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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[Detección de Benzoilecgonina en orina de consumidores de té de coca mediante métodos de inmunoensayo]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[In order to detect the presence of benzoylecgonine in urine of consumers of coca tea, a pilot study was conducted by analyzing urine samples from 10 volunteers not cocaine users, be fore drinking the coca tea infusion, and collected until 48 hours after ingestión of a single shot (100 mL) the same day, The analysis was performed by immunoassay qualitative methods, using fast Acu-check tests, and semi quantitative automated equipment Abbott Axsym System, based on fluorescence polarization immunoassay (FPIA). Before ingestion of the infusion for qualitative and semiquantitative methods for samples collected were negative, and after drinking the tea, for both methods, concentrations of benzoylecgonine was detected from the first to 48 hours with several variations between samples, observed excellent agreement between the methods for the determination of benzoilecgonine in urine. In this study, we concluded that there is the presence of benzoylecgonine in urine samples from consumers of coca tea. According to the methods used provide only preliminary results, we recommend using a more specific in order to find parameters to discriminate individuals who have ingested coca tea infusions of dose that are cocaine addicts, In turn, it is important to prevent cosumers coca tea on the risk of detection of benzoylecgonine in urine within the first 24 to 48 hours and the implications it brings such laboratory findings.]]></p></abstract>
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<kwd lng="es"><![CDATA[Infusión de Té de coca]]></kwd>
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</front><body><![CDATA[   <b><font FACE="Verdana">     <p align="center">Detección de Benzoilecgonina en orina de consumidores de té de  coca mediante métodos de inmunoensayo</p> </font></b><font FACE="Verdana">     <p align="center"><b>Yarima A Velásquez<sup>1</sup>, Yajaira Del V Hernández<sup>1</sup>,  Lester Y Rodríguez<sup>1</sup>,Alexis R Morales<sup>1</sup>, Jacinto Rincón<sup>1</sup>,  Luis Ramírez<sup>1</sup></b></font></p> <font FACE="Verdana" LANG="JA" SIZE="2">     <p align="justify">1 Grupo de Investigaciones en Toxicologia Analitica y  Estudios Farmacologico (GITAEF). Facultad de Farmacia y Bioanalisis. Universidad  de Los Andes. Merida-Venezuela. .Autor principal: Telefono: 0274-2403488 (Ofic.)  0424-7305542/0414-7457308,&nbsp; <a href="mailto:yarimavel@hotmail.com"> yarimavel@hotmail.com</a> , <a href="mailto:yajairahve@yahoo.com"> yajairahve@yahoo.com</a> , <a href="mailto:lesteryomar@gmail.com"> lesteryomar@gmail.com</a> </p> </font>     <p align="justify"><b><font size="2" face="Verdana">RESUMEN </font></b></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">Con el fin de detectar la  presencia de benzoilecgonina en orina de consumidores de té de coca, se realizó  un estudio piloto analizando muestras de orina a 10 voluntarios sanos, no  consumidores de cocaína, antes de ingerir la infusión de té de coca (Nasa Esh´s  Coca Nasa), y las recolectadas hasta las 48 horas después de la ingestión, de  una toma única de 100 mL el mismo día. El análisis se realizó por métodos de  inmunoensayo, cualitativo, mediante pruebas rápidas Acu-check, y  semicuantitativo AxSYM Cocaine Metabolite, basado en In munoensayo de  Fluorescencia Polarizada (FPIA). Antes de la ingestión de la infusión por los  métodos cualitativos y semicuantitativos las muestras recolectadas resultaron  negativas, después de haber ingerido la infusión, por ambos métodos se detectó  concentraciones de benzoilecgonina desde la primera hasta las 48 horas con  diversas variaciones entre las muestras, observándose excelente concordancia  entre los métodos para la determinación de benzoilecgonina en orina. En este  estudio, se concluyó que existe la presencia de benzoilecgonina en muestras de  orina de consumidores de té de coca. Los métodos utilizados sólo proporcionan  resultados preliminares, se recomienda utilizar unos más específicos a fin de  encontrar parámetros que permitan discriminar individuos que hayan ingerido  infusión de té de coca, de aquellos que son adictos a la cocaína. Además, es  importante prevenir a los consumidores de té de coca sobre el riesgo de  detección de benzoilecgonina en orina dentro de las primeras 24 a 48 horas y las  implicaciones que trae consigo tales hallazgos de laboratorio. </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana"><b><font size="2">Palabras clave:</font></b><font size="2">  Infusión de Té de coca, cocaína, metabolitos de cocaína, benzoilecgonina,  consumidores.</font></font></p> <b><font FACE="Verdana" SIZE="2">     <p align="center">Detection of Benzoilecgonine in urine of consumers of coca tea  by immunoassay methods</p> </font></b>     <p align="justify"><b><font size="2" face="Verdana">ABSTRACT </font></b></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">In order to detect the presence  of benzoylecgonine in urine of consumers of coca tea, a pilot study was  conducted by analyzing urine samples from 10 volunteers not cocaine users, be  fore drinking the coca tea infusion, and collected until 48 hours after  ingestión of a single shot (100 mL) the same day, The analysis was performed by  immunoassay qualitative methods, using fast Acu-check tests, and semi  quantitative automated equipment Abbott Axsym System, based on fluorescence  polarization immunoassay (FPIA). Before ingestion of the infusion for  qualitative and semiquantitative methods for samples collected were negative,  and after drinking the tea, for both methods, concentrations of benzoylecgonine  was detected from the first to 48 hours with several variations between samples,  observed excellent agreement between the methods for the determination of  benzoilecgonine in urine. In this study, we concluded that there is the presence  of benzoylecgonine in urine samples from consumers of coca tea. According to the  methods used provide only preliminary results, we recommend using a more  specific in order to find parameters to discriminate individuals who have  ingested coca tea infusions of dose that are cocaine addicts, In turn, it is  important to prevent cosumers coca tea on the risk of detection of  benzoylecgonine in urine within the first 24 to 48 hours and the implications it  brings such laboratory findings. </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font face="Verdana"><b><font size="2">Key words:</font></b><font size="2">  tea infusion of coca, cocaine, metabolites of cocaine, benzoylecgonine,  consumers.</font></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana"><b><font size="2">Recibido:</font></b><font size="2">  25 de noviembre de 2009 / <b>Aprobado:</b> 03 de mayo de 2010</font></font></p>     <p align="justify"><b><font size="2" face="Verdana">INTRODUCCIÓN </font></b></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">La cocaína, es el principal  alcaloide de las hojas de la planta de coca, Erythroxylum coca, arbusto que  crece en un ambiente ecológico húmedo, entre los 500 y 2000 metros sobre el  nivel del mar, perteneciente al género de la familia de las plantas tropicales  Erythoxyláceas, originaria de la región andina de la América del Sur, cuyo uso  se remonta al siglo xV, donde los indígenas mas ticaban mezclada con cal con la  finalidad de disminuir la fatiga y sensación de hambre (1) (2) (3). La absorción  de los alcaloides de las hojas de coca es muy variable, dependiendo  principalmente del contenido de las hojas, de la preparación usada y de la  presencia o ausencia de sustancias alcalinas en la boca del masticador así como  la habilidad de éste (4). El mate de coca, es la infusión comercial, tipo té,  preparada con hojas de coca molidas en bolsitas filtrantes y que se pueden  adquirir en establecimientos comerciales (5). La ingestión de la infusión de  hoja de coca, constituye una costumbre en la región andina, sien do de uso  habitual por la población campesina del Perú y Bolivia principalmente, y en  algunos sectores poblacionales de Ecuador y Argentina, debido a los objetivos  socio-antropológicos tradicionales y de salud (6) (7). </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">El mate de coca es muy  utilizado por sus bondades digestivas, circulatorias, respiratorias,  antifatigante y antiestrés, puede llegar a provocar leves pero significativos  efectos del estado de ánimo, considerándose que puede llegar a producir  posiblemente efectos antidepresivos en el organismo (7). Para los fines  anteriormente descritos es preferible utilizar las bolsitas filtrantes ya que  son las únicas unidades industriales pesadas y homogeneizadas, contienen  aproximadamente 1 gramo de hoja de coca naturales molidas (5). Se ha descrito  que la concentración de cocaína en las hojas de coca va de 0,5% a 1,5% (4). La  infusión tipo té, se prepara colocando una bolsita filtrante en una taza de 200  mL de agua caliente, aproximadamente durante 3 minutos, liberándose así cocaína  contenida en las hojas secas (5). </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">Según la literatura existente  del Instituto Boliviano de Biología de la Altura, 1997, es indiscutible el hecho  de que tanto la hoja de coca seca, utilizada para la elaboración de mate en  bolsitas, sola o acompañada de otra sustancia como por ejemplo anís o  manzanilla, produce los mismos metabolitos que la cocaína ingerida en forma de  clorhidrato o pasta base (1), es decir, benzoilecgonina (BE), ecgonina metil  ester y posteriormente ec gonina (1) (8) (9). En el organismo como en muestras  acuosas la benzoilecgonina no se produce enzimáticamente sino por hidrólisis  simple. Las colinesterasas pueden convertir la benzoilecgonina a ecgonina  enzimáticamente (4). Siendo la benzoilecgonina el principal metabolito de la  cocaína que se detecta en la orina (6) (10) (11) (12). La implementación de  procedimientos para la detección de uso de drogas ilegales como la cocaína, en  el ámbito laboral y en otros muy importantes como el deportivo, se ha venido  incrementando en Venezuela y en muchos otros países del mundo, ello debido a que  el con sumo de cocaína en sus diferentes formas ha ido en aumento entre  adolescentes, adultos jóvenes, deportistas, etc, y al constituir ésta una droga  con un potente efecto adictivo (15), se convierte en un grave problema desde el  punto de vista toxicológico, laboral, social, y de seguridad ciudadana,  representando un severo problema para las sociedades contemporáneas (11), como  consecuencia de ello, se ha generado la necesidad de análisis y detección de  drogas en fluidos biológicos (11) (12) (15). La orina es una matriz biológica  donde se puede detectar la</font></p>     <p align="justify"><b><font size="2" face="Verdana">MATERIALES Y MÉTODOS </font> </b></p>     <p align="justify"><font face="Verdana"><b><font size="2">Población objeto de  estudio</font></b><font size="2"> </font></font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">El universo de investigación  estuvo conformado por personas adultas sanas entre hombres y mujeres, no  consumidores de cocaína y cuyas edades oscilaron entre 22 y 43 años,  respectivamente. </font></p>     <p align="justify"><b><font size="2" face="Verdana">Muestra de pacientes  participantes </font></b></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font size="2" face="Verdana">Mediante un método de muestreo  no probabilístico se logró reunir información de 10 personas voluntarias, previo  consentimiento por escrito, y explicación por par te del equipo profesional del  objetivo de dicha investigación. Los datos de los sujetos fueron recolectados a  través de una encuesta con la finalidad de asegurar que cumplieran con los  criterios de inclusión. </font></p>     <p align="justify"><b><font size="2" face="Verdana">Criterios de inclusión </font></b></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">En este estudio se estableció  que las 10 personas voluntarias no fueran consumidores de cocaína, a las cuales  se les indicó que durante el estudio debían abstenerse de ingerir otro tipo de  infusión, bebidas alcohólicas y medicamentos. </font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana"><b><font size="2">Material biológico</font></b><font size="2"> </font></font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">Las muestras de orina fueron  recolectadas por los pacientes bajo estrictos controles de recolección antes y  después de la ingestión de la infusión de té de coca (Nasa Esh´s Coca nasa).  Para la recolección de la orina, en el laboratorio se le proporcionó a cada  voluntario envases secos, estériles y sin preservativos para el análisis in  mediato de la misma. </font></p>     <p align="justify"><b><font size="2" face="Verdana">Metodología </font></b></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">Para la determinación de  benzoilecgonina en orina, se analizaron por triplicado las muestras de orina de  los 10 voluntarios consumidores de infusión de té de coca (Nasa Esh´s Coca  Nasa),antes de ingerir la infusión y las recolectadas en las siguientes 48 horas  después de la misma. Para ello, se establecieron horas específicas de  recolección con la finalidad de vigilar y supervisar el proceso dentro del  laboratorio y así evitar errores durante la etapa preanalítica, por lo cual,  después de la ingestión de la infusión, se seleccionó para el análisis la orina  recolectada en la 1era, 3era, 24, 36 y 48 horas. La infusión de té de coca (Nasa  Esh´s Coca Nasa) utilizada en esta investigación es elaborada en Colombia, por  la Industria Indígena del Cauca, la cual contiene 20 bolsitas aromáticas de  Coca, con un peso neto contenido en la caja de 20 g. Cada bolsita de infusión de  té de coca (Nasa Esh´s Coca Nasa) se preparó en 100 mL de agua tibia, la cual  fue ingerida por los voluntarios en una toma única el mismo día y a la misma  hora.&nbsp; </font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana"> <a name="fig1"> <img border="0" src="/img/fbpe/inhrr/v42n1/art03fig1.gif"></a></font></p>     
<p align="justify"><font size="2" face="Verdana">A las muestras de orina  recolectadas por los pacientes antes de ingerir la infusión de té de coca (Nasa  Esh´s Coca Nasa), se les realizó una prueba cualitativa, Acu-check, prueba  rápida de un solo paso cocaína/benzoil/ecgonina para la detección de  benzoilecgonina en la orina, de lectura directa, y no requiere instrumentación,  la cual emplea un anticuerpo único monoclonal escogido para la selección e  identificación de benzoilecgonina en la muestra de orina con un alto grado de  sensibilidad, cuyo principio consiste en una cromatografía absorbente en la cual  la droga y sus metabolitos (antígeno) en la muestra compiten con un conjugado de  la droga (antígeno) inmovilizado en la membrana porosa en los sitios libres del  anticuerpo. Durante la prueba, la orina migra por acción capilar, si el antígeno  (benzoilecgonina) se encuentra por debajo de 300 ng/mL, no va a saturar los  sitios de unión del anticuerpo por completo, y los espacios libres en el  anticuerpo van a ser ocupados por el antígeno inmóvil (benzoilecgonina) de la  tira provocando una línea coloreada visible que aparece en la región tets. La  región coloreada no se hará visible en la región test si los niveles de antígeno  (benzoilecgonina) se encuentran por encima de 300 ng/mL ya que van a saturar  todos los sitios de unión del anticuerpo (17). </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">Las muestras de orina  recolectadas en la 1era, 3era, 24, 36 y 48 horas siguientes a la ingestión de la  infusión de té de coca (Nasa Esh´s Coca Nasa) se analizaron mediante dos métodos  de inmunoensayo: el cualitativo Acucheck, anteriormente descrito, y el AxSYM  Cocaine Metabolite, ensayo semicuantitativo para la detección del principal  metabolito urinario de la cocaína, benzoilecgonina, el cual utiliza la  tecnología de Inmunoensayo de Fluorescencia Polarizada (FPIA) y presenta como  nivel mínimo de detección (cut-off) 300 ng/mL (18). Las mediciones se realizaron  en el equipo automatizado Axsym System de la casa comercial Abbott, analizador  basado en (FPIA), el cual se fundamenta en la reacción antígeno anticuerpo, de  unión competitiva, entre el antígeno marcado con fluoresceína (fármaco trazador)  y el antígeno del paciente (fármaco a determinar), siendo los participantes en  la reacción de enlace competitivo, el anticuerpo, el antígeno del paciente y el  antígeno marcado con fluoresceína (trazador). Al formarse el enlace competitivo,  la proporción antígeno del paciente/trazador condiciona la cantidad de complejo  anticuerpo trazador que se forma y es responsable de la polarización resultante,  en la medida que la muestra del paciente contenga mayor cantidad de antígeno  (fármaco), este desplazará al trazador de su unión con el anticuerpo y conducirá  a una menor concentración del complejo anticuerpo-trazador, lo que hará que la  polarización resultante sea más baja, y si existe una baja concentración del  antígeno en la muestra habrá una elevada concentración del complejo anticuerpo-trazador y la polarización será más alta. Esta técnica se caracteriza por la  rapidez y sencillez en su manejo y por no requerir tratamiento previo de la  muestra, o ser muy sencillo, y entre los inconveniente más destacables es el no  determinar metabolitos y el elevado coste (19) (20). </font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center"><font size="2" face="Verdana"> <a name="fig2"> <img border="0" src="/img/fbpe/inhrr/v42n1/art03fig2.gif"></a></font></p>     
<p align="justify"><font size="2" face="Verdana">Para determinar si los métodos  utilizados para la detección de benzoilecgonina en orina arrojaban resultados  falsos positivos, las muestras de orina de los voluntarios, fueron analizadas  antes de la ingestión de la in fusión de té de coca (Nasa Esh´s Coca Nasa), por  el método cualitativo Acu-check y semi-cuantitativo AxSYM Cocaine Metabolite,  con lo cual a su vez se obtuvo referencia de los niveles basales de cada uno de  los sujetos voluntarios. La calibración de los métodos utilizados para la  dentección de benzoilecgonina en orina de los voluntarios participantes en este  estudio, fue realizada utilizando los calibradores comerciales rutinariamente  empleados por el método semicuantitativo AxSYM Cocaine Metabolite, los cuales  incluyen los calibradores A,B,C,D,E y F, don de el calibrador A contiene orina  humana y los calibradores B a F contienen preparado de benzoilecgonina en orina  humana para producir las concentraciones de 0, 300, 1000, 2000, 3000 y 5000 ng/mL  respectivamente (18). Los métodos utilizados en esta investigación, cualitativo  Acu-check y el semicuantitativo AxSYM Cocaine Metabolite, solo aportan  resultados analíticos preliminares los cuales deben ser confirmados por otros  métodos más específicos, tal como la cromatografía de gases/ es pectrofotometría  de masas (17) (18). El centro operativo del presente estudio, fue el Laboratorio  de Toxicología Analítica dependiente de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis de  la Universidad de Los Andes, ubicado en el Instituto Autónomo Hospital  Universitario de los Andes (IAHULA). Mérida-Venezuela. </font></p>     <p align="justify"><b><font size="2" face="Verdana">ANÁLISIS ESTADÍSTICO </font> </b></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">Mediante un análisis  estadístico descriptivo, a través de un método de muestreo no probabilístico se  logró reunir información de las 10 personas voluntarias involucradas en el  estudio. Los datos obtenidos fueron procesados mediante el software estadístico  R, versión 2.7.0, cuyo análisis consistió en: 1. Tablas de frecuencia de  información relevante de los pacientes. 2. Estimación de la Función de  Supervivencia de Kaplan y Meier, en base a la observación del evento, resultado positivo de benzoilecgonina (21). 3. Comparación de los métodos de  inmunoensayo, método cualitativo Acu-check y semi-cuantitativo AxSYM Cocaine  Metabolite, mediante el coeficiente Kappa (22).</font></p>     <p align="justify"><b><font size="2" face="Verdana">RESULTADOS </font></b></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">En este estudio los análisis se  iniciaron con el procesamiento de las muestras de orina recolectadas por los 10  voluntarios antes de ingerir la infusión de té de coca (Nasa Esh´s Coca Nasa),  se observa que mediante el método Acu-check los resultados fueron negativos y  por el método semicuantitativo AxSYM Cocaine Metabolite no se produjeron  resultados positivos al no detectarse concentraciones de benzoilecgonina en las  muestras procesadas, lo que demuestra que en el procesamiento analítico no se  obtuvieron resultados falsos positivos (<a href="#tab1">Tabla Nº 1</a>). Al realizar las  determinaciones con el método cualitativo Acu-check utilizando los calibradores  comerciales del método semicuantitativo AxSYM Cocaine Metabolite, a diferentes  concentraciones de benzoilecgonina, en los cuales estaban incluidos los valores  cut-off establecidos para el método Acu-check, se observó que a concentraciones  iguales o mayores de 300 ng/mL por el método semicuantitativo AxSYM Cocaine  Metabolite, resultaron positivos para el Acu-check (<a href="#tab2">Tabla Nº 2</a>). En la  <a href="#tab3">Tabla Nº  3</a> se muestran los resultados del análisis realizado mediante el método  cualitativo Acu-check a las muestras de orina de los 10 voluntarios, recolecta  das en un lapso de 48 horas después de ingerir la in fusión de té de coca (Nasa  Esh´s Coca Nasa). En la misma se puede observar que se obtienen resultados  positivos para benzoilecgonina en la orina analizada a la primera y a la 3 horas  posteriores a la ingestión en los 10 voluntarios participantes en el estudio. Al  realizar el análisis en la orina recolectada en las horas subsiguientes 24, 36 y  48,se obtienen resultados positivos con diversas variaciones de persistencia  entre las muestras hasta las 48 horas posteriores a la ingestión de dicho té,  así se tiene que a las 24 horas todas las muestras fueron positivas a excepción  de las muestras de los voluntarios 7 y 8, a las 36 horas el análisis arrojó  resultados positivos para las muestras de los voluntarios 2, 3 y 4, observando  resultados positivos hasta las 48 horas en las muestras 2 y 3. </font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana"> <a name="tab1"> <img border="0" src="/img/fbpe/inhrr/v42n1/art03fig3.gif"></a></font></p>     
<p align="center"><font size="2" face="Verdana"> <a name="tab2"> <img border="0" src="/img/fbpe/inhrr/v42n1/art03fig4.gif"></a></font></p>     
<p align="justify"><font size="2" face="Verdana">A partir de los datos de la  <a href="#tab3">Tabla Nº 3</a>, se obtiene la fun ción de supervivencia estimada de Kaplan y Meier  (21). En total se tienen 50 determinaciones y el evento de interés fue,  resultado positivo de benzoilecgonina (P). En la <a href="#tab4">Tabla Nº 4</a> se observa que el  evento, resultado positivo de benzoilecgonina (P), ocurrió en 33 de las veces  que se repitió la prueba, en diferentes instantes de tiempo, la mediana de  supervivencia fue de 24 horas, lo que significa que, en el 50% de las  repeticiones de la prueba ocurrió el evento máximo a las 24 horas después de  haber ingerido el té de coca. La <a href="#tab5">Tabla Nº 5</a>, muestra la función de supervivencia  estimada de Kaplan y Meier para el evento diagnóstico positivo de benzoilecgonina, donde se observa que, una hora después de haber ingerido té de  coca, la probabilidad de que el resultado de benzoilecgonina sea positivo, al  menos en ese instante de tiempo, es de 0.80; notándose que el evento ocurrió en  los 10 pacientes del estudio. El segundo tiempo de observación fue 3 horas  después de haber ingerido el té de coca, la probabilidad de que el evento sea  observado, al menos en ese instante de tiempo, es de 0.60; el mismo ocurrió  nuevamente en los 10 pacientes del estudio. El tercer tiempo de observación fue  24 horas después de haber ingerido té de coca, la probabilidad de observación  del evento al menos 24 horas después de haber ingerido té de coca es de 0,44; en  este instante de tiempo el evento ocurrió en 8 pacientes del estudio. El cuarto  tiempo de observación fue 36 horas después de haber ingerido té de coca, la  probabilidad de que el evento sea observado al me - nos 36 horas después de  haber ingerido té de coca es de 0,374; en este instante de tiempo el evento  ocurrió en 3 pacientes del estudio. El último tiempo de observación considerado  fue de 48 horas, después de haber ingerido té de coca. </font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana"> <a name="tab3"> <img border="0" src="/img/fbpe/inhrr/v42n1/art03fig5.gif"></a></font></p>     
]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center"><font size="2" face="Verdana"> <a name="tab4"> <img border="0" src="/img/fbpe/inhrr/v42n1/art03fig6.gif"></a></font></p>     
<p align="justify"><font size="2" face="Verdana">La probabilidad de que el  evento sea observado al menos 48 horas después de haber ingerido té de coca, es  de 0.299; en este momento el evento se observó sólo en dos de los pacientes del  estudio. En consecuencia, a medida que el tiempo de observación se incrementa,  la probabilidad de que ocurra el evento, resultado positivo de benzoilecgonina,  disminuye considerablemente, hasta un momento en que la probabilidad de  ocurrencia del evento es casi nula. En el <a href="#graf1">Gráfico Nº 1</a>, se observa un patrón  decreciente de la ocurrencia del evento, resultado positivo de benzoilecgonina,  a medida que el tiempo de observación se incrementa, así como las franjas de  confianza al 95% para cada intervalo de tiempo de observación. Al paciente  consumir té de coca, en un instante de tiempo muy corto (incluso inferior a una  hora) posterior a la in gesta, la probabilidad de que el evento ocurra es igual  a uno (1). Sin embargo, la probabilidad de que el evento ocurra una hora  después de ingerido té de coca, es de 0.80 (similar a los resultados mostrados  en la <a href="#tab5">Tabla Nº 5</a>). La probabilidad de observar el evento a las tres horas,  después de la ingesta, es de 0.60. Este patrón se mantiene constante hasta las  24 horas de observación. Similarmente ocurre entre las 24 y 36 horas de  observación, hasta que finalmente después de las 48 horas desaparece la  supervivencia de benzoilecgonina en las muestras de orina del paciente, cuya  probabilidad sería inferior a 0.299.</font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana"> <a name="tab5"> <img border="0" src="/img/fbpe/inhrr/v42n1/art03fig7.gif"></a></font></p>     
<p align="center"><font size="2" face="Verdana"> <a name="graf1"> <img border="0" src="/img/fbpe/inhrr/v42n1/art03fig8.gif"></a></font></p>     
<p align="justify"><font size="2" face="Verdana">La <a href="#tab6">Tabla Nº 6</a>, muestra los  resultados de las concentraciones (ng/mL) de benzoilecgonina, obtenidas en las  muestras de orina de los voluntarios después de ingerir la infusión de té de  coca, mediante el método semicuan titativo AxSYM Cocaine Metabolite (FPIA). De  cada paciente se realizaron tres (3) determinaciones en cada instante de tiempo  y se obtuvo la media aritmética de cada uno. En la Tabla se puede apreciar que  las mayores concentraciones de benzoilecgonina resultaron en la micción de la  1era hora (a excepción del voluntario 1) y las 3 horas. Se puede observar en los  voluntarios 3 y 5 concentraciones de benzoilecgonina mayores a 5.000 ng/mL en la  micción de la primera hora, y en estos al igual que en todos los voluntarios se  aprecia como las concentraciones de benzoilecgonina van decreciendo con el  transcurrir de las horas de estudio (excepto en el voluntario 1), detectándose  en los voluntarios 7 y 8 antes de las 24 horas concentraciones de  benzoilecgonina muy por debajo de las encontradas en el resto de las muestras,  resultando a las 48 horas posteriores a la ingestión de la infusión de té en  todos los voluntarios las concentraciones de benzoilecgonina en orina por debajo  del cut-off, detectándose las más altas concentraciones de benzoilecgonina  (mayor a 300 ng/mL) en la orina de los voluntarios 2 y 3 al finalizar el  estudio. </font></p>     <p align="center"><font size="2" face="Verdana"> <a name="graf2"> <img border="0" src="/img/fbpe/inhrr/v42n1/art03fig9.gif"></a></font></p>     
<p align="center"><font size="2" face="Verdana"> <a name="tab6"> <img border="0" src="/img/fbpe/inhrr/v42n1/art03fig10.gif"></a></font></p>     
<p align="center"> <a name="tab7"> <img border="0" src="/img/fbpe/inhrr/v42n1/art03fig11.gif"></a></p>     
<p align="justify"><font size="2" face="Verdana">Esta situación también la  podemos observar en el <a href="#graf2">Gráfico 2</a>. Allí se aprecia que el método semicuantitativo  nos indica que una vez ingerida la infusión de té de coca, las concentraciones  de Benzoilecgonina (ng/mL) disminuyen considerablemente en el tiempo. Mediante  los <a href="#graf1">Gráficos 1</a> y <a href="#graf2">2</a>, se muestran los resultados obtenidos a partir de la  aplicación de los métodos de inmunoensayo, cualitativo y semicuantitativo,  respectivamente. Ahora bien, mediante la aplicación del método estadístico Kappa,  estratificado para cada instante de tiempo, se determinó que ambos métodos son  concordantes, tal como se muestra en la <a href="#tab7">Tabla 7</a>. El Coeficiente Kappa está  basado en la hipótesis nula de que, los métodos semicuantitativo y cualitativo  no son equivalentes. El criterio de decisión es en función de un nivel de  significación del 5%. Si p valor es menor a 0.05 (p &lt; 0.05) se rechaza la  hipótesis nula. En este caso particular, p valor es igual a 0.002, menor a 0.05  (p = 0.002 &lt; 0.05), entonces se puede concluir que los métodos semicuantitativo  y cualitativo son equivalentes para determinar presencia de benzoilecgonina en  orina de pacientes consumidores de té de coca. Además, el valor del Coeficiente  Kappa es igual a uno (1), lo que se interpreta como una concordancia excelente  entre los métodos, cualitativo Acu-check y semicuantitativo AxSYM Cocaine  Metabolite (FPIA). </font></p>     <p align="justify"><b><font size="2" face="Verdana">DISCUSIÓN </font></b></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font size="2" face="Verdana">Se puede apreciar en los  resultados que al procesar las muestras de orina de los 10 voluntarios antes de  ingerir la infusión de te de coca (Nasa Esh´s Coca Na sa), al ser analizadas  tanto por el método cualitativo Acucheck y semicuantitativo AxSYM Cocaine  Metabolite, se demostró que no se obtuvieron resultados falsos positivos al ser  comparados los resultados por ambos métodos. En un estudio realizado por  Expósito y col (23) para evaluar la validez del test rápido Ontrak Teststik para  detectar cocaína y marihuana, realizaron determinaciones en muestras de orina  libres de droga, demostrando que no se obtuvieron falsos positivos con Ontrak  Tests tik al comparar los resultados con los arrojados por FPIA-TDx y con ELISA,  demostrando así una mayor confiabilidad de la validez del test. Por otra parte,  al realizar las determinaciones con el método cualitativo Acu-check utilizando  los calibradores del método semi-cuantitativo AxSYM Cocaine Metabolite (FPIA),  se aprecia que al procesar el calibrador A de concentración 0 ng/mL resultó  negativo para Acu-check, mientras que con los calibradores B, C, D, E y F con  concentraciones iguales o superiores de 300 ng/mL resultaron positivos, a  diferencia de los resultados obtenidos por Expósito y col (23) en la evaluación  del test rápido Ontrak TesTstik para detectar cocaína y marihuana en muestras de  orina, al utilizar el calibrador de 300 ng/mL correspondiente al método Elisa,  el Ontrak Teststik arrojó resultado negativo, siendo esa la concentración de cut-off  establecida por el fabricante de este test. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">Al analizar las muestras de los  10 voluntarios por el método cualitativo Acu-check, luego de la ingestión de té  de coca (Nasa Esh´s Coca Nasa), se puede observar que se obtienen resultados  positivos en el análisis de las orinas recolectadas en la primera, 3, 24, 36 y  las 48 horas posteriores a la ingestión de dicho té, ello con diversas  variaciones de persistencia entre las muestras, estos hallazgos se asemejan con  los obtenidos por zabaleta y Castro (6) en su estudio al analizar con el  ensayo cualitativo comercial inmunoquímico de un solo paso SureStep COC,  muestras de orina de voluntarios adultos sanos, que ingirieron infusión de mate  de coca (Delisse, ENACO, Perú) recolectadas a las 3, 6, 12, 48 y 72 horas, en el  cual se obtuvieron resultados positivos en la orina de todos los sujetos,  detectándose la presencia de benzoilecgonina entre las 3 y 24 horas y la orina  se negativizó a las 48 horas en todos los sujetos. Los resultados positivos  preliminares obtenidos utilizando el método cualitativo de Acu-check, coinciden  con los resultados obtenidos por el método semicuantitativo AxSYM Cocaine  Metabolite (FPIA), con el mismo se puedo detectar concentraciones de  benzoilecgonina en las muestras de orina de voluntarios después de la ingestión  de té de coca, en todos los rangos de concentraciones, inclusive en el de mayor  concentración ( &gt; 5000 ng/mL), a diferencia de los resultados encontrados en un  estudio realizado por Galassi y col (10) los cuales utilizaron Coat-a-Count  metabolitos de la cocaína, un radio inmuno análisis diseñado para la  determinación cuantitativa de benzoilecgonina en orina, para analizar muestras  de personas que consumieron té de coca, hallando con el mismo valores de  benzoilecgonina en todos los rangos de concentración menos en el último, que  corresponde al de mayor concentración de 5001-6000 ng/mL. </font></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">Se observa que mediante el  método semicuantitativo AxSYM Cocaine Metabolite (FPIA), la concentración de  benzoilecgonina en la muestra de orina del voluntario 1 en la primera micción  fue menor que las concentraciones de benzoilecgonina obtenidas en la micción a  las 3 horas y a las 24 horas esto ya que el voluntario 1 realizó la 1era micción  un poco antes de la media hora de la toma de la infusión de té de coca, a  diferencia de los demás voluntarios, resultado que se deba probablemente a que  la detección de benzoilecgonina en orina se hace positiva entre los 30 a 45  minutos de la administrada, sea la hoja de coca, la cocaína y/o mate de coca  (1), y considerando que la concentración máxima en plasma de cocaína en hojas de  coca es de 60 minutos (2), además, se aprecia que en los voluntarios 2 y 3 se  mantienen concentraciones de benzoilecgonina muy por encima del cut-off hasta  las 48 horas, evidenciándose diferencias de concentración de benzoilecgonina en  orina entre cada uno de los voluntarios involucrados en el estudio, lo cual  pudiera estar relacionado con el metabolismo de la persona así como a su  ingestión de líquidos, más que a la concentración o cantidad de mate o droga  consumida (1), a su vez, se deben considerar otros factores que pueden afectar  la concentración de cocaína y sus metabolitos en las muestras de orina, como el  volumen de ingestión de fluidos antes de proporcionar la muestra de orina y la  hidrólisis química que ocurre en ésta antes del análisis (12), además de ello,  de acuerdo a la cinética de la cocaína, la variabilidad individual es muy  grande, en el rango de los 30 a los 120 minutos en diferentes individuos (24),  es decir, cada individuo tiene su velocidad de eliminación de cocaína, ello  determinado en buena parte por la concentración o la actividad de sus colinesterasas, las cuales participan en dos vías de degradación de la cocaína,  a metiléster de ecgonina y a benzoilecgonina (25). </font></p>     <p align="justify"><b><font size="2" face="Verdana">CONCLUSIONES </font></b></p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">De acuerdo a los resultados  obtenidos con los métodos utilizados en este estudio piloto, se detectó  benzoilecgonina en las muestras de orina de consumidores de té de coca (Nasa  Esh´s Coca nasa). Mediante el método cualitativo Acu-chek se obtuvo resultados  positivos para benzoilecgonina en muestras de orina de consumidores de té de  coca (Nasa Esh´s Coca Nasa) desde la primera hora hasta las 48 horas del  estudio, coincidiendo este resultado con el obtenido mediante el método  semicuantitativo AxSYM Cocaine Metabolite (FPIA), con el cual se pudieron  detectar variaciones de concentraciones de benzoilecgonina entre cada uno de los  voluntarios del estudio.</font></p>     <p align="justify"><b><font size="2" face="Verdana">RECOMENDACIONES </font></b> </p>     <p align="justify"><font size="2" face="Verdana">Considerando los resultados  obtenidos, se recomienda realizar estudios posteriores con la implementación de  métodos más específicos con la finalidad de encontrar parámetros que permitan  discriminar un individuos que haya ingerido infusión de té de coca, de un adicto  a la cocaína, en virtud que los métodos utilizados en este estudio piloto  proporcionan sólo resultados analíticos preliminares. A su vez, es importante  prevenir a los consumidores de té de coca sobre el riesgo de la detección  benzoilecgonina en su orina dentro de la primera a 48 horas de la ingesta, y las  implicaciones que trae consigo tales hallazgos de laboratorio. </font></p>     <p align="justify"><b><font size="2" face="Verdana">REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS </font></b></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(1) Alcaráz Del Castillo F,  zuazo J.¿Es posible diferenciar analíticamente un consumidor de coca de uno de  cocaína? Adicciones. 2005; 17(1):61-69. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238456&pid=S0798-0477201100010000300001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(2) Botero M. Embriaguez no  alcohólica. Enfoque medicoforense. En: Toxicología. Bogotá, Colombia: El Manual  Moderno, 2001, p. 413-432. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238457&pid=S0798-0477201100010000300002&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(3) Lizasoain I, Moro M.  Cocaína (I).Farmacología. Intoxicación aguda. En: Drogodependencias. Madrid,  España: Editorial Médica Panamericana.1998, p.113-122. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238458&pid=S0798-0477201100010000300003&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(4) Lizasoain I, Moro M.  Cocaína (II).Dependencia. Síndrome de abstinencia. En: Drogodependencias.  Madrid, España: Editorial Médica Panamericana. 1998, p.123-133. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238459&pid=S0798-0477201100010000300004&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(5) Usos y abusos de la coca.  Disponible en: <a href="http://www.apehcoca.org/index.php?option=com_content&task=view&id=58&Itemid=81"> http://www.apehcoca.org/index.php?option=com_content&amp;task=view&amp;id=58&amp;Itemid=81</a>&nbsp;  (Consultado el 04.10.09). </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238460&pid=S0798-0477201100010000300005&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(6) zabaleta, A, Castro de la  Mata R. Detección de metabolitos de cocaína en orina de consumidores de mate de  co - ca. Psicoactiva. 2001:19: 3-5. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238461&pid=S0798-0477201100010000300006&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(7) Bolo L, Ocampo P. Mate de  coca y episodio depresivo. Medicina naturista. 2004; 5: 223-232. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238462&pid=S0798-0477201100010000300007&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(8) Pérez T, Patiño N. Manual  para el análisis toxicológico en el laboratorio de urgencias. Bogotá, Colombia.  2009. p. 58-63. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238463&pid=S0798-0477201100010000300008&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(9) Lizasoain I, Moro M,  Lorenzo P. Cocaína: aspectos farmacológicos. Adicciones. 2002; 14 (1):57-64. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238464&pid=S0798-0477201100010000300009&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(10) Galassi F, Ramírez E,  Prada G. Comparación entre el con tenido de benzoilecgonina en orina de:  bebedores de te de hojas de coca y de coqueadotes con el de adictos. Universidad  Nacional Del Nordeste. Comunicaciones Cien tíficas y Tecnológicas, 2006. </font> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238465&pid=S0798-0477201100010000300010&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(11) Expósito de Goikoetxea CL.  Cromatografía en capa fina y espectrofotometría en luz ultravioleta: validez  actual y aplicabilidad para detectar cocaína o benzoilecgonina en orinas de  pacientes farmacodependientes en proceso de rehabilitación. Rev. Fac. Med. 2003;  26 (1):49-54. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238466&pid=S0798-0477201100010000300011&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(12) Comparación de  inmunoensayos para la medición semicuantitativa de la benzoilecgonina en la  orina. Disponible en: <a href="http://www.cij.gob.mx/Paginas/Menulzquierdo/.../Comparacion.pdf"> http://www.cij.gob.mx/Paginas/Menulzquierdo/.../Comparacion.pdf</a>&nbsp;  (Consultado el 13.11.09) </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238467&pid=S0798-0477201100010000300012&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(13) Tóxicos en orina. Disponible en: <a href="http://www.Aebm.org/Jornada/…/DROGAS%20DE%20ABUSO…pdf"> www.Aebm.org/Jornada/…/DROGAS%20DE%20ABUSO…pdf</a>&nbsp;&nbsp; </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238468&pid=S0798-0477201100010000300013&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(14) Ecgonina. De Wikipedia, la  enciclopedia libre. Disponible en: <a href="http://es.wikipedia.org/wiki/Ecgonina"> http://es.wikipedia.org/wiki/Ecgonina</a> . (Consultado el 15.03.10). </font> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238469&pid=S0798-0477201100010000300014&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(15) La cocaína y el deporte.  Efectos nocivos y aspectos psicológicos. Disponible en:&nbsp; <a href="http://www.portalesmedicos.com/publicaciones/articles/639/1/La-cocaina-y-el-deporte-Efectos-nocivos-y-aspectos-Psicologicos.html"> http://www.portalesmedicos.com/publicaciones/articles/639/1/La-cocaina-y-el-deporte-Efectos-nocivos-y-aspectos-Psicologicos.html</a>&nbsp;  . (Consulta - do el 10.11.09).</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238470&pid=S0798-0477201100010000300015&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(16) <a href="http://www.delisse.ec/coca_mate_de_coca_nasa_esh_20.htm"> http://www.delisse.ec/coca_mate_de_coca_nasa_esh_20.htm</a>&nbsp; (Consultado el  17.03.10). </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238471&pid=S0798-0477201100010000300016&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(17) Acu-check. Cocaína/Benzoilecgonina.  Prueba de un solo paso. Para Venezuela – Registro Sanitario No PMP- 10099. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238472&pid=S0798-0477201100010000300017&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(18) AxSym Cocaine Metabolite.  REF 3B24-20. Abbott Laboratorios. USA.2005. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238473&pid=S0798-0477201100010000300018&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(19) Introducción a los  Inmunoensayos. Disponible en: <a href="http://www.abbottdiagnostics.es/ciencia/pdf/1_d.pdf"> http://www.abbottdiagnostics.es/ciencia/pdf/1_d.pdf</a> -. (Consultado el  07.11.09). </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238474&pid=S0798-0477201100010000300019&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(20) Torres V, Casabó V, Sancho  V. Farmacocinética clínica. España: AFAHPE;1997. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238475&pid=S0798-0477201100010000300020&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(21) Kleinbaum D. Survival  Analysis: A self-learning Text. New York: Springer-Verlag, 1995. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238476&pid=S0798-0477201100010000300021&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(22) Hernández R.  Contribuciones al análisis estadístico: El Coeficiente de Validez de Contenido (Cvc)  y el Coeficiente Kappa, en la determinación de la validez de contenido según la  técnica de juicio de expertos. Universidad de los Andes, Mérida-Venezuela. 2002. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238477&pid=S0798-0477201100010000300022&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(23) Expósito C. Evaluación del  test rápido Ontrax Teststik para detectar cocaína y marihuana en muestras de  orina. Rev. Fac. Med. 2001; 24 (2): 157-162. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238478&pid=S0798-0477201100010000300023&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(24) Farmacocinética de la  cocaína: consideraciones para evaluar el uso de cocaína por medio del análisis  de orina. Disponible en: <a href="http://www.cij.gob.mx/paginas/Menulzquierdo/…Farmacocinética.pdf"> www.cij.gob.mx/paginas/Menulzquierdo/…Farmacocinética.pdf</a> . (Consultado el  15.03.10). </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238479&pid=S0798-0477201100010000300024&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font size="2" face="Verdana">(25) Ortega A. ¿Estaba  intoxicado por cocaína este individuo? (I): estimaciones basadas en la  farmacocinética de la droga. Cuadernos de Medicina Forense. 2003; 33:5-12. </font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=2238480&pid=S0798-0477201100010000300025&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> ]]></body>
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