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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[Alteraciones histológicas hepáticas e incremento de proteínas séricas en pollos de engorde alimentados con dietas suplementadas con Saccharomyces cerevisiae]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[The aim of this study was to determine the effect of diet supplemented with Saccharomyces cerevisiae (SC), on the liver morphology, serum activities of aspartateaminotrasferase (AST) and alanineaminotransferase (ALT), and the serum concentration of total proteins, albumin and the different fractions (&#945;, &#946;, &#947;) of globulin in chickens. Two groups of Hubbar x Hubbar strain chickens (each = 16), were fed with a diet T1 (commercial food without SC) and T2 (commercial food with SC) for 42 days. Thereafter, animals were sacrificed and samples of blood and liver were obtained. Macroscopic features and relative weight of livers remained in the normal ranges in both groups. High percent of T2 chickens (p < 0.05) showed hepatic alterations with proliferation/dilation of biliary ducts and increased degree of vacuolization. Tricromic stain showed elevated perivascular fibrosis in T2. The ultrastructural study showed fibroblast like cells, increased amount of collagen fibers, cytoplasm vacuolization of hepatocytes and loss of cellular and mitochondrial integrates. No significant differences were observed in the activities of AST and ALT between groups. Increased concentrations of total proteins and &#945;2, &#946; and &#947; globulins and decreased albumin were observed in the serum of T2 group. These findings may be related to a hepatotoxic effect of SC and chickens could have the risk of further increased hepatic failure with a prolonged exposition to this diet.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[  <BASEFONT SIZE="3">     <P ALIGN="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="3"><b>Alteraciones histol&#243;gicas hep&#225;ticas e incremento de prote&#237;nas s&#233;ricas en  pollos de engorde alimentados con dietas suplementadas con <I>Saccharomyces  cerevisiae.</I>&nbsp;</b></font></P>     <P ALIGN="center"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Darwuin Arrieta-Mendoza</FONT><font face="Verdana" size="2"><sup>1</sup></font><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">, Maria L. Perez-Arevalo</FONT><font face="Verdana" size="2"><sup>2</sup></font><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">, Amelia Luengo</FONT><font face="Verdana" size="2"><sup>2</sup></font><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">, Juan  P. Hern&#225;ndez</FONT><font face="Verdana" size="2"><sup>3</sup></font><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">, Deisy Lista-Alves</FONT><font face="Verdana" size="2"><sup>1</sup></font><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> y Jes&#250;s Mosquera</FONT><font face="Verdana" size="2"><sup>4</sup></font><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">.&nbsp;</FONT></P>     <P ALIGN="justify"><font face="Verdana" size="2"><sup>1</sup><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">C&#225;tedra de Farmacolog&#237;a y Toxicolog&#237;a Veterinaria, Facultad de Ciencias  Veterinarias, Universidad Central de Venezuela. Maracay, Venezuela. </FONT><sup>2</sup><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">Facultad  de Ciencias Veterinarias, Universidad del Zulia. </FONT><sup>3</sup><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">Instituto de Investigaciones  Biol&#243;gicas, Facultad de Medicina, Universidad del Zulia. </FONT><sup>4</sup><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">Instituto de  Investigaciones Cl&#237;nicas &#147;Dr. Am&#233;rico Negrette&#148;, Facultad de Medicina,  Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela. Correo electr&#243;nico: darwuin@yahoo.com&nbsp;</FONT></font></P>     <P ALIGN="justify"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">Autor de correspondencia: Darwuin Arrieta-Mendoza. Cátedra de Farmacología y Toxicología Veterinaria, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Central de Venezuela, Apartado Postal Nº 4563/2101-A. Maracay, Venezuela. Telefax: 58-243-5506250/6440. Telf: 0414-966991. Correo electrónico: darwuin@yahoo.com&nbsp;</font></P>     <P ALIGN="justify"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> Resumen. </FONT> </B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> El presente estudio fue realizado para determinar el efecto<B> </B>del  alimento suplementado con cultivo<B> </B>de <I>Saccharomyces cerevisiae</I> (SC), sobre  la morfolog&#237;a hep&#225;tica, las actividad s&#233;rica de la aspartatoaminotrasferasa  (AST) y la alaninoaminotransferasa (ALT), la concentraci&#243;n de prote&#237;nas  totales (PT), la alb&#250;mina, y las fracciones <span style="font-size:10.0pt;font-family:Verdana; mso-fareast-font-family:&quot;Times New Roman&quot;;mso-bidi-font-family:&quot;Times New Roman&quot;; mso-ansi-language:ES;mso-fareast-language:ES;mso-bidi-language:AR-SA">&#945;, &#946;</span> y <span style="font-size:10.0pt;font-family:Verdana; mso-fareast-font-family:&quot;Times New Roman&quot;;mso-bidi-font-family:&quot;Times New Roman&quot;; mso-ansi-language:ES;mso-fareast-language:ES;mso-bidi-language:AR-SA">&#947;</span> de las globulinas,  en pollos de engorde. Se utilizaron dos grupos de pollos Hubbar x<I> </I>Hubbar  (n = 16 cada uno), que recibieron la dieta T<SUB>1</SUB> (alimento comercial sin SC)  y la dieta T<SUB>2</SUB> (alimento comercial con 0,1% de SC) durante 42 d&#237;as. Se obtuvieron  muestras de suero sangu&#237;neo y de h&#237;gado, para los estudios. No se observ&#243;  cambios macrosc&#243;picos, ni variaci&#243;n significativa del peso hep&#225;tico relativo.  Microsc&#243;picamente se evidenci&#243; mayor porcentaje (P &lt; 0,05) de lesiones  hepatot&#243;xicas con proliferaci&#243;n/dilataci&#243;n de conductos biliares y alto  grado de vacuolizaci&#243;n en pollos del grupo T<SUB>2</SUB>. La tinci&#243;n tricr&#243;mica demostr&#243;  mayor grado de fibrosis perivascular en T<SUB>2</SUB>. La ultraestructura del T<SUB>2 </SUB>revel&#243;  c&#233;lulas semejantes a fibroblastos, abundantes fibras de col&#225;geno, vacuolizaci&#243;n  y alteraci&#243;n de la matriz citoplasm&#225;tica de hepatocitos, ruptura celular  y edema mitocondrial. A nivel sangu&#237;neo, no se detect&#243; diferencia en los  valores de AST y ALT. Se apreci&#243; aumento de las PT, disminuci&#243;n de la alb&#250;mina  y aumento de las globulinas (</FONT></font><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"><span style="font-size:10.0pt;font-family:Verdana; mso-fareast-font-family:&quot;Times New Roman&quot;;mso-bidi-font-family:&quot;Times New Roman&quot;; mso-ansi-language:ES;mso-fareast-language:ES;mso-bidi-language:AR-SA">&#945;</span><SUB>2</SUB>, <span style="font-size:10.0pt;font-family:Verdana; mso-fareast-font-family:&quot;Times New Roman&quot;;mso-bidi-font-family:&quot;Times New Roman&quot;; mso-ansi-language:ES;mso-fareast-language:ES;mso-bidi-language:AR-SA">&#946;</span> y <span style="font-size:10.0pt;font-family:Verdana; mso-fareast-font-family:&quot;Times New Roman&quot;;mso-bidi-font-family:&quot;Times New Roman&quot;; mso-ansi-language:ES;mso-fareast-language:ES;mso-bidi-language:AR-SA">&#947;</span>) a los 42 d&#237;as de experimentaci&#243;n.  Estos hallazgos indican probables alteraciones hep&#225;ticas por consumo del  SC, existiendo el posible riesgo de agravarlas, cuando se prolongue la  exposici&#243;n a esta dieta a las aves de corral.</FONT></P>     <P ALIGN="justify"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> Palabras clave:&nbsp;</FONT></B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">H&#237;gado, <I>Saccharomyces cerevisiae,</I> hepatotoxicidad, fibrosis, pollo.&nbsp;</FONT></font></P>     <P ALIGN="center"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">Histological alterations in the liver and increased serum proteins in chickens  fed with diet containing </FONT> </B><I><B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">Saccharomyces cerevisiae.</FONT></B></I></font></P>     <P ALIGN="justify"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> Abstract. </FONT> </B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">The aim of this study was to determine the effect of diet supplemented  with <I>Saccharomyces cerevisiae</I> (SC), on the liver morphology, serum activities  of aspartateaminotrasferase (AST) and alanineaminotransferase (ALT), and  the serum concentration of total proteins, albumin and the different fractions  (<span style="font-size:10.0pt;font-family:Verdana; mso-fareast-font-family:&quot;Times New Roman&quot;;mso-bidi-font-family:&quot;Times New Roman&quot;; mso-ansi-language:ES;mso-fareast-language:ES;mso-bidi-language:AR-SA">&#945;, &#946;,</span> <span style="font-size:10.0pt;font-family:Verdana; mso-fareast-font-family:&quot;Times New Roman&quot;;mso-bidi-font-family:&quot;Times New Roman&quot;; mso-ansi-language:ES;mso-fareast-language:ES;mso-bidi-language:AR-SA">&#947;</span>) of globulin in chickens. Two groups of Hubbar x<I> </I>Hubbar strain  chickens (each = 16), were fed with a diet T<SUB>1 </SUB>(commercial food without  SC) and T<SUB>2</SUB> (commercial food with SC) for 42 days. Thereafter, animals were  sacrificed and samples of blood and liver were obtained. Macroscopic features  and relative weight of livers remained in the normal ranges in both groups.  High percent of T<SUB>2</SUB> chickens (p &lt; 0.05) showed hepatic alterations with  proliferation/dilation of biliary ducts and increased degree of vacuolization.  Tricromic stain showed elevated perivascular fibrosis in T<SUB>2</SUB>. The ultrastructural  study showed fibroblast like cells, increased amount of collagen fibers,  cytoplasm vacuolization of hepatocytes and loss of cellular and mitochondrial  integrates. No significant differences were observed in the activities  of AST and ALT between groups. Increased concentrations of total proteins  and </FONT></font><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"><span style="font-size:10.0pt;font-family:Verdana; mso-fareast-font-family:&quot;Times New Roman&quot;;mso-bidi-font-family:&quot;Times New Roman&quot;; mso-ansi-language:ES;mso-fareast-language:ES;mso-bidi-language:AR-SA">&#945;</span></FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"><SUB>2</SUB>, </FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"><span style="font-size:10.0pt;font-family:Verdana; mso-fareast-font-family:&quot;Times New Roman&quot;;mso-bidi-font-family:&quot;Times New Roman&quot;; mso-ansi-language:ES;mso-fareast-language:ES;mso-bidi-language:AR-SA">&#946;</span> and <span style="font-size:10.0pt;font-family:Verdana; mso-fareast-font-family:&quot;Times New Roman&quot;;mso-bidi-font-family:&quot;Times New Roman&quot;; mso-ansi-language:ES;mso-fareast-language:ES;mso-bidi-language:AR-SA">&#947;</span>&nbsp;globulins and decreased albumin were observed in the serum  of T<SUB>2 </SUB>group. These findings may be related to a hepatotoxic effect of SC  and chickens could have the risk of further increased hepatic failure with  a prolonged exposition to this diet.</FONT></P>     <P ALIGN="justify"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> Key words:&nbsp;</FONT></B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">Liver, <I>Saccharomyces cerevisiae,</I> hepatotoxicity, fibrosis, chicken.&nbsp;</FONT></font></P>     ]]></body>
<body><![CDATA[<P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Recibido: 06-09-2006. Aceptado: 15-02-2007.&nbsp; </FONT></P>     <P ALIGN="justify"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> INTRODUCCI&#211;N&nbsp; </FONT></B> </P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> La levadura de <I>Saccharomyces cerevisiae</I> (SC) es frecuentemente utilizada  en la industria de los alimentos destinados a consumo humano y en nutrici&#243;n  animal, destacando la cepa 1026 por sus beneficios zoot&#233;cnicos (1). En  avicultura existen frecuentes ensayos que incluyen el uso de SC en la dieta,  principalmente como promotor de crecimiento (2), probi&#243;tico (3) y adsorbente  de micotoxinas (4, 5). Varios de estos efectos son debidos a los componentes  de su pared celular (6-8) a los que tambi&#233;n se les atribuyen propiedades  inmunomoduladoras (9, 10), principalmente por incrementar los niveles de  anticuerpos en aves (11-13). Algunos de los mecanismos para inducir estos  efectos a&#250;n no est&#225;n claros (6, 14).&nbsp; </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Recientemente se ha asociado la presencia de anticuerpos anti-SC en algunas  patolog&#237;as hep&#225;ticas en el humano, principalmente la cirrosis hepatobiliar  primaria autoinmune (15), lo que ha incluido a esta levadura en la lista  de los probables agentes relacionados con la patog&#233;nesis de esta enfermedad  y otras alteraciones idiop&#225;ticas asociadas con trastornos gastrointestinales  (16, 17). El uso de dietas con SC o de los componentes de su pared celular  en aves de corral, ha sido dirigido para valorar los &#237;ndices productivos,  inmunidad humoral, equilibrio en la microflora gastrointestinal, morfolog&#237;a  de &#243;rganos y valores de qu&#237;mica sangu&#237;nea entre otros par&#225;metros (5, 10,  13, 18, 19); sin embargo, existe escasa informaci&#243;n acerca de los cambios  adversos en la morfolog&#237;a y la funci&#243;n hep&#225;tica de estas aves. Por lo tanto,  el prop&#243;sito de esta investigaci&#243;n fue evaluar la morfolog&#237;a hep&#225;tica,  la actividad s&#233;rica de aspartato-aminotransferasa (AST) y alanino-aminotransferasa  (ALT), as&#237; como, las prote&#237;nas totales, la alb&#250;mina, y las fracciones s&#233;ricas  (</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" face="Symbol" size="2">a</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">, </FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Symbol">b </FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> y </FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Symbol">g</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">) de las globulinas en pollos de engorde alimentados con dietas  con o sin SC durante 42 d&#237;as.&nbsp; </FONT></P>     <P ALIGN="justify"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> MATERIALES Y M&#201;TODOS&nbsp; </FONT></B> </P>     <P ALIGN="justify"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> Aves</FONT></B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">&nbsp;</FONT></font></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Se utilizaron 32 pollos h&#237;bridos (Hubbar x Hubbar), machos, de un d&#237;a de  edad, procedentes de una incubadora comercial, seleccionados y vacunados  contra las enfermedades de Marek (Virus de Herpes del Pavo), Gumboro (cepa  intermedia) y Newcastle (Cepa La Sota) y revacunados a los 7 y 16 d&#237;as  de edad contra Gumboro y Newcastle. Las aves fueron pesadas y distribuidas  en corrales de tres metros cuadrados cada uno, a raz&#243;n de 5 aves/m<FONT COLOR="#1f1a17"><SUP>2</SUP>. El  piso fue cubierto con concha de arroz previamente fumigada sobre la cual  se ubicaron los corrales y donde permanecieron las aves durante 42 d&#237;as.  Se comenz&#243; en la primera semana con criadoras, agua y alimento administrados<I>  ad libitum</I>. El experimento se realiz&#243; en el Centro Experimental de Producci&#243;n  Animal de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad del Zulia,  en el Municipio La Ca&#241;ada de Urdaneta, estado Zulia, Venezuela; zona clasificada  como bosque seco tropical, con temperatura promedio de 30&#176;C.&nbsp;</FONT> </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> Protocolo</FONT></B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">&nbsp;</FONT></font></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Las aves fueron separadas en dos grupos de 16 animales cada uno (T<FONT COLOR="#1f1a17"><SUB>1 </SUB>y<SUB> </SUB>T<SUB>2  </SUB>). Al grupo T<SUB>1</SUB> se le aliment&#243; diariamente durante 42 d&#237;as, con una dieta  comercial y al grupo T<SUB>2</SUB> con la misma dieta comercial suplementada con cultivo  de SC. En el &#250;ltimo d&#237;a los animales de cada grupo fueron sacrificados  para la obtenci&#243;n de sangre y tejido hep&#225;tico. El c&#225;lculo del tama&#241;o de  la muestra se determin&#243; mediante la distribuci&#243;n no central de <I>F</I> (20).<B>&nbsp;</B></FONT> </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> Alimento (dieta comercial)</FONT></B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">&nbsp;</FONT></font></P>     ]]></body>
<body><![CDATA[<P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> El alimento de la dieta control utilizado para este experimento fue producido  en una f&#225;brica de alimento comercial (Nutrientes de Occidente C.A, NUTRIDICA.  Maracaibo, Estado Zulia, Venezuela), a base de ma&#237;z, sorgo venezolano y  harina de soya, libre de aflatoxinas (21). Se emplearon dos tipos de alimentos  balanceados en el ensayo: iniciador (prote&#237;na: 23,2%; grasa: 8,4%; fibra:  2,8%; energ&#237;a metabolizable EM/kg MS: 3150 Kcal) que se ofreci&#243; a las aves  desde el d&#237;a 1 hasta el d&#237;a 21 y el alimento finalizador (prote&#237;na: 19%;  grasa: 10,5%; fibra: 2,9%; energ&#237;a metabolizable EM/kg MS: 3000 Kcal) desde  el d&#237;a 22 al d&#237;a 42 del experimento. Estos alimentos fueron elaborados  en funci&#243;n de los requerimientos de la l&#237;nea gen&#233;tica de los pollos de  engorde y suplementados con amino&#225;cidos, vitaminas y minerales bajo las  formulaciones indicadas por el &#147;National Research Council&#148; (22). En los  2 tipos de alimento los valores eataban calculados y en la energ&#237;a metabolizable  (EM/kg MS) los valores son tabulados. El cultivo de levaduras utilizado  estuvo compuesto por c&#233;lulas de la cepa 1026 de <I>S. cerevisiae</I>, liofilizado  y microencapsulado en </FONT> <FONT COLOR="#1f1a17" face="Symbol" size="2">b</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">-glucano para protegerlo y preservar su viabilidad.  La levadura fue estandarizada a una concentraci&#243;n m&#237;nima de 5 billones  de levaduras vivas por gramo, seg&#250;n las especificaciones descritas por  entidades comerciales (Alltech&#174; Corporate Headquarters, Kentucky, USA.).  La dieta experimental con inclusi&#243;n de esta levadura se hizo a raz&#243;n de  0,1% del alimento balanceado seg&#250;n lo reportado por otros autores (2).&nbsp; </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> An&#225;lisis sangu&#237;neos</FONT></B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">&nbsp;</FONT></font></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> La obtenci&#243;n de sangre para valores de qu&#237;mica sangu&#237;nea se realiz&#243; mediante  sangr&#237;a por un corte con bistur&#237; en la regi&#243;n cervical. La sangre se colect&#243;  en tubos de ensayo est&#233;riles sin anticoagulante para determinar la actividad  s&#233;rica de AST y ALT (21) y las concentraciones de las prote&#237;nas s&#233;ricas.  Para medir las prote&#237;nas totales se utiliz&#243; una metodolog&#237;a previamente  descrita (23). Las concentraciones s&#233;ricas de alb&#250;mina y las fracciones  de la globulina (globulina-</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" face="Symbol" size="2">a</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"><SUB>1</SUB>, globulina-</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Symbol">a</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"><SUB>2</SUB>, globulina-</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Symbol">b </FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> y globulina-</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Symbol">g</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">),  se determinaron mediante electroforesis (24).&nbsp; </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> Evaluaci&#243;n macrosc&#243;pica y microsc&#243;pica del h&#237;gado</FONT></B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">&nbsp;</FONT></font></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Una vez obtenida la muestra de sangre, se realiz&#243; el sacrificio por dislocaci&#243;n  cervical para hacer la evaluaci&#243;n macrosc&#243;pica y microsc&#243;pica del h&#237;gado.  Luego de la necropsia se retiraron los h&#237;gados para calcular su peso relativo  (5). Tambi&#233;n se tomaron porciones de cada h&#237;gado coloc&#225;ndolos en formalina  al 10% tamponada, para el an&#225;lisis histopatol&#243;gico con hematoxilina y eosina  (H&amp;E). Los grados de severidad de las lesiones hepatot&#243;xicas se clasificaron  seg&#250;n Ortatatli y col. (25) de la siguiente manera: normal; lesi&#243;n hepatot&#243;xica  leve (LHTL): hepatocitos con vacuolas lip&#237;dicas y/o h&#237;dricas, n&#250;cleos conservados  o con escasa necrosis individual (ausencia de n&#250;cleos), sinusoides obliterados  y escasos focos inflamatorios con predominio de linfocitos, con o sin fibrosis  periportal/proliferaci&#243;n y dilataci&#243;n de conductos biliares (FP/PDCB);  lesi&#243;n hepatot&#243;xica moderada (LHTM): mayor n&#250;mero de hepatocitos con vacuolas  lip&#237;dicas y/o h&#237;dricas con n&#250;cleos conservados y/o necrosis individual  de hepatocitos (ausencia de n&#250;cleos), sinusoides obliterados e incremento  de focos inflamatorios con linfocitos con o sin FP/PDCB. Tambi&#233;n se cuantific&#243;  el n&#250;mero de hepatocitos con n&#250;cleos picn&#243;ticos o condensados por mm<FONT COLOR="#1f1a17"><SUP>2</SUP> de  tejido.&nbsp;</FONT> </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> La intensidad de la vacuolizaci&#243;n hep&#225;tica en las muestras te&#241;idas con  H&amp;E, se clasific&#243; en 5 grados: ninguno/escasos hepatocitos vacuolados (+/&#150;);  hepatocitos con escasas vacuolas (+); hepatocitos con varias vacuolas intracitoplasm&#225;ticas  (++); n&#250;cleos con escasas &#225;reas de citoplasma (+++); n&#250;cleos sin citoplasma  rodeados por espacios &#243;pticamente vac&#237;os (++++). La frecuencia de cada  uno de estos grados se determin&#243; por mm<FONT COLOR="#1f1a17"><SUP>2</SUP> de tejido. En aquellas muestras  que resultaron con lesiones hepatot&#243;xicas en T<SUB>2</SUB>, se les realiz&#243; posteriormente  la tinci&#243;n tri-cr&#243;mica con el fin de identificar incremento de tejido conectivo  fibroso en los espacios perivasculares de los vasos sangu&#237;neos hep&#225;ticos.  Los diferentes grados histopatol&#243;gicos se clasificaron de acuerdo a la  intensidad y extensi&#243;n del color azul en los espacios perivasculares observados.  As&#237; pues, la reacci&#243;n azul parcial y de escasa intensidad represent&#243; el  grado +/&#150; y en la medida que el color azul cobr&#243; mayor intensidad y extensi&#243;n  se asignaron respectivamente los grados +, ++ y +++. La frecuencia en que  se presentaron los distintos grados fue cuantificada seg&#250;n el n&#250;mero de  vasos sangu&#237;neos con fibrosis perivascular por mm<SUP>2</SUP> de tejido. Las muestras  con tinci&#243;n tri-cr&#243;mica de T<SUB>2</SUB> fueron comparadas con igual n&#250;mero de muestras  tomadas al azar del grupo T<SUB>1</SUB>.&nbsp;</FONT> </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> Microscop&#237;a electr&#243;nica</FONT></B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">&nbsp;</FONT></font></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Para realizar la microscop&#237;a electr&#243;nica se tomaron muestras de animales  control (T<FONT COLOR="#1f1a17"><SUB>1</SUB>) y animales alimentados con la dieta T<SUB>2</SUB> que presentaron lesiones  hep&#225;ticas al estudio de microscopia de luz. Los estudios de microscopia  se realizaron con el objeto de determinar las alteraciones ultraestructurales  a nivel de mitocondrias, acumulaci&#243;n de fibras de col&#225;geno y apoptosis.  Se hicieron cortes de tejido hep&#225;tico de aproximadamente 1 mm<SUP>2</SUP>, y se incluyeron  en glutaraldeh&#237;do al 3% en buffer cacodilato de sodio 0,1M a 4&#176;C. Las muestras  posteriormente fueron deshidratadas post-fijadas en osmio e incluidas en  Epon. Despu&#233;s de los cortes ultrafinos, las muestras fueron coloreadas  con tetraoxido de plomo y citrato de uranilo. La observaci&#243;n se hizo en  un microscopio electr&#243;nico de transmisi&#243;n a 100.000 KV (JEM 1010, Jap&#243;n).&nbsp;</FONT> </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> An&#225;lisis estad&#237;stico</FONT></B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">&nbsp;</FONT></font></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Los datos son presentados como la media &#177; desviaci&#243;n est&#225;ndar, y se utilizaron  las siguientes pruebas estad&#237;sticas. Chi cuadrado (frecuencia de lesiones  hep&#225;ticas, vacuolizaci&#243;n, fibrosis perivascular) y prueba de Mann Whitney  (peso hep&#225;tico, actividad enzim&#225;tica s&#233;rica, n&#250;cleos p&#237;cnoticos, prote&#237;nas  s&#233;ricas). Un valor de p &lt; 0,05 fue considerado significativo.&nbsp; </FONT></P>     ]]></body>
<body><![CDATA[<P ALIGN="justify"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> RESULTADOS&nbsp; </FONT></B> </P>     <P ALIGN="justify"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> Estudios del tejido hep&#225;tico</FONT></B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">&nbsp;</FONT></font></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> No se apreciaron alteraciones macrosc&#243;picas en h&#237;gado ni en la ves&#237;cula  biliar en los grupos estudiados. El peso hep&#225;tico relativo fue semejante  en estos grupos (<a href="#TABLA I">Tabla&nbsp;I</a>). A nivel microsc&#243;pico los an&#225;lisis con H&amp;E mostraron  que el 12,5% de los animales del grupo T<FONT COLOR="#1f1a17"><SUB>1</SUB> presentaron lesiones hepatot&#243;xicas  leves mientras que el 50% del grupo T<SUB>2</SUB> present&#243; lesiones leves y moderadas  (P &lt; 0,05) (<a href="#TABLA II">Tabla II</a>). La intensidad de la vacuolizaci&#243;n del tejido hep&#225;tico  fue mayor, aunque no significante, en el grupo tratado con alimento con  SC. A este respecto, en el grupo T<SUB>1</SUB> (sin SC) fue m&#225;s frecuente observar  el grado +/&#150; (ninguno o escasos hepatocitos vacuolados) comparado con el  grupo T<SUB>2</SUB> (con SC) donde los grados ++ y ++++ se presentaron en mayor frecuencia (<a href="#fig1">Fig. 1</a>). La diferencia entre los valores del n&#250;mero de n&#250;cleos picn&#243;ticos  en ambos grupos no fue significativa (<a href="#fig2">Fig. 2</a>). La tinci&#243;n tricr&#243;mica mostr&#243;  fibrosis perivascular en ambos grupos (T<SUB>1</SUB> y T<SUB>2</SUB>). El grupo T<SUB>1</SUB> mostr&#243; fibrosis  en grado de +/- y +, sin evidencia de los otros grados mientras que en  el grupo T<SUB>2</SUB> mayormente se hall&#243; una intensidad de ++ y +++ (<a href="#fig3">Fig. 3</a>). La  ultraestructura del grupo T<SUB>1</SUB> mostr&#243; hepatocitos que presentaban frecuentemente  n&#250;cleos con aspecto normal de la cromatina, y citoplasma sin alteraciones  visibles. En el grupo T<SUB>2</SUB> frecuentemente se observaron hepatocitos con &#225;reas  de degeneraci&#243;n intracitoplasm&#225;tica, vacuolizaci&#243;n y mitocondrias edematizadas.  Se observaron abundantes ac&#250;mulos de fibras de col&#225;geno en el intersticio  y presencia de c&#233;lulas parecidas a fibroblastos. Se evidenci&#243; la presencia  de vacuolas lip&#237;dicas en el citoplasma del hepatocito y otras c&#233;lulas hep&#225;ticas.  Tanto en el grupo T<SUB>1</SUB> como el T<SUB>2</SUB> se apreciaron c&#233;lulas con morfolog&#237;a sugerente  de apoptosis (<a href="#fig4">Fig. 4</a>).</FONT></FONT></P> <basefont>     <p align="center"><font face="Verdana" size="2"><b><font color="#1f1a17"><a name="TABLA I">TABLA I</a></font></b></font></p>     <p align="center"><font face="Verdana" size="2"><font color="#1f1a17">PESOS HEPÁTICOS RELATIVOS EN POLLOS DE ENGORDE TRATADOS CON ALIMENTO SUPLEMENTADO O NO CON 0,1% <i>Saccharomyces cerevisiae</i> DURANTE 42 DÍAS&nbsp;</font></font></p>     <div align="center">       <center>   <table width="327" border="1" cellspacing="1">     <tbody>       <tr>         <td vAlign="top" bgColor="#c3c3c2" width="142">               <p align="center" style="margin-top: 0; margin-bottom: 0"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">Tratamiento&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" bgColor="#c3c3c2" width="169">               <p align="center" style="margin-top: 0; margin-bottom: 0"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">Peso           hepático</font>&nbsp;</p>               <p align="center" style="margin-top: 0; margin-bottom: 0"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">(g/100           g de peso vivo)<b><font color="#000000">&nbsp;</font></b></font></td>       </tr>       <tr>         <td vAlign="top" width="142">               ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">T<font color="#1f1a17"><sub>1</sub></font>           (sin SC)&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="169">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">1,94           ± 0,02&nbsp;</font></p>         </td>       </tr>       <tr>         <td vAlign="top" width="142">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">T<font color="#1f1a17"><sub>2</sub></font>           (con SC)&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="169">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">&nbsp;2,01           ± 0,05<font color="#1f1a17"><sup>a</sup></font>&nbsp;</font></p>         </td>       </tr>     </tbody>   </table>   </center> </div>     <p align="justify"><font color="#1f1a17" size="1" face="Verdana">SC: <i>Saccharomyces cerevisiae</i>. <font color="#1f1a17"><sup>a</sup></font>Valores sin significancía estadística.&nbsp;</font></p>     <p align="center"><font face="Verdana" size="2"><b><font color="#1f1a17"><a name="TABLA II">TABLA II</a></font></b></font></p>     <p align="center"><font face="Verdana" size="2"><font color="#1f1a17">FRECUENCIA DE LESIONES HEPATOTÓXICAS EN HÍGADOS DE POLLOS DE ENGORDE TRATADOS CON ALIMENTO SUPLEMENTADO O NO CON 0,1% <i>Saccharomyces cerevisiae</i> DURANTE 42 DÍAS&nbsp;</font></font></p>     <div align="center">       <center>   <table width="497" border="1" cellspacing="1">     <tbody>       <tr>         <td vAlign="top" bgColor="#c3c3c2" width="103">               <p align="center" style="margin-top: 0; margin-bottom: 0"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">Histología&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" bgColor="#c3c3c2" width="99">               ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center" style="margin-top: 0; margin-bottom: 0"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">T<font color="#1f1a17"><sub>1</sub></font>&nbsp;</font></p>               <p align="center" style="margin-top: 0; margin-bottom: 0"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">(sin           SC)&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" bgColor="#c3c3c2" width="110">               <p align="center" style="margin-top: 0; margin-bottom: 0"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">T<font color="#1f1a17"><sub>2</sub></font>&nbsp;</font></p>               <p align="center" style="margin-top: 0; margin-bottom: 0"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">(con           SC)&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" bgColor="#c3c3c2" width="157">               <p align="center" style="margin-top: 0; margin-bottom: 0"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">Número           de muestras con FP/PDCB en T<font color="#1f1a17"><sub>2</sub></font>&nbsp;</font></p>         </td>       </tr>       <tr>         <td vAlign="top" width="103">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">Normal&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="99">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">14/16&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="110">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">8/16&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="157">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">0&nbsp;</font></p>         </td>       </tr>       <tr>         <td vAlign="top" width="103">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">%&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="99">               ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">87,5&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="110">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">50&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="157">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">-&nbsp;</font></p>         </td>       </tr>       <tr>         <td vAlign="top" width="103">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">LHTL&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="99">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">2/16&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="110">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">6/16&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="157">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">2&nbsp;</font></p>         </td>       </tr>       <tr>         <td vAlign="top" width="103">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">%&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="99">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">12,5&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="110">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">37,5&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="157">               ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">-&nbsp;</font></p>         </td>       </tr>       <tr>         <td vAlign="top" width="103">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">LHTM&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="99">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">0&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="110">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">2/16&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="157">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">1&nbsp;</font></p>         </td>       </tr>       <tr>         <td vAlign="top" width="103">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">%&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="99">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">0&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="110">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">12,5&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="157">               <p align="center"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="2">-&nbsp;</font></p>         </td>       </tr>     </tbody>   </table>   </center> </div>     <p align="justify"><font color="#1f1a17" face="Verdana" size="1">SC: <i>Saccharomyces cerevisiae</i>. &nbsp;&nbsp;&nbsp;LHTL: lesiones hepatotóxicas leves. &nbsp;&nbsp;&nbsp;LHTM: lesiones hepatotóxicas moderadas. FP/PDCB: fibrosis periportal/proliferación y dilatación de conductos biliares.&nbsp;</font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center"><a name="fig1"><img border="0" src="/img/fbpe/ic/v48n4/art04fig1.gif" width="578" height="680"></a></p>     
<p align="center"><a name="fig2"><img border="0" src="./img/fbpe/ic/v48n4/art04fig2.gif" width="339" height="388"></a></p>     
<p align="center"><a name="fig3"><img border="0" src="/img/fbpe/ic/v48n4/art04fig3.gif" width="578" height="700"></a></p>     
<p align="center"><a name="fig4"><img border="0" src="/img/fbpe/ic/v48n4/art04fig4.gif" width="578" height="592"></a></p>     
<P ALIGN="justify"><font size="2"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana"> Valores sangu&#237;neos</FONT></B><FONT COLOR="#1f1a17" face="Verdana">&nbsp;</FONT></font></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Los valores de actividad de las enzimas hep&#225;ticas en el suero se observan  en la <a href="#TABLA III"> Tabla III</a>. No se observ&#243; diferencia significativa en la actividad  de estas enzimas en los grupos estudiados. En la evaluaci&#243;n de las concentraciones  de prote&#237;nas s&#233;ricas (<a href="#fig5">Fig. 5</a>) se evidenci&#243; aumento de las prote&#237;nas totales  (P = 0,04), de las globulinas </FONT> <FONT COLOR="#1f1a17" face="Symbol" size="2">a</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"><SUB>2 </SUB>(P&nbsp;&lt;&nbsp;0,0001), </FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Symbol">b </FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> (P = 0,04) y </FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Symbol">g </FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> (P &lt; 0,0001),  con disminuci&#243;n de la alb&#250;mina s&#233;rica (P&nbsp;=&nbsp;0,04) en los animales del grupo  T<SUB>2</SUB>.</FONT></P> <basefont>     <p align="center"><font face="Verdana" size="2"><b><font color="#1f1a17"><a name="TABLA III">TABLA III</a></font></b></font></p>     <p align="center"><font face="Verdana" size="2"><font color="#1f1a17">ACTIVIDAD SÉRICA DE LA ASPARTATO-AMINOTRANSFERASA (AST) Y ALANINO-AMINOTRANSFERASA (ALT) EN POLLOS DE ENGORDE TRATADOS CON ALIMENTO SUPLEMENTADO O NO CON 0,1% <i>Saccharomyces cerevisiae </i>DURANTE 42 DÍAS&nbsp;</font></font></p>     <div align="center">       <center>   <table width="507" border="1" cellspacing="1">     <tbody>       <tr>         <td vAlign="top" bgColor="#c3c3c2" rowSpan="2" width="132">               ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center"><font color="#1f1a17" size="2" face="Verdana">Tratamiento&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" bgColor="#C3C3C2" colSpan="2" width="359">               <p align="center"><font color="#1f1a17" size="2" face="Verdana">Actividad           enzimática (UI/L)&nbsp;</font></p>         </td>       </tr>       <tr>         <td vAlign="top" bgColor="#c3c3c2" width="191">               <p align="center"><font color="#1f1a17" size="2" face="Verdana">AST&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" bgColor="#c3c3c2" width="162">               <p align="center"><font color="#1f1a17" size="2" face="Verdana">ALT&nbsp;</font></p>         </td>       </tr>       <tr>         <td vAlign="top" width="132">               <p align="center"><font color="#1f1a17" size="2" face="Verdana">T<font color="#1f1a17"><sub>1</sub></font>           (sin SC)&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="191">               <p align="center"><font color="#1f1a17" size="2" face="Verdana">243,21           ± 4,96&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="162">               <p align="center"><font color="#1f1a17" size="2" face="Verdana">4,97           ± 0,37&nbsp;</font></p>         </td>       </tr>       <tr>         <td vAlign="top" width="132">               <p align="center"><font color="#1f1a17" size="2" face="Verdana">T<font color="#1f1a17"><sub>2</sub></font>           (con SC)&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="191">               <p align="center"><font color="#1f1a17" size="2" face="Verdana">&nbsp;&nbsp;227,18           ± 2,48<font color="#1f1a17"><sup>b</sup></font>&nbsp;</font></p>         </td>         <td vAlign="top" width="162">               <p align="center"><font color="#1f1a17" size="2" face="Verdana">5,35           ± 0,43<font color="#1f1a17"><sup>b</sup></font>&nbsp;</font></p>         </td>       </tr>     </tbody>   </table>   </center> </div>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font color="#1f1a17" size="1" face="Verdana">SC: <i>Saccharomyces cerevisiae</i>. &nbsp;&nbsp;&nbsp;<font color="#1f1a17"><sup>b</sup>Valores sin significancía estadística. UI/L: Unidades Internacionales/litro.&nbsp;</font></font></p>     <p ALIGN="center"><a name="fig5"><img border="0" src="/img/fbpe/ic/v48n4/art04fig5.gif" width="340" height="567"></a>    
<P ALIGN="justify"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> DISCUSI&#211;N</FONT></B></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Los resultados de este estudio evidenciaron una frecuencia significativa  de lesiones histopatol&#243;gicas con incremento de la severidad de fibrosis  perivascular y mayor intensidad de vacuolizaci&#243;n hep&#225;tica en animales alimentados  con 0,1% de SC en la dieta durante 42 d&#237;as. Estos hallazgos no estuvieron  relacionados con alteraciones hep&#225;ticas macrosc&#243;picas, lo que sugiere un  da&#241;o inicial a nivel microsc&#243;pico sin liberaci&#243;n significativa de enzimas  hep&#225;ticas por la ingesti&#243;n de esta levadura. Las consecuencias de un proceso  inflamatorio continuo y prolongado, induce consecutivamente da&#241;o tisular  con muerte de c&#233;lulas y la concomitante respuesta de remodelaci&#243;n y sustituci&#243;n  por fibras col&#225;genas que integran el tejido conectivo fibroso. Estudios  previos han demostrado que las patolog&#237;as cr&#243;nicas del h&#237;gado en el pollo  cursan con alteraciones microsc&#243;picas como fibrosis perivascular, proliferaci&#243;n,  dilataci&#243;n de conductos biliares (26, 27), y con frecuencia formaciones  de fibras col&#225;genas adyacentes a c&#233;lulas con abundantes vacuolas de l&#237;pido,  semejantes a fibroblastos (c&#233;lulas de Ito), importantes en la fibrog&#233;nesis  tisular (28). Esto puede representar una respuesta com&#250;n a la injuria hep&#225;tica  y puede relacionarse con los presentes hallazgos de fibrosis perivascular,  vacuolizaci&#243;n celular, mitocondrias edematizadas y acumulaci&#243;n de fibras  de col&#225;geno como resultado del da&#241;o hep&#225;tico precedente.&nbsp; </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> En vista que los da&#241;os estructurales encontrados solo estuvieron acompa&#241;ados  de una disminuci&#243;n de la producci&#243;n de alb&#250;mina s&#233;rica, se podr&#237;a interpretar  que la levadura indujo da&#241;o hep&#225;tico funcional con la concentraci&#243;n de  SC usada en la dieta durante el periodo experimental. No obstante las aves  sometidas a esta dieta no presentaron cambios significativos en las medias  de los &#237;ndices productivos evaluados a los 42 d&#237;as (resultados no puiblicados),  lo que indica que los efectos hep&#225;ticos observados, aparentemente fueron  leves sin causar alteraciones importantes en los par&#225;metros productivos  durante el periodo de vida aproximado (42 d&#237;as) de los pollos de engorde.  Sin embargo, la intensidad de este da&#241;o podr&#237;a agravarse, en aquellas aves  de corral (reproductoras pesadas, gallinas ponedoras, pavos) suplementadas  con SC en la dieta, donde los ciclos productivos tienen un periodo de tiempo  mayor al de los pollos de engorde y el uso del SC ser&#237;a m&#225;s prolongado  y sus efectos podr&#237;an tener consecuencias m&#225;s severas.&nbsp; </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> La actividad s&#233;rica de AST en aves es considerada un indicador sensible  de da&#241;o o disfunci&#243;n hepatocelular (29, 30), debido a que la necrosis u  otra alteraci&#243;n que aumente la permeabilidad celular, podr&#237;a causar liberaci&#243;n  e incremento inmediato de esta enzima en el suero (31). En el presente  estudio la actividad de las enzimas ALT y AST se encontr&#243; similar al grupo  control, lo que sugiere que no hubo suficiente da&#241;o celular hep&#225;tico para  incrementar estas enzimas, sin embargo, si hubo alteraciones en los niveles  de prote&#237;nas totales y alb&#250;mina s&#233;rica. Estos resultados difieren de los  reportados por Stanley y col. (5) en donde pollos que recibieron dietas  con 0,1% de SC durante 28 d&#237;as, no presentaron variaci&#243;n significativa  en la actividad enzim&#225;tica s&#233;rica de AST, prote&#237;nas totales y alb&#250;mina  s&#233;rica, pero reportaron variaci&#243;n significativa en la actividad de ALT.  A este respecto, trabajos con dietas suplementadas con componentes de la  pared celular de SC durante 35 d&#237;as, tampoco detectaron variaci&#243;n significativa  en los valores de prote&#237;nas totales, alb&#250;mina y actividad s&#233;rica de AST  y ALT (6).&nbsp; </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Algunos autores reportan que en casos de da&#241;o hep&#225;tico cr&#243;nico pueden producirse  da&#241;os o ruptura hepatocelulares sutiles, pudiendo resultar en valores normales  en la actividad s&#233;rica de AST y en algunos casos disminuci&#243;n de los mismos  (32), en estos casos es com&#250;n encontrar en aves hallazgos de fibrosis hep&#225;tica  con valores normales de AST, disminuci&#243;n de alb&#250;mina y otras prote&#237;nas  (33). Estos hallazgos pudiesen estar en relaci&#243;n con los presentes resultados,  en donde la fibrosis perivascular fue acompa&#241;ada de disminuci&#243;n de la alb&#250;mina  y puede representar el comienzo de una situaci&#243;n que pudiese agravarse  m&#225;s con la cronicidad de la exposici&#243;n a la levadura (tratamiento por m&#225;s  de 42 d&#237;as).&nbsp; </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Otros par&#225;metros hep&#225;ticos analizados fueron el peso relativo del &#243;rgano  y la frecuencia de n&#250;cleos condensados (picn&#243;ticos) estos &#250;ltimos sugerentes  de apoptosis. Los resultados de los pesos hep&#225;ticos relativos del presente  estudio coinciden con los de Stanley y col. (5), quienes utilizaron la  misma concentraci&#243;n (0,1%) de SC en la dieta de pollos de engorde. As&#237;  mismo otros autores reportaron pesos hep&#225;ticos similares entre pollos de  engorde sometidos a varios tipos de dietas suplementadas con SC (3). La  comparaci&#243;n del n&#250;mero de n&#250;cleos picn&#243;ticos entre los dos grupos no present&#243;  diferencia significativa, lo cual sugiere que la apoptosis no fue el mecanismo  celular involucrado en la hepatotoxicidad detectada en aves que recibieron  la dieta experimental. La presencia de c&#233;lulas con n&#250;cleo condensado o  picn&#243;tico, puede estar en relaci&#243;n con la presencia de c&#233;lulas con morfolog&#237;a  de apoptosis observadas en el tejido hep&#225;tico con el microscopio electr&#243;nico  (n&#250;cleos condensados, condensaci&#243;n citoplasm&#225;tica, disminuci&#243;n del tama&#241;o  celular). El resto del examen histopatol&#243;gico revel&#243; mayor intensidad de  vacuolizaci&#243;n hep&#225;tica, con una frecuencia significativa de lesiones hepatot&#243;xicas  y fibrosis perivascular, dichos hallazgos indican un probable efecto de  la dieta con SC sobre el tejido hep&#225;tico.&nbsp; </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Durante este estudio se encontr&#243; un aumento significativo de las prote&#237;nas  s&#233;ricas totales en las aves del grupo experimental, sin embargo tambi&#233;n  se encontr&#243; una disminuci&#243;n de los niveles de alb&#250;mina. Este &#250;ltimo hallazgo  pudiese estar relacionado con la alteraci&#243;n en la funci&#243;n hep&#225;tica que  involucra la s&#237;ntesis de alb&#250;mina como efecto de la dieta con SC. A este  respecto, se ha reportado disminuci&#243;n de la s&#237;ntesis de prote&#237;nas (principalmente  alb&#250;mina) debido a patolog&#237;as hep&#225;ticas (29). El incremento de las prote&#237;nas  totales en los animales alimentados con la dieta m&#225;s SC puede estar relacionado  con el aumento de la producci&#243;n de otras fracciones proteicas s&#233;ricas como  lo son las </FONT> <FONT COLOR="#1f1a17" face="Symbol" size="2">a</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">  y </FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Symbol"> g</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">-globulinas encontradas incrementadas en este grupo de  animales. La fracci&#243;n de la </FONT> <FONT COLOR="#1f1a17" face="Symbol" size="2">g</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">-globulina es sintetizada principalmente por  c&#233;lulas originadas por el linfocito B (34).&nbsp; </FONT></P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> El hallazgo de niveles elevados de </FONT> <FONT COLOR="#1f1a17" face="Symbol" size="2">g</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">-globulina en pollos suplementados  con SC coincide con otros reportes del incremento significativo de inmunoglobulinas  (Ig) s&#233;ricas en aves sometidas a este tipo de dietas (2, 10) o con los  componentes de la pared celular de esta levadura (9, 13, 35). Otros autores  demostraron incremento significativo de IgG en suero y de IgA en bilis  de pavos sometidos a dietas con componentes de la pared celular del <I>S.  cerevisiae </I>(36). As&#237; mismo, est&#225; demostrado que parte de las estructuras  de la pared celular del Saccharomyces, tiene una potente actividad antig&#233;nica  (37). El significado del aumento del contenido de </FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Symbol">g</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">-globulina s&#233;rica en  este estudio, pudiera ser debido a un incremento en la producci&#243;n de anticuerpos  contra ant&#237;genos de SC que pudiesen reaccionar con estructuras celulares  org&#225;nicas mediante una reacci&#243;n cruzada y producir patolog&#237;a hep&#225;tica o  en otros &#243;rganos (16, 38). A este respecto, se ha reportado que en el pollo,  30 a 75% de la IgA producida en la pared intestinal, puede llegar por la  sangre de la vena porta al h&#237;gado (34), sin embargo, existen escasos estudios  en aves que puedan identificar patolog&#237;as autoinmunes en pollos asociadas  con la presencia de anticuerpos contra ant&#237;genos de SC, a diferencia de  reportes de patolog&#237;a en humanos, tanto hep&#225;tica (15, 39- 41), como en  el tracto gastrointestinal (42, 43).&nbsp; </FONT></P>     ]]></body>
<body><![CDATA[<P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Los resultados provenientes de este estudio, sugieren que el consumo de  SC en la dieta puede ser un riesgo de hepatotoxicidad para los pollos de  engorde, al inducir alteraciones histol&#243;gicas y funcionales del &#243;rgano.  Adem&#225;s la ingesti&#243;n de esta levadura estuvo relacionada con aumento de  la concentraci&#243;n de </FONT> <FONT COLOR="#1f1a17" face="Symbol" size="2">g</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">-globulina s&#233;rica, que pudiese estar asociada a fen&#243;menos  de autoinmunidad. Se requieren estudios dirigidos a determinar, si la prolongaci&#243;n  del tiempo de administraci&#243;n del SC en la dieta, pudiese determinar incremento  en las lesiones reportadas y agravamiento de la disfunci&#243;n hep&#225;tica, as&#237;  como determinar si el aumento de las </FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Symbol">g</FONT><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">-globulinas puede estar relacionado  con la presencia de anticuerpos anti-SC y su posible papel en la inducci&#243;n  de autoinmunidad.&nbsp; </FONT></P>     <P ALIGN="justify"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> AGRADECIMIENTO&nbsp; </FONT></B> </P>     <P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> Al Consejo de Desarrollo Cient&#237;fico y Human&#237;stico de la Universidad del  Zulia. A la Unidad de Di&#225;lisis y Trasplante Renal del Hospital Universitario  de Maracaibo por su asistencia t&#233;cnica. Al Profesor Jorge Soto Bracho,  M&#233;dico Veterinario Pat&#243;logo, del Laboratorio de Diagn&#243;stico Veterinario,  por su participaci&#243;n en la descripci&#243;n histopatol&#243;gica.&nbsp; </FONT></P>     <P ALIGN="justify"> <B><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> REFERENCIAS&nbsp; </FONT></B> </P>     <!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 1.&nbsp;<B>G&#243;mez BJ. </B>El papel de las levaduras en la era de los suplementos nutrac&#233;uticos  y alimentos funcionales. Procceding Alltech&#180;s 11<FONT COLOR="#1f1a17"><SUP>a</SUP> Ronda Latinoamericana  de Alltech, 2001. Nicholasville, Kentucky, USA. P. 59-66.&nbsp;</FONT></FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1151992&pid=S0535-5133200700040000400001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 2.&nbsp;<B>Devegowda G, Aravind BIR, Rajendra K, Morton MG, Baburathna A, Sudarshan CA.  </B>Biological approach to counteract aflatoxicosis in broiler chickens  and ducklings by the use of <I>Saccharomyces cerevisiae </I>cultures added to  feed. En: Lyons T P, Jacques K A, Eds. Proc. Alltech&#146;s 10<FONT COLOR="#1f1a17"><SUP>th</SUP> Annual Symposium  on Biotechnology in the Feed Industry. Nottingham: University Press; 1994.  P 235-245.&nbsp;</FONT></FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1151993&pid=S0535-5133200700040000400002&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 3.&nbsp;<B>Onifade AA, Odunsi AA, Babatunde GM, Olorede BR, Muma E.</B> Comparison of  the supplemental effects of <I>Saccharomyces cerevisiae</I> and antibiotics in  low-protein and high-fibre diets fed to broiler chickens. Arch Tierernahr  1999; 52:29-39.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1151994&pid=S0535-5133200700040000400003&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 4.&nbsp;<B>Devegowda G, Aravind BIR, Morton MG.</B> <I>Saccharomyces cerevisiae</I> and mannanoligosaccharides  to counteract aflatoxicosis in broilers. Proceedings of Australia Poultry  Sciences Symposium, 1996. Sydney, Australia. p. 103-106.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1151995&pid=S0535-5133200700040000400004&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 5.&nbsp;<B>Stanley VG, Woldensenbet S, Hutchinson DH. </B>The use of <I>Saccharomyces cerevisiae</I>  to suppress the effects of aflatoxicosis in broiler chicks. Poult Sci 1993;  72:1867-1872.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1151996&pid=S0535-5133200700040000400005&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 6.&nbsp;<B>Raju MVLN, Devegowda G. </B>Influence of esterified-glucomannan on performance  and organ morphology serum biochemistry and hematology in broilers exposed  to individual and combined mycotoxicosis (aflatoxin, ochratoxin and T-2  toxin). Br Poult Sci 2000; 41:640-650.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1151997&pid=S0535-5133200700040000400006&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 7.&nbsp;<B>Zaghini A, Roncada P, Anfossi L. Rizzi. </B>Aflatoxin B<FONT COLOR="#1f1a17"><SUB>1</SUB> oral administration  to laying hens: effects on hepatic MFO activities and afficacy of a zeolite  to prevent aflatoxicosis. Rev Med Vet 1998; 6:668-672.&nbsp;</FONT></FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1151998&pid=S0535-5133200700040000400007&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 8.&nbsp;<B>Zhang AW, Lee BD, Lee SK, Lee KW, An GH, Song KB, Lee CH. </B>Effects of yeast  (<I>Saccharomyces cerevisiae</I>) cell components on growth performance, meat  quality, and ileal mucosa development of broiler chicks. Poult Sci 2005;  84:1015-1021.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1151999&pid=S0535-5133200700040000400008&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 9.&nbsp;<B>Cotter PF. </B>Modulation of the immune response: current perceptions and future  prospects with an example from poultry. En: Lyons TP, Jacques KA, Eds.  Biotechnology in the Feed Industry <FONT COLOR="#000000">Nottingham. Nottingham: University Press;  1997. P 195-204.&nbsp;</FONT></FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152000&pid=S0535-5133200700040000400009&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 10.&nbsp;<B>Devegowda G, Aravind BIR, Morton MG.</B> Inmunosupression in poultry caused  by aflatoxins and its alleviation by <I>Saccharomyces cerevisiae</I> (Yea-Sacc</FONT><font face="Verdana" size="2" color="#1F1A17"><sup>1026</sup></font><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana">),  and mannanoligosaccharides (Micosorb). En: Lyons T P, Jacques K A, Eds.  Biotechnology in the Feed Industry. Nottingham: University Press; 1997.  P 205-215.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152001&pid=S0535-5133200700040000400010&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 11.&nbsp;<B>Cotter PF, Malzone A, Paluch B, Lilburn MS, Sefton AE.</B> Modulation of humoral  immunity in commercial laying hens by a dietary prebiotic (Abstract). Poultry  Science, 2000. Menasha, Wisconsin. p 38.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152002&pid=S0535-5133200700040000400011&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 12.&nbsp;<B>Raju MVLN, Devegowda G.</B> Esterified-glucomannan in broiler chicken diets-contaminated  with aflatoxin, ochratoxin and T-2 toxin: evaluation of its binding ability  (in vitro) and efficacy as immunomodulator. Asian Aust J Anim Sci 2002;  15:1051-1056.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152003&pid=S0535-5133200700040000400012&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 13.&nbsp;<B>Shashidhara RG, Devegowda G. </B>Effect of dietary mannan oligosaccharide on  broiler breeder production traits and immunity. Poult Sci 2003; 82:1319-1325.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152004&pid=S0535-5133200700040000400013&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 14.&nbsp;<B>Aravind KL, Patil VS, Devegowda G, Umakantha B, Ganpule SP.</B> Efficacy of  esterified glucomannan to counteract mycotoxicosis in naturally contaminated  feed on performance and serum biochemical and hematological parameters  in broilers. Poult Sci 2003; 82:571-576.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152005&pid=S0535-5133200700040000400014&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 15.&nbsp;<B>Muratori P, Muratori L, Guidi M, Maccariello S, Pappas G, Ferrari R, Gionchetti  P, Campieri M, Bianchi FB. </B>Anti-<I> Saccharomyces cerevisiae</I> antibodies (ASCA)  and autoimmune liver diseases. Clin Exp Immunol 2003; 132:473-476.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152006&pid=S0535-5133200700040000400015&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 16.&nbsp;<B>Oshitani N, Hato F, Suzuki K, Sawa Y, Matsumoto T, Maeda K, Higuchi K,  Kitagawa S, Arakawa T.</B> Cross-reactivity of yeast antigens in human colon  and peripheral leukocytes. J Pathol 2003; 199: 361-367.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152007&pid=S0535-5133200700040000400016&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 17.&nbsp;<B>Van Den Bogaerde J, Kamm MA, Knight SC.</B> Immune sensitizacion to food, yeast  and bacteria in Crohn&#146;s disease. Aliment Pharmacol Ther 2001; 15:1647-1653.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152008&pid=S0535-5133200700040000400017&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 18.&nbsp;<B>Bradley GL, Savage TF, Timm KI. </B>The effects of supplementing diets with  <I>Saccharomyces cerevisiae var</I>. boulardii on male poult performance and ileal  morphology. Poult Sci 1994; 73:1766-1770.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152009&pid=S0535-5133200700040000400018&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 19.&nbsp;<B>Spring P, Wenk C, Dawson KA, Newman KE.</B> The effects of dietary mannaoligosaccharides  on cecal parameters and the concentrations of enteric bacteria in the cecal  of salmonella-challenged broiler chicks. Poult Sci 2000; 79:205-211.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152010&pid=S0535-5133200700040000400019&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 20.&nbsp;<B>Martin FG.</B> Statistical Design and Analysis. University of Florida, Copy  Center UF; 1995, p. 2-4-2-7.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152011&pid=S0535-5133200700040000400020&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 21.&nbsp;<B>Arrieta DM, P&#233;rez AM, G&#243;mez C, Molero G, Novoa E, Rinc&#243;n H, Ascanio E.  </B>Efecto del alimento contaminado con aflatoxina B<FONT COLOR="#1f1a17"><SUB>1</SUB> (0,07 mg/kg) sobre la  morfolog&#237;a hep&#225;tica y actividad enzim&#225;tica s&#233;rica (AST y ALT) en pollos  de engorde. Rev Cient&#237;f FCV-LUZ 2006; XVI:39-47.&nbsp;</FONT></FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152012&pid=S0535-5133200700040000400021&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 22.&nbsp;<B>National Research Council (NRC). </B>Nutrient Requirements of Poultry. 9<FONT COLOR="#1f1a17"><SUP>th</SUP>  Ed. Washington DC: National Academy Press; 1994, p 11-15.&nbsp;</FONT></FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152013&pid=S0535-5133200700040000400022&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 23.&nbsp;<B>Lowry OH, Rosebrough NJ , Farr AL, Randall RJ.</B> Protein measurement with  the Folin phenol reagent. J Biol Chem 1951; 193:265-275.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152014&pid=S0535-5133200700040000400023&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 24.&nbsp;<B>Ocando D, Rivera S, Ajjam E, Salas R.</B> Caracterizaci&#243;n proteica del suero  del ave C<I>oragyps atrtus</I> (Zamuro de Cabeza Negra) y algunos estudios inmunoserol&#243;gicos.  Rev Cient&#237;f FCV-LUZ 1991; I: 57-70.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152015&pid=S0535-5133200700040000400024&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 25.&nbsp;<B>Ortatatli M, Oguz H, Hatipoglu F, Karaman M.</B> Evaluation of pathological  changes in broilers during chronic aflatoxin (50 and 100 ppb) and clinoptilolite  exposure. Res Vet Sci 2005; 78: 61-68.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152016&pid=S0535-5133200700040000400025&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 26.&nbsp;<B>Ochiai K, Handharyani E, Umemura T.</B> Idiopathic hepatic fibrosis with cholestasis  in broiler chickens: immunohistochemistry of hepatic stellate cells. Avian  Pathol 2003; 32:425-428.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152017&pid=S0535-5133200700040000400026&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 27.&nbsp;<B>Ochiai K, Handharyani E, Umemura T.</B> Idiopathic hepatic fibrosis with cholestasis  in broiler chickens: immunohistochemistry of hepatic stellate cells. Avian  Pathol 2002; 31:425-428.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152018&pid=S0535-5133200700040000400027&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 28.&nbsp;<B>Handharyani E, Ochiai K, Iwata N, Umemura T. </B>Immunohistochemical and ultrastructural  study of ito cells (fat-storing cells) in response to extrahepatic bile  duct ligation in broiler chickens. J Vet Med Sci 2001; 63:547-552.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152019&pid=S0535-5133200700040000400028&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 29.&nbsp;<B>Jones PM. </B>Avian Clinical Pathology. Vet Clin North Am 1999; 2: 663-685.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152020&pid=S0535-5133200700040000400029&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 30.&nbsp;<B>Kubena LF, Harvey RB, Bailey RH, Buckley SA, Rottinghaus GE. </B>Effects of  a hydrated sodium calcium aluminosilicate (T-Bind) on mycotoxicosis in  young broiler chickens. Poult Sci 1998; 77:1502-1509.&nbsp;</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152021&pid=S0535-5133200700040000400030&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 31.&nbsp;<B>Shukla SK, Pachauri SP.</B> Blood biochemical profiles in induced aflatoxicosis  of cockerels. Br Poult Sci 1995; 36:155-160.</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152022&pid=S0535-5133200700040000400031&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><FONT COLOR="#1f1a17" size="2" face="Verdana"> 32.&nbsp;<B>Fudge AM.</B> Avian Liver and Gastrointestinal Testing. En: Fudge A M, Ed.  Laboratory Medicine Avian and Exotic Pets; 2000. P 47- 55.</FONT>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=1152023&pid=S0535-5133200700040000400032&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><P ALIGN="justify"><font face="Verdana" size="2"> 33.&nbsp;<b>Lumeij JT.</b> Hepatology. 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