Dras. Cristina Margarita Pastrán Mejías*, Claudia A B de Suárez**

*Médico Anatomopatólogo egresado del Instituto Anatomopatológico. UCV.

**Profesor Titular. Sección de Patología Cardiovascular. IAP-UCV

Autor responsable:

Claudia de Suárez

Instituto anatomopatológico. Sección de Patología Cardiovascular. Apartado 50.647. Caracas, 1050. Venezuela. Telf. 6053492. FAX: 6053427-28

El problema del estudio de la ateroesclerosis radica en la naturaleza multifactorial de su origen. Las principales células que participan en la morfogénesis de las lesiones ateroescleróticas son los macrófagos y las células musculares lisas. Se evaluaron 39 aortas de fetos, recién nacidos y lactantes menores para corroborar la existencia de lesiones ateroescleróticas tempranas y relacionar dichas lesiones con la densidad de células inflamatorias presentes en las mismas. Se realizó estudio macroscópico con tinción de sudán IV para identificar lesiones sudanofílicas y microscopia óptica con coloraciones especiales. En 20 casos se realizó inmunohistoquímica para identificar linfocitos T (CD45-Ro), linfocitos B (CD20) y macrófagos (CD68) en la pared arterial. Ningún caso presentó lesiones sudanofílicas macroscópicas. Histológicamente, en el 39 % de los casos se observó algún grado de engrosamiento intimal que tiende a aumentar con la edad. La localización de estas lesiones intimales fue preferencial en las áreas de bifurcación del vaso. En todos los engrosamientos intimales y en la adventicia arterial, hubo mayor cantidad de macrófagos derivados de los monocitos (114 células CD68) que de linfocitos T (69 células CD45RO). No se comprobaron linfocitos B (CD20). Con estas observaciones, teorizamos que la penetración de los monocitos al espacio subendotelial, marca el inicio de las lesiones ateroescleróticas, la cual comienza en la vida fetal. Con nuestros resultados y con la revisión bibliográfica sobre este problema, evaluamos algunos aspectos sobre la naturaleza de los engrosamientos intimales en arterias fetales y neonatales y la secuencia de los eventos que originan la atracción, adhesión y penetración de monocitos en la subíntima así como la influencia de las lipoproteínas de baja densidad en este proceso. Concluimos que estos mecanismos in vivo, siguen siendo controversiales.

Palabras clave: Ateroesclerosis infantil. Aorta. Fetos. Monocitos.

The problem of the study of the atherosclerosis resides in the multivariate nature of its origin; the main cells participating in the morphogenesis of the atherosclerotic lesions are the macrophages and the smooth muscle cells We evaluated 39 aortas of fetuses, newborns and little suckling to corroborate the existence of early atherosclerotic lesions and to relate these lesions with the density of the present inflammatory cells in the lesions. In order to identify sudanophilic lesions and optic microscopy with special stains, a macroscopic study with Sudan’s method was performed. With the objective to identify T-lymphocytes (CD45-Ro), B-lymphocytes (CD20) and macrophages (CD68) in the arterial wall, immunohistochemistry was performed in 20 cases. No case presented macroscopic sudanophilic lesions. By histology, 39 % of the cases showed some degree of intimal thickening wich tends to increase with age. The localization of these intimal lesions was preferential in the areas of bifurcation of the vessel. In all the intimal thickening and in the arterial adventitia, there was a greater quantity of monocytes derived macrophages (114 cells CD 68) than T lymphocytes (69 cells CD45 Ro). There were no B lymphocytes (CD20). Based on these observations, we speculate that the penetration of monocytes to the subendothelial space points out the beginning of the atherosclerotic lesions, which begins in the fetal life. Based on our results and on the bibliographical revision of this problem, we evaluated some aspects regarding the nature of the intimal thickening in fetal and neonates arteries and the sequence of the events that originate the attraction, adhesion and penetration of monocytes in the subintima as well as the influence of the lipoproteins of low density in this process. We concluded that these mechanisms in vivo, are still controversial.

Key words: Infantile atherosclerosis. Aorta. Fetuses. Monocytes.

La ateroesclerosis es un problema de salud pública mundial y en Venezuela; la enfermedad y sus complicaciones se encuentran entre las tres primeras causas de mortalidad, junto con los accidentes de tránsito y las neoplasias (1-3). Numerosos estudios han evidenciado la presencia de lesiones sudanofílicas en aortas de sujetos jóvenes y lactantes (4-10). Se ha insistido sobre el papel que los niveles altos del colesterol, desempeñan en la génesis de la ateroesclerosis y recientemente se ha involucrado al sistema inmune en la patogénesis de estas lesiones (11-17). Sin embargo, los factores predictivos más fiables para esta enfermedad aún no han sido identificados (18). Las principales células involucradas en el proceso aterogénico son los macrófagos y las células musculares lisas (19-21). Gerrity sugirió que los monocitos circulantes invaden la íntima, fagocitan las grasas y se convierte en una célula espumosa (16). Otros autores opinan que las células espumosas derivan tanto de las células musculares lisas de la capa media, como de los mononucleares procedentes de la sangre (22). Ha sido demostrado que la hipercolesterolemia inducida por la dieta produce daño endotelial (estructural y bioquímico), promueve la adhesión de los monocitos al endotelio vascular y su invasión a la íntima, seguido por la formación de estrías lipídicas (23). Los principales procesos que inician las lesiones ateroescleróticas como la adhesión de los leucocitos y plaquetas a las células endoteliales, la acumulación de lípidos en la pared aórtica y la infiltración de linfocitos T y monocitos en el subendotelio son semejantes a la respuesta inflamatoria crónica (24,25).

Desde hace varios años, se propuso un origen fetal para la enfermedad ateroesclerótica coronaria. Morfológicamente, Stary describió la presencia de células espumosas en vasos arteriales de recién nacidos y señaló que la disfunción endotelial es un evento temprano importante en la aterogénesis. En la actualidad, la disfunción endotelial ha sido reconocida y evidenciada en niños y adultos con factores de riesgo para la ateroesclerosis (26,27).

Desde el punto de vista morfológico, las arterias presentan engrosamientos adaptativos en localizaciones definidas desde el nacimiento, como una respuesta autolimitada de la íntima a fuerzas hemodinámicas, las cuales son las primeras áreas que evolucionan hacia lesiones más avanzadas (28,29). En estas áreas, ha sido detectada la presencia de células inflamatorias, interleucina-1-, interleucina-2 y el factor de necrosis tumoral g (gTNF) en el citoplasma de las células infiltrantes, lo que sugiere un mecanismo de hipersensibilidad mediado por células, como un evento importante para el desarrollo de la ateroesclerosis así como alteraciones en la expresión de los antígenos del complejo mayor de histocompatibilidad clase II en las células musculares y en las células inflamatorias, elementos que podrían contribuir a la perpetuación de la reacción autoinmune aterogenética (30-32).

Para comprobar la existencia de lesiones ateroscleróticas tempranas en las aortas de una población de niños en edad fetal y neonatal y relacionar la presencia de lesiones ateroscleróticas tempranas macro y microscópicamente, con la densidad de células inflamatorias y macrófagos presentes en las mismas, realizamos una investigación de tipo transversal en 39 fetos, neonatos y lactantes menores.

La muestra está integrada por 39 fetos mayores de 20 semanas de edad gestacional y lactantes menores de hasta 3 meses de edad, autopsiados durante el período de un año en el Instituto Anatomopatológico "Dr. José A. O Daly" (IAP-UCV) y procedentes de los servicios de Obstetricia, Neonatología y Pediatría del Hospital Universitario de Caracas (HUC). Los casos de un género u otro se dividieron en grupos de edades según la clasificación de pediatría y obstetricia en tres grupos: Grupo 1: mortinatos o neonatos pretérminos (14-36 semanas de gestación); Grupo 2: mortinatos o neonatos a término (37-41 semanas de gestación) y Grupo 3: lactantes menores (niños mayores de 28 días de edad y menores de 1 año de edad). Esta clasificación se aplicó tanto a los nacidos vivos como a los fetos nacidos sin signos vitales. Los datos de los diagnósticos clínicos maternos y de los diagnósticos anatomopatológicos definitivos de cada uno de los casos fueron obtenidos de las historias clínicas y de los protocolos de autopsia consignados.

Se obtuvieron 468 cortes histológicos de 20 aortas seleccionadas, los cuales fueron utilizados para el estudio inmunohistoquímico con el método de inmunoperoxidasa, para identificar: macrófagos (CD68), linfocitos T (CD45-Ro) y linfocitos B (CD20). Estos procedimientos fueron realizados en la Sección de Inmunohistoquímica del IAP. (34). La selección de los 20 casos a los que se les practicó inmunohistoquímica, se basó en los siguientes criterios histológicos: 1. Presencia de alteraciones en la capa íntima: engrosamientos y presencia de cojinetes. 2. Aumento de la celularidad de las capas íntima, media o adventicia y 3. Alteraciones de la capa media: desorganización de fibras elásticas y aumento del tamaño de los núcleos.

En cada uno de los casos se examinó cada corte histológico y se seleccionaron las áreas más representativas, en las cuales se cuantificó el número de células inmunomarcadas en 20 y más campos de 400x.

Del total de 39 aortas procedentes de fetos, neonatos y lactantes menores de 3 meses de edad, distribuidos por grupos de edades y género, el 61,5 % correspondió al género masculino y el 38,5 %, al femenino. (Cuadro 1). El promedio de edad gestacional para el primer grupo fue de 29,4 semanas y para el segundo, de 38,4 semanas. El promedio de días de vida de los niños del tercer grupo fue de 58,5 días.

Cuadro 1

Distribución por grupos de edades y género de la población estudiada

Ningún caso presentó lesiones sudanofílicas en la superficie de la íntima aórtica. En algunos, se observó la presencia de un precipitado rojo puntiforme en los sitios de ramificación de la aorta, tales como la salida de las arterias intercostales y en la bifurcación de las arterias (Figura 1).

A                             B                          C

Figura 1. Vista macroscópica de la íntima aórtica. A: se observa la íntima aórtica fijada en formol sin coloración de Sudán. B y C: se utilizó tinción de Sudán. Obsérvese la ausencia de lesiones sudanofílicas en estas dos muestras, en las que se aprecia la grasa periaórtica teñida de rojo (control).

En las aortas de 15 casos, se observó algún grado de engrosamiento de la capa íntima, localizados predominantemente en los sitios de ramificación de la arteria a manera de "cojinetes adaptativos" y en otras áreas no relacionados a la turbulencia. De acuerdo a los grupos de edad (ya definidos), 9 corresponden al grupo 1,5 al grupo 2 y 1 al grupo 3. En todos estos casos, la capa íntima estaba focalmente engrosada, con presencia de proteoglicanos ácidos distribuidos en forma laxa y difusa, en escasa cantidad; fibras colágenas delgadas y células mononucleadas aisladas. En uno de ellos, se observó mayor cantidad de matriz extracelular con macrófagos dispersos y mayor densidad de células mononucleares (Autopsia N° 032-00). En todos los cortes observados, la coloración de Veroheff demostró ausencia de fibras elásticas en las áreas engrosadas. El endotelio no era visible o estaba ausente en la mayoría de los casos (Figura 2).

A                                                     B

C                                                    D

Figura 2. A y B: Pared aórtica sin engrosamiento intimal. A: H&E lOOx. B: Tricrómico l00x. C: Lámina elástica interna subyacente al endotelio y fibras elásticas paralelas de la capa media (Veroheff 250x). D: Glucocálix suprayacente a la lámina elástica interna (PAS azul alciano 250x).

En los 24 casos restantes, se observó la capa íntima delgada, revestida por endotelio poco visible y con sustancia fundamental escasa, evidenciada por la presencia de una delgada capa de glucocálix. Subyacente a ésta, resaltó una lámina refringente, continua y gruesa correspondiente a la lámina elástica interna. La capa media estaba formada por laminillas de fibras elásticas paralelas con fragmentación artefactual ocasional. Se observó además, núcleos de células mesenquimáticas redondeados u ondulados, hipercromáticos, que variaron de densidad por área en los diferentes cortes. La capa adventicia presentó algunos fibroblastos, linfocitos en variable cantidad y aisladas células mononucleares (Figura 3).

C                                                    D

Figura 3. Microfotografía de la pared aórtica. A: Compárese la íntima con el grosor de su homóloga en la figura 2A (H&E l00x). B: Incremento de los proteoglicanos en los engrosamientos intimales (PAS azul alciano 250x). C: Obsérvese las células mononucleadas dispersas en el engrosamiento intimal (tricrómico l00x). D: "cojinete adaptativo" en la bifurcación (tricrómico l00x).

Los datos maternos obtenidos a través de las historias clínicas fueron insuficientes en la mayoría de los casos. Ninguna de las historias clínicas revisadas presentó datos concernientes al lipidograma o niveles de colesterolemia de las madres. Predominó la insuficiencia de información clínica de las madres cuyos hijos presentaron engrosamiento intimal (7 casos), seguido por los productos de embarazo mal controlado (4 casos) y los embarazos gemelares (2 casos). Dos niños fueron productos de madre con preeclampsia, de los cuales, uno, presentó engrosamiento intimal. Sólo una de las historias clínicas mencionó los hábitos tabáquicos de la madre, cuyo hijo presentó engrosamiento intimal.

En el Cuadro 2 se expone el contaje de linfocitos y macrófagos observados en el total de los casos de los tres grupos. En ningún caso se observó la presencia de linfocitos B (CD20) en las capas de la aorta. Los linfocitos T (CD45Ro) fueron más frecuentes en la adventicia, alrededor de los vasos sanguíneos, de los ganglios linfáticos y dispersos en el tejido conjuntivo. En la íntima, se observó el promedio de 1 linfocito por cada dos campos de 400x, y solo fueron evidentes, en las aortas que mostraron engrosamiento intimal (Figura 4).

Cuadro 2

Número de células inflamatorias inmunomarcadas observadas en 20 y más campos e 400x (n = 20)

A                                                          B

Figura 4. Inmunomarcaje de las células inflamatorias (linfocitos T y linfocitos B) en los engrosamientos intimales de las aortas estudiadas. A: Engrosamiento intimal aórtico que muestra escasos linfocitos T (inmunomarcados con CD45RO, 250x). B: Engrosamiento intimal aórtico que muestra ausencia de linfocitos B inmunomarcados con CD2O (250x). LEI: lámina elástica interna.

A                              B                              C

Figura 5. Inmunomarcaje de las células inflamatorias (macrófagos) en los engrosamientos intimales de las aortas estudiadas. A y B: Macrófagos inmunomarcados con CD68 en la íntima arterial engrosada (250x). C: Macrófagos inmunomarcados con CD68 en la adventicia arterial (250x). 1: íntima, M: media, A: adventicia.

Las tinciones de Sudán realizadas en tejidos fijados y cortados por congelado, resultaron negativas en todas las aortas evaluadas.

La aterogénesis es un proceso extraordinariamente complejo que involucra fenómenos inflamatorios, degenerativos, genéticos e inmunológicos y las lesiones iniciales en los fetos están relacionados con la hipercolesterolemia maternas (35,36).

Durante el nacimiento ocurren profundos cambios fisiológicos y circulatorios, que comienzan con una descarga de catecolamina in útero lo que contribuye al incremento de la presión arterial sistémica durante el período prenatal y posteriormente durante la transición del cambio de patrón de la circulación fetal una vez ocurrido el nacimiento (37,38). El incremento de la presión arterial produciría una exageración de las lesiones coronarias congénitas descritas en estudios experimentales (39). Las células involucradas en los inicios de la aterogénesis son: los macrófagos y las células musculares lisas cuya aparición en la secuencia de los fenómenos inflamatorios durante la formación de las lesiones ateroescleróticas tempranas, es controvertida: Se imponen varias preguntas al respecto: ¿Es simultánea la presencia de los macrófagos y de las lipoproteínas en las lesiones ateroescleróticas tempranas? ¿Es normal o disfuncionante el endotelio? ¿Quién penetra en primer lugar al subendotelio: el monocito o la lipoproteína? (40).

En 1992, Asada postuló un mecanismo etiopatogénico en el cual, la hipercolesterolemia produce daño endotelial, se liberan factores quimiotácticos quienes atraen los monocitos y permiten su adhesión al endotelio; posteriormente estos invaden la íntima arterial y se inicia de este modo la formación de la estría lipídica (23). Sin embargo, otros autores sostienen que las lipoproteínas de baja densidad (LDL) es transportado a través de un endotelio intacto para acumularse en la región subintimal de las arterias aparentemente sanas donde interviene en el reclutamiento de monocitos a través de la activación de genes para la síntesis de citoquinas y moléculas reguladoras de crecimiento (41-43). Ha sido demostrado que la activación de los genes, depende de la modificación de las LDL nativas (bien sea por oxidación o por acetilación en el espacio subintimal) para que se induzca este proceso (44).

Recientemente, Napoli y col., sostienen que el proceso aterogénico comienza en los fetos humanos demostrando que la oxidación de las LDL ocurre durante la vida fetal y está muy relacionada con la hipercolesterolemia materna, siendo la llegada de los macrófagos un evento subsiguiente (47,48).

En nuestra investigación, no observamos lesiones ateroescleróticas macroscópicas en las aortas teñidas con Sudán. En los trabajos de Napoli anteriormente citados, los estudios morfométricos con análisis de imágenes, demostraron la presencia de lípidos en el 60 % de todas las secciones de aorta evaluadas comprobando que estas áreas fueron más extensas en la aorta abdominal, seguidas del arco aórtico (35).

Microscópicamente comprobamos en nuestros casos que, la mayoría de las aortas presentaban una capa íntima delgada, con un endotelio poco visible y con una capa fina de glucocálix. En 15 casos se observó algún grado de engrosamiento de la capa íntima, predominantemente ubicadas en las áreas de bifurcación de la arteria. En todos estos casos la tinción para demostrar grasas en tejido fijado sin procesar y en tejido procesado, resultaron negativas. En 14 de los 15 casos, la población de linfocitos y macrófagos resultó escasa, como habría de esperarse si consideramos de que se trata de lesiones adaptativas, es decir, lesiones de tipo I de la clasificación de Stary (49). En un solo caso (Nº 32-00), observamos una lesión ateroesclerótica en la aorta perteneciente a un lactante de 2 meses de edad con antecedente de colocación de marcapaso por bloqueo A-V completo congénito y portador de meningitis linfocitaria. En este caso, se observó engrosamiento de la íntima con aumento de la sustancia fundamental y de la celularidad, predominantemente dada por la presencia de células mononucleadas CD68 positivas. Este hallazgo coincide con las observaciones del grupo de Napoli en las que sólo evidenciaron la presencia de macrófagos en las lesiones establecidas (35). Lamentablemente, en este caso así como en los otros, los datos relacionados con la colesterolemia, hábitos tabáquicos, hábitos alimenticios y estado de la madre, así como la colesterolemia del niño, no se mencionaron en la historia clínica. Por otro lado, más de un tercio de la muestra estudiada presentó engrosamientos intimales, con tendencia no significativa a aumentar con la edad. Estos resultados no concuerdan con los hallazgos de Napoli y col. quienes observaron que las concentraciones de colesterolemia fetal eran mayores en edades tempranas del desarrollo fetal y que éstas disminuían a medida que transcurría el embarazo, sugiriendo que las lesiones observadas en los fetos podrían regresar cuando los niveles de colesterolemia declinan (36).

En 1995, Berliner hipotetizó que una vez que las lipoproteínas de baja densidad han penetrado al subendotelio, son oxidadas por varias vías las cuales activan un factor de transcripción parecido al factor NFkB que induce la expresión de genes cuyo producto proteico inicia la respuesta inflamatoria y el consiguiente desarrollo de la estría lipídica (50). El NF-kB es un factor nuclear que controla la transcripción de la Proteína-1 quimioatrayente de monocitos (MCP-1), principal factor quimiotáctico involucrado en la migración de los monocitos, la cual se expresa en respuesta a diferentes estímulos como lo son las LDLs, IL-1, TNF-alfa, el interferon gamma y el factor estimulante de colonias de macrófagos (51).

La adhesión y transmigración de los leucocitos a través del endotelio están asociadas con cambios en la expresión de sus moléculas de adhesión celular (CAMs) presentes en la superficie endotelial y por integrinas B-2 como la LFA-1, Mac-1 y la integrina B-1 VLA-4 expresadas sobre la superficie celular del leucocito (52-54). Las cadherinas son moléculas que se encuentran predominantemente en las zonas adherentes intercelulares, unidas a la actina del citoesqueleto por la alfa catenina, de tal manera que, cuando se aproximan los monocitos a la célula endotelial, se realiza un cambio de distribución temporal de las moléculas de cadherinas del endotelio y de la integrina LFA-1 de la superficie leucocitaria, promoviendo la interacción entre los dos tipos celulares (55,56). Estos mecanismos moleculares observados in vitro, no han sido totalmente demostrados en estudios experimentales in vivo.

Debido a todas estas evidencias, actualmente, se considera que la prevención de la ateroesclerosis a través del control de los factores de riesgo debe comenzar en la adolescencia y más aún desde la niñez (57).

Existen engrosamientos intimales predominantemente ubicados en sitios de bifurcación de las colaterales aórticas, los cuales son observados solo histológicamente. El número de aortas fetales con engrosamientos intimales tiende a ser directamente proporcional a la edad gestacional del feto, lo cual probablemente está relacionado con una mayor susceptibilidad del tejido aórtico a los niveles del colesterol en sangre materna.

Los engrosamientos intimales observados corresponden a lesiones adaptativas, en los que existe incremento leve de la matriz extracelular, fibras colágenas delgadas y aisladas células mononucleadas (macrófagos y linfocitos).

La naturaleza y significado de los engrosamientos intimales aún son tema de controversia. Algunos autores opinan que estos engrosamientos adaptativos deben ser considerados ateroescleróticos ya que se encuentran en los mismos lugares en los que posteriormente asientan las lesiones establecidas típicas y porque además, son lesiones circunscritas y excéntricas (en los casos de las arterias coronarias) que se proyectan hacia el lumen del vaso. Otros autores señalan que aunque los engrosamientos adaptativos no constituyen una lesión por sí misma, son un prerequisito para la retención y acumulación de lípidos y por tanto para la formación de la lesión. Ninguna de estas concepciones son completamente ciertas, dado que, cuando las concentraciones de lipoproteínas son extremadamente altas, los macrófagos y los lípidos se acumulan aún en ausencia de lesiones adaptativas. Por otra parte, las lesiones avanzadas también se desarrollan en localizaciones que no presentan previamente engrosamientos. La migración de los monocitos hacia la pared arterial es un evento crítico en el desarrollo de las lesiones ateroescleróticas, y su reclutamiento en la íntima arterial caracteriza la iniciación de la lesión aterosclerótica. La penetración de estas células al espacio subendotelial está mediada por diversos elementos y procesos moleculares. Las lipoproteínas ingresan al subendotelio, donde son modificadas promoviendo la expresión de moléculas de adhesión y citoquinas implicadas en la aterogénesis temprana.

La secuencia de los siguientes eventos: penetración de LDL al espacio subendotelial, modificación de las LDL por oxidación o acetilación, reclutamiento de monocitos y conversión de estos en células espumosas aún no ha sido completamente dilucidada in vivo.

La ateroesclerosis se inicia en etapas fetales de la vida, por lo tanto, la identificación de los factores de riesgo y su control deben implementarse desde los primeros meses del embarazo.

Recomendamos incorporar el lipidograma materno dentro de los exámenes rutinarios del control prenatal y de admisión hospitalaria de mujeres en trabajo de parto, tal como se cumple con las enfermedades infecciosas en las que se indica, de forma obligatoria, la realización de la serología para VIH y VDRL.

1. Ross Russell. The pathogenesis of atherosclerosis: A perspective for the 1990s. Nature 1993;362:801-808.        [ Links ]

2. Anuario de Epidemiología y Estadística vital 1996. Ministerio de Sanidad y Asistencia Social. Caracas, Venezuela.        [ Links ]

3. Anuario de Epidemiología y Estadística vital 1997. Ministerio de Sanidad y Asistencia Social. Caracas, Venezuela.        [ Links ]

4. McGill HC. Introduction to the geographic pathology of atherosclerosis. Lab Invest 1968;18:465-467.         [ Links ]

5. McGill HC, Mc Mahan CA, Henderick EE, Malcom GT, Tracy RE, Strong JP. Origin of atherosclerosis in childhood and adolescence. Pathobiological determinants of atherosclerosis in youth (PDAY) Research Group. Am J Clin Nutr 2000;72(Suppl):13075-13155.        [ Links ]

6. Suárez C, Nava BC. Ateroesclerosis aórtica y coronaria. Correlación con cardiopatía isquémica y algunos factores de riesgo. Análisis anatomopatológico en 10 000 autopsias. En: Ateroesclerosis en los ’90. Ed. Cárdenas y Cárdenas. Posgrado de Cardiología. HUC; Caracas 1990.p.25-68.        [ Links ]

7. Suárez C, Nava BC. Epidemiología descriptiva de la ateroesclerosis. La experiencia venezolana en la autopsia. En: Ateroesclerosis al día II. Caracas, Venezuela: Ed. Galénicas; 1993.p.12-23.        [ Links ]

8. Pineda DK, Mota JD, Suárez C, Siegert V. Ateroesclerosis infanto-juvenil: estudio morfológico de la aorta de menores de 15 años de edad. Rev Fac Med 1998;21:92-101.        [ Links ]

9. Haust MD. The morphogenesis and fate of potential and early atherosclerotic lesions in man. Hum Pathol 1971;2:1-29.        [ Links ]

10. Stary HC. Evolution and progression of atherosclerotic lesions in children and young adults. Atherosclerosis 1989;9(Suppl 1):1-9.        [ Links ]

11. NCEP Expert Panel on Blood cholesterol levels in children and adolescents: Highlights of the report of the expert panel on blood cholesterol levels in children and adolescents. Pediatrics 1992;89:495-510.        [ Links ]

12. Kwiterovich P. Dyslipoproteinemia and other risk factors for atherosclerosis in children and adolescents. Atherosclerosis 1994;108(Suppl):55-71.        [ Links ]

13. American Academy of Pediatrics. Biochemical, clinical, epidemiologic, genetic, and pathological data in the pediatric age group relevant to the cholesterol hypothesis. Pediatrics 1986;78(2):349-355.        [ Links ]

14. Majno G, Joris I, Zand T. Atherosclerosis: New horizons. Hum Pathol 1985;16:3-5.        [ Links ]

15. Joris I, Zand T, Nunnari J, Krolikowski FJ, Majno G. Studies on the pathogenesis of atherosclerosis: I. Adhesion and emigration of mononuclear cells in the aorta of hypercholesterolemic rats. Am J Pathol 1983;113:341-358         [ Links ]

16. Gerrity RG. The role of the monocyte in atherogenesis: I. Transition of blood-borne monocytes into foam cells in fatty lesions. Am J Pathol 1981;103:181-190.        [ Links ]

17. Hansson GK. Involvement of the immune system in human atherogenesis, current knowledge and unanswered questions. Lab Invest 1991;64:5-15.        [ Links ]

18. Haust M. The genesis of the atherosclerosis in pediatric age-group. En: Pediatric Diseases. Hemisphere Publishing Corporation; 1990.p.253-271.        [ Links ]

19. Still W, O’Neal R. Electron microscopic study of experimental atherosclerosis in rats. Am J Pathol 1962;40:21-35.        [ Links ]

20. Clowes A, Ryan G, Breslow J, Karnovky M. Absence of enhanced intimal thickening in the response of the carotidal arterial wall to endothelial injury in hypercholesterolemia rats. Lab Invest 1976;35:6-17.        [ Links ]

21. Massmann J. Mononuclear cell infiltration of the aortic intima in domestic swine. Exp Pathol 1979;17:110-112.        [ Links ]

22. Watanabe T, Hirata M, Yoshikawa Y, Nagafuchi Y, Toyoshima H, Watanabe T. Role of macrophages in atherosclerosis: Sequential observations of cholesterol induced rabbit aortic lesion by the inmunoperoxidasa technique using monoclonal antimacrophage antibody. Lab Invest 1985;53:80-90.        [ Links ]

23. Asada Y, Hayashi T, Tanimura N, Kisanuki A, Sumiyoshi A. Replication of endothelial cells and smooth muscle cells induced in vivo by hypercholesterolemia and materials released from platelet- rich white thrombus. J Pathol 1992;166:69-75.        [ Links ]

24. Aqel N, Ball R, Waldmann H, Mitchinson M. Identification of macrophages and smooth muscle cells in human atherosclerosis using monoclonal antibodies. J Pathol 1985;146:197-204.        [ Links ]

25. Shimokama T, Haraoka S, Watanabe T. Morphological fate and sequelae of human atherosclerosis: Evaluation of immune mechanisms in atherogenesis through immunohistological and ultrastructural analysis. Pathol Intern 1995;45:801-804.        [ Links ]

26. Stary H. Macrophages, macrophages foam cells, and eccentric intimal thickening in the coronary arteries of young children. Atherosclerosis 1987;64:91-108.        [ Links ]

27. Calermajer D, Sorensen K, Gooch V, Spiegelhalter D, Miller O, Sullivan I, et al. Non-invasive detection of endothelial dysfunction in children and adults at risk of atherosclerosis. Lancet 1992;340/8828:1111-1115.        [ Links ]

28. Stary H. Changes in components and structure of atherosclerotic lesions developing from childhood to middle age in coronary arteries. Bas Resear Cardiol 1994;89(Suppl):17-32.        [ Links ]

29. Sebkhi A, Weinberg P. Age-related variations in transport properties of the rabbit arterial wall near branches. Atherosclerosis 1994;106:1-8.        [ Links ]

30. Schaffner T, Taylor K, Bartucci E, Fischer-Dzoga K, Beeson J, Glagov S, Wissler R. Arterial foam cells with distinctive immunomorphologic and histochemical features of macrophages. Am J Pathol 1980;100:57-73.        [ Links ]

31. Kishikawa H, Shimokama T, Watanabe T. Localization of T-lymphocytes and macrophages expressing IL-1, IL-2 receptor, IL-6 and TNF in human aortic intima. Role of cell-mediated immunity in human atherosclerosis. Virchows Arch 1993;423:433-442.        [ Links ]

32. Xu Q, Oberhuber G, Gruschwitz M, Wick G. Immunology of atherosclerosis: Cellular composition and major histocompatibility complex class II antigen expression in aortic intima, fatty streaks, and atherosclerotic plaques in young and aged human specimens. Clin Imm 1990;56:344-359.        [ Links ]

33. Guzmán MA, McMahan GA, McGill HC, Strong J, Tejada C, Restrepo C, et al. Selected methodologic aspect of the International Atherosclerosis Project. Lab Invest 1968;18:479-497.        [ Links ]

34. Ferreira V, Bacchi C, Vassallo J. Manual de Imuno-histoquímica. Sociedade Brasileira de Patologia. Sao Paulo. 1999.p.260-270.        [ Links ]

35. Palinski W, Napoli C. Pathophysiological events during pregnancy influences the development of atherosclerosis in humans. Trends Cardiovasc Med 1999;9:205-214.        [ Links ]

36. Napoli C, Glass C, Witztum J, Deutsch R, D’Armiento F, Palinski W. Influence of maternal hypercho-lesterolemia during pregnancy on progression of early atherosclerotic lesions in childhood: Fate of early lesions in children (FELIC) study. Lancet 1999;354:1234-1241.        [ Links ]

37. Lagercrantz H, Bistoletti P. Catecholamine release in the newborn infant at birth. Pediatr Res 1977;11:889-893.        [ Links ]

38. Padbury JF, Martinez A M. Sympathoadrenal system activity at birth: Integration of postnatal adaptation. Semin Perinatol 1988;12:163-172.        [ Links ]

39. Leistikow EA, Bolande RP. Perinatal origins of coronary atherosclerosis. Pediatr Develop Pathol 1999;2:3-10.        [ Links ]

40. Libby P. Changing concepts of atherogenesis. J Int Med 2000;247:349-358.        [ Links ]

41. Schwenke DC, Carew TE. Initiation of atherosclerotic lesions in cholesterol-fed rabbits. II. Selective retention of LDL vs. increase in LDL permeability in susceptible sites of arteries. Arteriosclerosis 1989;9:908-917.        [ Links ]

42. Pritchard KA, Tota RR, Lin YH. Native low density lipoprotein endothelial cell recruitment of mononuclear cells. Arterioscler Thromb 1991;11:1175-1183.        [ Links ]

43. Ross R. Atherosclerosis: A defense mechanism gone awry. Am J Pathol 1993;143(4):987-1002.        [ Links ]

44. Witztum JL. The oxidation hypothesis of atherosclerosis. Lancet 1994;344:793-795.        [ Links ]

45. Stary HC, Blankenhorn DH, Bleakley A, Glagov S, Insull W Jr, Richardson M, et al. A definition of the intima of human arteries and of its atherosclerosis-prone regions. A report from the committee on vascular lesions of the council on arteriosclerosis, American Heart Association. Circulation 1992;85:391-405.        [ Links ]

46. Stary HC. Lipid and macrophage accumulations in arteries of children and the development of atherosclerosis. Am J Clin Nutr 2000;72(Suppl):1297-1306.        [ Links ]

47. Napoli C, Ambrosio G, Scarpato N, Corso G, Palumbo G, D’Armiento F, et al. Decreased low-density lipoprotein oxidation after repeated selective aphaeresis in homozygous familial hypercholesterolemia. Am Heart J 1997;133:585-595.         [ Links ]

48. Napoli C, D’Armiento F, Mancini FP, Postiglione A, Witztum JL. Fatty streak formation occurs in human fetal aortas and is greatly enhanced by maternal hypercholesterolemia. J Clin Invest 1997;100:2680-2690.        [ Links ]

49. Stary HC, Chandler AB, Dinsmore RE, Fuster V, Glagov S, Insull W, et al. A definition of advanced types of atherosclerotic lesions and a histological classification of atherosclerosis. A report from the Committee on Vascular lesions of the Council on Arteriosclerosis, American Heart Association. Circulation 1995;92:1355-1374.        [ Links ]

50. Berliner JA, Navah M, Fogelman AM, Frank JS, Demer LL, Edwars PA, et al. Atherosclerosis: Basic mechanisms. Oxidation, inflammation, and genetics. Circulation 1995;91:2488-2496.         [ Links ]

51. Hernandez-Presa M, Bustos C, Ortega M, Tuñón J, Renedo G, Ruiz-Ortega M, Egido J. Angiotensin-converting enzyme inhibition prevents arterial nuclear factor-kB activation, monocyte chemoattractant protein-1 expression, and macrophage infiltration in a rabbit model of early accelerated atherosclerosis. Circulation 1997;95:1532-1541.        [ Links ]

52. Harlan TM. Leukocyte-endothelial adhesion molecules. Blood 1994;84:2068-2101.        [ Links ]

53. Wood KM, Cadogan MD, Ramshaw AL, Parums DV. The distribution of adhesion molecules in human atherosclerosis. Histopathology 1993;22:437-444.        [ Links ]

54. Adams DH, Shaw S. Leukocyte-endothelial interactions and regulation of leukocyte migration. Lancet 1994;343:831-836.        [ Links ]

55. Lampugnani MG, Corada M, Caveda L, Brevario F, Ayalon O, Geiger B, Dejana E. The molecular organization of endothelial cell to cell junctions: Differential association of plakoglobin, beta-catenin, and alpha-catenin with vascular endothelial cadherins (VE-cadherin). J Cell Biol 1995;12:203-217.        [ Links ]

56. Sandig M, Korvemaker ML, Ionescu CV, Negrou E, Rogers K. Transendothelial migration of monocytes in rat aorta: Distribution of F-actin, alpha-catenin, LFA-1, and PECAM-1. Biotech Histochem 1998;74:276-293.        [ Links ]

57. McGill HC, McMahan CA, Herderick EE, Malcolm GT, Tracy RE, Strong JP. Origin of atherosclerosis in childhood and adolescence. Am J Clin Nutr 2000;72(Suppl):1307-1315.        [ Links ] ]]> 1 1993 362 801-808 2 Ministerio de Sanidad y Asistencia Social 3 Ministerio de Sanidad y Asistencia Social 4 1968 18 465-467 5 2000 72 13075-13155 6 1990 25-68 7 1993 12-23 8 1998 21 92-101 9 1971 2 1-29 10 1989 9 ^s1 ^s1 1 1-9 11 NCEP 1992 89 495-510 12 1994 108 55-71 13 American Academy of Pediatrics 1986 78 2 2 349-355 14 1985 16 3-5 15 1983 113 341-358 16 1981 103 181-190 17 1991 64 5-15 18 1990 253-271 19 1962 40 21-35 20 1976 35 6-17 21 1979 17 110-112 22 1985 53 80-90 23 1992 166 69-75 24 1985 146 197-204 25 1995 45 801-804 26 1987 64 91-108 27 1992 340/8828 1111-1115 28 1994 89 17-32 29 1994 106 1-8 30 1980 100 57-73 31 1993 423 433-442 32 1990 56 344-359 33 1968 18 479-497 34 1999 260-270 35 1999 9 205-214 36 1999 354 1234-1241 37 1977 11 889-893 38 1988 12 163-172 39 1999 2 3-10 40 2000 247 349-358 41 1989 9 908-917 42 1991 11 1175-1183 43 1993 143 4 4 987-1002 44 1994 344 793-795 45 1992 85 391-405 46 2000 72 1297-1306 47 1997 133 585-595 48 1997 100 2680-2690 49 1995 92 1355-1374 50 1995 91 2488-2496 51 1997 95 1532-1541 52 1994 84 2068-2101 53 1993 22 437-444 54 1994 343 831-836 55 1995 12 203-217 56 1998 74 276-293 57 2000 72 1307-1315