Carolina M Wagner A, Angelyseb  Dorta P , María V Pérez de G, Mónica V Galindo P, Anaibeth Nessi P, María A Venthecourt, Anabel Blandes, Carmen T Guzmán de R

RESUMEN

Las amibas de vida libre (AVL) del género Acanthamoeba son parásitos facultativos ampliamente distribuidos en el ambiente, por lo cual el contacto del humano con ellos es frecuente, sin embargo, los reportes de enfermedades producidas por AVL son escasos. La gravedad de éstas justifica su búsqueda, sobre todo cuando la infección es del sistema nervioso central (SNC) y cuando hay compromiso in munológico. En este trabajo se reporta el hallazgo de Acanthamoeba spp en una biopsia cerebral, tomada a un paciente de 44 años de edad con adenocarcinoma. Se exa minó la muestra bajo el protocolo del Laboratorio de Amibiasis, de la Cátedra de Parasitología, Escuela de Bioanálisis, Facultad de Medicina, Universidad Central de Venezuela, para la investigación de AVL y Entamoeba histolytica. Se realizó examen directo y coloraciones especiales, inducción de la flagelación y cultivos a diferentes temperaturas. Se observó crecimiento de Acanthamoeba spp en el medio de Page modificado por Chinchilla y col. (1979), incubado a 37 °C a las 96 horas. La descripción morfológica coincide con la morfología del grupo 3 de Acanthamoeba, según Visvesvara (1991). Se destaca la importancia de la realización del cultivo para el crecimiento e identificación de estos organismos en aquellos laboratorios donde los métodos basados en biología molecular aun no se hayan implementado como parte del diagnóstico y así aplicar el tratamiento oportuno y específico al paciente.

Palabras clave: Acanthamoeba, amibas de vida libre, adenocarcinoma.

Acanthamoeba spp found in a cerebral biopsy from a patient with metastasic adenocarcinoma

ABSTRACT

Free-living amoebas (FLA) of genus Acanthamoeba are parasitic facultative organisms whose are widely distributed in the environment, thus the human contact with them is frequent; nevertheless, there are few reports of diseases produced by FLA. The severity of these diseases justifies its re search, mainly when the infection is at central nervous system (CNS) and when there is an immunocompromised host. This work reports the finding of Acanthamoeba spp in a cerebral biopsy from a 44 year-old patient with adenocarcinoma. We followed the protocol established by the Amibiasis Laboratory, Parasitology Chair, School of Bioanalisis, Medicine Faculty, Central University of Venezuela, for the investigation of FLA and Entamoeba histolytica. It wasmade by direct examination of the sample and special stains, flagellation induction and cultures incubated at different temperatures. We observed Acanthamoeba spp growth in biphasic Page media modified by Chinchilla and col. (1979), incubated for 96 hours at 37 °C. The morphologic des cription agrees with the morphology of group 3 of Acanthamoeba, according to Visvesvara (1991). We emphasize the importance of using growth culture for isolation and identification of these organisms in those laboratories where molecular methods has not been implemented yet as part of the diagnosis scheme and thus for applying the opportune and specific treatment to the patient.

Key words: Acanthamoeba, free-living amoebas, adenocarcinoma.

INTRODUCCIÓN

En el humano se pueden presentar afecciones del sis tema nervioso central (SNC) producidas por amibas, tales como Entamoeba histolytica (meningoencefalitis secundaria) y amibas de vida libre (AVL) de los géneros naegleria (Meningoencefalitis amibiana primaria), Acanthamoeba, Balamuthia y Sappinia (Encefalitis Granulo - matosa Amibiana) y de más reciente reporte, Para valkamphia (1-6). Desde 1965, año en el cual Fowler y Carter reportaron cuatro casos de Encefalitis Granulo - matosa Amibiana, probablemente debida a Acantha - moeba spp, se ha reportado el hallazgo de esta amiba, no solamente en muestras de líquido cefalorraquídeo (LCR), sino también en úlceras corneales, conjuntivitis, lesiones granulomatosas, lentes de contacto, líquido de lavado de los mismos, polvo, aguas colectadas, etc. (7-10). Las AVL están ampliamente distribuidas en el ambiente por lo cual el contacto del humano con ellas es frecuente. Sin embargo, los reportes de enfermedades producidas por estos organismos son escasos, pero la gravedad de las mismas, justifica su búsqueda (1,4,5). En este trabajo, se presenta el hallazgo de Acanthamoeba spp en una biopsia cerebral de un paciente inmunocomprometido, con diagnóstico de adenocarcinoma, la cual fue remitida al Laboratorio de Amibiasis, Bioanálisis-UCV para su diagnóstico parasitológico.

MATERIAL Y MÉTODOS

Muestra: Se recibió muestra de cerebro en el Laboratorio de Amibiasis, adscrito a la Cátedra de Parasitología de la Es cuela de Bioanálisis, Facultad de Medicina de la Universidad Central de Venezuela, para investigar la probable etiología parasitaria del caso. Historia clínico-epidemiológica: Se trata de paciente masculino de 44 años de edad, con diagnóstico de adenocarcinoma metastásico de probable origen pulmonar, con lesión cerebral no especificada en hoja de referencia enviada. Además de visita a una zona boscosa de Costa Rica, previa a la aparición del cuadro clínico, no hay otro antecedente relevante. Procesamiento de la muestra: La biopsia fue evaluada según protocolo establecido por este Laboratorio para la investigación de la etiología parasitaria del caso: se procedió a macerar el material biológico, se realizó examen directo de la muestra al microscopio óptico y extendidos coloreados con Giemsa, para la observación morfológica de los elementos celulares. Se cultivó en medio de Boeck-Drbohlav (37 °C), por tres días, para la investigación de E. histolytica y medio de cultivo bifásico de Page modificado por Chin chilla y col., incubado a tres temperaturas (25, 37 y 42 °C) para la investigación de AVL de los géneros Acanthamoeba y naegleria, estos fueron observados cada 24 horas al microscopio invertido hasta cumplir siete días de incubación. Además, se realizó la prueba de inducción de la flagelación indicada en el caso de sospecha de n. fowleri (11-13).

RESULTADOS

En el examen directo, se observó abundantes células en degeneración y hematíes; en el extendido colorea do con Giemsa, se observó células predominantemente mononucleares. En estos exámenes, no se observó morfología compatible con E. histolytica, n. fowleri ni Acantha moeba spp. En la prueba de la inducción de la flagelación, no se observó ninguna forma flagelada. El cultivo en medio de Boeck y Drbohlav resultó negativo para E. histolytica hasta las 72 horas de observación. En el cultivo en medio de Page modificado por Chin chilla y col., se observó trofozoítos y quistes compatibles morfológicamente con el género Acanthamoeba spp a las 96 horas de incubación a 37 ºC. El crecimiento fue negativo hasta los siete días a 25 ºC y a 42 ºC. Los trofozoítos ameboides presentaron una medida promedio de 17,2 μm, con pocos pseudópodos de tipo acantopodios. Se observó en ellos la presencia de una vacuola contráctil (Figura 1). Los quistes presentaron de 1 a 5 puntas, las cuales coinciden en el mismo plano de observación en 1.000 aumentos, con un ectoquiste delgado y poco festoneado y diámetro promedio de 12 μm (Figura 2).

DISCUSIÓN