Susmira Godoy1 y Claudio F. Chicco2
1 Doctora en Ciencias Agrícolas, Universidad Central de Venezuela (UCV). Investigadora, Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas, INIA-CENIAP, Venezuela. Dirección: Apartado Postal 2103, Maracay 2105, Venezuela. e-mail: sgodoy@inia.gov.ve
2 Ph.D. en Bioquímica de la Nutrición, University of Florida, EEUU. Professor, Facultad de Ciencias Veterinarias, UCV.
Resumen
La retención neta verdadera (RNV) y la cinética del fósforo de fosfatos de yacimientos de Venezuela fueron determinadas en pollos de tres semanas de edad. Los fosfatos correspondían a los yacimientos de Riecito (RIO), Lizardo (LIZA), Monte Fresco (MONTE), Navay (NAVAY), Chiguará (CHIGUA) y Jají (JAJI), utilizándose un fosfato dicalcico (DICAL) como testigo referencial. Para los estudios de cinética y la determinación del fósforo endógeno, las aves fueron dosificadas, vía oral, con 10µCi de ³²P. La RNV del fósforo (%) fue de 66,98; 67,70; 58,20; 57,70; 59,65 y 59,97; respectivamente para los fosfatos de RIO, LIZA, CHIGUA, JAJI, MONTE y NAVAY siendo los valores de RIO y LIZA mayores (P<0,05) que los demás. La cinética de entrada y salida del 32P del plasma mostró una dinámica más rápida en las aves alimentadas con los fosfatos de mayor absorción. La biodisponibilidad, relativa al testigo referencial (100%), fue de 90,6; 91,6; 78,5; 77,8; 80,7 y 81,1%; respectivamente para RIO, LIZA, CHIGUA, JAJI, MONTE y NAVAY.
Summary
Phosphorus true net retention (TNR) and phosphorus kinetics of Venezuelan sedimentary phosphates were measured in three week old broiler chicks. The phosphates utilized were Riecito (RIO), Lizardo (LIZA), Monte Fresco (MONTE), Navay (NAVAY), Chiguará (CHIGUA) and Jají (JAJI). Dicalcium phosphate was used as a reference control (DICAL). The kinetic studies and endogenous phosphorus measurements were carried out by orally dosing the birds with 10µCi³²P. Phosphorus TNR values (%) were 66.98, 67.70, 58.20, 57.70, 59.65 and 59.97 for RIO, LIZA, CHIGUA, JAJI, MONTE and NAVAY, respectively, being RIO and LIZA higher (P<0.05) than the other phosphates. Blood 32P kinetics showed a faster dynamics for the phosphates with the higher absorption values. The relative bioavailability values as percentage of the reference phosphate (100%) were 90.6, 91.6, 78.5, 77.8, 80.7 and 81.1%, respectively for RIO, LIZA, MONTE, NAVAY, CHIGUA and JAJI.
Resumo
A retenção neta verdadeira (RNV) e a cinética do fósforo de jazidas de fosfatos da Venezuela foram determinadas em frangos com três semanas de idade. Os fosfatos correspondiam a jazidas de Riecito (RIO), Lizardo (LIZA), Monte Fresco (MONTE), Navay (NAVAY), Chiguará (CHIGUA) e Jaji (JAJI), utilizando-se um fosfato dicálcico (DICAL) como testemunha referencial. Para os estudos de cinética e a determinação do fósforo endógeno, as aves foram dosadas por via oral, com 10µCi de ³²P. A RNV do fósforo (%) foi de 66,98; 67,70; 58,20; 57,70; 59,65 e 59,97; respectivamente para os fosfatos de RIO, LIZA, CHIGUA, JAJI, MONTE e NAVAY sendo os valores de RIO e LIZA maiores (P<0,05) que os demais. A cinética de entrada e saída do 32P do plasma mostrou uma dinâmica mais rápida nas aves alimentadas com os fosfatos de maior absorção. A biodisponibilidade, relativa ao testemunho referencial (100%), foi de 90,6; 91,6; 78,5; 77,8; 80,7 e 81,1%; respectivamente para RIO, LIZA, CHIGUA, JAJI, MONTE e NAVAY.
]]> Palabras clave / Aves / Biodisponibilidad / Cinética / Fosfatos / Fósforo / Retención /Recibido: 18/01/2005. Modificado: 08/03/2005. Aceptado: 10/03/2005.
Introducción
En Venezuela no existe una industria productora de fosfatos de grado alimenticio para animales a través del procesamiento de los depósitos sedimentarios del país. Esta actividad está limitada únicamente a la molienda de los fosfatos de roca y, en algunos casos, al enriquecimiento mediante la adición de ácido fosfórico. Tampoco se han establecido procesos industriales para la desfluorinización de los fosfatos de yacimientos. Por lo tanto, la mayoría de los fosfatos que se utilizan en la alimentación de las aves son importados.
Los fosfatos de yacimientos podrían ser utilizados parcial o totalmente como fuentes de fósforo en dietas para aves. Los resultados experimentales con estas fuentes han sido variables (Matterson et al., 1945; Gerry et al., 1947; Motzok et al., 1956; Chicco y Godoy, 1997), encontrándose valores de disponibilidad biológica entre 25 y 85% (De Groote, 1983; Sullivan et al., 1992). Además, estos fosfatos contienen concentraciones de elementos tóxicos entre medianas y altas, particularmente de flúor (Godoy y Chicco, 2001).
Consecuentemente, el propósito de este trabajo fue determinar la retención verdadera y la cinética del fósforo de fosfatos de yacimientos venezolanos en la alimentación de pollos de engorde.
Materiales y Métodos
Para determinar la retención neta aparente y verdadera, la excreción endógena fecal y la cinética del fósforo en aves alimentadas con fosfatos de yacimientos, 392 pollos, sexados machos, de un día de nacidos, fueron distribuidos en siete grupos (fosfatos), con siete repeticiones de 8 aves cada una, según un diseño completamente aleatorio.
Fueron evaluados fosfatos venezolanos provenientes de Riecito (RIO) y Lizardo (LIZA) en el estado Falcón, Chiguará (CHIGUA) y Jají (JAJI) en el estado Táchira, y Monte Fresco (MONTE) y Navay (NAVAY) en el estado Mérida, así como un fosfato dicálcico de alta pureza (DICAL) como testigo referencial. Los contenidos de Ca, P y F de los fosfatos evaluados se muestran en la Tabla I.
Para reducir la incidencia de las variaciones de peso de los animales entre fuentes, que pudieran generar un efecto de confusión sobre los resultados de absorción y cinetica, las aves fueron alimentadas con una dieta basal de iniciación durante las primeras dos semanas, y solamente durante la última semana del período de prueba, de un total de tres semanas, recibieron los diferentes fosfatos.
Por prueba de balance, con ocho aves/tratamiento, se determinó la cantidad de P ingerido y excretado para las estimaciones de retención neta aparente y verdadera de P.
La retención neta aparente de P (RNAP) se calculó mediante la fórmula
donde Pi: fósforo ingerido, Pe: fósforo excretado.
Con el uso de la técnica de dilución isotópica con 32P se estimó la fracción endógena fecal, para la determinación de la retención neta verdadera (RNV) del elemento (Kleiber et al., 1951), así como su cinética.
El material radioactivo utilizado fue fosfato de sodio (Na2HPO4; Amersham International plc®.). Se prepararon cápsulas de gelatina que contenían 10µCi 32P por cápsula, que fueron suministradas a las aves por via oral.
Durante 3 días consecutivos se midió diariamente el consumo de alimento y las excreciones cloacales, y una alícuota del 10% fue almacenada bajo refrigeración (0oC), para análisis de P estable y radioactivo.
]]> Para la estimación de la actividad específica del 32P en plasma, cuatro aves/tiempo/tratamiento fueron sacrificadas, por dislocación cervical, a las 0,5; 1; 1,5; 2; 3; 4; 5; 6; 8; 10; 12; 24; 48 y 72 horas, y se tomaron muestras de sangre. La radiactividad se midió por efecto Cerenkov, con el uso de un equipo convencional de centelleo líquido. Además, se midió la concentración de P inorgánico estable en plasma.La pérdida fecal endógena de P fue determinada a través de las actividades específicas del elemento en heces y plasma y con el cálculo del P total excretado (Kleiber et al., 1951), de manera que
La retención neta verdadera (RNV) se calculó de acuerdo a
Para la estimación del tiempo medio (t1/2) de entrada del 32P al pool central (plasma) y su salida a los diferentes compartimientos, se calcularon ecuaciones exponenciales, relacionando la actividad específica del elemento en el plasma, como variable dependiente, y el tiempo (horas) posdosificación del material radioactivo, como variable independiente, para cada una de las fuentes de fósforo. La pendiente de las ecuaciones fue utilizada para el cálculo de los t1/2 de acuerdo a
t1/2 = ln 2/pendiente
El contenido de proteína se determinó por el método de Kjeldahl (AOAC, 1984), el Ca por espectrofotometría de absorción atómica (Perkin-Elmer; AOAC, 1984), P por colorimetría (Fiske y Subbarrow, 1925) y F por electrometría (AOAC, 1984).
Los datos obtenidos fueron sometidos a análisis de varianza, correlación y regresión. Las medias se compararon por el método de amplitudes múltiples de Duncan (Steel y Torrie, 1988).
Resultados y Discusión
]]> La retención neta aparente (%) de P (Tabla III) fue superior (P<0,05) para DICAL (71,50), seguida por los fosfatos de yacimiento de LIZA (65,53) y RIO (64,78), siendo éstos significativamente superiores (P<0,05) a los demás.
La actividad específica del 32P en heces, a las 24 horas, mostró valores similares para DICAL y los depósitos de RIO, LIZA y CHIGUA, siendo mayores para los yacimientos de JAJI, MONTE y NAVAY (Tabla IV). La actividad específica del 32P en el plasma fue menor (P<0,05) en DICAL que en RIO y LIZA y éstos inferiores (P<0,05) a CHIGUA, JAJI, MONTE y NAVAY.
La eliminación endógena del fósforo (Tabla IV) en las excretas (%) fue mas elevada (P<0,05) para DICAL, LIZA y RIO, y menor para los yacimientos de CHIGUA, JAJI, NAVAY y MONTE, sin diferencias significativas entre éstas últimas fuentes.
La retención neta verdadera de P (RNV; Tabla IV) permitió separar (P<0,05) al DICAL (74,04) de los depósitos de LIZA (67,70) y RIO (66,98), de menor biodisponibilidad, y éstos (P<0,05) de los de NAVAY, MONTE, CHIGUA y JAJI. Estos valores, para todas las fuentes de fósforo, fueron más elevados que las estimaciones de retención neta aparente, ya que se sustrae de la excreción total la fracción endógena del elemento.
Estos resultados corroboran investigaciones previas (Godoy y Chicco, 2002) en cerdos, utilizando los fosfatos de RIO y MONTE, los cuales presentaron valores de absorción aparente y verdadera inferiores al DICAL, empleado como testigo referencial. La fracción endógena fue más elevada en las fuentes de mayor biodisponibilidad, siendo su concentración inferior al 10%, como fuera señalado por Georgyevskii (1982) para esta especie. Recientemente Cabrera et al. (2002), utilizando el método de Sibbald (1982) en aves de postura, encontraron que la absorción del DICAL fue de 82,8%, superior al valor obtenido en el presente estudio. Diferencias en el estado fisiológico de las aves y tipo de fosfato podrían explicar la variación entre los resultados obtenidos.
El tiempo medio (T1/2, horas; Tabla V) de entrada del 32P al "pool" central (plasma) fue menor (P<0,05) para DICAL (1,38) que para las rocas de LIZA y RIO (P<0,05) y en éstas ultimas fueron inferiores (P<0,05) a los fosfatos de JAJI, CHIGUA, MONTE y NAVAY, indicando que, entre yacimientos, los tres primeros son los de más alta biodisponibilidad.
El análisis compartamental que describe la cinética de la actividad específica del 32P en el plasma (Tabla VI) mostró un comportamiento biexponencial, con salidas del P a dos velocidades, una rápida y otra lenta. La disminución de la actividad específica del 32P en el plasma se debió principalmente a la salida rápida, para DICAL, RIO, LIZA, CHIGUA y JAJI, con proporciones (%), a los 15 minutos postdosificación del elemento radioactivo, de 89,6; 77,8; 95,5; 62,4 y 66,7; respectivamente. En los fosfatos de MONTE y NAVAY, la contribución del compartimiento rápido fue mas baja, siendo los valores de 37,0 y 40,2%, respectivamente.
]]>
Consecuentemente, los tiempos medios de salida del 32P (T1/2, horas; Tabla VI) para la fase rápida, fueron mas bajos (P<0,05) para DICAL y LIZA, seguidos por RIO, JAJI y NAVAY, y mas elevados para (P<0,05) CHIGUA y MONTE. Para la fase lenta fueron menores para DICAL, RIO, MONTE y JAJI, intermedios para LIZA y NAVAY y mayores para CHIGUA, indicando que la absorción primaria y la secundaria, junto con el intercambio entre el plasma y el medio extra e intracelular, se realizaron más rápidamente en los fosfatos de mayor biodisponibilidad.
La menor actividad específica del 32P en el plasma en el caso de las fuentes de mayor biodisponibilidad se relaciona con una más rápida dinámica del elemento en éstas fuentes. Esto se corrobora con los tiempos medios más bajos de entrada del elemento al "pool" central (plasma) y su salida a los diferentes compartimientos. Los menores valores de tiempo medio del P en el plasma, para los fosfatos de mayor biodisponibilidad, indican nuevamente que el intercambio entre el plasma y el medio extra e intracelular se realiza más rápidamente en estos fosfatos (Georgievskii, 1982; Vitti et al., 1989) que con los fosfatos de bajo valor biológico.
La matriz de los análisis de correlación entre las diferentes fuentes estudiadas indica correlaciones positivas y significativas (P<0,01) entre RNAP y RNVP con valores de 0,99.
Utilizando el fosfato dicálcico (DICAL) como fosfato de referencia (100% biodisponible) se calculó, para cada fuente, el valor promedio de disponibilidad biológica de las variables bajo estudio. Los valores promedios resultantes aparecen en la Tabla VII.
Tendencias similares de biodisponibilidad relativa en aves fueron reportadas en experimentaciones previas por los mismos autores (Godoy y Chicco, 2001) utilizando como variables de respuesta ganancia de peso, consumo voluntario y mediciones de mineralización ósea.
Conclusiones
La retención neta verdadera del P es ligeramente superior a la retención neta aparente, por la limitada eliminación endógena del elemento. Ésta es más elevada en los fosfatos de mayor biodisponibilidad. Así mismo, la dinámica de ingreso y salida del P del pool central es mayor en los fosfatos que presentan una tasa más alta de absorción. Como fue reseñado en investigaciones previas, los fosfatos sedimentarios de Riecito y Lizardo presentan una mayor biodisponibilidad del P que los demás yacimientos, con potencial de uso en la alimentación de no rumiantes.
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