Aislamiento de enterobacterias en la mosca común (Musca domestica) en Coro, estado Falcón, Venezuela

Palabras clave: Musca domestica, enterobacterias, aislamiento, foresis, Venezuela.

Las enfermedades diarreicas, especialmente la diarrea aguda o gastroenteritis aguda, son endémicas en los países del denominado Tercer Mundo, representando en la actualidad un grave y alarmante problema de salud pública, especialmente en la población infantil. Estas enfermedades constituyen la primera causa de mortalidad en el grupo etario por debajo de los 4 años, cuya tasa se estima en 3,3 millones/año para América Latina, África y Asia. Así mismo, a las enfermedades diarreicas se les considera uno de los principales factores que contribuyen a la desnutrición infantil y a la hospitalización (Bern et al., 1992; Podewils et al., 2004; Gadewar & Fasano, 2005; Petri et al., 2008). Venezuela no escapa a esta realidad, estimándose que ocurren más de un millón de casos anuales, con una media de 2,2 episodios/niño/año, siendo los rotavirus y las bacterias entéricas los principales agentes etiológicos involucrados (Urrestarazu et al., 1999; Rincón et al., 2002).

La avidez y atracción de las moscas sinantrópicas adultas y particularmente la mosca doméstica o común (Musca domestica L., 1758; Díptera: Muscidae), para alimentarse, mediante su aparato bucal lamedor-chupador, sobre una gran variedad de sustratos, incluyendo alimentos, basura y/o excretas, las ponen en contacto con agentes enteropatógenos, tales como virus, bacterias, protozoos y/o helmintos, de manera que pueden actuar como transportadores mecánicos o forentes de estos microorganismos patógenos (Manrique-Saide & Delfín-González, 1997). En este sentido, al ser insectos que tienen sus cuerpos cubiertos de pelos y cerdas, especialmente en sus patas, pueden a través de estas estructuras externas diseminar agentes entre los que se encuentran los potencialmente patógenos. Así mismo, en su anatomía interna las moscas tienen estructuras que contribuyen a transmitir elementos o factores contaminantes; en efecto, dentro de sus glándulas salivales, el tracto gastrointestinal y el sistema excretor pueden al menos permanecer viables numerosos tipos de organismos patógenos, que pueden diseminarse con sus vómitos, su saliva y sus excrementos (Manrique-Saide & Delfín-González, 1997; Bejar et al., 2006). Cabe destacar otros aspectos biológicos y ecológicos de M. domestica que le permiten un eficiente transporte mecánico de patógenos. Las hembras pueden vivir entre 15 a 25 días, y oviponen entre cinco y seis paquetes de huevos. Esta especie puede desarrollar varias generaciones de moscas anualmente, incluso en época de lluvia dentro de los recintos (e.g., domicilio humano, establos de animales). Otra característica resaltante de M. domestica es su habilidad para volar a distancia, reportándose registros individuales de hasta 20 millas, aunque generalmente vuelan 2 millas, lo cual es epidemiológicamente muy importante (Murvosh & Thaggard, 1966; Manrique-Saide & Delfín-González, 1997; Conn et al., 2007).

En la ciudad de Coro, enclavada en la zona semiárida del estado Falcón, en la región nor-occidental de Venezuela y sus alrededores, es común observar numerosas poblaciones de moscas de las familias Calliphoridae, Muscidae y Sarcophagidae, especialmente de M. domestica, y en particular en las cercanías de los mercados, expendios de comidas, viviendas, depósitos de basuras, incluyendo los de los hospitales y criaderos de animales en general, con mayor énfasis donde el manejo sanitario es inapropiado.

Siendo la mosca común una especie muscoide con un marcado grado de sinantropia, adaptada a las condiciones del medio ambiente humano, el presente trabajo tuvo como objetivo detectar la presencia de enterobacterias potencialmente patógenas para el humano, en adultos de M. domestica recolectados en la ciudad de Coro, estado Falcón, Venezuela.

El estudio descriptivo transversal se realizó entre Enero y Mayo de 2006, en la ciudad Coro 11°24´N; 69°40´O), estado Falcón, en la región semiárida septentrional de Venezuela. La zona posee características bioclimáticas correspondientes al monte espinoso tropical (MET) (Acosta et al., 2002). Se realizaron capturas de adultos de M. domestica con mallas entomológicas, en tres sitios: como referencia para la búsqueda de posibles fuentes de contaminación comunitaria y nosocomial de las moscas, se escogieron el mercado municipal (N=10) y el hospital universitario "Alfredo Van Grieken" (HUAV) (N=10) respectivamente; mientras que el basurero municipal (N=10) se eligió como posible fuente de contaminación intradomiciliar, ya que en éste se encuentra ubicado el barrio "Las Tenerías", en las afueras de la ciudad de Coro. La distancia entre el basurero municipal y los restantes sitios de captura es de alrededor de 7-8 kilómetros, mientras que entre el mercado municipal y el HUAVG es de aproximadamente 1,5 kilómetros. Una vez capturadas, las moscas se transportaron inmediatamente dentro de bolsas plásticas estériles para ser procesadas el mismo día. Para el análisis bacteriológico, cada ejemplar fue sumergido sin macerarse, bajo condiciones de esterilidad en campana de cultivo ad hoc, individualmente dentro de medios de cultivo de enriquecimiento: primero en caldo selenito, y luego en otros como agar Infusión Cerebro Corazón, los cuales fueron incubados aeróbicamente en estufa a 37ºC por 24- 48 horas, hasta la observación del crecimiento bacteriano. Una vez concluido este proceso, las moscas se descartaron. Posteriormente, se tomaron muestras de las diferentes colonias de los medios iniciales, y se resembraron con un asa redonda mediante la técnica por agotamiento en medios de cultivo selectivos y diferenciales, incluyendo agar-Levine, agar Salmonella-Shigella y agar XLD. Estos cultivos fueron incubados por 24 horas a 37°C. Seguidamente, cada colonia se resembró en agar nutritivo para su identificación específica, siguiendo los procedimientos bioquímicos convencionales para el diagnóstico bacteriológico, que incluyeron agar TSI para observar la fermentación de azúcares (glucosa, lactosa y sacarosa), la producción de H2S y gas; agar SIM para detectar motilidad, presencia de H2S e indol; agar-Citrato como fuente única de carbohidrato, y agar-Urea para estimar la actividad ureásica (Prescott et al., 2000; Jawetz et al., 2005).

El análisis bacteriológico de 30 ejemplares adultos de M. domestica capturados en tres ambientes diferentes (mercado municipal, HUAV y basurero municipal) de la ciudad de Coro, estado Falcón, Venezuela, reveló la presencia de diez especies de bacterias aeróbicas Gram-negativas pertenecientes a seis géneros de la familia Enterobacteriaceae, incluyendo Enterobacter, Escherichia, Pantoea, Proteus, Morganella y Providencia. Además, se logró aislar bacilos Gram negativos no fermentadores que no pudieron ser identificados por no contar con los medios ad hoc (Tabla I). De los 30 ejemplares de moscas sembrados, tan sólo 1 (3,33%) capturado en el HUAV no presentó contaminación bacteriana, para una efectividad en el aislamiento del 96,67% (29/30). Tal como se aprecia en la Tabla I, P. agglomerans (30%: 9/30), P. mirabilis (23,33%: 7/30) y E. cloacae (16,67%: 5/30) fueron las especies bacterianas más frecuentemente aisladas. Cuando se hace el análisis por sitio de captura, se tiene que se ha logrado aislar e identificar siete especies de enterobacterias en las moscas capturadas en los alrededores del HUAV, presentando P. agglomerans y P. mirabilis los mayores porcentajes de aislamientos con 50 y 40%, respectivamente. Por otra parte, en los otros dos sitios muestreados (mercado municipal y basurero municipal) se detectaron seis especies de Enterobacteriaceae en cada uno de ellos (Tabla I). Es importante resaltar que E. coli y P. alcalifaciens sólo se aislaron en el mercado municipal y basurero municipal, respectivamente, presentando P. alcalifaciens la mayor frecuencia (40%) en este último sitio señalado; estos resultados se muestran en la Tabla I.

En la actualidad se ha reportado la existencia de aproximadamente 350 especies de moscas de 29 familias de dípteros que potencialmente se encuentran asociadas con la transmisión mecánica o foresis de agentes infecciosos potencialmente patógenos, incluyendo bacterias, virus, protozoarios y/o helmintos, especialmente aquellos donde se encuentran involucrados alimentos (Graczyk et al., 2003, 2005).

Las enterobacterias detectadas en el presente estudio en moscas de Coro frecuentemente habitan en el tracto digestivo del humano sin causar generalmente efectos patológicos aparentes de consideración, así como también en el de varios tipos de insectos, que incluyen las moscas y particularmente M. domestica (Manrique-Saide & Delfín-González, 1997; Jawetz et al., 2005; Bejar et al., 2006). Sin embargo, es necesario aclarar que el simple hallazgo o aislamiento de un microorganismo patógeno o no, en un insecto en un área determinada tan sólo podría ser un indicativo de "presencia/ausencia", y no necesariamente implica que el artrópodo lo está transmitiendo (Richards et al., 1961; Manrique-Saide & Delfín-González, 1997; Bejar et al., 2006). Por lo tanto, tal como lo indican Bejar et al. (2006): "debe demostrarse la transmisión, la consistencia de la transmisión y su relación poblacional". Por otra parte, la sola presencia de moscas ciclorrafas como M. domestica y de enterobacterias en su cuerpo, son un tácito indicativo de insalubridad en esos lugares al existir materia orgánica en descomposición o fermentación (e.g., heces, alimentos, carroñas) que utilizan para alimentarse tanto imagos como larvas, siendo por lo tanto una fuente potencial de contaminación (Manrique-Saide & Delfín-González, 1997; Bejar et al., 2006).

Se debe resaltar la importancia del aislamiento de E. coli en 1 adulto de M. domestica que pululaba en el mercado municipal de Coro, donde existen numerosos puestos de ventas de productos alimenticios, incluyendo los de comidas preparadas y los denominados de "comida rápida" (e.g., hamburguesas, perros calientes). Es bien conocido la capacidad de esta bacteria para producir diarrea con sangre o no, especialmente en niños, y el síndrome hemolítico-urémico, clasificándose las diferentes cepas en: enterotoxigénica (ETEC), enteropatógena (EPEC), enteroagregante (EAEC), enteroinvasiva (EIEC) y enterohemorrágica (cepa 0157:H7); otros investigadores han aislado esta bacteria de M. domestica, la cual es capaz de transportarla hacia los alimentos, particularmente la cepa enterohemorrágica 0157:H7 (Kobayashi et al., 1999; Sasaki et al., 2000; Leotta et al., 2008). Más aún, Kobayashi et al. (1999) proponen el término de "transmisión biomejorada" (bioenhanced transmission) para la diseminación de la cepa 0157:H7 por parte de la mosca doméstica, esto en virtud de que estos investigadores detectaron que esta cepa bacteriana se reproduce y persiste en las partes bucales y el divertículo del insecto, por lo que no la consideran "un simple transportador mecánico" del patógeno.

Hasta donde se ha podido indagar, en el HUAVG de la ciudad de Coro E. coli es la especie bacteriana más frecuentemente aislada en pacientes de diferentes grupos etarios con infecciones urinarias y diarreicas (Del Moral & Saúl: com. pers.); particularmente en laboratorios clínicos privados se ha registrado la cepa EPEC de esta enterobacteria, a partir de neonatos con episodios de diarrea (Acurero: com. pers.). Sin embargo, se necesitan estudios bacteriológicos más amplios y detallados para demostrar cuáles de las formas patogénicas de la bacteria se encuentran circulando en las moscas de la ciudad de Coro, estado Falcón, Venezuela.

Es relevante el hecho de haberse detectado enterobacterias Gram negativas oportunistas de individuos inmunosuprimidos, incluyendo E. cloacae, E. gergoviae, E. aerogenes, P. agglomerans y M. morganii, de interés nosocomial en las moscas capturadas en el HUAV de la ciudad de Coro, estado Falcón, Venezuela, las cuales también se han aislado en pacientes de este recinto hospitalario, siendo las más prevalentes, al igual que en los ejemplares de M. domestica analizados, P. mirabilis y P. agglomerans (Del Moral & Saúl: com. pers.). Las especies del género Enterobacter están consideradas como las causas más importantes de infecciones nosocomiales en los últimos años, que incluyen cuadros fatales de meningitis (Sanders & Sanders, 1997; Foster & Rhoney, 2005; Benca et al., 2007; Singhi et al., 2008). En este sentido, es bien conocido que muchas infecciones y bacteriemias debidas a E. cloacae se han adquirido a nivel nosocomial, a través de infecciones del tracto genito-urinario, respiratorio, heridas y ambientes quirúrgicos. A E. cloacae se le considera responsable del 65-75% de todas las infecciones debidas al género, y de 5-10% de todos los casos de sepsis ocasionadas por bacterias gram-negativas, en las cuales puede presentarse el deceso del individuo (Lee et al., 2002; Lin et al., 2006; Juanjuan et al., 2007; John et al., 2008). Similarmente, E. gergoviae, E. aerogenes han estado involucradas en infecciones nosocomiales (Ganeswire et al., 2003; Foster & Rhoney, 2005; Ribas et al., 2007). Otros investigadores igualmente han detectado bacterias del género Enterobacter tanto en moscas como en otros artrópodos, en sitios donde se brinda atención médica (Srámová et al., 1992).

Pantoea agglomerans, anteriormente colocada en el género Enterobacter, es una Enterobacteriaceae aislada con mucha frecuencia de plantas, incluyendo sus frutos y semillas, en las que puede encontrarse como patógeno o comensal, aunque también se puede detectar en heces (Monier et al., 2005). Su elevada frecuencia en las moscas evaluadas, especialmente en las del HUAVG, puede interpretarse como indicativo de presencia de sustratos, especialmente de origen vegetal (e.g., féculas, frutas), en descomposición y fermentación. Se le considera un patógeno oportunista que afecta personas inmunocomprometidas, las cuales al pincharse con astillas de plantas les afecta las articulaciones, produciendo artritis séptica, sinovitis, osteitis; también ocasiona bacteriemia, colecistitis e infecciones urinarias (Cruz et al., 2007). Como ya se indicó, su elevada presencia tanto en las moscas capturadas como en las infecciones de pacientes del HUAVG, justifica un estudio más detallado para aclarar su posible transporte vectorial, debido a que esta bacteria también puede ser vehiculizada por el agua y los alimentos (Cruz et al., 2007).

En lo referente a las enterobacterias aisladas en las moscas capturadas en el mercado y basurero municipales, es oportuno destacar la presencia de P. rettgeri, que también es considerada como una enterobacteria oportunista de interés nosocomial, y recientemente se la ha involucrado, al igual que P. alcalifaciens, en casos de diarrea de viajeros (Yoh et al., 2005). De acuerdo a datos suministrados en laboratorios privados de Coro (Acurero: com. pers.), M. morganii, la cual también se aisló en las moscas del basurero municipal, ha sido detectada de pacientes pediátricos como su única causa de diarrea; de allí que no debería subestimarse su potencialidad etiológica en este tipo de patologías.

Siendo la sola presencia de moscas un indicativo tácito de las condiciones de insalubridad de un local o área, y a la luz de las evidencias presentadas en el presente estudio, donde se demuestra el aislamiento de enterobacterias en ejemplares adultos, se sugiere que M. domestica podría estar involucrada en la transmisión mecánica de bacterias potencialmente patógenas en ambientes hospitalarios, de ventas de alimentos y residenciales de la ciudad de Coro, estado Falcón, Venezuela. Ante la potencialidad que posee M. domestica para transportar agentes bacterianos, se necesita realizar campañas sanitarias para reducir y controlar sus poblaciones en aquellas áreas donde los habitantes de la ciudad de Coro se alimentan, viven y se desenvuelven, especialmente en los ambientes donde se detectaron bacterias entéricas de interés nosocomial. Así mismo, se requieren realizar estudios prospectivos de vigilancia epidemiológica para determinar, antes y después de la aplicación de los planes de control, la importancia real de las moscas en la diseminación directa de los agentes bacterianos patógenos.

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