Caracterización fisicoquímica y antimicrobiana de la miel de nueve especies de abejas sin aguijón (Meliponini) de Guatemala.

María José Dardón y Eunice Enríquez

María José Dardón. Bióloga, Universidad de San Carlos de Guatemala (USAC) Guatemala. Estudiante Doctoral, Universidad de Salamanca, España. Investigadora, Laboratorio de Entomología Aplicada y Parasitología (LENAP), USAC. Guatemala. Dirección: LENAP Edificio T-10 Segundo Nivel, Ciudad Universitaria, Zona 12, Guatemala, Guatemala. CP 01012. e-mail: majodar24yahoo.com

Eunice Enríquez. Bióloga, USAC. Profesora e investigadora, LENAP, Programa EDC y Centro de Estudios Conservacionistas USAC. Guatemala. e-mail: eu_enriquez@yahoo.com.mx.

RESUMEN

La miel de meliponinos es reconocida popularmente en Latinoamérica por sus propiedades terapéuticas. En Guatemala, unas 13 especies son criadas artesanalmente para la obtención de miel. Debido al reciente interés en la utilización de la miel de meliponinos en Guatemala y a su comercialización, se hace necesario conocer las características fisicoquímicas y validar el uso terapéutico de la misma. En el presente trabajo se realizó una caracterización fisicoquímica y antibacteriana de la miel producida en Guatemala de nueve especies de meliponinos: Geotrigona acapulconis (Strand, 1919); Melipona beecheii Bennett, 1831; Melipona solani Cockerell, 1912; Melipona aff. yucatanica; Nannotrigona perilampoides Cresson, 1878; Plebeia sp.; Scaptotrigona mexicana Guérin, 1845; Scaptotrigona pectoralis Dalla Torre, 1896; y Tetragonisca angustula (Latreille, 1811). Los valores promedio obtenidos en 18 muestras fueron: humedad 21,55g/100g de miel; acidez 22,45meq/kg; cenizas 0,29g/100g; hidroximetilfurfural 0,23mg/kg; actividad de la diastasa 10,94DN; y pH 3,89. Se evaluó la actividad antibacteriana frente a ocho microorganismos, determinando una concentración inhibitoria mínima de 2,5 a 10% (v/v). Se realizó un análisis preliminar de tipos polínicos que permitió identificar la presencia de 21 familias vegetales visitadas por los meliponinos en Guatemala, donde la miel de T. angustula presentó la mayor diversidad. Este trabajo es el primer aporte al conocimiento sobre la composición fisicoquímica y antibacteriana de las mieles de nueve especies de meliponinos en este país.

SUMMARY

The honey of stingless bees is popularly known in Latin America for its therapeutic properties. In Guatemala some 13 species are traditionally bred to obtain honey. Due to the recent interest and trading of meliponine honey, it is necessary to know the physicochemical properties and to validate its therapeutic use. The antimicrobial activity, the physicochemical composition and the botanical origin of the honey produced by nine species of stingless bees from Guatemala is reported. The species were Geotrigona acapulconis (Strand, 1919); Melipona beecheii Bennett, 1831; Melipona solani Cockerell, 1912; Melipona aff. yucatanica; Nannotrigona perilampoides Cresson, 1878; Plebeia sp.; Scaptotrigona mexicana Guérin, 1845; Scaptotrigona pectoralis Dalla Torre, 1896; and Tetragonisca angustula (Latreille, 1811). The average values obtained in 18 samples were: Moisture 21.55g for 100g of honey, acidity 22.45meq/100g, ash 0.29g/100g, hidroximetilfurfural 0.23mg/kg, diastase activity 10.94 N, and pH 3.89. The antibacterial activity of the honey against eight microorganisms was determined; the minimum inhibitory concentration was found to be of 2.5 to 10% (v/v). A preliminary palynological analysis permitted the identification of 21 vegetal families in the honey samples of Guatemala, among which the honey of T. angustula presented the greatest diversity. This work is the first contribution about the composition of honey from nine species of meliponini in the country.

RESUMO

O mel de meliponíneos é reconhecido popularmente na América Latina por suas propriedades terapêuticas. Na Guatemala, umas 13 espécies são criadas artesanalmente para a obtenção de mel. Devido ao recente interesse na utilização do mel de meliponíneos na Guatemala e a sua comercialização, se faz necessário conhecer as características físico-químicas e validar o uso terapêutico da mesma. No presente trabalho se realizou uma caracterização físico-química e antibacteriana do mel produzido na Guatemala de nove espécies de meliponíneos: Geotrigona acapulconis (Strand, 1919); Melipona beecheii Bennett, 1831; Melipona solani Cockerell, 1912; Melipona aff. yucatanica; Nannotrigona perilampoides Cresson, 1878; Plebeia sp.; Scaptotrigona mexicana Guérin, 1845; Scaptotrigona pectoralis Dalla Torre, 1896; e Tetragonisca angustula (Latreille, 1811). Os valores médios obtidos em 18 amostras foram: umidade 21,55g/100 g de mel; acidez 22,45meq/kg; cinzas 0,29g/100g; hidroximetilfurfural 0,23mg/kg; atividade da diastasa 10,94DN; y pH 3,89. Avaliou-se a atividade antibacteriana frente a oito microorganismos, determinando uma concentração inibitória mínima de 2,5 a 10% (v/v). A análise preliminar de tipos polínicos permitiu identificar a presença de 21 famílias vegetais visitadas pelos meliponíneos na Guatemala, onde o mel de T. angustula apresentou a maior diversidade. Este trabalho é o primeiro aporte ao conhecimento sobre a composição físico-química e antibacteriana do mel de noves espécies de meliponíneos neste país.

PALABRAS CLAVE / Guatemala / Geotrigona / Melipona / Miel / Scaptotrigona / Tetragonisca /

Las abejas sin aguijón (Apidae: Apinae: Meliponini) se distribuyen en las regiones tropicales y subtropicales del mundo. En Guatemala se ha reportado la presencia de 30 especies de abejas sin aguijón (Yurrita et al., 2004), de las cuales al menos 13 son utilizadas para la obtención de miel y otros productos de la colmena (Enríquez et al., 2001; Yurrita et al., 2004; Enríquez et al., 2005; Enríquez y Dardón, 2007). La crianza de estas abejas, en la región mesoamericana, data desde épocas prehispánicas. Los antiguos Mayas llegaron a conformar extensos meliponarios, lugares donde mantenían a las abejas sin aguijón, de la especie Melipona beecheii, de los cuales obtenían considerables cantidades de miel empleada como alimento, medicina y para ceremonias religiosas (De Jong, 1999; Villanueva et al., 2003).

Actualmente se busca rescatar el cultivo de meliponinos para la conservación de los bosques y como una propuesta de desarrollo rural para comercializar los productos de la colmena. La miel de meliponinos es muy valorada porque se emplea popularmente para el tratamiento de diversas afecciones respiratorias, dermatológicas y gastrointestinales (Vit et al., 2004), lo que incrementa su valor frente a la miel de Apis mellifera L. (Schwarz, 1948; Vit et al., 1998; Enríquez et al., 2005).

La Comisión Internacional de la Miel ha propuesto criterios para evaluar la calidad de las mieles de A. mellifera, tales como la humedad, contenido de azúcares, la acidez, el hidroximetilfurfural (HMF) y la actividad de la diastasa, enzima encargada de la degradación del almidón y vinculada con la actividad antibacteriana de la miel (Villena y Bicudo, 1999; Bogdanov et al., 2000), propiedades que influyen en la calidad y atributos medicinales de la miel (Joshi et al., 2000). La composición bioquímica de la miel de A. mellifera esta determinada principalmente por una alta cantidad de monosacáridos, que constituyen 53-80% de la miel; agua (23-31%); minerales y sustancias nitrogenadas; ácidos orgánicos que confieren a la miel un pH de 3,6-4,2 (Vit et al., 1998). En Guatemala no existe legislación para la miel de A. mellifera; sin embargo, se ha iniciado la elaboración de la Norma Técnica Guatemalteca Miel de Abejas, donde se proponen parámetros fisicoquímicos con valores basados en la legislación internacional (CNCM, 2008).

Vit et al. (2004) han propuesto valores para estos parámetros en tres géneros de meliponinos; sin embargo en Guatemala, al igual que en otros países, se desconoce la composición y la bioactividad de estas mieles. Solo se ha estudiado la composición de una miel de M. beecheii de Guatemala (Vit et al., 2006). Esto plantea la necesidad de conocer las cualidades de la miel de las abejas sin aguijón de Guatemala, objetivo con el cual se determinaron las características fisicoquímicas y antibacterianas de muestras de miel provenientes de 26 localidades ubicadas en 12 de los 22 departamentos de Guatemala, y se llevó a cabo un análisis melisopalinológico preliminar de las mismas.

Se recolectaron 59 muestras de miel provenientes de 12 departamentos de Guatemala (Figura 1), correspondientes a nueve especies de abejas nativas sin aguijón. Las abejas fueron identificadas empleando la clave taxonómica de abejas sin aguijón de Ayala (1999) y para los nombres específicos se siguió el criterio de Moure (Camargo y Pedro, 2008). En la Tabla I se presenta el listado de las especies de meliponinos con sus nombres comunes. Las muestras fueron recolectadas de colmenas tradicionales en troncos y de colmenas en cajas tecnificadas que los meliponicultores mantienen en sus casas. La extracción se realizó durante febrero, marzo y abril de 2006. La miel de las colmenas de cajas se obtuvo con una jeringa (20ml) a la cual se adaptó una pequeña manguera fina que permitía tomar la miel directamente de los potes sellados, mientras que la miel de las colmenas en troncos fue obtenida rompiendo los potes y decantándola. Posteriormente, la miel fue filtrada y colocada en recipientes plásticos con un tamaño adecuado al volumen extraído. Todas las muestras fueron conservadas a 4ºC evitando la exposición lumínica.

Las bacterias utilizadas para evaluar la actividad antibacteriana de la miel de meliponinos fueron Staphylococcus aureus ATCC 25923, Salmonella typhi ATCC 14028, Mycobacterium smegmatis ATCC 607, Bacillus subtilis cepa silvestre, Pseudomona aeruginosa ATCC 27853 y Escherichia coli ATCC 25922. Las levaduras evaluadas fueron Candida albicans ATCC 10231 y Criptococcus neoformans CCQQ C-13. Estos microorganismos fueron seleccionados por su importancia médica y en algunos casos por su resistencia a antibióticos. Se utilizó el procedimiento descrito por Mitscher et al. (1972) adaptado para bacterias y levaduras. Se trabajó con 31 muestras de miel, las cuales se diluyeron en agar Mueller-Hinton para obtener concentraciones entre 10, 5, 2,5 y 1,25% (v/v) y determinar así la concentración inhibitoria mínima (CIM). Los microorganismos fueron inoculados en cuadriplicado e incubados a 37ºC por 24h para el caso de bacterias y por 48h para los hongos. Después del período de incubación se verificó el crecimiento positivo o negativo de las bacterias y de las levaduras evaluadas. Se reporta la CIM promedio de la miel de cada especie de meliponino que inhibía el 100% del crecimiento de cada microorganismo, correspondiendo a su efecto bactericida, no siendo considerada en este trabajo la acción bacteriostática.

Las mieles de ocho especies de meliponinos, haciendo un total de 18 muestras, fueron analizadas respecto a su contenido de HMF (por cromatografía líquida), cenizas (por incineración), pH, acidez libre (por titulación), humedad (por refractometría) y actividad enzimática de la diastasa. Por otro lado, las mieles producidas por cuatro especies de meliponinos, haciendo un total de nueve muestras, fueron evaluadas respecto a su contenido de sacarosa aparente, de azúcares reductores y azúcares totales (por cuprimetría). Para los nueve parámetros evaluados se empleó la metodología descrita en el manual de Bogdanov et al. (2002).

Se realizó estadística descriptiva y análisis de componentes principales (ACP) para explicar la variación observada en los parámetros fisicoquímicos de la miel producida por diferentes especies de abejas. Se utilizó el paquete estadístico XLSTAT 2008.

En la Tabla II se presenta la CIM de 31 muestras de miel. El 62,5% presenta CIM= 5% para todos los microorganismos inoculados con mieles de S. mexicana, y excepto para C. albicans en las mieles de M. beecheii y de Plebeia sp. La miel de M. aff. yucatanica fue menos efectiva frente a S. typhi, al igual que la miel de G. acapulconis, la cual presentó menor efectividad frente a S. aureus y no presentó actividad contra C. albicans. El espectro intermedio se encontró para las mieles de T. angustula, con crecimientos de la mitad de los microorganismos estudiados, con diluciones de 5 y 10%. Un 12,5% de muestras no inhibieron el crecimiento de los microorganismos, correspondiendo casi exclusivamente a M. solani. La miel de S. pectoralis presentó los valores más bajos de CIM, siendo efectiva al 2,5% para seis de los ocho microorganismos evaluados. La miel de N. perilampoides también presentó una CIM baja (2,5%) para M. smegmatis, B. subtilis y C. neoformans.

En la Tabla III se presentan las características fisicoquímicas de todas las muestras de miel analizadas. Los valores promedio obtenidos para las especies de los géneros Melipona, Scaptotrigona y Tetragonisca se encuentran dentro de los parámetros propuestos a la Comisión Internacional de la Miel para estos mismos géneros (Vit et al., 2004).

En los tipos polínicos identificados en las 53 muestras de miel correspondientes a nueve especies de meliponinos (Tabla IV), destaca la alta riqueza de diferentes familias vegetales encontradas en T. angustula y la escasa riqueza de éstas en M. aff. yucatanica. Sin embargo, esta última especie presenta tipos polínicos de Asteraceae y Melastomataceae, las familias vegetales más abundantes en las mieles evaluadas.

La miel ha sido definida como un fluido dulce, denso, transparente y viscoso; resultante de la acción enzimática de las abejas sobre el néctar de las flores y exudados de las partes vivas de las plantas, que es producida por A. mellifera (White, 1971). Dentro de esta definición existe un vacío para la miel producida por meliponinos, por lo que su reconocimiento es una prioridad (Souza et al., 2006). En general, la miel presenta diversas características que han sido estudiadas para reconocer diferentes tipos de miel, características que varían por factores tales como el recurso floral disponible para la obtención de polen y néctar (Molan, 1992). Tres componentes son los más empleados para el análisis de la miel: actividad antimicrobiana, composición fisicoquímica y recursos florales de los que proviene.

La miel de ocho de las nueve especies de abejas sin aguijón evaluadas presenta actividad antibacteriana a concentraciones de 2,5-10% (v/v) contra los ocho microorganismos patógenos utilizados, seis bacterias y dos levaduras. Estos valores pueden ser considerados como más efectivos que los reportados en análisis efectuados con la miel de A. mellifera (Lusby et al., 2005; Molan, 2006). La miel de M. solani al 10% (v/v) no presentó actividad antibacteriana frente a los microorganismos evaluados; aunque una de las tres réplicas sí presentó actividad antibacteriana. Temaru et al. (2007), empleando una técnica distinta a la del presente trabajo, reportan que la miel de M. solani no presenta actividad antibacteriana contra E. coli y P. aeuroginosa, pero sí contra S. aureus ATCC 9144. En el presente estudio, la miel de M. beecheii y M. aff. yucatanica presentaron actividad antibacteriana a concentraciones entre 5 y 10%, siendo C. albicans y S. typhi los microorganismos más resistentes. La miel de las abejas del género Melipona ha sido objeto de estudios que han demostrado su efectividad contra distintas bacterias patógenas (B. subtilis, S. aureus, E. coli y S. cholerasuis, P. aeruginosa; Martins et al., 1997; Temaru et al., 2007), lo cual se corrobora en este trabajo.

La miel de T. angustula, aunque presentó actividad antibacteriana en concentraciones de 5-10%, puede considerarse como una de las menos efectivas, con menor actividad contra S. aureus, S. typhi, P. aeruginosa y C. albicans. La miel de Plebeia sp. presentó una efectividad promedio a una concentración del 5%, excepto para C. albicans, a la que inhibió a una concentración del 10%. Las mieles de las especies S. pectoralis y N. perilampoides presentaron la mayor efectividad contra los microorganismos evaluados, inhibiendo su crecimiento a concentraciones de 2,5-5%.

La actividad antibacteriana de la miel de abejas sin aguijón ha sido poco estudiada. Sin embargo, se han realizado algunos trabajos con propóleos de estas abejas y su efectividad antibacteriana frente a diversos organismos, citados por Bankova y Popota (2007). Se considera que el propóleo presente en los potes de almacenamiento de miel de abejas sin aguijón puede transmitirle propiedades antibacterianas, antifúngicas y antivirales a la miel (Temaru et al., 2007), lo cual puede ser considerado para explicar la actividad antimicrobiana de las mieles producidas por los géneros Plebeia, Scaptotrigona y Nannotrigona, aquí estudiadas.

Dado que para las especies de M. aff. yucatanica, Plebeia sp., G. acapulconis y ambas especies del género Scaptorigona solo se analizó una muestra de miel, se hace necesario analizar un mayor número de muestras.

De forma general, los microorganismos menos susceptibles a la miel de meliponinos fueron C. albicans y S. typhi, para los cuales se ha reportado resistencia a antibióticos (Calva, 2007). Sin embargo, a diluciones de 2,5%, la miel de S. pectoralis resulta ser efectiva para inhibir el crecimiento de S. aureus, S. typhi, M. smegmatis, B. subtilis, P. aeruginosa y C. neoformans. Temaru et al. (2007) obtuvieron resultados positivos para la inhibición de diversos microorganismos empleando miel de S. pectoralis. Es de interés conocer los componentes de esta miel que inhiben el crecimiento bacteriano en la dilución más baja, de 2,5% (v/v), comparada con las otras mieles analizadas en este trabajo.

S. aureus suele desarrollar resistencia rápidamente a antibióticos y penicilina, por lo que resulta difícil de tratar (Tortora et al., 2002). En este estudio, la miel de las especies de meliponinos inhibió su crecimiento a 5-10% de dilución, con excepción de S. pectoralis que inhibió al 2.5% y M. solani que no presentó inhibición alguna. Demera y Angert (2004) señalan la falta de efectividad de la miel de T. angustula de Costa Rica frente a este microorganismo. Sin embargo, en el presente trabajo esta miel fue efectiva al 10% (v/v).

Las bacterias del género Mycobacterium suelen resistir condiciones ambientales adversas, antibióticos y productos químicos como antisépticos y desinfectantes (Tortora et al., 2002). En este estudio, el crecimiento de M. smegmatis fue inhibido por mieles de ocho especies de abejas sin aguijón a una dilución promedio de 5% (v/v). Por ello sería recomendable evaluar la respuesta de M. tuberculosis y M. leprae a la miel de meliponinos, ya que de ser efectivas podrían ser propuestas como tratamientos alternativos para las enfermedades causadas por estas bacterias.

La caracterización fisicoquímica suele realizarse para determinar las cualidades de la miel, en especial con fines de comercialización. Para analizar la composición de la miel se emplean los parámetros establecidos para evaluar la miel de A. mellifera. Vit et al. (2004) han propuesto algunos valores para el control de la miel de meliponinos. Los parámetros fisicoquímicos de las mieles evaluadas en este trabajo se encuentran dentro de lo propuesto por Vit et al. (2004) en relación a los parámetros de calidad para Melipona, Trigona y Scaptotrigona, pero no así en algunos valores encontrados para Plebeia sp. y G. acapulconis, dos especies que han sido poco estudiadas, por lo que no se han propuesto parámetros de calidad para ellas. La humedad en la miel de G. acapulconis excede en 2 g/100g de miel al valor propuesto (máximo de 30,0g/100g) y la miel de Plebeia sp. presentó un valor de 30,26g/100g.

La acidez en G. acapulconis excede el límite propuesto por Vit et al. (2004) para la miel de Trigona (75,0meq/kg miel) y presenta un valor en el límite de lo permitido para Scaptotrigona (85,0 meq/kg). Popularmente se reconoce a la miel de esta especie por su alta acidez, lo cual se corrobora al presentar un valor cuatro veces mayor que el resto de especies evaluadas. Destaca su bajo valor de actividad de la diastasa, inferior a lo permitido para los géneros Trigona (7DN) y Scaptotrigona (3DN). Souza et al. (2006) citan valores de 0,9-23,0DN para mieles de meliponinos, lo cual sugiere analizar una disminución en la propuesta de Vit et al. (2004) al mínimo requerido como parámetro de calidad.

Vit et al. (1998) indicaron que la miel de T. angustula presenta mayor acidez que la de Melipona; sin embargo, en el presente estudio la miel de esa especie presentó una acidez promedio menor a la de M. beecheii y considerablemente mayor a la de M. solani. Se ha señalado que la acidez de las mieles es importante para impedir el crecimiento de microorganismos (Alves et al., 2005); no obstante, los valores de acidez más altos no correspondieron a las mieles con mayor actividad antibacteriana. Por ejemplo, la de N. perilampoides fue altamente efectiva contra los microorganismos evaluados, pero presenta una acidez ocho veces menor al máximo encontrado en las mieles estudiadas.

Para las mieles del género Melipona, la humedad se encuentra entre márgenes estrechos, de 17,32 a 20,37g/100g miel, por lo que no se observan diferencias notables entre las producidas por diferentes especies. Valores muy similares han sido encontrados en T. angustula, N. perilampoides y S. mexicana. Lo cual no coincide con lo encontrado por Vit et al. (1998), quienes hallan mayor humedad en la miel de Melipona que en la miel de T. angustula. En este estudio, los valores más altos de humedad fueron encontrados en las mieles de G. acapulconis y Plebeia sp., los cuales difieren en gran medida con las mieles de las otras especies.

El HMF es un importante indicador del grado de adulteración de la miel y aumenta con el tiempo de almacenamiento. Los valores obtenidos (<0,2mg/kg de miel) fueron bajos en todas las especies y se encuentran por debajo del límite (40mg/kg) propuesto por Vit et al. (2004), correspondiendo a mieles puras y que permanecieron en refrigeración, lo cual conservó sus cualidades. Estos valores son inferiores a los señalados por diversos estudios realizados en mieles desde México hasta Brasil (Souza et al., 2006).

El análisis de componentes principales efectuado indica que las variables de HMF, acidez, humedad, diastasa y pH son los parámetros que determinan la variabilidad, en un 55%; entre las especies analizadas, mientras que las cenizas explican el 24%. Este análisis permite distinguir la miel de Plebeia sp. y G. acapulconis de las demás mieles. En el caso de Plebeia probablemente se explica por la elevada concentración de cenizas, parámetro que parece ser característico de la miel de este género, dado que valores similares han sido encontrados en otros trabajos (Souza et al., 2006). Las mieles de meliponinos evaluadas presentan tres divisiones principales al tomar en cuenta los valores de cenizas. Las del género Melipona son similares entre sí (0,06-0,07g/100g miel); las de S. mexicana y G. acapulconis presentan valores intermedios (0,09g/100g) y, finalmente, las de T. angustula y N. perilampoides son mayores (0,3g/100g). Vit et al. (1998) también señalan que la miel del género Trigona presenta mayor contenido de cenizas que la de Melipona.

Diez componentes fisicoquímicos de mieles de meliponinos, reducidos a cuatro por análisis discriminante (contenidos de azúcares reductores y de sacarosa, actividad de la diastasa, y la acidez libre o el contenido de nitrógeno) permitieron diferenciar mieles de Scaptotrigona y de Trigona, determinando que la miel de la primera presenta mayor similitud con mieles de Melipona (Vit et al., 1998). Esto coincide en el presente trabajo, dado que la miel de T. angustula se halla separada de S. mexicana, la cual parece tener mayor similitud con las mieles del género Melipona en el análisis de componentes principales. La miel de G. acapulconis se presenta distinta a las otras, lo que se debe muy probablemente a la acidez, que cuadruplica los valores obtenidos para las otras especies.

Los tres azúcares evaluados en el presente estudio en mieles de meliponinos, se encuentran dentro de los parámetros propuestos por Vit et al. (2004) al Codex Alimentarius como parámetro de calidad para la comercialización de estas mieles. Destaca el valor bajo de S. mexicana, en comparación a lo obtenido en mieles de M. beecheii y T. angustula, al igual que en mieles venezolanas (Vit et al., 1998). La miel de M. solani presentó el valor más alto, lo cual refleja las diferencias existentes dentro de las especies del género Melipona respecto a los azúcares reductores.

La miel del género Melipona presentó mayor cantidad de azúcares que las mieles de S. mexicana y T. angustula. La sacarosa presenta una desviación grande entre los valores obtenidos para las muestras analizadas, que van desde 0,06g/100g miel para S. mexicana hasta 10,98 en M. beecheii. Sin embargo, esta última especie presentó valores que iban de 0,6 a 10,98g/100g. Una explicación podría ser que los valores elevados de sacarosa son el resultado de colectas prematuras de la miel, antes de ser transformada en glucosa y fructosa por acción de la invertasa (Alves et al., 2005). Por ello que debe prestarse atención al momento de la colecta de la miel, para obtener así una mejor calidad, aunque otras causas, de origen entomológico (sistema enzimático, flora visitada, etc.) pueden ocasionar el elevado contenido de sacarosa observado en algunas mieles de abejas sin aguijón.

El análisis preliminar de tipos polínicos realizados a la miel de nueve especies de meliponinos muestra que la miel de T. angustula es la que presenta mayor diversidad, con más de 18 familias vegetales distintas. La miel de M. aff. yucatanica, S. mexicana y G. acapulconis presentaron pocas familias vegetales (2, 3 y 3, respectivamente) por lo que pueden ser consideradas como mieles monoflorales, las cuales llegan a ser muy apreciadas comercialmente. La diversidad de recursos identificados en la miel de los meliponinos evaluados señala su importancia como visitantes de la flora autóctona en Guatemala, especialmente el caso de T. angustula que ha sido reportada como una especie que visita una alta cantidad de recursos (Iwama y Melhem, 1979).

Se identificó la presencia de tipos polínicos correspondientes a la familia Myrtaceae en mieles de dos especies de meliponinos. En esta familia se ubica Leptospermum sp., especie a la que se le atribuye la actividad antibacteriana de la miel de manuka (Lusby et al., 2005). No obstante, las mieles que presentaron esta familia dentro de su composición polínica no corresponden a las mieles de mayor actividad antibacteriana, por lo que debe evaluarse cuáles otras especies vegetales contribuyen en conferir tales propiedades a la miel de meliponinos.

Las mieles de meliponinos evaluadas presentaron valores fisicoquímicos promedios de humedad 21,55g/100g, acidez 22,45meq/100g, cenizas 0,29g/100g, HMF 0,23mg/kg de miel, actividad de diastasa de 10,94DN y pH 3,89. Destaca la alta presencia de cenizas en la miel de Plebeia sp. y la elevada acidez de la miel de Geotrigona acapulconis.

Las mieles de meliponinos resultan efectivas para inhibir el crecimiento bacteriano de diversos patógenos como bacterias y levaduras a una dilución de 2,5-10% v/v, a excepción de la miel de Melipona solani, de la cual solo una muestra presentó actividad antibacteriana. En general, los microorganismos menos susceptibles a la miel de meliponinos fueron Candida albicans y Salmonella typhi, destacando la efectividad de la miel de Nannotrigona perilampoides al 2,5% v/v.

En un total de 53 muestras de mieles correspondientes a nueve especies de abejas, se identificaron 21 familias vegetales visitadas por los meliponinos en Guatemala. En donde la miel de Tetragonisca angustula presentó la mayor diversidad en comparación con las otras especies de meliponinos.

Este estudio es el primer reporte de las características antimicrobianas, fisicoquímicas y melisopalinológicas de la miel de diversas especies de meliponinos en Guatemala, representando la base para la estandarización de parámetros de calidad para la comercialización de la miel de abejas nativas sin aguijón en el país. Se destaca la necesidad de continuar evaluando las características de estas mieles, dada la diversidad de sus cualidades en diversas especies e, incluso, dentro de la misma especie.

Las autoras agradecen a la Dirección General de Investigación de la Universidad de San Carlos de Guatemala, por el apoyo financiero, en especial a Liuba Cabrera; a Vilma Landaverde por la colaboración en la identificación de tipos polínicos; a Mabel Vásquez, María Fernanda Bracamonte, Carmen Lucía Yurrita, Gabriela Armas y Sandy Pineda, por el apoyo en el trabajo de laboratorio y campo; al Laboratorio de Citohistología, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de San Carlos, en especial a Isabel Gaytan, por su ayuda en la determinación de la actividad antibacteriana; a Ricardo Ayala, Instituto de Biología de la UNAM, México, por su ayuda para la identificación de especies; y especialmente a los meliponicultores de Guatemala por las muestras de miel y compartir sus conocimientos.

1. Alves R, Carvalho C, Souza B, Sodre G, Marchini L (2005) Características Físico-Químicas de amostras de mel de Melipona mandacaia Smith (Hymenoptera: Apidae). Cien. Tecnol. Alim. 25: 644-650.        [ Links ]

2. Ayala R (1999) Revisión de las abejas sin aguijón de México (Hymenoptera: Apidae: Meliponini). Folia Entomol. Mex. 106: 1-123.        [ Links ]

3. Bankova V, Popova M (2007) Propolis of Stingless Bees: a Promising Source of Biologically Active Compounds. Pharmacog. Rev. 1: 88-92.        [ Links ]

4. Bogdanov S, Lüllmann C, Martin P, Von der Ohe W, Russmann H, Volwohl G, Persano L, Sabatini A, Marcazzan G, Piro R, Flamini C, Morlot M, Lheretier J, Borneck R, Marioleas P, Tsigouri A, Kerkvliet J, Ortiz A, Ivanov T, D´arcy B, Mossel B, Vit P (2000) Honey Quality. Methods of Análisis and Internacional Regulatory Standards: Review of the Work of the International Honey Comission. Swiss Bee Research Centre. Berna, SUIZA. 15 pp.        [ Links ]

5. Bogdanov S, Martin P, Lullmann C (2002) Harmonized Methods of the International Honey Commission. Berna, Suiza. 54 pp.        [ Links ]

6. Calva E (2007) Salmonella typhi y la fiebre tifoidea: de la biología molecular a la salud pública. www.microbiologia.org.mx/microbiosenlinea/CAPITULO_07/Capitulo07.pdf        [ Links ]

7. Camargo J, Pedro S (2008) Meliponini Lepeletier, 1836. In Moure JS, Urban D, Melo GAR (Orgs.) Catalogue of Bees (Hymeptore, Apoidea) in the Neotropical Region - online version. www.moure.cria.org.br/catalogue (Cons. 18/09/2008).        [ Links ]

8. CNCM (2008) Proyecto de Norma Técnica Guatemalteca Miel de Abejas. Especificaciones. Comité Nacional del Codex sobre Miel. Ciudad, Guatemala. 11 pp.        [ Links ]

9. De Jong H (1999) Land of Corn and Honey. The Keeping of Stingless Bees (meliponiculture) in the Ethno-ecological Environment of Yucatán (México) and El Salvador. Utrecht University. Utrech, Holanda. 423 pp.        [ Links ]

10. Demera J, Angert E (2004) Comparison of the antimicrobial activity of honey produced by Tetragonisca angustula (Meliponinae) and Apis mellifera L. from different phytogeographic regions of Costa Rica. Apidologie 35: 411-417.        [ Links ]

11. Enríquez E, Dardón MJ (2007) Caracterización de la miel de meliponinos de distintas regiones biogeográficas de Guatemala. En Resúmenes de Investigaciones. Dirección General de Investigación. Universidad de San Carlos. Guatemala. pp. 3-8.        [ Links ]

12. Enríquez E, Monroy C, Solis A (2001) Situación actual de la meliponicultura en Pueblo Nuevo Viñas, Santa Rosa, Guatemala. II Seminario Mexicano sobre Abejas sin Aguijón. Mérida, Yucatán, México. 120 pp.        [ Links ]

13. Enríquez E, Yurrita CL, Aldana C, Ochenta J, Jáuregui R, Chau P (2005) Conocimiento tradicional acerca de la biología y manejo de abejas nativas sin aguijón en Chiquimula. Revista Agricultura 8: 27-30.        [ Links ]

14. Erdtman G (1966) Pollen Morphology and Plant Taxonomy. Angiosperms. Hafner. Nueva York, EEUU. 553 pp.        [ Links ]

15. Iwama S, Melhem T (1979) The pollen spectrum of the honey of Tetragonisca angustula angustula. Latreille (Apidae, Meliponinae). Apidologie 10: 275-295.        [ Links ]

16. Joshi S, Pechhacker H, William A, Von der Ohe W (2000) Physico-chemical characteristics of Apis dorsata, A. Cerana and A. Mellifera honey from Chitwan district, central Nepal. Apidologie 31: 367-375.        [ Links ]

17. Lusby P, Coombes A, Wilkinson J (2005) Bactericidal Activity of Different Honeys against Pathogenic Bacteria. Arch. Med. Res. 36: 464-467.        [ Links ]

18. Martins S, Albuquerque L, Matos J, Silva G, Pereira A (1997) Atividade antibacteriana en méis de abelhas africanizadas (Apis mellifica) e nativas (Melipona scutelaris, Melipona subnitida e Scaptotrigona bipunctata), do Estado do Ceará. Hig. Alim. 2: 50-53.        [ Links ]

19. Mitscher LA, Leu RP, Bathala MS, Wu WN, Beal JL, White R (1972) Antimicrobial agents from higher plants. I. Introduction, rationale and methodology. Lloydia 35: 157-166.        [ Links ]

20. Molan P (1992) The Antibacterial Activity of Honey. Bee World 73:59-76.        [ Links ]

21. Molan P (2006) The Evidence Supporting the Use of Honey as a Wound Dressing. Int. J.f Lower Extrem. Wounds 5: 40-54.        [ Links ]

22. Roubik D, Moreno J (1991) Pollen and Spores of Barro Colorado Island. Monographs in Systematic Botany. Missouri Botanical Garden. St. Louis, MO, EEUU. 270 pp.        [ Links ]

23. Schwarz HF (1948) Stingless Bees (Meliponidae) of the Western Hemisphere. Bull. Am. Mus. Nat. Hist. 90: 1-546.        [ Links ]

24. Souza B, Roubik D, Barth O, Heard T, Enríquez E, Carvalho C, Villas-Böas J, Marchini L, Locatelli J, Persano-Oddo L, Almeida-Muradian L, Bogdanov S, Vit P (2006) Composition of stingless bee honey: Setting quality standards. Interciencia 31: 867-875.        [ Links ]

25. Temaru E, Shimura S, Amano K, Karasawa T (2007) Antibacterial activity of honey from stingless honeybees (Hymenoptera: Apidae; Meliponinae). Pol. J. Microbiol. 56: 281-285.        [ Links ]

26. Tortora G, Funke B, Case C (2002) Microbiology: An Introduction Media Update. 7^th ed. Cummings. San Francisco, EEUU. 887 pp.        [ Links ]

27. Villanueva R, Roubik D, Colli-Ucán W, Forsythe S (2003) La Meliponicultura, una tradición maya que se pierde. III Seminario Mesoamericano sobre Abejas sin Aguijón. Tapachula, Chiapas, México. 6-8/11/2003. pp. 32-35.        [ Links ]

28. Villena F, Bicudo L (1999) Manual de Análises Físico-Químicas de Mel. APACAME. Sao Paulo, Brasil. 16pp.        [ Links ]

29. Vit P, Persano L, Marano M, Salas E (1998) Venezuelan stingless bee honeys characterized by multivariate analisis of physicochemical properties. Apidologie 29: 377-389.        [ Links ]

30. Vit P, Medina M, Enríquez E (2004) Quality standards for medicinal uses of Meliponinae honey in Guatemala, México and Venezuela. Bee World 85: 2-5.        [ Links ]

31. Vit P, Enríquez E, Barth OM, Matsuda AH, Almeida-Muradian LB (2006) Necesidad del control de calidad de la miel de abejas sin aguijón. MedULA 15: 36-42.        [ Links ]

32. White W (1971) Honey, its Composition and Properties. Agricultural Research Service. United States Departament of Agriculture. Washington, DC, EEUU. 147 pp.        [ Links ]33. Yurrita CL, Enríquez E, Monroy C, Marroquín A (2004) Study of stingless bee diversity in Guatemala. Proc. 8^th IBRA Int. Conf. on Tropical Bees and VI Encontro sobre Abelhas. pp. 402-408.         [ Links ] ]]> 1 2005 25 644-650 2 1999 106 1-123 3 2007 1 88-92 4 2000 15 5 2002 54 6 2007 7 2008 8 CNCM 2008 11 9 1999 423 10 2004 35 411-417 11 2007 3-8 12 2001 120 13 2005 8 27-30 14 1966 553 15 1979 10 275-295 16 2000 31 367-375 17 2005 36 464-467 18 1997 2 50-53 19 1972 35 157-166 20 1992 73 59-76 21 2006 5 40-54 22 1991 270 23 1948 90 1-546 24 2006 31 867-875 25 2007 56 281-285 26 2002 7th 887 27 2003 8/11/2003 Tapachula Chiapas 32-35 28 1999 16 29 1998 29 377-389 30 2004 85 2-5 31 2006 15 36-42 32 1971 147 33 2004 402-408