Dr. Roald E. Gómez-Pérez
Universidad de Los Andes. Mérida. Venezuela
El análisis de semen es realizado para la evaluación de los trastornos de fertilidad con y sin síntomas de déficit de andrógenos. Se recomienda un período de abstinencia entre 3 a 5 días para la toma de muestra y análisis de la misma. La variabilidad normal de los parámetros para la potencial fertilidad debería basarse en al menos dos análisis de semen realizados en un intervalo de 4 a 12 semanas. El eyaculado debería ser obtenido en la clínica por masturbación en un envase de boca ancha y estéril. Examen físico:
El volumen del eyaculado es medido en un contenedor de vidrio graduado, debería tener un volumen de 2 a 6 ml. Un eyaculado normal tiene un color gris opalescente y se licua en 60 minutos a temperatura ambiente. Una apariencia amarilla y olor purulento indica infección, un color marrón – rojizo indica la presencia de hematíes, hematospermia.
]]>Si el pH excede 8, la infección debería ser sospechada, un pH bajo menor de 7,2 asociado a azoospermia indica malformación u obstrucción del epidídimo, conducto deferente, vesículas seminales o del conducto eyaculatorio.
Examen microscópico
La aglutinación espermática en la muestra de semen fresco es subjetiva de infertilidad inmunológica. Sin embargo, la adherencia de los espermatozoides a detritos celulares u otros elementos del eyaculado, no se considerada patológica.
La motilidad espermática es examinada en el examen de semen fresco e una magnificación de 400 – 600x. El examen debería ser realizado a una temperatura de ambiente de 37° C, a los 60 minutos después de la eyaculación. La clasificación de la motilidad se expresa acorde a la clase “a” hasta “d”, las cuales son definidas: a.- motilidad progresivamente rápida (> 25 mm/s), b.- motilidad progresiva lenta, c.- motilidad in situ (< 5 mm/s), d.- inmóviles.
La concentración espermática es determinada en una cámara de conteo (cámara de Neubauer). Según los parámetros de la OMS, la concentración debería estar en 20 millones de espermatozides por ml, con una concentración mínima total de 40 millones en un eyaculado. Por debajo de esta cifra se considera oligozoospermia. La azoospermia es la ausencia total de espermatozoides en el eyaculado examinado.
]]>La azoospermia debería ser confirmada por la ausencia de espermatozoides en el sedimento después de una centrifugación a alta velocidad del eyaculado.
Además de las células espermáticas, el eyaculado contiene células epiteliales del tracto urinario y las denominadas células redondas (células espermatogonias y leucocitos). La diferenciación entre estas células redondas es lograda por la tinción de peroxidasa, la cual colorea específicamente a los leucocitos. Otro marcador específico para leucocitos es la coloración de CD45.
La morfología espermática se examina en un preparado de semen fijado y coloreado con la técnica de Papanicolaou. El esperma normal tiene una cabeza de forma ovalada con una pieza media y cola intacta. El acrosoma debería ser claramente visible y cubrir del 40 al 70 % del área de la cabeza. Algunos espermatozoides tienen doble cabeza, formas irregulares de la cabeza ( cabeza oval pequeña y/o larga) denominadas como formas amorfas. La pieza intermedia y la cola también muestran defectos. El 30 % de los espermatozoides examinados deberían ser normales. Según los criterios de Kruger, el 14 % deberían ser normales.
Análisis bioquímico
Diferentes sustancias químicas son medidas en el líquido seminal, las cuales son secretadas por órganos específicos y estas sirven de marcador para su funcionabilidad. La determinación de estas sustancias permite establecer el nivel del trastorno. Así, la función prostática puede ser medida por la concentración de zinc, ácido cítrico y la fosfatasa ácida prostática. Las prostaglandinas y la fructosa son secretadas principalmente por las vesículas seminales. Una concentración baja de fructosa en el plasma seminal puede indicar agenesia bilateral o severa disfunción de las vesículas seminales u obstrucción del conducto eyaculador.
]]>La a-glucosidasa, la L-carnitina y la glicerolfosfocolina son marcadores del epidídimo. La a-glucosidasa tiene una sensibilidad y especificidad alta para función epididimaria. Una severa disminución de aglucosidasa en presencia de FSH normal y volumen testicular normal es un indicador de obstrucción epididimaria o del conducto deferente.
Otros análisis
CASA: la concentración espermática puede ser analizada automáticamente por un análisis espermático ayudado por computadora, siglas en inglés (CASA). La evaluación de la motilidad espermática es influenciada por la subjetividad del observador. Por lo que la utilización de un sistema computarizado permite una mayor objetividad de la misma. El sistema CASA es actualmente el mejor desarrollado, consiste en la colocación de una muestra de semen en un microscopio conectado a un sistema de computadora, la cual tiene un software para medir la movilidad de los espermatozoides. Este sistema permite medir la velocidad del espermatozoide, la linealidad y la amplitud del desplazamiento de la cabeza entre otros. Estos valores son altamente predictivos de la capacidad de fertilidad.
Test de vitalidad: Test de la solución hipoosmótica es un método para determinar la integridad de la membrana espermática de la cola del espermatozoide. Los espermatozoides son diluidos con una solución hipoosmótica y el agua entra a la célula. Un espermatozoide intacto se observa un englobamiento de la cola en diferentes tamaños. Este test sirve para diferenciar un espermatozoide vivo inmóvil de uno muerto.
Test de eosina se basa en que las células vivas rechazan la eosina, la membrana de espermatozoides muertos puede ser penetrada por ella y colorearlos.
]]>Con las nuevas técnicas de reproducción asistida (inyección espermática intracitoplasmática), las técnicas de vitalidad son necesarias para seleccionar un espermatozoide vivo, el cual puede ser usado para la fertilización.
Valores normales del espermograma según la OMS: Volume: 2 – 6 ml pH: 7,2 a 8
Concentración espermática: 20 x 106/ml
Concentración espermática total: 40 x 106
Motilidad a + b : 50 %
Morfología normal: 30 %
Viabilidad: 50%
Leucocitospermia: < 1 x 106
]]>Terminología básica:
Oligozoospermia: < 20 millones de espermatozoides por ml
Astenozoospermia: < 50% de espermatozoides con movilidad progresiva Teratozoospermia: < 30 % formas normales
Oligoastenoteratozoospermia (OAT): sumatoria de los tres trastornos anteriores Azoospermia: ausencia de espermatozoides en el semen Aspermia: no eyaculado Parvisemia: volumen del eyaculado < 2 ml
Referencias bibliográficas
1. WHO. Manual for the standardized investigation and diagnosis of the infertile couple. Cuarta edición. Panamericana 2001. [ Links ]
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2 Eckardstein S, cooper T, Rutsch H, Meschede D, Horst J, Nieschag E. Seminal plasma characteristics as indicators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator gene mutations in men with obstructive azoospermia. Fertil Steril 2000;73:1226-1231. [ Links ]
3 Pasqualotto F, Sharma R, Nelson D, Thomas A, Agarwal A. Relationship between oxidative stress, semen characteristics, and clinical diagnosis in men undergoing infertility investigation. Fertil Steril 2000;73: 459-464. [ Links ]
4 De Geyter C, De Geyter M, Koppers B, Nieschlag E. Diagnostic accuracy of computer-assisted sperm motion analysis. Hum Reprod 1998;13: 2512-2520. [ Links ] ]]>