María Gualtieri¹, María Araque², Juan Carmona³, María Garcia⁴, María Di Bernardo⁴, Nurby Rios¹, Ciro Villalobos¹, Yilen Fung¹, Néstor Uscategui⁴, Frank Sosa¹

1 Laboratorio de Investigación de Medicamentos Orgánicos.

2 Laboratorio de Microbiología Molecular.

3 Herbario MERF.

4 GITAEF-Grupo de Investigaciones en Toxicología Analítica y Estudios Farmacológicos. Facultad de Farmacia y Bioanálisis, Universidad de los Andes. Mérida-Venezuela.5101. gualtier@ula.ve

RESUMEN

El objetivo de esta investigación fue determinar la actividad antibacteriana del extracto etanolico de las hojas y el extracto hexanoico obtenido de los frutos del Schinus molle L. (Anacardiaceae), cultivado en Italia, con un rendimiento de 32,42 % y 5,63 %, respectivamente. Independientemente del tipo de extracto y de la parte de la planta utilizada, el Schinus molle L., mostró una buena actividad antibacteriana contra bacterias Gram positivas (S. aureus ATCC 29213 y E. faecalis ATCC 29212) con una CMI 16 µg/mL. El rango de CBM de estas bacterias estuvo entre 32 y 64 g/mL, respectivamente.

Palabras Claves: Schinus molle L., Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis; falso pimentero.

Antibacterial activity of Schinus molle I grown in Italy

The aim of this research was to determine antibacterial activity of etanolic extract of the leaves and hexanoic extract obtained from fruits of Schinus molle L. (Anacardiaceae), grown in Italia. with a yield of 32,42 % and 5,63 %, respectively. Whatever type of extract and the plant part used, Schinus molle L., showed good antibacterial activity against Gram positive bacteria (S. aureus ATCC 29213 and E. faecalis ATCC 29212) with MIC 16 g/mL. Range of MBC of these bacteria were between 32 and 64 g/mL respectively.

Recibido. 24 de noviembre de 2011 Aprobado: 25 de mayo de 2012

INTRODUCCIÓN

Schinus molle L. (Anacardiaceae), también conocido como pirú, perú o falso pimentero, es una especie de árbol, de hojas perennes, con copa redonda y puede medir hasta 20 m, dependiendo del area geografica en la que se encuentre. El género Schinus consta de 27 especies distribuidas en América del Sur y una sola especie se extiende hasta México. Se encuentra de forma espontánea en el Perú, de donde fue llevado a Europa por los españoles. (Fig. 1). En Europa se cultiva en parques y avenidas, para el paisajismo (1). En la medicina folclorica, Schinus sp. se emplea para el tratar el dolor artritico y limpieza de heridas (2). Estudios realizados, muestran que los extractos obtenidos del Schinus molle pueden ser empleados como analgésico y antiinflamatorio (3). El aceite esencial de las hojas y de los frutos muestra actividad insecticida, repelente de insectos (4), actividad citotóxica y antioxidante en líneas celulares de tumor (5). El extracto etanolico de los frutos posee potente actividad antibacteriana, actividad antiviral (6) y actividad antifúngica (7).

Fig. 1. Schinus molle L

El objetivo del presente estudio fue investigar la actividad antibacteriana del extracto etanolico de las hojas y el extracto hexanoico de los frutos del Schinus molle L., cultivado en Italia contra bacterias Gram positivas y Bacterias Gran negativas usando el método de difusión del disco.

MATERIALES Y MÉTODOS

Material vegetal

Preparación del extracto etanoico

Las hojas fueron secadas a 30°C y pulverizadas (250,8 g). Seguidamente, fueron extraídas con etanol a 21 C, por 15 días y repetida la extracción en tres tiempos. El extracto etanolico fue filtrado y concentrado a presión reducida a 45ºC. La evaporación del solvente produjo un residuo de 81,32 g y un rendimiento de 32,42 %.

Preparación del extracto hexanoico

Los frutos fueron secados a 30°C y pulverizados (476 g). Posteriormente, fueron extraídos con hexano a 21ºC, por 15 días y repetida la extracción en tres tiempos. El extracto hexanoico fue filtrado y concentrado a presión reducida a 45ºC. La evaporación del solvente produjo un residuo de 26,8 g y un rendimiento de 5,63 %.

Actividad Antimicrobiana

Microorganismos

Staphylococcus aureus ATCC 29213, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Escherichia coli ATCC 252922, Klebsiella pneumoniae ATCC 13076 y Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 fueron utilizadas como microorganismos de ensayo para determinar la actividad antimicrobiana.

Determinacion de la concentracion inhibitaria minima (CMI) y concentracion bactericida minima (CBM)

La actividad inhibitoria de los extractos de S.molle fue probada contra bacterias Gram positivas: Staphylococcus aureus ATCC 29213 y Enterococcus faecalis ATCC 29212 y bacterias Gram negativas: Escherichia coli ATCC 252922, Klebsiella pneumoniae ATCC 13076 y Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, cultivadas durante la noche a 37°C en caldo infusión de cerebro-corazón (BHI) y ajustadas a un estándar de 0,5 Mac Farland (105-6 UFC/mL). La Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) y la Concentración Bactericida Mínima (CBM) se determinó por el método de dilución en agar Mueller Hinton, según el Clinical and Laboratory Standard Institute (8). Estos parámetros se determinaron en el rango de 0,25 a 512 g/mL. Los extractos de S.molle fueron disueltos en etanol y hexanol y las CMI se llevaron a realizaron por duplicado para todas las cepas probadas. Se determinó adicionalmente la CMI y CBM a Ciprofloxacina como control positivo del ensayo.

Actividad antibacteriana Independientemente del tipo de extracto, el Shinus molle mostró una buena actividad antibacteriana contra bacterias Gram positivas (S. aureus ATCC 29213 y E. faecalis ATCC 29212) con una CMI 16 g/mL. El rango de CBM de estas bacterias fue entre 32 y 64 g/mL respectivamente (Tabla 1).

Tabla 1

Valores de  (mg/mL) y  (mg/mL) de extractos de Shinus molle L

ATCC: American Type Culture Collection; * Control Positivo; ND: No determinado

Los resultados de los ensayos antibacterianos (CMI y CBM) mostraron que la actividad inhibitoria y bactericida de los extractos etanoico y hexanoico de Shinus molle L. contra las cepas ensayadas fueron grupo-dependiente, es decir ; la inhibicion del crecimiento bacteriano fue observado solo en las cepas gram positivas, reportandose valores inhibitorios mayores a 16 µ/mL. Por el contrario, las bacterias Gram negativas ensayadas permanecieron viables en presencia de concentraciones mayor de 128 µg/mL de los extractos etanolicos y hexanicos, mientras que la inhibición del crecimiento de la bacteria fue solamente observado con cepas Gram positivas tales como S. aureus ATCC 29213 y E. Faecalis ATCC 29212.. Estos resultados coincididen con lo reportado en Schinus molle L. cultivado en Turquia (9), en donde la CIM y CBM mostraron la misma actividad inhibitoria y bactericida contra las bacterias testadas en los extractos hexanoicos de hojas y frutos. De igual forma, Padin et al (10). Reportaron que el extracto etanolico de Schinus molle demostró actividad inhibitoria (CMI: 2–4 µg/mL) frente a Salmonella enterica, S. aureus, E.coli y especies de Bacillus y valores de CBM entre 2 a 15 µ/mL.

Conclusiones

Los extractos obtenidos de las hojas y frutos del Shinus molle tienen un efecto inhibitorio contra el S. aureus ATCC 29213 y E. faecalis ATCC 29212. En consecuencia, los extractos analizados muestran una actividad antibacteriana, la cual puede en un futuro ser investigada para desarrollar nuevas drogas para el tratamiento de infecciones producidas por importantes patógenos humanos Gram positivos.

AGRADECIMIENTOS

Al Ing° Juan Carmona por contribuir con la identificación taxonómica de la especie Shinus molle L., del Herbario MERF de la Facultad de Farmacia y Bioanálisis, de la Universidad de los Andes, Venezuela.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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9. Deveci Onder, Sukan Artun, Tuzun Nedim, Hames Kocabas Esin. Chemical composition, repellent and antimicrobial activity of Schinus molle L. J. Med. Plant. Res. 2010; 4(21): 2211-2216.         [ Links ]