Investigación Clínica

Consideraciones sobre revisores y autores de los trabajos sometidos a publicación en Investigación Clínica

Eficacia antimicrobiana del primer ortodóncico adicionado con nanopartículas de plata: Estudio transversal in vitro

Se evaluó la eficacia antimicrobiana de las nanopartículas de plata (NPsAg) incorporadas al adhesivo (primer) colocado en el esmalte dental adyacente a la aparatología ortodóncica fija (brackets). Se realizó un estudio experimental in vitro en 40 premolares, los cuales se dividieron en dos grupos con brackets, uno cementado con primer convencional y otro adicionado con NPsAg; se colocaron en medios de cultivo, previamente inoculados con Streptococcus mutans, y se tomaron muestras para hacer cultivos y conteo de unidades formadoras de colonias (UFC) al día 1, 15 y 30. Se observó una disminución de la presencia de Streptococcus mutans en las muestras a los 15 días de colocado el primer con la agregación de nanopartículas, aunque tal efecto se redujo a los 30 días. Esta reducción del efecto de las nanopartículas puede deberse a la inexistencia de limpieza mecánica, lo cual favoreció la agregación bacteriana sobre el biofilm, afectando su efecto antimicrobiano. Esto sugiere la necesidad de realizar estudios in vivo que permitan observar el comportamiento de los biomateriales en el medio bucal. Las NPsAg agregadas al primer resultan una herramienta eficaz para prevenir la desmineralización del esmalte alrededor de la aparatología ortodóncica fija.

The antimicrobial efficacy of the silver nanoparticles (NPsAg), incorporated into the adhesive (primer) placed in the enamel adjacent to fixed orthodontic appliances (brackets), was evaluated. An experimental study was performed on 40 premolars in vitro, which were divided into two groups with brackets, one cemented with conventional primer and another added with NPsAg, placed in culture media previously inoculated with Streptococcus mutans, and sampled for culturing and counting colony forming units (UFC) on days 1, 15 and 30. A decrease in the presence of Streptococcus mutans in the samples after 15 days with nanoparticle aggregation was observed, and a reduction in the effect of said nanoparticles after 30 days. This reduction of the nanoparticles effects can be due to the absence of mechanical cleaning, which favored the bacterial aggregation on the biofilm, affecting its antimicrobial effect. This suggest the need for realizing studies in vivo which will allow the observation of the behavior of the biometals on the buccal medium. The NPsAg added to the primer are an effective tool to prevent the demineralization of the enamel around the fixed orthodontic appliances.

Expresión de BRCA1 en lesiones benignas y malignas de la mama

La mayor parte de los carcinomas de mama son cánceres esporádicos; sin embargo, existe una proporción, estimada entre el 5 y el 10%, en la cual aparece una predisposición hereditaria al cáncer, asociado principalmente a mutaciones germinales en los genes BRCA1 y BRCA2; tales mutaciones incrementan la predisposición para el desarrollo de la enfermedad durante el transcurso de la vida. El objetivo general de este trabajo fue valorar la expresión del gen BRCA1 por inmunohistoquímica (IHQ). El estudio se realizó en mujeres diagnosticadas con lesiones benignas o con carcinoma ductal infiltrante de mama en seguimiento en el Instituto de Oncología Dr. Miguel Pérez Carreño de Valencia, Venezuela. Se analizó la expresión de la proteína BRCA1 y los resultados obtenidos se compararon con la clasificación de las lesiones benignas propuesta por Dupont y Page y los subtipos moleculares intrínsecos definidos por IHQ. De este análisis se obtuvo que tanto en las lesiones no infiltrantes (proliferativas y carcinoma in situ), así como en los carcinomas infiltrantes, predominaron los casos con un marcaje nuclear de BRCA1 por IHQ ≤10%. Además, la relación de la expresión de BRCA1 con la media de la supervivencia global, obtuvo valor pronóstico desfavorable, cuando la expresión nuclear y citoplasmática de BRCA1 fue ≤10%, con p<0,05. Finalmente, en base a los resultados, se sugiere que en el algoritmo de abordaje de mujeres con riesgo de padecer cáncer de mama, se incluya la valoración de la expresión de BRCA1 por IHQ.

The majority of breast cancers are sporadic cancers; however, there is an estima¬ted proportion of 5% to 10%, where a hereditary predisposition appears, mainly associated with germline mutations in the BRCA1 and BRCA2 genes. Such mutations increase the predis-position to develop the disease during the course of life. The overall objective of this work was to evaluate the expression of the BRCA1 gene by immunohistochemistry (IHC). The study was conducted in women diagnosed with benign lesions or invasive breast ductal carcinoma in follow-up care at the Institute of Oncology Dr. Miguel Perez Carreño in Valencia, Venezuela. Expression of the BRCA1 protein was analyzed and the results were compared with the benign lesions classification given by DuPont and Page and the intrinsic molecular subtypes defined by IHC. From this analysis it was found that in both, non-infiltrative lesions (proliferative and carcinoma in situ), as well as in infiltrating carcinomas, predominated the cases with BRCA1 nuclear labeling by IHC (≤10 %). Furthermore, the relationship of expression of BRCA1 with the average overall survival, showed a poor prognostic value obtained when the nuclear and cytoplasmic expression of BRCA1 was ≤10%, with p<0.05. Finally, based on the results, it is suggested that the assessment of BRCA1 expression by IHC should be included in the approach algorithm of women at risk of developing breast cancer.

Miocarditis inducida por clozapina durante la evaluación observacional, transversal y longitudinal: comparación con otros antipsicóticos en ambientes naturalísticos

Myocarditis occurs more frequently during clozapine (CLZ) administration than during treatment with other antipsychotic drugs (APs). In this observational study, we transversally screened outpatients for myocarditis by comparing a CLZ group of 132 subjects, with a non-CLZ group taking other APs (n = 371) only, and in 21 CLZ-treated patients and 18 subjects treated with other APs who had been followed for more than one year. The protocol included a) assessment of symptoms such as dyspnea, tachycardia, chest discomfort, fever, cough, and edema, b) blood pressure and heart auscultation; c) a standard electrocardiogram after a 5-minute rest, d) white cell count, and qualitative determination of troponin I, creatine-kinase-MB and myoglobin, and e) a cardiologist evaluation of subjects with suspected myocarditis. Only one case of myocarditis was detected, providing an approximation of the frequency of myocarditis of 1.6% in the first month of treatment. This was a 30-year-old man with schizophrenia who developed symptoms at day 6 after starting a treatment with 200 mg of CLZ a day without titration. Myocarditis was not observed during prolonged CLZ or other AP administration. These results support the proposal of starting CLZ treatment with a low dose and the feasibility of a simple protocol for myocarditis detection in psychiatry primary care.

El desarrollo de miocarditis ocurre con más frecuencia durante el tratamiento con clozapina (CLZ) que durante el uso de otros antipsicóticos (APs). En el presente estudio observacional evaluamos la presencia de miocarditis mediante un protocolo transversal comparando 132 sujetos tratados con CLZ con 371 pacientes tratados con otro AP, y en 21 sujetos tratados con CLZ y 18 pacientes tratados con otro AP en un protocolo longitudinal mayor 1 año de duración. La evaluación incluyó: a) detección de síntomas como disnea, taquicardia, malestar torácico, fiebre, tos y edema; b) presión arterial y auscultación cardiaca; c) electrocardiograma estándar luego de un reposo de 5 minutos; d) contaje de glóbulos blancos y determinación cualitativa de troponina I, creatin-kinasa-MB y mioglobina, y e) evaluación por un cardiólogo en sujetos sospechosos para miocarditis. Detectamos un solo caso de miocarditis, lo que permite una aproximación sobre la frecuencia de miocarditis de 1,6 % durante el primer mes de tratamiento. Se trató de un sujeto masculino con esquizofrenia que desarrolló síntomas durante el día 6 después de haber iniciado el tratamiento con CLZ a la dosis de 200 mg por día sin titulación. No se detectaron sujetos sospechosos de miocarditis durante el tratamiento prolongado con CLZ u otro AP. Estos resultados sustentan la recomendación de comenzar el tratamiento con clozapina a dosis bajas, y la factibilidad de utilizar un protocolo sencillo para detectar miocarditis en la atención psiquiátrica primaria.

Alta prevalencia y pobre control de la hipertensión en cinco poblaciones de Venezuela: Estudio VEMSOLS

The prevalence of hypertension in multiple regions of Venezuela is unknown. The objective of this study was to estimate the prevalence of hypertension in five populations from three regions. During 2006 to 2010, 1392 subjects aged 20 or older were selected by multistage stratified random sampling from all households in five municipalities from: Lara State (Western region), Merida State (Andean region), and Capital District (Capital region). Anthropometric measurements, blood pressure, and biochemical analysis were obtained from each participant. Mean age was 45.2 ± 0.4 years and 68% were females. The overall prevalence of hypertension was 31.3% (CI 95% 28.9 - 33.8), it was higher in men than women (38.1% [33.5 - 42.8] vs. 28.2% [25.4 - 31.2], respectively; p <0.001). The hypertensive participants were older, with higher body mass index (BMI), glucose, total cholesterol, LDL-c, and triglycerides; and lower values of HDL-c, than pre-hypertensive and normotensive participants (p < 0.05). In women, hypertension prevalence increased linearly for every decade of life and by category of BMI; whereas in men it increased until the fifth decade of life, and was similar in patients with overweight and obesity. The risk of hypertension increased with age, the presence of obesity, diabetes, overweight and family history of hypertension. Only 17.7% of the hypertensive subjects were both treated and controlled. In conclusion, about one third of the subjects evaluated had hypertension and about one fifth of them had their hypertension under control. In Venezuela, hypertension is a serious public health problem exacerbated by age and overweight.

Se desconoce la prevalencia de hipertensión arterial (HTA) en múltiples regiones de Venezuela. El objetivo fue determinar la prevalencia de HTA en cinco poblaciones de tres regiones. Durante 2006 a 2010, 1392 sujetos de 20 o más años de edad fueron seleccionados mediante un muestreo aleatorio estratificado polietápico, de todas las casas en 5 municipios de: Estado Lara (región Oeste), Estado Mérida (región Andina) y Distrito Capital (región Capital). Se obtuvieron medidas antropométricas, presión arterial y análisis bioquímico. La media de edad fue 45,2 ± 0,4 años, y 68% fueron mujeres. La prevalencia de HTA fue 31,3% (IC 95%: 28,9 - 33,8), mayor en hombres que en mujeres (38,1% [33,5 - 42,8] vs 28,2% [25,4 - 31,2], respectivamente; p <0,001). Los sujetos hipertensos mostraron mayor edad, índice de masa corporal (IMC), glucemia, colesterol total, c-LDL y triglicéridos; y valores más bajos de c-HDL, que los sujetos pre-hipertensos y normotensos (p< 0,05). En las mujeres, la prevalencia de HTA aumentó linealmente en cada década de la vida y en cada categoría de IMC; en los hombres, se incrementó hasta la quinta década, siendo similar en sujetos con sobrepeso y obesidad. El riesgo de HTA se incrementó con la edad, presencia de sobrepeso/obesidad, diabetes, e historia familiar de HTA. Sólo 17,7% de los sujetos hipertensos se encontraban tratados y controlados. En conclusión, un tercio de los sujetos evaluados presentó HTA y alrededor de un quinto está bajo control. En Venezuela, la HTA es un grave problema de salud pública exacerbado por la edad y el sobrepeso.

Detección de mutaciones en el gen F8 en mujeres portadoras y en pacientes con hemofilia A: Identificación de una mutación nueva

The molecular diagnosis of haemophilia A (HA) patients has many benefits including diagnosis confirmation and inhibitor risk development prediction. In female carries of a mutation, the molecular diagnosis allows for genetic counseling and prenatal diagnosis, which have become part of the comprehensive care for HA in many countries. Therefore, the aim of this study was to determine the F8 mutations in severe HA (sHA) patients and female carriers. In 12 patients with sHA, the presence of the intron 22 and intron 1 inversions was investigated using an inverse and a conventional PCR method, respectively. In patients negative for the inversions, the F8 gene was screened through conformation sensitive gel electrophoresis (CSGE) and further sequencing. The causative mutation was successfully identified in 6/12 patients, including the novel mutation p.G190C. The mothers of these six patients and those of seven other sHA patients molecularly diagnosed in a previous work were investigated for the presence of the genetic alterations found in their sons. All mothers were found to be carriers. This is the first study conducted in Venezuela which directly analyzes the F8 gene in potential carrier mothers to specifically identify the presence of the mutation that was detected in their sons, and complements a previous study on sHA patients. Our findings will facilitate the implementation of regular screening of HA carriers in our country and will allow a better care of bleeding symptoms and genetic counseling.

El diagnóstico molecular de pacientes con hemofilia A (HA) tiene múltiples beneficios, incluyendo la confirmación del diagnóstico y la predicción del riesgo de desarrollar inhibidores. En mujeres portadoras de una mutación, el diagnóstico molecular permite el consejo genético y el diagnóstico prenatal, los cuales son parte de la atención integral de HA en muchos países. Así, el objetivo de este estudio fue determinar mutaciones en el gen F8 en pacientes con HA severa (HAs) y en mujeres portadoras. En 12 pacientes con HAs, la presencia de la inversión del intrón 22 y el intrón 1 fue investigada utilizando una PCR inversa y una convencional, respectivamente. En pacientes negativos para cualquiera de las inversiones, el gen del F8 fue analizado a través de la técnica de electroforesis en gel sensible a conformación (CSGE) y posterior secuenciación. La mutación causante de la enfermedad fue identificada en 6/12 pacientes, incluyendo la mutación nueva p.G190C. Las madres de estos seis pacientes y las de otros siete pacientes de HAs diagnosticados en un estudio previo y fueron investigadas para la presencia de alteraciones genéticas encontradas en sus hijos. Todas las madres resultaron ser portadoras. Éste es el primer estudio realizado en Venezuela donde se analiza directamente el gen F8 en portadoras potenciales para identificar específicamente la presencia de una mutación que fue detectada en sus hijos, y complementa un estudio previo con pacientes HAs. Nuestros hallazgos facilitarán la implementación del análisis regular de portadoras de HA en nuestro país y permitirán un mejor cuidado de los síntomas de sangrado y consejo genético.

Síndrome PAGOD y anomalías vasculares: ¿es un defecto de la angiogénesis embrionaria? Un nuevo caso y revisión

El Síndrome PAGOD es un acrónimo de hipoplasia de pulmón y arterias pulmonares, agonadismo, onfalocele / defecto diafragmático y dextrocardia. Se describe una serie de 21 pacientes, en la cual, 90,5 % presentó un cariotipo 46,XY y solo dos casos 46,XX; el 66,6 % exhibió un fenotipo femenino y 28,6 % genitales ambiguos. La ocurrencia de dos paciente 46,XX excluye al cromosoma Y como portador del defecto genético y plantea la posibilidad de una herencia recesiva ligada al cromosoma X, sin descartar que los casos observados en hermanos puedan deberse a mutaciones en otros genes como STRA6, VEGFA, VEGFB, VEGFC, transcritos de empalmes alternativos de VEGFA, HIF1, HIF2, entre otros. Las malformaciones congénitas observadas en los pacientes fueron: genitales y gónadas 85,7 %, diafragma y pared 66,6 %, cardíaco 80,9 %, pulmonar 71,4 %, vascular 80,9 % y abdomen 42,8 %. La revisión de los pacientes ha demostrado un alto grado de variabilidad en la expresividad de malformaciones de órganos, aparatos o sistemas. Las malformaciones vasculares representan un componente importante y característico del síndrome PAGOD y cuya base morfogenética del síndrome pueda deberse a un defecto de la angiogénesis embrionaria temprana con repercusión en la organogénesis de aparatos y sistemas. Dentro de los genes relacionados con el remodelamiento vascular durante la embriogénesis, regeneración tisular y carcinogénesis está el Factor de Crecimiento del Endotelio Vascular D (VEGFD), localizado en Xp22.31, con expresión en pulmón, corazón, intestino delgado, pulmón fetal, útero, mamas, tejido neural y neuroblastoma, el cual representa un fuerte candidato para su análisis molecular como una de las posibles causa del síndrome.

PAGOD Syndrome is an acronym for lung and pulmonary arteries hypoplasia, agonadism, omphalocele / diaphragmatic defect and dextrocardia. A series of 21 patients is described, where 90.5% had a 46,XY karyotype and only two cases 46,XX; 66.6% exhibited a female phenotype and 28.6% ambiguous genitalia. The occurrence of two patients 46,XX excludes the Y chromosome as a carrier of the genetic defect and raises the possibility of a recessive X-linked inheritance, without ruling out that the observed cases in siblings may be due to mutations in other genes as Stra6, VEGFA, VEGFB, VEGFC, and alternative splicing of transcripts VEGFA, HIF1, HIF2, among others. Congenital malformations were observed in patients genitals and gonads 85.7%, 66.6% in diaphragm and abdominal wall , heart 80.9%, 71.4% lungs, blood vessels 80.9% and 42.8% in abdomen. The review of patients has demonstrated a high degree of variability in the expression of malformations of organs and organ systems. Vascular malformations represent an important and characteristic component of PAGOD syndrome and whose base morphogenetic syndrome may be due to a defect in early embryonic angiogenesis with impact on organogenesis and system development. Among genes related to vascular remodeling during embryogenesis, tissue regeneration and carcinogenesis, the Endothelial Growth Factor D Vascular (VEGFD), located in the Xp22.31 region, with expression in lung, heart, small intestine, uterus, breast, neuroblastoma and neural tissue, represents a strong candidate for molecular analysis as a cause of the syndrome.

**Identificación molecular de Enterobacter hormaechei multidrogoresistente en Venezuela**

Besides the importance of Enterobacter cloacae species complex as a nosocomial pathogen, little is known about the frequency of each species/genotype. Here, we describe a strain of E. hormaechei subsp. hormaechei isolated from a bronchial secretion of a patient, in the Intensive Care Unit at the General Hospital of Cumaná, Venezuela, who died due to complications of his infection. The molecular identification was done by sequencing the 16S rRNA gene and comparing it to sequences from the GenBank. This strain showed resistance to multiple families of antibiotics (MDR), and the genes blaKPC and blaVIM were detected by PCR. This is the first time E. hormaechei has been identified in Venezuela.

A pesar de la importancia de las especies del complejo Enterobacter cloacae como patógeno nosocomial, poco se conoce sobre la frecuencia de cada especie/genotipo. Aquí se describe una cepa de E. hormaechei subsp. hormaechei aislada de una secreción bronquial de un paciente internado en la Unidad de Cuidados Intensivos del Hospital General de Cumaná, Venezuela, quien murió producto de complicaciones de su infección. La identificación molecular fue hecha por secuenciación del gen ARNr 16S y porcomparación con las secuencias del GenBank. Esta cepa mostró resistencia a múltiples familias de antibióticos (MDR) y se detectaron los genes blaKPCyblaVIMpor PCR. Este es el primer reporte de E. hormaechei en Venezuela.

Psicoterapeutas: ¿Deberíamos conocer a Arthur Schopenhauer?

Arthur Schopenhauer (1788-1860) is known as the pessimist philosopher and the psychologist of the will. He anticipated some features of cognitive neuroscience, psychoanalysis and evolutionary psychology, but he is relatively unfamiliar to most contemporary mental health professionals. Schopenhauer conceived the will as the universes essence; purposeful human actions are a small part of it. We do not directly perceive the will, but only its phenomena through the Veil of Maya, which, in contemporary terms, refers to the cognitive and perceptual limits imposed by our own biological species. This is why Schopenhauer posits that we have a representation (idea) of the world. We have a direct access to the will by perceiving our bodys desires. The will is insatiable and selfish. Because of these wills features, there is no possibility of collective or global salvation. However, individual or existential salvation may occur by denying the will through a path that includes: 1) an aesthetic experience particularly with the aid of art, that allows contemplation of the ´Platonic Ideas´, lessening desire and promoting knowledge through contemplation,; 2) the ethical experience refers to the insight about the unity of the universe, particularly by realizing the ubiquity of suffering and neediness, and 3) the metaphysical step which promotes compassion and asceticism. These philosophical principles may add to specific psychotherapeutic techniques in expanding the individuals awareness beyond herself/himself, and thus arise and improve the psychological outcome.

Arturo Schopenhauer (1788-1860) es conocido como el filósofo pesimista y como el psicólogo de la voluntad. Schopenhauer anticipó algunos elementos de las neurociencias cognitivas, del psicoanálisis y de la psicología evolutiva, pero es poco conocido por la mayoría de los profesionales de la salud mental contemporáneos. Schopenhauer concibió la voluntad como la esencia del universo; la acción humana voluntaria es una pequeña parte de la voluntad. No percibimos a la voluntad directamente sino a sus fenómenos a través del Velo de Maya, el cual se refiere en términos presentes a los límites cognitivos y perceptuales impuestos por nuestra propia especie biológica. Es por esta razón que Schopenhauer afirmó que nos hacemos una representación (idea) del mundo. Tenemos un acceso directo a la voluntad al percibir los deseos de nuestro cuerpo. La voluntad es insaciable y egoísta. Dadas estas características de la voluntad, no existe la salvación colectiva o global. Sin embargo, es posible la salvación individual, mediante la negación de la voluntad, la cual ocurre a través de un camino que incluye: 1) la experiencia estética, en particular con la ayuda del arte, que permite contemplar las ´Ideas Platónicas´, aplacar el deseo y promover el conocimiento mediante la contemplación; 2) la experiencia ética, la cual se refiere a la toma de conciencia sobre la unidad del universo, en especial al darse cuenta de la ubicuidad del sufrimiento y de la naturaleza menesterosa del ser humano, y; 3) la experiencia metafísica, la cual promueve la compasión y el ascetismo. Estos principios filosóficos pueden agregarse a las técnicas psicoterapéuticas específicas para expandir la conciencia individual más allá de sí mismo (misma), y de esa manera estimular y mejorar la evolución psicológica.