etiológica en la población o riesgo atribuible (FEP). La FEP es un valor porcentual que permite identificar que porción de casos que aparecen en una comunidad son atribuibles a la exposición del factor de riesgo (30). La FPP es también un valor porcentual, estima cuando el factor de exposición (alelo y/o genotipo) produce una disminución en el riesgo (30). La FPE es un valor que se estima en población de expuestos en un estudio de casos y control, representando la proporción reducida en la tasa de incidencia del evento en salud (DM2) si se eliminara la exposición en los portadores de los diferentes alelos y genotipos (30).

Para obtener los valores de parámetros de asociación de impacto, anteriormente citados, se utilizó el programa estadístico Epi-Info versión 7.1.5 (https://wwwn.cdc.gov/epiinfo/7/index.htm). En los casos en los que se presentaban valores <5 en las tablas de contingencia, la asociación e impacto se validó por la X² con corrección de Yates.

RESULTADOS

a) Distribución de alelos: Al comparar la distribución de alelos del SNP rs1345365 se encontró que el alelo G estuvo presente con una mayor frecuencia en los diabéticos (60%), mientras que el alelo A fue mayor en personas con SM (72%) y en individuos sanos (84%) (Fig. 1A). Estas diferencias en la distribuciones alelicas, al estimar la razón de riesgo, mostraron una asociación débil, siendo el alelo A un factor protector para DM2 con valores de ORs=0,7 y 0,65 respectivamente, explicando una FPE entre el 23-34,57% (Tabla I).

b) Distribución de genotipos: Al comparar la distribución de genotipos entre los grupos de estudio se muestra el heterocigoto con mayor frecuencia en los diabéticos (75%), así como también en controles con SM (66%). Los homocigotos A/A tienen una frecuencia menor en personas sanas (34%) (Fig.1B). El homocigoto G/G corresponde al 2,6% del grupo de estudio así como al 1,3 % de la población total y es exclusivo de los diabéticos (Fig. 1B).La distribución genotípica se encontró en EHW en la población total; X²<3,84, p=0,05, mientras el grupo DM2 presentó desviación del equilibrio X²6,99, p=0,001.

c) Análisis de asociación e impacto epidemiológico entre diabéticos y controles con SM: El análisis de asociación de genotipos del SNP rs1345365 mostró que el modelo dominante explica mejor el desarrollo de DM2 con una asociación moderada ORs=0,5768. Lo que sugiere que una única copia del alelo A es suficiente como factor protector (Tabla IA). Mientras que el modelo para-dominante explica que la presencia de un alelo G es determinante como factor de riesgo ORs=1,5 (Tabla IA). Los resultados de los modelos co-dominante y sobre-dominante mostraron una asociación moderada, siendo el genotipo homocigoto A/A protector para el desarrollo de DM2; ORs=0,5858 y 0,5976, respectivamente. La limitante para este último modelo es que no se detectaron homocigotos G/G en los controles con SM (Tabla II).

Los genotipos del SNP rs1345365 mostraron valores más significativos para el modelo dominante y para-dominante, con una FPP del 14,06% y una FPE de 42,32%, así como FPP de 36,38 y FEP 27,62%, respectivamente (Tabla IA).

d) Análisis de asociación e impacto epidemiológico entre diabéticos y controles sanos: La asociación de genotipos del SNP rs1345365 entre diabéticos y controles sanos mostró que el alelo A es un factor de protección para DM2 mediante los modelos dominante, sobre-dominante, co-dominante y recesivo (p<0,01)(Tabla IB). Mientras el modelo para-dominante mostró una tendencia como factor de predisposición (p=0,05178) (Tabla IB). El modelo con mayor impacto fue el modelo dominante, el cual mostró al genotipo homocigoto A/A como factor de protección con una FPP del 16,37% y una FPE de 46,74%.

e) Análisis de asociación e impacto epidemiológico entre personas sanas y controles con SM: Finalmente, al comparar la distribución de genotipos del SNP rs1345365 en los grupos controles (personas con SM y sanas), se encontró asociación moderada para SM mediante el modelo co-dominante en el cual el genotipo homocigoto A/A es protector p=0,0225 con un impacto de FPP del 56,10% y FPE de 58% (Tabla IC).

DISCUSIÓN

Este es el primer estudio que sugiere asociación, así como impacto epidemiológico del SNP rs1345365 del gen ELMO1 con el desarrollo de DM2. Encontramos, por el modelo dominante, que el alelo silvestre (A) es un factor de protección, mientras que el alelo ancestral (G) es un factor de predisposición. Por otra parte, el modelo para-dominante mostró que cuando se pierde una copia del alelo silvestre (A), como en el caso de los portadores heterocigotos, aumenta el riesgo. Un efecto similar se observó en el desarrollo de SM, (Tabla IA y IB), resultando el genotipo homocigoto A un factor protector. Estos resultados sugieren que el alelo ancestral (G) es un factor de predisposición para DM2 y SM.

En afroamericanos, el alelo A del SNP rs1345365 es un factor protector para la nefropatía en pacientes diabéticos; sin embargo, en esta población no se encontró asociación con DM2 (21). En otros estudios se ha reportado pérdida de la asociación del SNP con nefropatía diabética (19, 21,22). Estas diferencias están relacionadas con la diversidad genética, la heterogeneidad molecular y con la naturaleza multifactorial de la DM2 (1). Esto es lo esperado, considerando que el efecto aditivo entre genes y factores ambientales es lo que determina el umbral para el desarrollo de DM2 (2).

Los resultados sugieren una posible asociación del SNP rs1345365 como factor de susceptibilidad para DM2 y para SM, dado que de eligieron controles sin daño renal sub-clínico o clínico, validado por la prueba negativa de microalbuminuria, así como los ensayos negativos para los mucopolisacáridos y niveles bajos de hemoglobina glucosilada A1c, que son indicadores del grado de control metabólico (26,33). Aunque el genotipo homocigoto G/G es exclusivo en los diabéticos, no se puede aseverar que la doble dosis del alelo G aumente el riesgo, ya que está ausente en los grupos control. En dos reportes previos de población sana en México, no se encontraron homocigotos G/G. Datos similares se han reportado en residentes de Los Ángeles con ancestria mexicana, así como en poblaciones asiática, toscana italiana y residentes de Utah del norte y occidente con ancestria europea (Tabla II) (27,28).

Por lo anterior se propone que la baja frecuencia del genotipo homocigoto G/G en la población mexicana, puede estar relacionada con los efectos del mestizaje que se dio entre amerindios, españoles y africanos durante la conquista. Los heterocigotos aumentaron y conservaron la frecuencia de genotipos y alelos, como en algunas poblaciones con ancestria africana (Tabla II). Esto sugiere un efecto fundador en África para el polimorfismo SNP rs1345365 (28).

En estudios de casos y controles es común que se reporten valores de la prueba equilibrio Hardy Weinberg (EHW), pero el sesgo de información estriba en que se consideran los controles como población general, lo cual es erróneo porque es una población seleccionada y, por lo tanto, de entrada el EHW está desviado (29-31). En el presente trabajo no hay sesgo informativo ya que el EHW se estimó en la muestra total de probandos incluidos, considerando que los tres grupos de estudio pertenecen a una misma población. Además, en este trabajo se incluyeron probandos enrolados en estudios previos realizados en México, en los cuales ya se había reportado el equilibrio EHW para SNP rs1345365 (26,27).Estos estudios, en su conjunto, muestran que el marcador polimórfico tiene una alta verosimilitud para estudios de asociación, descartándose también errores de genotipificación. Del mismo modo en esta investigación se reportan las frecuencias de alelos así como de genotipos en pacientes con SM y DM2 de población mexicana (Tablas I A, B y C), lo cual no se había investigado previamente (Tabla II). El grupo con DM2 presentó una desviación EHW que permitió inferir el efecto que tiene un SNP en la enfermedad, incrementando o disminuyendo el número de heterocigotos (Fig. 1B).

Hay que considerar que el SNP rs1345365 está en desequilibrio de ligamiento con otros SNP en el intrón 13 de ELMO1, región altamente conservada por lo que es posible que contenga elementos regulatorios transcripcionales (21). Esto podría llevar a un sesgo, ya que la DM2 podría estar no solamente asociada al SNP analizado, sino también a un haplotipo conformado con alelos de otros marcadores del mismo intrón con los cuales segregan en bloque. Sin embargo, esta hipótesis en población mexicana necesita ser explorada con análisis funcional de las secuencias conservadas durante la evolución.

Para evitar sesgos de información en estudios de asociación en diabetes, se deben considerar los elementos de la complejidad en el diseño metodológico, como los múltiples ejes metabólicos, la co-existencia de diferentes tipos de diabetes en una misma familia y la impronta genética (2). Desde el punto de vista epidemiológico, este estudio es el primero en el que solo fueron considerados para el análisis probandos cuyo componente fuera la resistencia a la insulina (DM2 puros). El hecho que se considere solo probandos para el análisis cuyo componente sea la resistencia a la insulina (DM2 puros), esto permite sugerir que el SNP rs1345365 es un factor de predisposición, tal como se ha reportado para las variantes en LMNA (16-18). La inclusión de probandos entre los 35-55 años nos permitió excluir a la diabetes MODY y la diabetes de inicio en el adulto mayor, eliminando los sesgos de confusión así como de información (31).

El bajo peso al nacimiento está relacionado con una disminución de la masa de células beta e impronta como factores en la génesis de la DM2 (34). En el presente trabajo se pudo descartar parcialmente este efecto, ya que se excluyeron pacientes con bajo peso al nacimiento (35). Por otra parte, el sesgo del recuerdo está eliminado ya que el peso al nacimiento fue verificado en el certificado de nacimiento (31).

Acorde con la escala Hanler, la asociación moderada con DM2 del SNP rs1345365 de ELMO1 deberá ser corroborada en otras poblaciones y replicada en México por otros estudios de seguimiento a largo plazo (32). Si se considera el componente poligénico y la baja penetrancia de la DM2, un solo marcador genético no puede explicar por completo todos los casos como se observó en el presente trabajo (2). El análisis de impacto, para el modelo dominante y para dominante al comparar DM2 y los controles con SM arrojó valores de FPP del 14,06% y una FPE de 42,32% así como, FPP de 36,38 y FEP 27,62%.

El hecho que el SNP de ELMO1 analizado esté asociado con DM no permite concluir contundentemente que es un agente causal que modifica el riesgo, pero si es sugestivo (31). Tres estudios apoyan tal sugerencia; uno realizado en mestizos Mexicanos de la ciudad de México en los que se analizaron 24 genes asociados a DM2 en diferentes poblaciones europeas, en el cual se encontró correlación con los SNP rs13266634 (SLC30A8), rs7923837 (HHEX), rs10811661 (CDKN2A/2B), rs4402960 (IGF2BP2), rs12779790 (CDC123/CAMK1D) y rs2237892 (KCNQ1)(36). El segundo, del tipo de búsqueda exhaustiva del genoma, realizado en 8214 Mexicanos y Latinos con 9,2 millones de polimorfismos reveló otros dos genes, SLC16A11 y SLC16A13. Este último gen candidato está relacionado con el metabolismo de lípidos (37). El tercer estudio, llevado a cabo en probandos de la Ciudad de México, con variantes en 14 genes candidato para síndrome metabólico, mostró que las variantes en TCF7L2 estaban fuertemente correlacionadas con la DM2 y otro nuevo marcador asociado; el SNP rs4994 del gen ADRB3 (38).

Considerando las anteriores premisas y la diversidad de la población mexicana, se requiere hacer más estudios de réplica de genes asociados, como el realizado en diabéticos de las ciudades de Guerrero y México en el que solo se encontró asociación para variantes en IRS1 y TCF7L2 (39). Sin embargo, también serán necesarios estudios funcionales in vivo así como in vitro que demuestren un efecto biológico diferente de la variante ancestral en comparación con el alelo más frecuente, no solo para el polimorfismo rs1345365 de ELMO1 sino también para los otros SNP que se han encontrado asociados a la DM2 en los mexicanos.

Finalmente, hay que considerar que la mala alimentación así como la pobreza son factores de riesgo, en las sociedades postcoloniales como la mexicana, para el desarrollo de enfermedades complejas, incluyendo la DM2. Estas se caracterizan por la mala alimentación, abundancia de comidas con alto contenido energético y resistencia a la insulina (RI). La hipótesis del genotipo ahorrador postula que los genes responsables de la RI protegieron a los individuos durante períodos prolongados de ayuno en la cuarta glaciación, al almacenar energía en forma de grasa en vez de glucógeno en el tejido muscular. Esto permitió la selección positiva de los pobladores migrantes. Este genotipo, heredado en las sociedades postcoloniales actuales, se convierte en un mecanismo de daño porque estos individuos no están diseñados para la ingesta abundante, lo cual se refleja en el aumento de la incidencia de obesidad, sobrepeso, dislipidemias, e hipertensión arterial; el gen ELMO1 podría ser parte de este genotipo (2,40).

Por las mismas consideraciones, el alelo ancestral G podría ser también un factor de riesgo para el desarrollo de SM (Tabla II). Sin embargo, se requieren estudios que amplíen la muestra poblacional de personas sanas y con SM (18).

En conclusión, el presente estudio sugiere la asociación del SNP rs1345365 del gen ELMO1 con el desarrollo de DM2 clínicamente pura, cuyo fenotipo principal por más de 10 años ha sido la resistencia a la insulina, independientemente de la susceptibilidad genética a la nefropatía diabética. Además apunta al estado homocigoto A/A como protector para el desarrollo de SM.

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