Aves de corral: En aves de corral Helicobacter pullorum se define como una nueva especie en 1994, aislada de un intestino lesionado y el higado de pollos de engorde y gallinas ponedoras. H. pullorum es una bacteria Gramnegativa,ligeramente curva y monopolar flagelar. Es resistente a la bilis y requiere un entorno microaerofilico complementado en que el crecimiento se produce a 37 oC-42 oC (1, 3 y 6). Helicobacter especies enterohepaticas incluyendo H. pullorum, se reconocen cada vez mas como patogenos microbianos en humanos y los animales. H. pullorum se ha relacionado con la hepatitis y enteritis en pollos de engorde y gallinas ponedoras y diarrea,gastroenteritis, enfermedad hepatica al igual que en los seres humanos. H. pullorum puede contaminar las canales de aves. En algunos estudios muestran que esta bacteria esta presente en el 33,6% a nivel intestinal (cecal), en pollos de engorde a nivel de matadero por pruebas  de reaccion en cadena de la polimerasa (PCR).

]]> Otros au tores establecen una prevalencia del 4% tras la toma de muestras de contenido cecal en pollos de engorde. Com parando los resultados por este ultimo grupo reportaron 60% de incidencia en canales de aves de corral (12). Filogeneticamente estan relacionados con el microorganismo C. jejuni, tambien aislada de intestino de pollo. Es to parece suponer que los segmentos mas bajos del tracto intestinal son los lugares predominantes para la colonizacion por H. pullorum en pollos de engorde y pueda tener acceso al higado por transferencia retrograda, desde el duodeno (12). La comercializacion y venta al por menor de carne de aves de corral y otros pro ductos avicolas pueden constituir vehiculos para la infeccion en humanos.

En suinos: El sindrome gastroesofagico ulceroso suino (GEUS: Gatro-Esophageal Ulcer Syndrome), ha sido descrito ampliamente en la literatura a nivel mundial. GEUS comprende enfermedad inflamatoria del esofago, estomago, con erosion y ulceras, sindrome de emaciacion cronica, perforacion gastrica y muerte subita. La etiologia de este sindrome suele ser multifactorial. Gastropirillum suis es una bacteria no cultivada, hermetica espiral asociada a enfermedad esofago-gastrica. El analisis filogenetico de la secuencia senala su ubicacion dentro del genero Helicobacter, donde se formo un sub -grupo junto con otros Gastrospirillum como las bacterias (Helicobacter felis, H. bizzozeronii, H. salomonis y H. heil mannii tipo 1 y tipo 2. Recientemente fue aislada de es tomagos de cerdos, caracterizada y propuesta una nue va especie de Helicobacter, H. suis sp.nov (9). Exis -ten reportes que sugieren que H. pylori en infecciones cronicas puede inducir enfermedad gastrointestinal en suinos especificamente polipos gastricos (8 y 13). En el caso del suino tiene particularmente importancia la infeccion por el genero Helicobacter ya que la comercializacion de la carne puede ser un vehiculo para la infeccion en humanos, ya sea a nivel de granjas porcinas en el ma tadero industrial y en el ultimo nivel de comercializacion de la carne de cerdo. Adicionalmente tiene una gran significancia en las zonas rurales donde se mantienen crias de cerdos artesanales (traspatios), en adyacencias de las casas, donde el potencial zoonotico aumenta.

En bovinos y pequeños rumiantes: Ha sido detectado ADN de Helicobacter pylori y se considera como un potencial patogeno para el humano (14). La prevalencia de H. pylori es de 34,7% (14). Se plantea la hipotesis de una posible transmision via consumo de leche contaminada con esta bacteria ya que ha sido detectada en muestras de leche de cabras en un 25% (14).

En caninos y felinos: El genero Helicobacter en caninos esta relacionada con gastritis, ulceraciones gastro -duodenales y procesos neoplasicos gastricos. H. pylori en perros y gatos, ha sido reportada como potencialmente zoonotica. Las bacterias gastricas encontradas en perros son: H. felis, H. bizzozeroni, H. salomonis, Flexis pira rappini (H. rappini) y H. heilmannii. En la mucosa gastrica de gatos se han aislado H. felis, H. heilmannii y H. pametensis (15). La infeccion se ha detectado en perros de 2 me ses y 11 anos de edad, asi como en gatos de 5 meses a 10 anos de edad. Helicobacter sp. se ha sugerido como un factor etiologico de gastritis cronica (5, 16 y 17).

Varios estudios han demostrado que Helicobac ter gastrico son comunes en perros con una prevalencia que va entre un 67%-100%. H. bizzozeronii en perros es la especie mas prevalente, seguido de H. heilmannii, H. salomonis y H. felis (18). A pesar de esto la especie que ha sido aislada en humanos asociada a infeccion por caninos es H. heilmannii. En Venezuela estudios sugieren 13,9% de lesiones inflamatorias y ulceras gastroduodenales,asociadas a bacterias tipo espiral cortas, positivas a la prueba de ureasa y 4,7% de anticuerpos contra H. py lori (19). En otro estudio en Venezuela en 40 perros asin tomaticos se observaron en todos los casos bac terias tipo espirales cortas positivas a la coloracion  especial de sales de plata Warthing-Starry, asociadas a gastritis cronica atrofica, con metaplasia intestinal (20).

Gen asociado a la citotoxina Cag A (cytotoxin as-sociated gen): El gen Cag A se relaciona con el gen Vac A y con su toxicidad (21). Este es una proteína de uno de los genes del islote patogénico Cag A, se ha de mostrado experimentalmente que facilita la adherencia a la mcosa gástrica e inicia la respuesta inflamatoria por que induce la secreción de interleukina (IL-8) (21). Es at adherencia induce apoptosis al tener contacto con las células epiteliales. Los mediadores inflamatorios Interferon g (IFN-g) y factor de necrosis tumoral (TNF-a) aumentan la expresión del p53 (Oncogen Supresor) aumentan la apoptosis inducida por H. pylori. Esta muer et celular esta regulada por interacciones célula-célula, cuyos moduladores moleculares apoptóticos aumentan la expresión del gen supresor tumoral p53, esencial para la inducción de apoptosis asociada a daño cromosómico, actuando como bloqueador de la replicación del ADN de células lesionadas y también al aumento de la proteína porapop-tótica Bak (21).

 Gen inductor de contacto con el epitelio Ice A (in duced by contact with epithelium): Es un producto genético desconocido aunque parece proceder de una restricción bacteriana enzimática que es inducida por con tacto con el epitelio gástrico. Dos subtipos han sido reconocidos: Ice A1, que lo han relacionado con la úlce-ra duodenal en el 50% de pacientes, y el Ice A2, sólo ha sido comprobado en el 4% (21).

 Antígeno adherido al grupo sanguíneo Bab A (Blood antigen binding): Consiste en una proteína de membrana externa del H. pylori que favorece la adherencia al antígeno sanguíneo Lewis sobre las células del epitelio gástrico (21).

 Inmunología de la infección por el género Helico - bacter: A pesar de las intensas respuestas inmunes lo cales y sistémicas, es un enigma la persistencia de la infección gástrica con H. pylori, ya que estas respuestas son sumamente complejas y varían entre los seres infectados (2). La mayoría de los pacientes infectados muestran una respuesta importante de anticuerpos anti-H. pylori, quienes pueden ser detectados en el suero sanguíneo de éstos y de individuos asintomáticos. La respuesta sistémica es esencialmente inmunoglobulinas de la clase IgG, que permanecen presentes durante meses después que la infección ha sanado. A nivel de mucosa estomacal, la respuesta incluye la producción de IgA, la cual se liga a los antígenos de superficie de H. pyoril, además, la infección es asociada a una respuesta inflamatoria y la infiltración de células en la mucosa gástrica. Pueden estar presentes las células polimorfo nucleares e infiltraciones de mononucleares: linfocitos B y células T. Algunos estudios han indicado que la actividad del asesino natural de los linfocitos de sangre periférica, pueda estar aumentada por el H. pylori posiblemente estimulando la producción de interferón y otras citocinas (2). El desarrollo de una vacuna eficaz contra H. pylori ofrecería ventajas como la no repetición de la infección; para ello se han hecho seguimientos y la mayoría han sido basados en el uso de antígenos seleccionados involucrados en la patogénesis de la infección, como la urea sa, la Vac A, Cag A y otros, la cual percibe conferir profilaxia terapéutica (2).

 Carcinogenesis gástrica asociadas al género Helicobacter: Existe la hipótesis que la relación del H. pylori con el desarrollo de cáncer gástrico esta basado en el daño progresivo provocado por la presencia prolongada de la bacteria, que lleva a lesiones que evolucionan de una gastritis superficial, gastritis crónica, gastritis atrófica y en esta ultima etapa, hay una infiltración inflamatoria importante con agregados foliculares linfoides que destruyen la mucosa a tal grado, que provoca pérdida de la función e induciendo una metaplasia intestinal, displasia y eventualmente cáncer (22). El tejido linfoide asociado a mucosa (MALT: mucosa associated tissue), es un tejido relacionado con la respuesta inmune en diferentes órganos y que son el sustrato para el desarrollo de linfomas de bajo grado (tejido linfoide semejante a las placas de Peyer en intestino) de malignidad positivos para marcadores inmunohistoquímicos de linfocitos tipo B. La relación epidemiológica entre el linfoma gástrico MALT y la infección por H. pylori es sugerido por el estímulo antigénico continuo sobre la hiperplasia folicular linfoide del tejido gástrico; este linfoma gástrico, se acompaña en más del 90% de los casos de infección con esta bacteria, habiéndose observado una desaparición de linfoma B de bajo grado en casos de erradicación del H. pylori, lo que ha sugerido la antígeno dependencia y la respuesta linfoide a la infección en estos tumores (21). El desarrollo de tumores asociados a la infección crónica por H. pylori, ha sido reportada y asociada a una hiperplasia del tejido lin oidef asociado a mucosa (MALT), pólipos, linfomas y adenocarcinomas gástricos (23). Varios estudios han asociado la inflamación y algunas citocinas a la car-cinogenesis gástrica (23). El aumento de la producción de LI-1b inducida por H. pylori e hipoclorhidria y se asocia con un mayor riesgo de cáncer gástrico. Además el TNF-a-xenografeted es capaz de promover la metástasis de las células de cáncer gástrico en humanos (24). Se ha propuesto la activación del factor nuclear kb (NF-kb), como una característica distintiva de respuestas inflamatorias que se detectan también en tumores (24). La carcinogénesis gástrica es un proceso complejo que se caracteriza por la acumulación de alteraciones moleculares que se explican por dos mecanismos genéticos y epigenéticos. Los genéticos incluyen cambios directos en la secuencia de ADN y los epigenéticos incluyen mutilaciones aberrantes del ADN que se traduce en el crecimiento de células tumorales. El estómago es uno de los órganos más susceptibles de sufrir mutilaciones aberrantes del ADN en sus células epiteliales, por su accesibilidad a agentes tóxicos exógenos, infecciosos (H. pylori) (24). Las anormalidades genéticas más comunes son asociadas a la pérdida de heterozigosidad en particular del gen supresor p53 o gen “polipoadenomatoso coli”, en caso de infección por H. pylori (24). No obstante algunos estudios sugieren el desarrollo de este tejido depende de la estimulación de las células T y no de la bacteria por sí misma, y a su vez afirman que H. pylori no es el único factor de progresión de estos tejidos, aun cuan do pueden ser un importante iniciador por estímulo inmunológico en pacientes susceptibles (25).

MÉTODOS DIAGNÓSTICOS PARA EL GÉNERO

]]> Helicobacter

 Métodos invasivos: Las alteraciones macroscópicas de la mucosa gástrica no son confiables para el diagnóstico de esta infección. Es necesario el examen endoscópico, biopsias para examen histológico, test de ureasa y cultivo.

 Examen histológico: Lermite identificar la bacteria y caracterizar la intensidad del grado de inflamación, presencia de atrofia, metaplasia, displasia y neoplasia. Las tinciones de plata (Warthing-Starry), permiten la detección de mayor números de bacterias que la hematoxilina y eosina y permite distinguirlas más fácilmente, en la mucosa, intraglandular y en células parietales (las baterías aparecen como espirales y cocos pequeños, en un fondo marrón claro), de aproximadamente 2-20µm., también es posible emplear otras coloraciones como: Gram, Giem a,s Azul de Toluidina y Leung y Gibboun. Otra de las técnicas complementarias diagnósticas es la inmunohistoquímica, ésta permite la identificación y distribución de antígenos específicos para Helicobacter pylori, mediante la técnica de Streptavidina-Biotina Pe roxidasa (LSAB), en biopsias gástricas.

 Test de ureasa: Es un test, rápido, económico y eficiente. Consiste en la hidrólisis que produce la urea, li-berando CO2 y NH3, con el consiguiente aumento del pH, lo que se manifiesta en cambios de color en un indicador ácido-base. Su sensibilidad esta relacionada con la cantidad de bacterias presentes en la biopsia (99%) y una especificidad de 95%. La concordancia y el valor predictivo positivo de la prueba esta alrededor del 100%, cuando se comparan los resultados con los métodos histológicos.

 Cultivo: Es el método de mayor sensibilidad y especificidad (100%). Permite la correcta identificación de la bacteria. El cultivo de las colonias es difícil y de crecimiento lento (3-7 días), precisando ciertas condiciones (35-37 ºC en un entorno gaseoso con 5-10% de O2, 5-10 CO2, 5-8% H2 y 80-90% de N, 200 mmHg presión). La muestra es una biopsia que debe ser macerada en forma estéril en un tubo de ensayo y cultivado en medios no se activos enriquecidos como el agar nutriente (sangre y otros elementos), medios selectivos con 2, 3, 5-trifeniltetrazolio (TTC) y suplementos antibióticos (me dio Shirrow, entre otros). Las colonias son de aproximadamente 1mm. de diámetro, claras, transparentes, brillan-tes y convexas.

 Métodos no invasivos: Los métodos no invasivos son los más indicados para estudios epidemiológicos y control de tratamiento.

 Serología: Son útiles en el diagnóstico inicial de la infección. Permite evaluar el nivel de anticuerpos en sangre total., en saliva y orina. Los antígenos pueden activar a los linfocitos B, para conducir su diferenciación a plasmocitos productores de IgA, IgG, IgM, IgE e IgD. En la respuesta humoral la infección por H. pylori, la IgM específica se encuentra en la fase aguda, en la reinfección y en la infección múltiple con otra cepa distinta de H. pylori y ésta usualmente dirigida contra los antígenos de la flagelina, los cuales tienen reacción cruzada con los antígenos de los flagelos de Campylobacter y se detecta en bomba de protones y en la aplicación de antibióticoteramenos del 10% de los pacientes infectados por H. pylori. y esta usualmente dirigida contra los antigenos de la flagelina,los cuales tienen reaccion cruzada con los antigenos de los flagelos de Campylobacter y se detecta en menos del 10% de los pacientes infectados por H. pylori.

Los anticuerpos del isotipo IgG, se encuentran predominantemente en la fase cronica de la infeccion y estan dirigidos contra antigenos especificos como inespecificos que son excretados en el lumen gastrico a traves de la mucosa. La IgA es tambien producida por las celulas plasmaticas y secretada en forma de dimero en el lu men gastrico, despues de la union de la inmunoglobulina al componente secretor producido por las celulas epiteliales.

La produccion de IgA secretora especifica esta asociada a la presencia de las proteinas de shock-termico, los polisacaridos y el complejo mayor de histocompatibilidad de clase II. La serologia es positiva aun despues que la infeccion por H. pylori has sido erradicada.

Pruebas inmunoenzimáticas: Estas pruebas evaluan la evolucion post-tratamiento y las investigaciones epidemiologicas, que podrian dilucidar la via de diseminacion de este agente, mediante la identificacion de antigenos de Helicobacter en heces del paciente.

]]> Test respiratorio con urea marcada: La prueba del alien to con urea marcada -13C o 14C (urea breath test-UBH), es un test basado con el mismo principio, valorando la integridad de la mucosa gastrica, pero por su metodologia pertenece al grupo de tecnicas no invasivas.

Identificación de antígeno fecal: Consiste en un test inmunoenzimatico, empleando anticuerpos monoclonales anti-H.pylori. Es un aun menos invasivo ya que se realiza con muestras de heces, su principal aplicacion se basa en el control de tratamiento y estudios epidemiologicos.

Prueba de reacción en cadena de la polimerasa (PCR: the polymerasa chain reaction), y la hibridización in situ: Son herramientas desarrolladas para permitir la identificacion especifica de los organismos en biopsias gastricas, saliva, suero y heces. Esta prueba permite detectar pequenas cantidades de ADN bacteriano, precisando la presencia de nucleotidos, genes o proteinas especificas. El PCR y la hibridizacion in situ, son herramientas que se desarrollaron para permitir la identificacion especifica de los organismos.

Tratamiento para la infección por el género Heli-cobacter: En la actualidad en humanos y en medicina de pequenos animales se utilizan tres o cuatro regimenes terapeuticos basados todos en la inhibicion de la bom ba de protones y en la aplicacion de antibioticoterapia mixta, acompanada con el uso de probioticos (26, 27,28 y 29). En los animales domesticos no ha sido descrito un tratamiento especifico para la gastritis infecciosa asociada a HLO. Los antibioticos mas utilizados son: claritromicina (macrolido: que inhibe la sintesis de proteinas). Metronidazol (Nitroimidazoles: inhibidor de la sintesis de acidos nucleicos). El omeprazol como inhibidor de la bom ba de protones es el de mayor uso. Con respecto a los probioticos tenemos la lactoferrina (26 y 27).

En conclusión: El genero Helicobacter es de gran importancia desde el punto de vista de la salud publica, por el impacto que tiene sobre el esofago, mucosa gastrica, mucosa intestinal, sobre el higado y potencial inductor de carcinogenesis gastrica. Los animales domesticos y otras especies pueden sufrir colonizacion por estas bacterias y sufrir enfermedad gastro-hepatica. El riesgo de infeccion para el humano es inminente ya sea por con sumo de alimentos de origen animal contaminado, aguas contaminadas y transmision directa oral-oral, oralfecal. Alimentos de origen animal sin la inspeccion sanitaria que garanticen la calidad e inocuidad deben ser considerados como un elemento infeccioso potencial a nivel de mataderos industriales y sobre toda la cadena de comercializacion.

Agradecimientos: Este estudio ha sido financiado por el Consejo de Desarrollo Cientifico y Humanistico de la Universidad Central de Venezuela (CDCH) PG 116631-06.

REFERENCIAS

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