Morphological Characterization of the Organs of the Endocrine System of the Spectacled Cayman (Caiman crocodilus crocodilus). Histological Aspects
Jenny González-Torrealba*, Gisela C. García C.*,1, Sonia Alvarado-Rico*, Elizabeth Marcano de Díaz** y Albert Rodríguez***
* Cátedra de Histología y ** Cátedra de Sociología y Extensión, Facultad de Ciencias Veterinarias. *** Pregrado de la Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad Central de Venezuela. Apartado 4563, Maracay 2101A, estado Aragua, Venezuela
Correo-E: garciagc@hotmail.com
1 A quien debe dirigirse la correspondencia (To whom correspondence should be addressed)
Resumen
Se realizó la descripción histológica de los órganos endocrinos de nueve babas, cinco hembras y cuatro machos (Caiman crocodilus crocodilus), provenientes del Hato Santa Ana, estado Guárico y de la laguna de oxidación de la Facultad de Agronomía de la Universidad Central de Venezuela (UCV), estado Aragua. Las muestras se fijaron en formol neutro al 10% v/v y se incluyeron en parafina en el Laboratorio de Histoquímica de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la UCV. Todos los órganos fueron sometidos a la coloración de rutina con hematoxilina y eosina. También, se utilizaron otras coloraciones especiales para la hipófisis como: ácido peryódico de Schiff, tricrómico de Shorr, tricrómico de Gallego y el método de Wilder. Los hallazgos del presente estudio permitieron evidenciar la presencia de la hipófisis, tiroides, paratiroides, glándulas adrenales y la porción endocrina del páncreas, con estructuras bien definidas, como se presentan en otros reptiles, aves y mamíferos; a diferencia de la epífisis, que no se ubicó macroscópicamente. Los hallazgos revelaron que la hipófisis se encontraba organizada de manera similar a otras especies, con una adenohipófisis y una neurohipófisis. La epífisis o glándula pineal no se presentó como un órgano independiente; histológicamente, estuvo representada por células con citoplasma difícil de distinguir y un núcleo redondeado, con nucléolo prominente, a nivel del encéfalo. La tiroides presentó folículos tiroideos y células parafoliculares características. En la glándula paratiroides se evidenciaron las células principales, oxífilas y células similares a las parafoliculares. Las glándulas adrenales mostraron tejido cortical y tejido medular entremezclados. El páncreas mostró tejido linfático asociado, destacándose la porción endocrina, por su agrupación en islotes de Langerhans, constituidos por células con citoplasma pálido, en comparación con las de los acinos.
(Palabras clave: Histología; sistema endocrino; Caiman crocodilus crocodilus)
Abstract
]]> A histological description of the endocrine organs of nine spectacled caimans (Caiman crocodilus crocodilus) of both sexes, from the Santa Ana farm, in the State of Guárico and the manure lagoon of the Agronomy School of the Universidad Central de Venezuela (UCV), in the State of Aragua, Venezuela, was performed. Samples were fixed in 10% v/v neutral formalin and embedded in paraffin at the Histochemistry Laboratory of the School of Veterinary Medicine of the UCV. All organs were subjected to routine histological staining techniques with hematoxylin and eosin; also, special techniques for the hypophysis such as the periodic acid-Schiff, the Shorr’s trichrome, the Gallego’s trichrome, and the Wilder method were used. The results of the present study showed the presence of the hypophysis, thyroid, parathyroid, adrenal glands, and the endocrine portion of the pancreas, with well defined structures as seen in other reptiles, birds and mammals; unlike the epiphysis, which was not macroscopically identified. The pituitary was organized in a manner similar to other species, with an adenohypophysis and a neurohypophysis. The pineal gland was not seen as an independent body. From the histological stand point, this gland was represented by cells with a difficult to distinguish cytoplasm, with a rounded nucleus, and prominent nucleoli at the brain level. The thyroid showed typical follicles and characteristic parafollicular cells. In the parathyroid gland the main cells, oxyphyl, and parafollicular-like cells were evidenced. The adrenal glands had intermingled cortical and medullary tissues. The pancreas exhibited associated lymphatic tissue, standing out the endocrine portion, due to the clustering of Langerhans islets, made up of cells with pale cytoplasms, compared to those of the acini.(Key words: Histology; endocrine system; Caiman crocodilus crocodilus)
Recibido: 16/02/17 - Aprobado: 17/07/17
Introducción
La baba (Caiman crocodilus crocodilus) es una subespecie que habita en los llanos venezolanos, protegida por el Ministerio del Poder Popular para el Ambiente. Este último, realizó un programa de aprovechamiento comercial [1], permitiendo su cría en cautiverio bajo una regulación especial; sin embargo, este programa está limitado por la falta de información técnica y científica sobre este animal a nivel de zoocriaderos.
Actualmente, existe una escasez de proteína de origen animal para consumo humano, esto se puede solucionar incorporando al mercado nuevas fuentes de proteínas como la carne de baba, de acuerdo a García [2] para suplir las necesidades de la población venezolana. Además, esta subespecie ha sido considerablemente explotada por su piel y carne, gracias a la facilidad para criarla en cautiverio de conformidad a García [2] y García et al.[3]. Según Vidaurreta [4] y Alarcón-García et al. [5], los análisis realizados a la musculatura de las babas, demuestran un alto porcentaje de proteína, bajo contenido de grasa y una buena fuente de minerales como hierro y calcio. En el año 2000, se inició una Línea de Investigación sobre el Caiman crocodilus crocodilus en la Maestría en Ciencias Morfológicas de la Facultad de Ciencias Veterinarias (FCV) de la UCV, en diferentes sistemas corporales, como urinario conforme a Cabrera y García [6, 7, 8], circulatorio tratado por Rossini y García [9] y Rossini et al.[10], genital masculino acorde a Saccucci et al. [11] sistema digestivo coincidente con Alvarado-Rico [12]; sin embargo, todavía existía un vacío de conocimiento sobre la morfología de los órganos del sistema endocrino de la baba, el cual es importante para conocer sobre la fisiología, comportamiento, reproducción, homeostasis y adaptación al medio ambiente de esta subespecie. Es por ello, que se planteó esta investigación, con el objetivo general, de describir las características morfológicas de los órganos del sistema endocrino (hipófisis, epífisis, tiroides, paratiroides, glándula adrenal e islotes pancreáticos) de la baba y el objetivo específico, de describir las características histológicas de los órganos del sistema endocrino de la misma.
Materiales y Métodos
Se estudiaron nueve babas, cinco hembras y cuatro machos obtenidas al azar, en diferentes períodos del año, provenientes del Hato Santa Ana, ubicado en el ecosistema del sur del estado Guárico, y de la laguna de oxidación de la Facultad de Agronomía de la Universidad Central de Venezuela, Campus Maracay, estado Aragua. Para la captura de los animales, se procedió a someterlos y atarlos con mecatillo. Los animales utilizados en la investigación, fueron tratados respetando las normas éticas que rigen el empleo de animales de investigación [4]. A dos animales, se les administró sobredosis de anestesia: tiopental, a razón de 20 mg/kg IV, en la base de la cola, según Ruiz et al. [5], al resto de los animales, se le hizo eutanasia por aturdimiento y posteriormente fueron desmedulados, según Bryony et al. [6]. La disección se realizó abordando la cavidad celómica, a nivel del plano lateral, modificando la técnica citada por Gásquez [7], evitando así, la presencia de los osteodermos, placas óseas ubicadas en la piel de esta subespecie. Una vez abordada la cavidad, se describió in situ cada órgano endocrino, su localización y sus relaciones anatómicas. Para el estudio histológico, se tomaron muestras de 0,5 a 1 cm. de grosor de los órganos de interés, se fijaron en formol neutro al 10% y se procesaron en el Laboratorio de Histoquímica de la FCV, UCV, siguiendo la técnica descrita por Prophet et al. [8], con el fin de realizar la descripción histológica de dichos órganos. Para la tinción de todos los tejidos, se utilizó la coloración de rutina con hematoxilina y eosina (H y E); y además, se utilizaron coloraciones especiales para la hipófisis: ácido peryódico de Schiff (PAS), tricrómico de Shorr (TS), tricrómico de Gallego (TG) y coloración de Wilder (MW). El PAS se utilizó para evidenciar los carbohidratos presentes en el citoplasma de las células cromófilas basófilas. El TS se utilizó para identificar a las células cromófilas basófilas y a las células cromófilas acidófilas. El TG evidenció las fibras colágenas y permitió diferenciarlas del tejido muscular y el MW se utilizó para evidenciar a las fibras reticulares. Para la descripción histológica de los órganos, se procedió a observar los preparados histológicos en el microscopio óptico y se realizaron dibujos de aquellas estructuras que no pudieron ser visualizadas en un solo campo. Las muestras se fotografiaron en un microscopio Nikon Eclipse 400 con montura F y cámara digital Nikon Coolpix 950 de 2,1 megapíxeles.
Resultados y Discusión
1. Hipófisis. La hipófisis de la baba presenta dos partes, la adenohipófisis y la neurohipófisis. La adenohipófisis presenta tres zonas: pars distalis, pars intermedia y pars tuberalis. La neurohipófisis igualmente presenta tres zonas: la eminencia media, el tallo infundibular y la pars nervosa, como lo han descrito Banks [9] y Dellman [10], en animales domésticos; Leeson et al. [11] y Boya [12], en el humano y Orós [13], en otros reptiles (Figura 1).
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La hipófisis, está rodeada por una cápsula de tejido conjuntivo fibroso que penetra en ella y se continúa con una red de fibras reticulares muy finas que forman el tejido conjuntivo reticular, el cual constituye el estroma del órgano. El parénquima está constituido por cordones de células con citoplasma basofílico, células con citoplasma eosinofílico y células sin afinidad tintorial, las cuales corresponden a las células cromófilas basófilas, células cromófilas acidófilas y células cromófobas, respectivamente, y entre los cordones celulares se encuentran abundantes sinusoides, tal como lo han señalado Banks [9] en animales domésticos y Leeson et al. [11] y Boya [12], en el humano.
Las células cromófilas basófilas, cromófilas acidófilas y cromófobas, se encuentran ampliamente distribuidas en la pars distalis, mientras que las células cromófilas basófilas predominan en la pars intermedia y las células cromófobas se ubican intercaladas entre éstas. Se observó que las células se organizan también formando folículos en la pars intermedia (Figura 2), este resultado coincide con lo señalado por Leeson et al. [11], en el humano. Para identificar a las células cromófilas, se utilizaron varias coloraciones especiales. Para identificar a las células cromófilas basófilas, se utilizó el PAS el cual pone en evidencia a los carbohidratos, y se tiñeron de rojo a púrpura. Al utilizar el Tricrómico de Shorr, tiñéndose de color amarillo las células cromófilas acidófilas y de color verde las células cromófilas basófilas, mientras que los eritrocitos se tiñen de color anaranjado (Figura 3).
A nivel de la neurohipófisis (Figura 2), se observó un tejido en el cual predominan las fibras nerviosas provenientes del hipotálamo, y células muy pequeñas con citoplasma difícil de distinguir, que corresponden a los pituicitos, este resultado concuerda con lo descrito por Banks [9], en animales domésticos; Leeson et al. [11], en el humano y Orós [13], en reptiles. A nivel del tallo hipofisario, se observó un sistema portal (Figura 1) en el que predomina una red de capilares sinusoidales, que se encuentra entre la eminencia media y la pars distalis de la adenohipófisis, similar a lo descrito por Banks [9], en animales domésticos. Esta red capilar penetra en la pars distalis de la adenohipófisis para formar los sinusoides localizados entre los cordones celulares. La hipófisis de la baba presenta características histológicas similares a la hipófisis de los mamíferos.
2. Epífisis o Glándula Pineal. La epífisis o glándula pineal de la baba está representada por células con citoplasma difícil de distinguir y núcleo redondeado con nucléolo prominente, que corresponden a los pinealocitos, este resultado coincide con lo descrito por Paniagua y Nistal [14] y Banks [9], en animales domésticos. Al realizar el corte longitudinal del encéfalo se encontraron los pinealocitos formando hileras (Figura 4), mientras que, en los cortes transversales seriados se observó que se disponen u organizan en grupos. En cuanto a la conformación y organización como glándula, en la baba, no se observó una glándula pineal maciza o compacta, sino pinealocitos dispuestos en hileras o grupos en el encéfalo, este resultado concuerda con lo señalado por Paniagua y Nistal [14], quienes mencionan que la epífisis está presente en todos los vertebrados y puede tener una organización diferente y, difiere con lo señalado por Banks [9], en animales domésticos y con lo descrito por Leeson et al. [11] y Boya [12], en el humano.
3. Glándula Tiroides. Se observó que está íntimamente relacionada con un órgano de carácter linfoide, como el timo y con otra glándula endocrina, la paratiroides (Figura 5).
La célula folicular tiene forma cúbica, presenta un núcleo redondeado en el centro y hacia la base de la misma, con citoplasma eosinofílico. Mientras que las células parafoliculares tienen forma redondeada, con un núcleo redondeado y con citoplasma claro, tal y como lo han descrito Banks [9], en animales domésticos y Leeson et al. [11], en el humano. En los folículos, se observan espacios entre el coloide y el epitelio, con pequeñas vacuolas, así como lo han señalado Leeson et al. [11], en el humano. La glándula tiroides de la baba presenta características histológicas similares a las descritas en los mamíferos, tal y como lo ha señalado Orós [13], en otros reptiles.
4. Glándula Paratiroides. Se observó que está rodeada por una cápsula de tejido conjuntivo fibroso que penetra, tabica a la glándula y la divide en lóbulos y lobulillos (Figura 5). El tejido conjuntivo del estroma está constituido por delgadas fibras reticulares, así como lo han descrito Banks [9], en animales domésticos; Leeson et al. [11] y Boya [12], en el humano.
El parénquima paratiroideo está constituido por cordones de células con citoplasma basofílico, que corresponden a las células principales. Entre los cordones celulares, se observan abundantes sinusoides. Este resultado coincide con lo señalado por Paniagua y Nistal [14] y Banks [9], en animales domésticos; Leeson et al. [11], en el humano; y Srivastav et al. [15] y Orós [13], en otros reptiles. También se observaron algunas células con citoplasma eosinofílico, dispersas entre las células basófilas, que se asemejan a las células oxífilas, lo que coincide con lo señalado por Paniagua y Nistal [14] y Banks [9], en animales domésticos; Leeson et al. [11], en el humano y Srivastav et al. [15], en otros reptiles, pero difiere con lo señalado por Orós [13], sobre la existencia de un único tipo celular en reptiles, la célula principal. Además se observaron células con citoplasma claro, las cuales se asemejan a las células claras o parafoliculares de la glándula tiroides. Esto coincide con lo reportado por Srivastav et al. [15], en otros reptiles. Por último, se observó que las células del parénquima también se disponen formando folículos, tal y como lo han señalado Banks [9], en animales domésticos; Leeson et al. [11], en el humano y Srivastav et al. [15] y Orós [13], en otros reptiles.
La glándula paratiroides de la baba presenta características histológicas similares a las descritas en los mamíferos, con la diferencia de que presenta células claras similares a las células claras de la tiroides.
5. Glándula Adrenal. La glándula adrenal de la baba es un órgano que se encuentra en íntima relación con las gónadas, presenta una cápsula de tejido conjuntivo fibroso, la cual penetra y forma el estroma de la glándula, constituido por una red de fibras reticulares, tal y como lo han descrito Banks [9], en animales domésticos y Leeson et al. [11], en el humano.
En toda la glándula se observan células poco teñidas, de aspecto espumoso, que corresponden a las células parenquimatosas de la corteza y se observa un tejido con afinidad tintorial basofílica disperso, que correspondería a las células parenquimatosas de la médula del órgano (Figura 6). En el tejido subyacente a la cápsula, se observó que las células se disponen formando arcos o en forma glomerular, típico de esta área. También, se observó que las células del parénquima no se organizan en diferentes zonas, no conformándose una corteza bien definida. Mientras que la médula tampoco presenta una configuración típica, más bien, se presenta como un tejido disperso entremezclado con la corteza. No se observó una división entre ambos tejidos, corteza y médula, como ocurre en la glándula adrenal de los mamíferos. Este resultado coincide con lo descrito por Banks [9], en las aves; con Orós [13], en los reptiles y con lo reportado por García et al. [16], en las babas, mientras que difiere con lo descrito por Banks [9] y Leeson et al. [11], en el caso de los mamíferos.
6. Páncreas Endocrino (Islote Pancreático) En el páncreas de la baba, se observó cómo hallazgo, la presencia de tejido linfático asociado tanto fuera como dentro del órgano. El tejido linfático estaba asociado a un conducto dentro del órgano y, asociado a la cápsula del órgano en relación con los vasos sanguíneos.
El páncreas de la baba es un órgano anficrino, es decir, posee una porción exocrina y una porción endocrina, así como lo han descrito Paniagua y Nistal [14], en animales domésticos; Orós [13], en reptiles y Rossini [17], en babas. La porción exocrina está representada por los acinos pancreáticos y la porción endocrina, por los islotes pancreáticos. Se observó que el páncreas endocrino de la baba, presenta células que se agrupan en islotes y que presentan un citoplasma con una coloración más clara, que las diferencian del páncreas exocrino o de los acinos pancreáticos, este resultado coincide con lo descrito por Paniagua y Nistal [14] y Banks [9], en animales domésticos; Leeson et al. [11], en el humano y Rossini [17], en babas (Figura 7).
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En los islotes pancreáticos, se observaron al menos dos tipos celulares con la coloración de rutina H y E, tal y como lo han señalado Titlbach [18], en Alligator mississippiensis y Caiman niger; Banks [9], en animales domésticos y Leeson et al. [11], en el humano. Algunas células presentan un citoplasma granular eosinofílico, y otras presentan un citoplasma claro.
Conclusiones
La hipófisis presenta una estructura similar a la descrita en otros reptiles, aves y mamíferos. La epífisis o pineal no forma un órgano macizo, sino que se presenta formando hileras o grupos de pinealocitos en el encéfalo, difiriendo de lo reportado en mamíferos. La tiroides estructuralmente es similar a la de otros vertebrados, con folículos, células foliculares y células parafoliculares. La paratiroides tiene una estructura similar a la de otros reptiles y mamíferos. Posee células basófilas y acidófilas en cordones, pero también pueden observarse folículos. Se observa la presencia de células similares a las parafoliculares o células C, como se ha reportado en otros reptiles. La glándula adrenal no posee una estructuración en médula y corteza, ya que la migración de las células correspondientes a la médula, no es completa, localizándose entre las células de citoplasma espumoso, características de la zona cortical de mamíferos. Se observa una zona glomerulosa, pero el resto no se diferencia en zonas. Esto es similar a lo observado en aves y reptiles. En relación al, páncreas endocrino su estructura es similar a la de otros reptiles y mamíferos.
Agradecimientos
A los señores Francisco García, Rafael Rosales, Norvis Gómez, José Ibirma (FCV, UCV) y al señor Sixto Hernández (FAGRO, UCV), por el apoyo técnico. A El Consejo de Desarrollo Científico y Humanístico de la UCV (CDCH, UCV), por el apoyo económico (PG-11-8159-2011-1).
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