Efecto de la combinación levotiroxina-clenbuterol sobre la arteria aorta en ratas Sprague-Dowley

The effect of combined levothyroxine-clenbuterol over aortic artery in Sprague-Dowley rats

María Armas¹, Claudia Guarino¹, Manuel Moya^2,3, Emilio Suniaga³, Abelardo Morales⁴ Aniceto Méndez⁴, Kimberly Brewer⁵, Thomas Tobin⁶.

¹ Facultad de Farmacia Universidad Santa María, Caracas-Venezuela.

² Instituto de Medicina Experimental Facultad de Medicina Universidad Central de Venezuela.

³ Instituto Nacional de Higiene Dr. Rafael Rangel.

⁴ Departamento de Anatomía y Anatomía Patológica Comparadas, Edificio de Sanidad Animal, Campus de Rabanales Ctra. de Madrid km 396, 14071, Córdoba Universidad de Córdoba, España.

⁵1711 Lakefield North Court, Wellington, FL 33414 USA.

⁶ Maxwell H. Gluck Equine Research Center, University of Kentucky, Lexington USA.

Resumen

El objetivo describir el efecto de la medicación combinada Levotiroxina-clenbuterol sobre la aorta en ratas Sprague- Dowley. Se establecieron 4 grupos de tratamiento para ratas Sprague-Dowley. Los animales fueron medicados por 21 días con Clenbuterol; Levotiroxina; Clenbuterol + Levotiroxina vía oral. Fue practicada eutanasia y necropsia. Se realizo un estudio macroscópico, morfológico de la arteria aorta, fueron colectadas muestras de aorta para estudio histológico. Los resultados se presentan a continuación: el grupo control evidencio la aorta normal. El Grupo Clenbuterol: en la túnica media: cambios degenerativos con vacuolización intracitoplasmatica (25%). Así como necrosis de coagulación focal (10%). Hipertrofia marcada de la intima con aumento en la producción de fibras de colágeno, en la túnica adventicia: cambios degenerativos focales moderados. En el Grupo Levotiroxina: en la túnica media: se observan cambios degenerativos con vacuolización intracitoplasmatica (15%). Hipertrofia marcada de la intima con aumento en la producción de fibras de colágeno, en la túnica adventicia: cambios degenerativos focales leves. El Grupo Clenbuterol + Levotiroxina: en la túnica intima: no se observaron lesiones significativas, en la túnica media: se observan cambios degenerativos con vacuolización intracitoplasmatica (10%). Hipertrofia marcada de la intima con aumento en la producción de fibras de colágeno, en la túnica adventicia: no se observaron lesiones significativas. En conclusión describimos los patrones morfológicos, macroscópicos e histológicos la aorta en la terapéutica con Clenbuterol, Levotiroxina, Clenbuterol-Levotiroxina en ratas Sprague/Dowley.

Palabras claves: aorta, clenbuterol, levotiroxina, ratas.

Abstract

The aim of this study was to describe the effect of the combined drugs Levothyroxine-clenbuterol on the aorta in Sprague-Dowley rats. Four treatments to Sprague-Dowley rats were established. The animals were dosed for 21 days with Clenbuterol; levothyroxine; Clenbuterol + Levothyroxine orally. Were practiced euthanasia and necropsy. Macroscopic study, morphological aortic artery, aorta samples were collected for histological study was conducted. The results are as follows: Control group evidenced normal aorta. Clenbuterol Group: in the tunica media: degenerative changes with intracytoplasmic vacuolization (25%). Focal necrosis and bleeding (10%). Marked hypertrophy of the intima with increased production of collagen fibers, the adventitia with moderate focal degenerative changes. Levothyroxine In Group: in the tunica media: degenerative changes with intracytoplasmic vacuolization (15%) are observed. Marked hypertrophy of the intima with increased production of collagen fibers in the adventitia: mild focal degenerative changes. Clenbuterol + Levothyroxine Group: the intima: no significant lesions were observed in the tunica media: degenerative changes seen with intracytoplasmic vacuolization (10%). Marked hypertrophy of the intima with increased production of collagen fibers, in the adventitia no significant lesions. In conclusion we describe the morphological, macroscopic and histological patterns in the aorta with Clenbuterol therapy, levothyroxine, Levothyroxine Clenbuterol-in Sprague / Dawley rats.

Keywords: aorta, clenbuterol, levothyroxine, rats.

Recibido: 20/10/2013 Aceptado: 21/11/2013

Introducción

El uso de Clenbuterol y Levothiroxine como suplemento en caballos en entrenamiento es común en muchos Hipódromos a nivel mundial, la muerte súbita de siete caballos en California USA, en los cuales fueron detectadas estas dos substancias ha generado múltiples especulaciones en cuanto a su uso en caballos³. La levotiroxina (Thyro-L), es una hormona tiroidea (T4) que se utiliza para tratar el hipotiroidismo, con el propósito de restaurar la actividad metabólica normal. La levotiroxina tiene efectos similares a la adrenalina que incluyen aumento del ritmo cardíaco, palpitaciones, hipertensión, taquicardia, nerviosismo y aumento del riesgo de arritmias cardiacas ⁴. Los riesgos de la sobre-medicación de caballos con función tiroidea normal (eutiroideo) incluyen indicaciones claramente cardiovasculares adversos y síntomas de hipertiroidismo que puede ser mortal cuando se combina con otros medicamentos en particular, Clenbuterol y agonistas de receptores N-metil de aspartato (ketamina). Su uso en conjunto con el clenbuterol elimina de manera potente la grasa, mientras que la ketamina puede aumentar el riesgo de insuficiencia cardiaca. El Clenbuterol es un medicamento broncodilatador (agonista ß-2-adrenergico), se emplea en la industria de las carreras para problemas respiratorios y como anabolizante⁴. El Clenbuterol aumenta el tamaño de las células del músculo del corazón debido a la mayor producción de colágeno, un material elástico que reduce la capacidad del corazón para bombear la sangre y puede potencialmente conducir a un paro cardíaco⁹. El colágeno también interfiere con las señales eléctricas enviadas a través de las células del músculo cardíaco para que siga bombeando con regularidad y pueden producir arritmias (latidos cardíacos irregulares). Existe un considerable interés en el uso potencial de las drogas (Levothyroxyne, clenbuterol, ractopamina, hidrochloride) y suplementos (picolinato chromion, magnesio) en los programas de pérdida de peso para los caballos³, pero pocos de estos agentes han sido evaluados en estudios bien diseñados. Los estudios en caballos no obesos han demostrado que la administración crónica clenbuterol reduce la adiposidad³. Sin embargo, estos estudios también revelaron efectos adversos incluyen una disminución de la función cardíaca. Por lo tanto, el uso de clenbuterol no puede ser justificado para el manejo de la obesidad. Estudios recientes también han demostrado que la administración de levotiroxina de sodio puede aumentar la pérdida de peso en los caballos; su uso en el manejo de los caballos con síndrome metabólico equino es recomendado¹⁰. En algunos países específicamente en la Comunidad Europea es prohibido el uso de clenbuterol en animales, mientras que en otros países es permitido en caballos atletas solo durante entrenamiento pero es prohibido su uso en pruebas públicas (ARCI: Asociación Internacional Comisionada para las Carreras, Penalización Clase B)^17,18. En virtud de esta importante área de estudio planteamos como objetivo describir el efecto de la medicación combinada Levotiroxina-clenbuterol sobre la aorta en ratas Sprague-Dowley.

Material y método

Se establecieron 4 grupos de tratamiento (comprendido por 4 animales cada uno), para ratas Sprague-Dowley, como se muestra en la tabla N°1. Los animales fueron medicados por 21 días de la siguiente manera:

Grupo 1.- Clenbuterol: vía oral 5mg/kg⁴.

Grupo 2.- Levotiroxina: vía oral 0.2mg/kg.

Grupo 3.- Clenbuterol + Levotiroxina: vía oral (5mg/kg- 0.2mg/kg).

Grupo 4.- Control: se le administro solución fisiológica: vía oral.

Fue practicada eutanasia de acuerdo al protocolo internacional y posteriormente se le realizo la técnica de necropsia^1,2. Se realizo un estudio macroscópico, morfológico de la aorta, en los cuales se tomaron las medidas de acuerdo a los protocolos descritos en la literatura^5,6. Fueron colectadas muestras de aorta, las cuales se fijaron en formol por 24 horas y procesadas por los métodos convencionales de procesamiento histológico². Se realizo un análisis estadístico (estadística descriptiva) y ANOVA.

Resultados

Los resultados morfológicos se presentan a continuación:

La comparación de grupos fue la siguiente (ANOVA): COMPARACION DE GRUPOS (ANOVA):

Los resultados macroscópicos e histológicos en ratas Sprague-Dowley, se presentan a continuación en la tabla N°3.

A continuación se presentan imágenes de los cortes histológicos de la aorta representativos de cada grupo de tratamiento en ratas.

Discusión

En cuanto a la medicación establecida clenbuterol, levotiroxina y su combinación (Clenbuterol-Levotiroxina), en general se observaron mayores cambios significativos en la aorta de las ratas medicadas con clenbuterol. Se evidenciaron cambios degenerativos e severos en comparación con los otros grupos de tratamiento y el grupo control, lo cual coincide con los reportes en la literatura e inclusive estudios en miocitos del corazón de ratas en dosis terapeuticas⁴. Los cambios histológicos fueron menos evidentes en el grupo de levotiroxina en comparación con el grupo Clenbuterol y el grupo Clenbuterol + Levotiroxina. En todos los grupos de tratamiento se observo hipertrofia de la media excepto el grupo control. La cual es una importante evidencia del efecto del clenbuterol a largo plazo como un riesgo potencial circulatorio cardiovascular ya que puede disminuir la capacidad contráctil de la arteria aorta e incrementar la resistencia periférica vascular así como el efecto de estenosis vascular, que se puede evidenciar durante el ejercicio o bajo situaciones de estrés. En este estudio no se consideraron las variables estrés y ejercicio en las ratas pero ha sido propuesto para un experimento futuro en conjunto con los niveles de cortisol. Un estudio en caballos de raza Standardbred medicados con clembuterol a dosis terapéutica de manera crónica mostró un aumento considerable de las dimensiones de la raíz de la aorta 29,9 +/- 6.1%; 24.0 +/- 1,7%), lo que sugiere un mayor riesgo de rotura de la aorta⁷, esto parece coincidir con los resultados obtenidos en este estudio. Estudios de la pared de la aorta bajo disfunción de las hormonas tiroideas sugieren cambios significativos en la pared de la intima y media de la aorta bajo condiciones de hipotiroidismo. El espesor de la túnica media aumentó en los grupos de hipertiroidismo y hipotiroideos en un 75% y 35%¹⁰. Además, el área relativa de colágeno aumentó en los grupos mencionados anteriormente por 142% y 120%, respectivamente¹⁰.Estos resultados relacionados al incremento del colágeno son similares a los observados el grupo medicado con Levotiroxina. En conclusión describimos los patrones morfológicos, macroscópicos e histológicos la aorta en la terapéutica con Clenbuterol, Levotiroxina, Clenbuterol-Levotiroxina en ratas Sprague/Dowley.

Referencias

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