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Zootecnia Tropical
versión impresa ISSN 0798-7269
Zootecnia Trop. vol.30 no.3 Maracay set. 2012
Efectos de la esplenectomía sobre el Número Total de Leucocitos y Proteínas Séricas Totales en becerros Bos taurus
Emir Espinoza *1, Ana Álvarez 2 y Carmen Madrid 3.
*1 Universidad Simón Rodríguez. Instituto de Estudios Científi cos y Tecnológicos (IDECYT). Altos del Cují, carretera La Mariposa, calle Mara, San Antonio de los Altos estado Miranda. *Correo electrónico: espinozaemir@yahoo.com
2 Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas (INIA). Unidad de Sanidad Animal. Maracay. Aragua. Venezuela.
3 Ejercicio Libre.
RESUMEN
El objetivo de este trabajo fue realizar un estudio comparativo del número total de leucocitos (NTL) y proteína sérica total (PST) en becerros Bos taurus esplenectomizados vs no esplenectomizados, a ser utilizados como multiplicadores de agentes hemotrópicos. Seis se esplenectomizaron por el método quirúrgico convencional y los tres restantes se utilizaron como controles. Las determinaciones de las variables se realizaron durante un lapso experimental de cinco semanas, utilizando el hemocitómetro para la obtención del NTL y procedimiento colorimétrico comercial para análisis de PST y sus componentes (albúmina, globulinas y relación A:G). Los datos se agruparon en medias y fueron analizados mediante la prueba no paramétrica U Mann-Whitney. No hubo diferencias estadísticas al comparar las medias estudiadas. Los hallazgos obtenidos no permitieron expresar conclusiones defi nitivas sobre las variables estudiadas. El cociente A:G (0,6) sugirió producción de anticuerpos en los animales esplenectomizados.
Palabras clave: Becerros Bos taurus, esplenectomizados, respuesta inmunitaria.
Splenectomy effects on the total number leukocytes and total serum proteins total in calves Bos taurus
ABSTRACT
The aim of this study was to perform a comparative study of the total number of leukocytes (TLN) and total serum proteins (TSP) in. Bos Taurus calves splenectomized vs non splenectomized, to serve as multipliers haemotropic agents. Six were splenectomized for conventional surgical methods and the remaining three were used as controls. The variables determinations were carried out during an experimental lapse of fi ve weeks, using the hemocytometer for the obtaining of the TLN and commercial colorimetric method for analysis of SPT and its components (albumin, globulins and ratio A:G). The data grouped in means and they were analyzed of the non-parametric U Mann-Whitney. The comparison between means did not show any statistical differences. The fi ndings did not allow defi nitive conclusions about variables studied. The ratio A:G (0.6) suggested the production of antibodies in animals splenectomized.
Key words: Calves Bos taurus, splenectomized, immune response.
Recibido: 29/08/12 Aprobado: 29/05/13
INTRODUCCIÓN
En Venezuela, los sistemas de explotación bovina son afectados negativamente por una serie de factores entre los cuales fi guran las infecciones por hemotrópicos (Protozoos y Rickettsias), cuyas patologías inciden sobre el mejoramiento de la producción y productividad de los rumiantes generadores de proteínas esenciales para la alimentación del colectivo venezolano. Estas hemoparasitosis son interactivas y dependientes de factores tales como, condiciones inmunológicas, patogenicidad de los parásitos y entornos ambientales para la instauración de la enfermedad en particular (Barrios et al., 2011; Meléndez, 1998).
Las enfermedades transmitidas por garrapatas (Babesiosis y Anaplasmosis) constituyen uno de los mayores retos para la salud y el manejo de los bovinos en Latinoamérica, y por ende en el país. En áreas endémicas tropicales y subtropicales, el ganado adaptado, ha desarrollado resistencia a los vectores y a los patógenos transmitidos por ellos; no obstante el mejoramiento genético de los biotipos bovinos tradicionalmente explotados, mediante el uso de razas Bos taurus presentan obstáculos dada la susceptibilidad de este tipo de animales a estos patógenos hemotrópicos (Engwerda y Meeusen, 2010; Shkap et al., 2007).
Conocidas las limitaciones de las diversas medidas disponibles para controlar y tratar la anaplasmosis y babesiosis bovinas, el método de inmunización (vacunación) con parásitos vivos atenuados y cepas menos patógenas, se perfi la en el momento actual, como un medio de control sustentable al estimular en el hospedador una posible inmunidad por un largo tiempo que puede abarcar el período de mayor productividad del Bóvido. A pesar de las desventajas de este tipo de vacunas vivas, no se visualiza en un tiempo perentorio de esta era post genómica, el desarrollo y mercadeo de vacunas recombinantes contra la anaplasmosis y babesiosis bovina (Reinbold et al., 2010; Shkap et al., 2007). En consecuencia, el uso de animales (bovinos jóvenes) experimentales esplenectomizados continuaran siendo requerimientos esenciales para la implementación y producción de este tipo de inmunógeno (Shkap et al., 2007; Lew y Jorgensen, 2005), a pesar de los avances en cultivos in vitro de estos hemoparásitos (Rojas et al., 2011; Guillen y León, 2001).
Los becerros esplenectomizados experimentalmente (extracción quirúrgica del bazo) están inmunodeprimidos, comprometiéndose de esa manera la eliminación selectiva de los eritrocitos, la defensa inmunitaria y el almacenaje de las plaquetas (Reinbold et al., 2010; Coetzee et al., 2006); sin embargo, la defi ciencia transitoria por ausencia de esta estructura linfática secundaria puede ser compensada en el caso de los bovinos, por los nódulos o ganglios hemolinfáticos, al poseer algunas similitudes anatómicas y funcionales con el bazo (Campal y Barreto, 2009; Bassan et al., 1999).
Tomando en cuenta los criterios expresados por Barrios et al, (2011) que al referirse a susceptibilidad y resistencia a noxas patógenas, como las generadas por parásitos y bacterias hemotrópicas, se deben considerar los mecanismos o elementos infl amatorios (respuesta inmunológica humoral y celular) generados por esos antígenos producidos o derivados de esos agentes extraños al hospedador bovino; se pretende reseñar en esta comunicación las observaciones preliminares obtenidas a través de un estudio comparativo del número total de leucocitos (NTL) y proteínas séricas totales (PST) entre bovinos Bos taurus esplenectomizados vs no esplenectomizados, a ser utilizados como multiplicadores de agentes hemotrópicos.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se seleccionaron para este estudio preliminar, nueve animales Bos taurus. Mediante el uso de la tabla aleatoria, seis (becerros) se adjudicaron para ser esplenectomizados (inmunodepresión) mediante acto quirúrgico convencional y los tres restantes sirvieron como controles. Ambas secciones experimentales fueron alojadas en ambientes separados. La alimentación consistió en el suministro de heno, alimento concentrado y agua ad libitum. La duración del experimento abarcó cinco semanas en los dos grupos de animales estudiados.
Las muestras sanguíneas fueron colectadas de la vena yugular durante las cinco semanas de la investigación. El conteo del número total de leucocitos (NTL) se efectuó mediante el uso del hemocitómetro, expresándose los resultados en gigas por litro (g/L = 109/L). Los sueros para la determinación de la proteína sérica total (PST) y la albúmina se procesaron dos veces por semana durante el lapso experimental, a través de un método colorimétrico convencional,
utilizando reactivos comerciales y señalándose los resultados en g/L. Los valores de las globulinas y la relación albúmina: globulinas se determinaron por fórmulas matemáticas (Matheus y Figuereido, 2004).Los datos se agruparon en medias para ser analizados estadísticamente a través de la prueba no paramétrica de U Mann-Whitney, con una signifi cación máxima del 5% (Morales y Pino, 2009; Wiedenhorfer, 1993).
En cuanto a las consideraciones éticas, el procedimiento que se les realizó a los animales, cumplió con todas las condiciones y regulaciones de la Institución, para ensayo e investigaciones con especímenes mamíferos (MPPCYT, Código de Bioética y Bioseguridad, 2008)
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Como hipótesis de trabajo, se infi rió la posibilidad que en los becerros esplenectomizados se produjera algún cambio en el NTL, por lo materializado en algunas informaciones científi cas, las cuales señalan la presencia de diversas anormalidades inmunológicas después de las esplenectomías. Lo anterior, clínicamente se pudiera traducir en un mayor riesgo para la salud los animales intervenidos (Moreno, 2009; Ochoa et al., 2003; Bassan, 1998).
La valoración de la media del número total de leucocitos (NTL) de los animales esplenectomizados y no esplenectomizados son mostrados en el Cuadro 1, donde se evidencia que los promedios obtenidos durante el ensayo experimental, oscilaron dentro de las cifras referenciales citadas para la especie (Cotter, 2001). Es notorio que en los animales controles, el promedio (6,3 x 109) del NTL se ubicó ligeramente por debajo del rango medio de referencia (8 x 109). Los becerros esplenectomizados no revelaron fluctuaciones indicativas de alteración en la cantidad del NTL (Cuadro 1), dado que sus valores mínimos y máximos se movieron dentro los límites inferiores y superiores de referencia. La comparación de las medias entre los grupos, no indicó diferencia significativa (Cuadro 1).
Cuadro 1. Promedios del número total de leucocitos (NTL, gigas por litro1) en los becerros esplenectomizados y sus controles.
Los reportes científicos consultados, muestran sufi cientes testimonios que el bazo en diferentes animales y el hombre no es esencial para la vida (García, 2008; Bassan et al., 1998). Las esplenectomías realizadas de forma experimental en animales o en humanos debidos a traumatismos abdominales, desencadenan modificaciones en los parámetros inmunológicos, citándose disminución de las inmunoglobulinas (IgG, IgM), de la respuesta primaria a antígenos, y de la respuesta de los linfocitos T (Moreno, 2009; Bassan et al., 1998).
La posible explicación de no haber diferencia entre las medias en ambos grupos experimentales, puede ser sustentada por la conclusiones obtenidas por Mahmoud y Abou-Zeina (2008) y Bassan et al. (1999), quienes señalaron que otros órganos linfoides secundarios son capaces de realizar el papel suplementario en la función esplénica en bovinos jóvenes esplenectomizados, situación interesante a tomar en cuenta durante las inoculaciones experimentales de becerros inmunodeprimidos quirúrgicamente para la propagación de aislados y/o cepas de Babesia sp y Anaplasma sp en Venezuela. En el mismo orden de ideas, podemos indicar que los datos obtenidos en esta experiencia con la determinación del NTL, coinciden en parte con los resultados señalados por Moreno (2009), quien trabajo con becerros esplenectomizados en Colombia.
En los Cuadros 2 y 3 se detalla el comportamiento de la concentración de PST y sus componentes cuando se trató de indagar en este estudio experimental, si la esplenectomía realizada en becerros Bos taurus producen o generan alteraciones en la concentración sanguínea de las mismas. Para el caso de las PST en los dos grupos de animales (esplenectomizados y controles), la media y los valores mínimos y máximos (Cuadro 2) variaron cercano a los rangos señalados por la literatura como normales para la especie (Cole; 1989; Kaneko, 1989), no evidenciándose a la comparación, diferencias estadísticas entre las medias de los dos secciones experimentales. Igualmente, en este estudio con respecto a los componentes de las PST, los resultados de las medias de la albúmina y las globulinas al ser comparadas, tampoco se encontraron diferencias estadísticas. La relación A:G osciló entre el límite inferior (LI, 0,6 g/L) y superior (LS, 0,9 g/L) citado por autores tales como Duncan y Prasses (2005) y Kaneco (1989).
Cuadro 2. Promedios de las Proteínas Séricas Totales (PST, gramos por litro1) en los becerros esplenectomizados y sus controles.
Cuadro 3. Estimación de la Concentración Media1 de la Albúmina, Globulinas y la Relación A:G en becerros esplenectomizados y sus controles.
CONCLUSIONES
Los hallazgos obtenidos en esta investigación, no permiten expresar conclusiones defi nitivas sobre las variables estudiadas. La comparación de las medias del NTL, PST, Albúmina y Globulinas no señaló diferencias estadísticas; no obstante se pudo observar en el grupo experimental esplenectomizado que la fracción de la globulinas aumentó ligeramente, lo cual podría sugerir producción de anticuerpos, situación que se refl eja en el cociente A:G. Se recomienda profundizar este tipo de estudios, incluyendo la evaluación de otras variables y sus fracciones para confi rmar o negar las observaciones aquí referidas.
LITERATURA CITADA
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