Proliferation of Trypanosoma cruzi in the peritoneal membrane and ascitic liquid of mice with acute infection
Ana Lugo de Yarbuh1, Karina Cáceres1, Deisy Sulbarán1, Sonia Araujo1, Elio Moreno1, Hernán José Carrasco2, Cesare Colasante3, Nora Mogollón1 & Maritza Alarcón*1
1 Laboratorio de Parasitología Experimental, Facultad de Ciencias, Universidad de Los Andes, Mérida, Venezuela.
2 Laboratorio de Biología Molecular de Protozoarios, Instituto de Medicina Tropical, Facultad de Medicina, Universidad Central de Venezuela, Caracas, Venezuela.
3 Laboratorio de Fisiología de la Conducta, Facultad de Medicina, Mérida, Venezuela.
*Autor de correspondencia: amaritza@ula.ve
RESUMEN
En este estudio fue analizada la parasitemia y el parasitismo en el líquido ascítico (LA), membrana peritoneal (MP) y en otros tejidos de 40 ratones machos NMRI durante la infección aguda. Los ratones (20 ratones por grupo) fueron inoculados por vía intradérmica con tripomastigotos metacíclicos linaje T.cr I de las cepas P6 y P11 obtenidos de Rhodnius prolixus. Formas delgadas y gruesas de tripomastigotos fueron encontradas en la sangre de todos los ratones. En los ratones infectados con la cepa P6 los tripomastigotos aparecieron primero en el LA a los 13 días pi y en la sangre a los 18 días pi, en los ratones infectados con la cepa P11 los parásitos se observaron primero en la sangre a los 15 días pi y en el LA a los 22 días pi. Los ratones desarrollaron emaciación, disnea, hirsutismo, pérdida de la actividad motora de las patas posteriores y hepatoesplenomegalia. Los ratones fueron sacrificados a los 39 días pi. El estudio histológico mostró que T. cruzi prolifera formando nidos de amastigotos y tripomastigotos en la MP. Los parásitos también fueron encontrados en el músculo esquelético y en el corazón de los ratones infectados con la cepa P6. La inmunotinción con PAP reveló antígeno de T. cruzi en las secciones de esófago, estómago, intestino delgado y grueso, bazo, riñón, hígado, próstata y pene de los ratones. Estos resultados confirmaron que las cepas P6 y P11 desarrollaron anormalidades histopatológicas en el tracto gastrointestinal, renal y órgano reproductivo. La localización intra-peritoneal de los parásitos y la acumulación de fluido peritoneal, reveló ascitis y peritonitis causada por el incremento de líquido en la cavidad peritoneal y destrucción del tejido peritoneal de los ratones. El presente estudio reporta por primera vez la proliferación de tripomastigotos en la cavidad peritoneal cinco días antes de encontrarse en la sangre periférica para la cepa P6 causando daño intraperitoneal y muerte del modelo murino utilizado.
Palabras clave: Trypanosoma cruzi, ratones, membrana peritoneal, ascitis, peritonitis
]]> SUMMARYIn this study we analyzed the parasitemia and parasitism in the ascitic fluid (AF), peritoneal membrane (PM) and in other tissues of 40 NMRI male mice during acute infection. Mice (20 mice per group) were inoculated by intradermal route with metacyclic trypomastigotes T.cI lineage of P6 or P11 strains obtained from Rhodnius prolixus. Slender and stout forms were observed in the blood of all mice. In infected mice with P6 strain the trypomastigotes were observed first in the AF at day 13 pi and in blood at day 18 pi. Meanwhile in infected mice with P11 strain trypomastigotes were observed first in the blood at day 15 pi and in the AF at day 22 pi. Infected mice showed emaciation, dyspnea, bristled hair, loss of motor activities in the rear limbs and hepatosplenomegaly. Mice were sacrificed at day 39 pi. Histological finding indicated that T. cruzi proliferates forming amastigotes and trypomastigotes nests in the PM. Parasites were also observed in skeletal muscle of the mice and in the heart of infected mice with P6 strain. Imunostaining with PAP revealed T. cruzi antigen in esophagus, stomach, thin and thick intestine, spleen, and kidney, liver, prostate and penis. The results show that P6 and P11 colonized and produced abnormalities in the gastrointestinal tract, renal and reproductive organs. Intra-peritoneal localization of parasites and accumulation of peritoneal fluid, revealed ascites and peritonitis caused by increase of fluid in the peritoneal cavity and destruction of the membrane peritoneal of the mice. This study reports for the first time the proliferation of trypomastigotes in the peritoneal cavity five days earlier than in peripheral blood for the P6 strain causing intra-peritoneal damage and death in the murine model used.
Key words: Trypanosoma cruzi, mice, peritoneal membrane, ascites, peritonitis
Recibido el 27/06/2013 Aceptado el 15/11/2013
INTRODUCCIÓN
La enfermedad de Chagas es causada por el protozoario flagelado Trypanosoma cruzi (Chagas, 1909), a través de la contaminación con excretas infectadas de insectos triatominos hematófagos, infectando a mamíferos entre los cuales se incluyen al humano y a otros animales silvestres y domésticos. Se le considera una de las parasitosis tropicales de mayor importancia en América Latina y se estima que cerca de 20 millones de personas se encuentran infectadas y de 2 a 3 millones son chagásicos crónicos (OPS, 2010).
Esta forma de transmisión vectorial en áreas rurales se alterna con otras formas de transmisión favorecida por las migraciones internas de la población hacia áreas urbanas, donde el contagio por T. cruzi puede ocurrir también a través de transfusiones sanguíneas, transplacentaria y con menor frecuencia por ingestión de alimentos contaminados (Dao, 1949; Díaz Bello et al., 2008; Alarcón de Noya et al., 2010).
En Venezuela la enfermedad de Chagas prevalece en aproximadamente 7 millones de personas que viven en sectores rurales montañosos de la región centro occidental así como, en las regiones oriental y central del país donde la población está en estrecho contacto con Rhodnius prolixus principal vector intradomiciliario y ocasionalmente con Panstrongylus geniculatus y Triatoma maculata (Feliciangeli et al., 2004; Serrano et al., 2008; Morocoima et al., 2008; Bonfante-Cabarcas et al., 2011).
Es importante señalar que la migración humana desde la región de los Llanos y Andina del país con alta prevalencia para la enfermedad de Chagas hacia sectores urbanos, ha favorecido la diseminación de T. cruzi hacia las zonas urbanas (Rodríguez-Bonfante et al., 2007; Alarcón de Noya et al., 2010; Carrasco et al., 2012).
Los estudios sobre el comportamiento de T. cruzi en humanos y otros mamíferos han mostrado, variadas manifestaciones clínicas asociadas al potencial patógeno y al tropismo diferencial de los diversos genotipos del parásito que estén circulando (Breniére et al., 2012).
]]> La patogenicidad de T. cruzi también se encuentra asociada a sus numerosas características metabólicas diferenciales y a la estructura antigénica que puede expresar frente a hospedadores con condiciones genéticas propias y un sistema inmunológico establecido (Pedreira de Castro & Brener, 1985).Las cepas de T. cruzi poseen potencial de invadir y lesionar los tejidos con diferente intensidad causando variada reacción inflamatoria. En este sentido, los estudios sobre el tropismo y grado de patogenicidad de cepas de T. cruzi en modelos experimentales, han revelado que algunas cepas tienden a diseminarse en casi todos los tejidos (Galaviz et al., 1992; Paredes et al., 2009). La marcada heterogeneidad de algunas cepas de T. cruzi explicarían el fenómeno de paninfectividad (Lenzi et al., 1996; Andrade, 2000).
En los modelos de laboratorio se ha observado que cuando ocurre la deposición de las heces contentivas de las formas infectantes o tripomastigotos metacíclicos sobre sus hospedadores mamíferos, los parásitos se diseminan hacia tejidos tales como el miocardio, esófago, colon, hueso y cartílago y dependiendo del caso, puede invadir la placenta, los fetos y plasma seminal de ratones con infección aguda (Moreno et al., 2003; Morocaima et al., 2006; Lugo de Yarbuh et al., 2010; Sulbarán, 2011; Alarcón et al., 2011; Cáceres, 2011). Debido a la diversidad de poblaciones naturales del parásito que se encuentran circulando, es necesario profundizar en estudios que vinculen el comportamiento biológico de las cepas de T. cruzi, con las manifestaciones clínicas, evolución de la parasitemia y tropismo tisular.
En el presente estudio evaluamos la infección aguda en ratones mediante el curso de la parasitemia patente, parasitismo en los tejidos y la patología chagásica causada por dos cepas de T. cruzi, aisladas del foco epidemiológico surgido en Chichiriviche, Estado Vargas, usando como fuente de infección tripomastigotos metacíclicos obtenidos de aislados mantenidos en vectores experimentales.
MATERIALES Y MÉTODOS
Parásitos
Se utilizaron dos cepas de T. cruzi, M/HOM/ VE/2009/P6 y M/HOM/VE/2009/P11 aisladas de dos casos agudos humanos procedentes de Chichiriviche de la Costa en el Estado Vargas, Venezuela y mantenidas en R. prolixus en el laboratorio LAPEX de la Universidad de Los Andes.
Caracterización fenotípica de los aislados P6 y P11 (RAPD)
Se realizó la extracción de ADN de T. cruzi de las cepas P6 y P11 mantenidas en el medio NNN con el Kit Nucleón BACC2 (Amersham-Pharmacia) y luego fue seguida la cuantificación de ADN a longitudes de onda de 260-280λ. La ampliación aleatoria del ADN polimórfico (RAPD) se realizó usando el primer A2 y la comparación de ADN con bandas características de la cepa de referencia internacional WA250 c11OB representativa del genotipo TcI. El patrón de las bandas del ADN de T. cruzi de los aislados P6 y P11 fueron comparadas con las cepas de referencia para TcI y TcIII (Carrasco et al., 1996).
Obtención de tripomastigotos metacíclicos de Rhodnius prolixus
]]> Se utilizaron dos grupos de 20 ninfas de R. prolixus de IV estadio obtenidas del Insectario de cría "Dr. Herman Lent" del Departamento de Biología, Facultad de Ciencias de la Universidad de Los Andes. Los triatominos fueron alimentados hasta la repleción sobre dos grupos de ratones machos NMRI infectados con las cepas P6 y P11 de T. cruzi respectivamente. A los 30 días de la ingesta sanguínea las ninfas infectadas fueron nuevamente alimentadas sobre ratones sanos y una vez ingurgitadas el contenido intestinal de cada ninfa fue recolectado, mezclado y homogenizado con solución fisiológica. Las muestras de heces fueron examinadas al microscopio con aumento de 400X a fin de obtener un inoculo de 2x104 tripomastigotos en 0,1 mL de suspensión (Brener, 1962).Infección experimental de los ratones
Se utilizaron 40 ratones machos NMRI de 20 gr de peso y dos meses de nacidos separados en dos grupos de 20 ratones cada uno. Los animales fueron ligeramente anestesiados e inyectados por vía intradérmica (id) en la cara interna de la pata posterior derecha con un inóculo de 2x104 tripomastigotos metacíclicos de T. cruzi obtenidos de heces de ninfas de R. prolixus infectadas con las cepas P6 y P11 respectivamente. Diez (10) ratones sanos controles fueron inyectados por la vía id con 0,1 mL de solución salina. Los animales fueron mantenidos en el Bioterio bajo condiciones controladas de temperatura (22±20C), humedad relativa (54% ±5%) y alimentadas con Ratarina(R) y agua ad libitum.
Determinación de la parasitemia
El curso de la infección fue seguido interdiariamente entre 4 y 36 días post-inoculación (pi), mediante el examen directo de muestras de sangre periférica extraídas de la porción distal de la cola de cada ratón, colocada en láminas portaobjeto y cubierta con cubreobjetos. El recuento de tripomastigotos se realizó en 100 campos microscópicos a 400X (Leica DM 500) (Brener, 1962).
Identificación de parásitos en el líquido ascítico (LA) y células inflamatorias
Para la detección de formas flageladas de T. cruzi en la cavidad peritoneal, las muestras de LA fueron obtenidas interdiariamente a partir del día 4 pi. Para tal fin los ratones fueron inyectados en la cavidad peritoneal con 300 μL de solución fisiológica estéril y cinco minutos después de la inyección se extrajeron muestras de 50 μL de LA de cada ratón infectado con las cepas P6 y P11 respectivamente. El número de tripomastigotos fue estimado en muestras de 5 μL de LA coloreadas con Giemsa al 20 % en un aumento de 40X, las células inflamatorias también fueron identificadas en las muestras de LA coloreadas con Giemsa al 20% (Araujo et al., 2011).
Parasitismo tisular en los ratones infectados
A los ratones que sobrevivieron hasta los 39 días pi previa anestesia con cloroformo se les extrajeron los órganos. Las muestras de membrana peritoneal, músculo esquelético, corazón, pulmón, esófago, estómago, intestino delgado y grueso, riñón, hígado, bazo, ganglio poplíteo, vejiga, testículo y pene fueron fijadas con formalina neutra a los 10%, deshidratadas e incluidas en Paraplast (Monoject Scientific, St. Louis MO, USA). Los cortes de 7μm de espesor se colorearon con Hematoxilina y Eosina.
Análisis inmunohistoquímico para la detección de anticuerpos anti-T. cruzi en muestras de tejidos de ratones infectados
]]> A 4 conejos machos de 2 Kg de peso se les inyectó por vía id una mezcla de 0,5 mL de suspensión de antígeno de T. cruzi de las cepas P6 y P11 (1.500 μg de proteínas/mL) y 0,5 mL de adyuvante incompleto de Freund's (2 conejos por cada cepa). Posterior a la inoculación con 4 dosis del antígeno, se determinó el título de anticuerpos (Ac) mediante inmunofluorescencia indirecta (Camargo, 1966). El suero de conejo anti-T. cruzi con nivel de Ac superior a 1:2048 fue utilizado.Para el análisis inmunohistoquímico con Peroxidasa-antiperoxidasa las secciones de tejidos de 7 mm de espesor fueron desparafinadas, hidratadas, tratadas con H2O2 al 3% en metanol, lavadas con PBS a pH 7,2, incubadas con suero normal de carnero diluido 1:32 con PBS, suero de conejo anti-T. cruzi diluido 1:100 en PBS y con suero anti-conejo-IgG-Peroxidasa (Sigma Aldrich, St. Louis, USA) diluido 1:200 con PBS. Las muestras se revelaron con 3,3-Tetrahidrocloruro de Diaminobencidina (DAB), se lavaron con PBS, se contra colorearon con Hematoxilina de Mayer y se cubrieron con Mar-tex y cubreobjetos. La intensidad del parasitismo tisular fue revelada mediante la identificación de antígeno de T. cruzi de color marrón en los tejidos afectados (Sell & Burton, 1981).
Análisis estadístico
Se utilizó el test de Wilcoxon en el análisis estadístico no paramétrico para comparar los valores promedios de parasitemia patente entre las muestras de sangre y entre el número promedio de tripomastigotos en el LA de los ratones infectados con las cepas P6 y P11 respectivamente. Se consideró un nivel de significancia del 95% (Martín & del Castillo, 2004).
Consideraciones éticas
Los animales experimentales fueron tratados según las normas establecidas por el Comité de Bioética del Fondo Nacional de Ciencias y Tecnología en su capítulo 2 y Bioética animal en Venezuela (De Jesús, 2002).
RESULTADOS
Durante el curso de la infección aguda se observó parasitemia patente y tripomastigotos en el LA de los ratones. El 80% (16/20) y el 76% (15,2/20) de los ratones infectados con las cepas p6 y P11 respectivamente sobrevivieron hasta los 39 días pi.
En los ratones infectados con la cepa P6, los tripomastigotos aparecieron primero en el LA a los 13 días pi con promedio inicial de parasitemia de 2,7x103±1,8x103 tripomastigotos alcanzando nivel máximo de 5,9x105±4,1x105 tripomastigotos a los 32 días pi. En la sangre periférica los tripomastigotos delgados y gruesos fueron detectados a los 18 días pi con promedio inicial de parasitemia de 3,4x103±2,7x103 tripomastigotos y nivel máximo de 2,3x105±1,9x105 tripomastigotos a los 27 días pi. Las muestras de sangre y de LA fueron negativas a los 39 días pi (Fig. 1). La mortalidad registrada de los ratones infectados con la cepa P6 fue del 20% (4/20).
Las formas delgadas y gruesas de tripomastigotos en la sangre y las formas gruesas de tripomastigotos en el líquido ascítico de los ratones infectados con las cepas P6 y P11 respectivamente se observan en las Figs. 3 y 4.
Las comparaciones (Test de Wilcoxon) de los valores promedios de tripomastigotos en la sangre de los ratones infectados con las cepas P6 y P11 mostraron diferencias significativas (P=0,0426), la comparación entre los valores de tripomastigotos en el LA de los ratones resultó no significativa (P=0,769).
Histopatología
En las secciones de MP de los ratones infectados con la cepa P6 de T. cruzi, se observaron nidos de amastigotos y de tripomastigotos, pérdida en la continuidad del tejido peritoneal y presencia de infiltrado inflamatorio celular mononuclear y polimorfonuclear (Figs. 5A y 5B).
En la MP de los ratones infectados con la cepa P11 se observaron nidos de amastigotos, destrucción del tejido peritoneal e intenso infiltrado celular inflamatorio (Fig.5C).
]]> La infección con T. cruzi en ambos grupos de ratones también afectó el tejido muscular esquelético encontrándose nidos de amastigotos en el músculo de los ratones infectados con la cepa P6 y nidos de tripomastigotos en la fibra muscular esquelética de los ratones infectados con la cepa P11 (Fig. 6).Los nidos de amastigotos en el tejido cardíaco solo se observaron en los ratones infectados con la cepa P6. La intensidad del parasitismo y de infiltración tisular producida en los ratones infectados con las dos cepas de T. cruzi se muestran en la Tabla I. 
El análisis inmunohistoquímico de los tejidos en ambos grupos de ratones infectados reveló la presencia de antígeno de T. cruzi en las secciones de bazo, riñón, hígado, estómago, intestino delgado y grueso, pulmón, vejiga, testículo y pene (Tabla I)
DISCUSIÓN
El análisis del comportamiento biológico de las cepas de T. cruzi estudiadas mostró que las cepas P6 y P11 resultaron ser altamente virulentas, generando elevada parasitemia y desarrollo de parasitismo en la cavidad intra-peritoneal del modelo murino utilizado.
Las cepas desarrollaron elevada parasitemia patente y un dimorfismo con presencia de formas delgadas y gruesas en la sangre periférica de los ratones similar a otras cepas de T. cruzi de Venezuela y de otros países (Herrera et al., 2003; Suárez, 2009; Berrizbeitia et al., 2010).
Algunos autores han señalado que las cepas pleomórficas con predominio de formas delgadas, causan elevadas parasitemias y tropismo diferencial del parásito por células de defensa mononucleadas, parasitando más frecuentemente los macrófagos del bazo y del hígado y con mayor capacidad de invasión tisular y susceptibilidad a los anticuerpos. En este sentido la diferencia en cuanto a la severidad de la enfermedad en humanos y otros mamíferos se ha atribuido al pleomorfismo natural que presenta T. cruzi demostrado en los estudios biológicos, bioquímicos y moleculares (Brener, 1969; de Scorza et al., 1989; Magalhaes et al., 1996; Suárez et al., 2009; Rimoldi et al., 2012).
Otras investigaciones consideran la incapacidad de la forma delgada para invadir una nueva célula después de su liberación del pseudoquiste, mientras que las formas gruesas muestran marcado tropismo por las fibras musculares y el tejido glandular dependiendo de la fuente de la cepa y de la fase de infección en el hospedador (Campos & Andrade, 1996; Tyler & Engman, 2001).
Más específicamente es de destacar que con la metodología utilizada se detectaron tripomastigotos en la cavidad peritoneal cinco días antes de encontrarse en la sangre periférica para la cepa P6, hecho que no ha sido descrito en los estudios de la enfermedad de Chagas. La literatura señala que distintas cepas de T. cruzi altamente invasivas se diseminan por el torrente sanguíneo a los distintos órganos y tejidos, generando eventos inmunológicos y marcado tropismo y patogenicidad del parásito (Moreno, 1983; Alarcón et al., 2006). El registro de localización peritoneal de formas flageladas lo refirieron en México Martínez & Martín en 1981 en ratones infectados con T. cruzi aislado de Triatoma phyllosoma. Recientemente en Venezuela fue reportada la proliferación de tripomastigotos en el fluido ascítico de ratones con infección aguda producidas por diferentes cepas de T. cruzi (Araujo et al., 2011).
]]> Los resultados obtenidos en el presente estudio sugieren que el tropismo de T. cruzi procedente de la cepa P6 con alta eficiencia multiplicativa inicial en el LA y luego en la sangre del 100% de los ratones, pudiera asociarse con propiedades como la virulencia de las cepas, lo que depende en gran medida del comportamiento biológico de los parásitos y de la respuesta fisiológica e inmunológica del hospedador (Deane et al., 1984; Atwood et al., 2005).La infección de la membrana peritoneal por dos cepas de T. cruzi en los ratones, pudiera relacionarse también con la exposición previa al sistema inmunológico del hospedador en donde el parásito induce una respuesta que conduce a un estado de inmunosupresión humoral y celular y mecanismo de evasión del complemento, respuestas que disminuyen con el tiempo generando una persistencia y cronicidad parasitaria (Macedo et al., 2002; Tapia et al., 2012; Haberland et al., 2012).
La diseminación de los parásitos hacia la cavidad peritoneal y la formación de nidos de amastigotos, la forma multiplicativa de los parásitos y de tripomastigotos en la membrana peritoneal condujeron a la desorganización estructural de la MP, favoreciendo la ascitis por acumulación anormal de fluido en la cavidad peritoneal y peritonitis por inflamación del peritoneo.
Estas patologías solo han sido descritas en pacientes humanos inmunosuprimidos por efectos del SIDA que han sufrido reactivación de la infección chagásica acompañada de alta parasitemia, con tripomastigotos en el fluido pleural y desarrollo de peritonitis espontánea, quizás debido a una efusión pleural sufrida por el paciente (Iliovich et al., 1998; Menghi et al., 2011).
En este sentido consideramos importante señalar que la preferencia de T. cruzi de la cepa P6 hacia la cavidad peritoneal y luego a la sangre circulante, es un comportamiento que no ha sido antes señalado y requiere ser estudiado, a fin de comprender los factores que regulan la proliferación de formas del parásito en la patogénesis de la infección por T. cruzi (Deloris et al., 2003).
La aparición de los tripomastigotos en la sangre circulante y luego en el líquido ascítico de los ratones infectados con la cepa P11 es otro hallazgo poco común y pudiera deberse a que las formas metacíclicas de entrada del parásito al hospedador, estimularían la producción de proteínas ribosomales y un mecanismo de defensa antioxidante como adaptación previa a la fagocitosis, mientras que las formas sanguíneas del parásito producirían proteínas específicas de la familia de la trans-sialidasas, que desviarían la respuesta inmune o bloquearían la respuesta de las células T (Martín & Tarleton, 2004).
Bajo condiciones experimentales, la infección con distintos aislados de T. cruzi presentan un tropismo e infectividad en diferentes tejidos, siendo la musculatura cardíaca y muscular esquelética las más comprometidas y con menor frecuencia la infección intra-abdominal en la que se ha encontrado dilatación y adelgazamiento de la capa mucosa del colon con pérdida de los pliegues y de los plexos mioentéricos (Guillén et al., 2001). Otras investigaciones han señalado alteraciones en la unión neuromuscular asociada a la degeneración de la fibra nerviosa muscular provocando anormal actividad motora de las patas posteriores de ratones con infección aguda por las cepas P6 y P11 de T. cruzi (Lugo de Yarbuh et al., 2006).
Las evidencias sugieren que el daño tisular e inflamatorio que sufren los tejidos dependería de la agresión por antígenos de T. cruzi a los tejidos del hospedador, con participación del sistema inmune y reacción cruzada entre T. cruzi, los tejidos y los receptores moleculares en la superficie de las células fagocíticas, en especial con macrófagos peritoneales de ratón, primera línea celular invadida por el parásito (Kipnis et al., 1979). Se ha referido que diferentes moléculas del parásito producirían activación policlonal asociada a elevadas parasitemias, una depresión de la respuesta inmune celular y que el parásito se diseminaría en el organismo originando una compleja respuesta inflamatoria de subpoblaciones de linfocitos por mecanismos inmunológicos que caracterizan una infección aguda por T. cruzi (Minoprio et al., 1988).
En el presente trabajo también se observó que durante el curso de la infección aguda los ratones desarrollaron manifestaciones clínicas causando emaciación muscular importante, caracterizada por una gran depleción de masa corporal, lo que pudiera ser indicativo de malnutrición energéticoproteínica grave por merma involuntaria de la ingesta de alimentos (De Onis et al., 1993). Por otro lado, se presume que la disnea en los ratones infectados se deriva de la congestión venosa pulmonar, uno de los síntomas de insuficiencia cardiaca en humanos con enfermedad de Chagas, extrapolable al modelo murino (Richardson et al., 1996).
Finalmente concluimos que es necesario realizar nuevos estudios que consideren diferentes cepas de tripomastigotos en la infección experimental de animales, basados en la detección de la parasitemia, parasitismo en la cavidad intra-peritoneal y síntomas clínicos los cuales pudieran también presentarse en humanos con infección aguda.
]]> Conflicto de interesesNinguno.
AGRADECIMIENTOS
Al Consejo de Desarrollo Científico Tecnológico y de las Artes (CDCHTA) de la Universidad de Los Andes. Código del Proyecto: C-1822-13-03-B. Nuestro agradecimiento al Dr. Rafael Bonfante Cabarcas de la Unidad de Bioquímica de la Universidad Centro Occidental "Lisando Alvarado", Barquisimeto, Venezuela, por habernos cedido las cepas de T. cruzi.
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