Archivos Venezolanos de Farmacología y Terapéutica

El mecanismo molecular de la regulación de la contracción muscular

La estructura de los filamentos gruesos de músculo estriado en el estado relajado ha sido finalmente comprendida a nivel molecular. La estructura revela interacciones intra- e intermoleculares que mantienen las cabezas de miosina unidas formando hélices adosadas a la superficie del filamento grueso. La fosforilación de las cadenas ligeras reguladoras de la miosina induce el debilitamiento de estas interacciones permitiendo la activación de los filamentos gruesos, produciendo el desorden y la liberación de las cabezas de miosina, y permitiendo su interacción con los filamentos delgados. Estos resultados abren las puertas para la comprensión del mecanismo molecular de la regulación ligada a miosina de la contracción muscular, de relevancia ya que las mutaciones asociadas a la cardiomiopatía hipertrófica medioventricular están ubicadas cercanas al sitio de fosforilación en las cadenas ligeras reguladoras de miosina.

The structure of the thick filaments of striated muscle has been finally understood at the molecular level. The structure reveals intra- and inter-molecular interactions that held the myosin heads forming helices on the thick filament surface. The phosphorylation of the myosin regulatory light chains induces the weakening of these interactions, allowing the activation of thick filaments, and enabling their interaction with the thin filaments. These results open the possibility to the understanding of the molecular mechanism of the myosinlinked regulation of muscle contraction. This is of relevance as the mutations associated with mid ventricular cardiomyopathy are located near the phosphorylation site in the regulatory light chain.

Aproximaciones de bioquímica clásica al estudio de la relación entre la estructura y la función de la rodopsina

La proteína fotorreceptora rodopsina (R) fue extraída de los segmentos externos de los bastoncillos de retinas bovinas con el detergente n-dodecil β-D-maltósido (DM) y purificada a homogeneidad mediante cromatografía de afinidad. El entrecruzamiento químico de la R y de la rodopsina fotoactivada (R*) con los agentes bifuncionales sulfo-succinimidilo 4-(Nmaleimidometilo) ciclohexano-1-carboxilato (sulfo-SMCC) o m-maleimidobenzoilo-N-hidroxisuccinimido ester, sugirieron la naturaleza oligomérica de la proteína fotorreceptora. La caracterización de los parámetros hidrodinámicos de la R y la R* en presencia de 0.1% DM, mediante cromatografía de exclusión molecular y sedimentación sobre gradientes de sacarosa, permitió estimar los tamaños de los complejos R:DM y R*: DM. Los resultados concuerdan con una estructura cuaternaria dimérica tanto para la R como para la R*. La R entrecruzada con sulfo-SMCC, en presencia de luz, fue estabilizada en un fotointermediario que absorbió a ~ 470 nm. Experimentos de proteólisis con termolísina sobre los dímeros nativos de R y sobre los monómeros de R generados por medio del uso de altas concentraciones de DM, complementados con estudios de modelaje basados en la estructura cristalina reportada de la proteína, sugirieron que el reactivo sulfo-SMCC generó un entrecruzamiento intramolecular entre la Cys140 y la Lys248 de la R, el cual posiblemente es el responsable de la incapacidad de la proteína de sufrir el cambio conformacional requerido para llegar a su estado fotoactivado.

The photoreceptor protein rhodopsin (R) was extracted from bovine retinal rod outer segments using the detergent n-dodecyl β-D-maltoside (DM), and purified to homogeneity by affinity chromatography. Chemical cross-linking of R and photoactivated rhodopsin (R*) with the bifunctional agents sulfo-succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl) ciclohexane-1-carboxylate (sulfo-SMCC) or m-maleimidobenzoyl-N-hydroxysuccinimide ester, suggested the oligomeric nature of this photoreceptor protein. The characterization of the hydrodynamic parameters of R and R* in the presence of 0.1% DM, using molecular exclusion chromatography and sedimentation on sucrose gradients, allowed us to estimate the size of the R:DM and R*:DM complexes. Our results agreed with a dimeric quaternary structure for both, R and R*. R crosslinked with sulfo-SMCC, in the presence of light, was stabilized in a photointermediate that absorbed at ~ 470 nm. Experiments of proteolysis with termolysine on R native dimers and R monomers generated by using high concentrations of DM, together with modeling studies based on the reported crystal structure of the protein, suggested that sulfo-SMCC generated an intramolecular cross-link between Cys140 and Lys248 of R, which was probably responsible for the incapacity of the protein to display the conformational change required to reach its photoactivated state.

The mechanism of cancer involves short interfering RNA (siRNA)

The recent discoveries of the RNA-mediated interference system in cells could explain all of the known features of human carcinogenesis. A novel idea, proposed here, is that the cell has the ability to recognize a mutated protein and/or mRNA. Secondly, the cell can generate its own short interfering RNA (siRNA) using an RNA polymerase to destroy mutated mRNA, even when only a single base pair in the gene has mutated. The anti-sense strand of the short RNA molecule (called sicRNA), targets the mutated mRNA of an oncogene or a tumour suppressor. During cell mitosis, the sicRNA complex can move into the nucleus to target the mutated gene. The sicRNA triggers the assembly of protein complexes leading to epigenetic modification of the promoter site of the mutant gene. In some instances, instead of methylation, the homologous DNA is degraded, leading to loss of heterozygosity. The factors controlling these two actions are unknown but the result is gene silencing or physical destruction of the mutant gene. An error in RNAi defence occurs when the sicRNA during methylation of the target gene, inadvertently interferes with the production of a miRNA specific for that tissue. This produces a change in the profile of correct proteins for that tissue. On a rare occasion, a preneoplastic stem cell will survive if miRNA interference switches on/off a gene involved in apoptosis, as well as a gene involved in cell proliferation and DNA damage surveillance. The driving force of carcinogenesis is the sequential loss of specific miRNAs.

Efecto de los ácidos grasos trans sobre las lipoproteínas del plasma

Estudios clínicos y epidemiológicos indican que un consumo elevado de ácidos grasos trans (AGtrans) aumenta el riesgo de enfermedad cardio-vascular (ECV). Los ácidos grasos trans provenientes de los aceites parcialmente hidrogenados han sido asociados a muertes por ECV, pero estos efectos negativos sobre la salud humana no son atribuibles a los isómeros trans-11 C18:1 ó al cis-9, trans-11 del ácido linoleico conjugado (CLA) presentes en la carne o leche de ganado vacuno u ovino. El objetivo de esta revisión es presentar las evidencias disponibles a la fecha, sobre los diferentes aspectos químicos de los ácidos grasos con isomería trans, sobre el proceso de hidrogenación usado por la industria de alimentos y de biohidrogenación, así como de los posibles efectos del consumo de los AG trans sobre los factores de riesgo de ECV asociados con las lipoproteínas del plasma.

Epidemiological and clinical studies suggest that high consumption of trans unsaturated fatty acids (TFA) increase the risk of coronary heart disease (ECV). The TFA formed by partial hydrogenation of vegetable oils increase cardiovascular mortality, but these negative effects on the human health are not attributable to the isomer trans-11 C18: 1 to cis-9, trans-11 of the conjugated linoleic acid (CLA) present in the meat or milk of cattle and ovine. The objective of this review is to present the available evidences to date, on different aspects of the chemistry of trans fatty acids isomers, the hydrogenation process used in food industry and biohydrogenation, as well as the possible effects of the consumption of the TFA on the cardiovascular disease risk factors associated with plasma lipoproteins.

Silenciamiento de genes mediante RNA interferencia: Consideraciones sobre el mecanismo y diseño de los sistemas efectores

La interferencia por RNA es una nueva poderosa herramienta molecular para silenciar genes a nivel post-transcripcional. Es utilizada para la búsqueda de las funciones asociadas a varios genes mediante, genómica reversa y como herramienta terapéutica para reducir o bloquear la expresión de genes alterados o sobre expresados, en terapia genética. La interferencia por RNA proporciona una estrategia fácil y rápida para degradar los RNA mensajeros mediante la introducción de un RNA pequeño de doble cadena homólogo (siRNA) al RNA mensajero celular de interés, removiéndolo de una manera secuencia específica. En este artículo de revisión se resumen el mecanismo básico propuesto para producir silenciamiento vía interferencia por RNA, algunos de los requisitos para producir los siRNA intracelulares capaces de producir silenciamiento, así como los posibles sistemas efectores para transferir éstos a las células o tejidos. La misma pretende ayudar a divulgar información sobre tópicos de Biología Molecular de actual interés médico.

RNA interference (RNAi) is a powerful new molecular tool to dowregulate the gene expression at posttranscriptional level. It is being used in reverse genetic to found functions of several genes and as a therapeutic device to knockout or knockdown altered or over-expressed genes, in gene therapy. RNA interference now provides a fast and easy strategy to depleting mRNA by introducing double-stranded RNA homologous to a particular cellular mRNA, leading to its sequence specific removing. In this review we summarized the basic mechanism for RNAi, some of the structural requirements needed in the siRNA to be able to produce an efficient and specific silencing and some effectors systems used to deliver them inside the cells or tissue. This review is written to divulgate some topics in Molecular Biology of actual medical interest.

Modelo biomecánico de la generación de fuerza muscular en condiciones isométrica y tetánica

El objetivo de este trabajo consiste en elaborar un modelo estructural y matemático de la generación de fuerza del músculo esquelético en condiciones isométricas, y tetánica, que permita explicar las curvas Fuerza - tiempo (F - t) y Fuerza - longitud (F - l) obtenidas experimentalmente. Se propone un modelo macroscópico empaquetado que consta de un conjunto formado por un elemento contráctil, uno elástico y otro viscoso organizados en paralelo, y un elemento elástico en serie con el conjunto anterior. A este modelo se le aplican las leyes de Newton, para obtener la ecuación diferencial de movimiento del sistema. La solución de esta ecuación se está en un buen acuerdo con los resultados experimentales.

Our aim was to develop a lumped structural model of muscle under isometric and tetanic conditions to explain the experimental curves: Force-time (F- t), and Force-length (F- l). The model consists of three elements connected in parallel: a contractile, a viscous one, and elastic, and other elastic element, in tandem with the former ensemble. Application of Newtons second law leads to the differential equation of motion of the system. The solution of this equation is in good agreement with the experimental results.

Insulinorresistencia e hiperinsulinemia como factores de riesgo para enfermedad cardiovascular

La Insulinoresistencia se define como un estado metabólico en el cual los efectos periféricos titulares de la insulina se encuentran disminuidos. La resistencia a la acción de esta hormona se compensa mediante un aumento en su secreción por parte de la célula β, resultando en la llamada hiperinsulinemia compensadora. Desde hace varios años se ha acumulado suficiente evidencia de que la insulinoresistencia y la hiperinsulinemia están involucradas en el desarrollo de hipertensión arterial, obesidad y diabetes. Igualmente, la hiperinsulinemia esta altamente relacionada con el desarrollo de de dislipidemia caracterizada por aumento de las VLDL y TAG y una disminución de las HDL favoreciendo la aparición de ateroesclerosis. Otra de las patologías que se ha encontrado fuertemente relacionada con la hiperinsulinemia y la insulinoresistencia es la isquemia miocárdica, tanto en su génesis como en su evolución, ya que se ha demostrado que las posibilidades de supervivencia del miocito se ven reducidas por la disminución de la captación de glucosa durante el período isquémico. La hiperinsulinemia también se relaciona con la hipertrofia miocárdica, probablemente debido al efecto directo de la insulina sobre la elevación de la presión arterial, bien por incremento en la reabsorción de Na+ o por hiperactividad simpática. Finalmente, la resistencia a la insulina es muy prevalente en pacientes no diabéticos que han padecido TIA o ACV sin secuelas. Este hallazgo tiene importantes implicaciones terapéuticas si el tratamiento de esta condición es capaz de reducir la prevalencia de enfermedad cerebro-vascular y enfermedad coronaria.

Insulin resistance is defined as a metabolic state in which insulin peripheral effects are diminished. This condition is compensated by an insulin secretion increase called compensatory hyperinsulinemia. Several years ago several authors are agree with the fact that insulin resistance and hiperinsulinemia are involved in hypertension, obesity and diabetes. Equally, hyperinsulinemia is related with a plasmatic lipidic pattern characterized by a decrease in HDL cholesterol and increases in triglyceride and VLDL levels that in turn conduces to atherosclerosis development. In this sense, myocardial ischemia has been related with these conditions in both, genesis and further evolution because accelerated atherosclerosis and myocyte survival reduction by angiogenesis blockade at insulin-signalling level. Hyperinsulinemia is related with myocardial hypertrophy. One hypothesis that has been designed to explain this association is that insulin may directly increase blood pressure and therefore left ventricular work. In support of this, insulin has been shown to activate the sympathetic nervous system in patients with essential hypertension. Finally, impaired insulin sensitivity is highly prevalent among non-diabetic patients with a recent TIA or non-disabling ischemic stroke. This finding has important therapeutic implications if treatment to improve insulin sensitivity is shown to reduce risk for subsequent stroke and heart disease.

Origen étnico y enfermedad cardiovascular

La interacción entre el ambiente y la genética durante la evolución de la especie humana ha predispuesto al padecimiento de muchas enfermedades crónico-degenerativas comunes de nuestra sociedad occidentalizada. El genotipo Thrifty, producto de la adaptación del hombre paleolítico y neolítico al medio, se caracteriza por hiperinsulinemia sin inhibición de la gluconeogenesis, que, aunada al estilo de vida condiciona el desarrollo de enfermedades cardiovasculares (ECV). Múltiples hipótesis intentan explicar la elevada morbimortalidad por ECV en los diferentes grupos étnicos. Por ejemplo, las poblaciones afro-americanas presentan isoformas de proteínas desacoplantes relacionados con bajo gasto energético basal y metabolismo oxidativo de los ácidos grasos (AG) disminuido, así como una concentración elevada de Lipoproteína(a) y alta sensibilidad a la sal. La población asiática posee numerosos factores de riesgos cardiovasculares contrarrestados en parte por una dieta rica en PUFA´s ω-3. No obstante, los indio-asiáticos aún teniendo una dieta baja en AG saturados, presentan alta prevalencia de ECV, lo que se ha tratado de explicar por la expresión de un genotipo Thrifty. Las poblaciones hispánicas caracterizadas por su origen multirracial presentan alta incidencia de obesidad y diabetes relacionada a leptinorresistencia e insulinorresistencia, con hiperinsulinemia compensadora -de duración variable- que aparentemente precede a la hipertensión arterial esencial. En poblaciones indígenas norteamericanas como los Pima se observa la prevalencia más alta de diabetes a nivel mundial, sugiriéndose una conexión con el gen de la PPP1R3, niveles de TNF-α elevados e IL-6, entre otros.

Environment and genetic interaction during human evolution has predisposed chronic-degenerative diseases development in our society. Thrifty genotype, is a consequence derived from human being adaptation to Paleolithic and Neolithic environment combined with occidental life style, which is characterized by hyperinsulinemia without a gluconeogenesis inhibition, resulting in cardiovascular diseases and diabetes mellitus. Many hypotheses were formulated to explain high diversity rates in coronary artery disease according to different ethnic groups. For example, Afro-American populations present uncoupling proteins isoforms related to lower resting energy expenditure and oxidative metabolism of fatty acids diminished. In addition they have elevated Lipoprotein(a) concentration and high salt sensitivity which are just some of the influential factors in CAD pathogenesis. Asian population has numerous cardiovascular risks factors partly inhibited by a polyunsaturated fatty acids ω-3 rich diet. However, Asiatic Indians still having a low saturated fatty acids diet, but display high CAD prevalence, agreeing with thrifty genotype expression hypotheses. Hispanic populations characterized by multiracial origin exhibit both, high obesity and diabetes prevalence associated with leptin and insulin resistance plus hyperinsulinemia, conditions that apparently precedes high blood pressure. North American Pima Indians show the world highest type 2 diabetes mellitus prevalence, apparently related to PPP1R3 gene, TNF-α and IL-6 high levels, sedentary life style and changes in diet composition and caloric density.

Estrés y vitaminas antioxidantes en pacientes diabeticos Tipo 2

La hiperglicemia incrementa la producción de radicales libres, sobrepasando la capacidad defensiva antioxidante. Objetivo: determinar el estrés oxidativo, defensa antioxidante y el consumo de alimentos ricos en vitaminas A y E, en 24 pacientes de 35-55 años con diagnóstico reciente de diabetes tipo 2, que acudieron a la Consulta de Diabetes del HUAL en el 2004 y del HVS en el 2005 Metodología: Se determinó la concentración de malondialdehido (MDA) para evaluar el estrés oxidativo, a través del método de sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS). La defensa antioxidante mediante la determinación sérica de vitamina A y E por cromatografía líquida de alta eficiencia. El colesterol total (CT) y los triglicéridos (TG) por el método enzimático colorimétrico y el consumo de alimentos ricos en antioxidantes a través de un cuestionario de consumo. Resultados: El MDA estuvo dentro de límites normales (1,617±1,520mm/l), las vitaminas antioxidantes A, E y E estandarizada a los lípidos se encontraron por debajo del punto de corte antioxidante (44,372 ± 25,411µg/dl y 1051,704 ± 499,805 µg/dl y 1.090,041 ± 665,89 µg/dl respectivamente), el consumo de vitamina E fue 16.432,02 ±22.552,55 µg, mientras que el de vitamina A alcanzó valores de 1.863,325 ± 1.559,677 µg. En conclusión, no se encontró estrés oxidativo en etapas tempranas de la Diabetes, pero sí una disminución de los niveles séricos de las vitaminas A y E que puede ser atribuida a la disminución del consumo de la vitamina E, ya que la vitamina A se encontraba por encima de los niveles antioxidantes.

Hyperglicemia increases free radicals generation, surpassing the antioxidant defense capacity. Objective: to assess the oxidative stress, antioxidant defense, and consumption of food rich in vitamins A and E, in 24 patients aged 35-55 years with recent diagnosis of type 2 diabetes, attending to the HUAL Diabetes Unit Care in 2004 and the HVS Diabetes Unit Care in 2005. Methodology: The malon-dialdehyd (MDA) concentration was assessed to evaluate the oxidative stress using the tio-barbituric acid-reactive substances (TBARS) method. The antioxidant defense was assessed by the serum concentration of vitamins A and E through high-performance liquid chromatography; total cholesterol (CT) and triglycerides (TG) were assessed by the colorimetric enzymatic method and the consumption of food rich in antioxidants, using a food-consumption questionnaire. Outcomes: MDA was within normal limits (1.617±1.520mm/l); antioxidant vitamins A, E, and lipids-standardized vitamin E, were below the cut-off point for antioxidants (44.372±25.411µg/dl, 1051.704±499.805 µg/dl and 1090.041±665.89 µg/dl respectively); the vitamin E consumption was 16432.02 ±22552.55 µg, and the vitamin A consumption reached values of 1863.325±1559.677 µg. Conclusions: An oxidative stress in early stages of Diabetes was not observed, except for a decrease in serum levels of vitamins A and E, which can be due to the decrease in the consumption of vitamin E, as the vitamin A was above the antioxidant levels.

Variables hemodinamicas versus hormonas endoteliales en hipertensos y diabéticos tipo 2 con disfunción endotelial

La leptina es una hormona peptídica de 167 aminoácidos secretada por el tejido adiposo. Funciona principalmente como una señal de saciedad, actuando en el hipotálamo, pero dadas sus estrechas conexiones con el sistema inflamatorio y endotelial, se ha planteado que además ejerce una acción reguladora sobre la presión arterial, interactuando con el ON (óxido nítrico) y la PCR (proteína C reactiva). La PPF (prueba presora por frío) es una prueba simple que determina en forma indirecta disfunción endotelial. Objetivos: En este trabajo se evaluaron indicadores bioquímicos (PCR, leptina y ON) e indicadores hemodinámicos (PAS y PAD: presión arterial sistólica y diastólica) durante la realización de una PPF en sujetos hipertensos y diabéticos tipo 2 para determinar la presencia de disfunción endotelial. Métodos: Se incluyeron 43 sujetos, hombres y mujeres, de edades entre 25-60 años divididos en 3 grupos: 15 voluntarios sanos, 13 pacientes con hipertensión, y 15 pacientes con diabetes tipo 2. Una historia médica integral fue obtenida para cada sujeto, incluyendo reposo. Durante el experimento, de 30 minutos de duración, se administró solución salina 0,9%. La PPF, se realizó para medir la reactividad cardiaca al minuto 15. Las variables cardiovasculares (FC, PAS y PAD), fueron medidas en el minuto 0, 16 y 30. Muestras séricas se extrajeron al comienzo y al final del experimento, y tras determinar las variables bioquímicas, se realizó el análisis estadístico. Resultados: La PPF provocó un aumento significativo de la PA y el pulso en todos los grupos. No se apreciaron diferencias significativas para la PCR y la leptina en todos los grupos, pero sí se apreciaron diferencias manifiestas entre grupos para el óxido nítrico (p < 0,05). Los cálculos de sensibilidad y especificidad para las variables bioquímicas individuales no resultaron de significancia estadística o clínica como marcadores de disfunción endotelial, pero sí se halló asociación entre la leptina junto a oxido nítrico (sensibilidad: 20%; especificidad: 80%). Conclusión: La PCR, leptina y ON no mostraron asociación directa y significativa con las variables hemodinámicas en este estudio, aunque se evidenciaron relaciones entre el ON según grupo y entre las variables bioquímicas cuando fueron evaluadas en conjunto.

Leptin is a 167 aminoacid long peptidic hormone, secreted by adipose tissue. Works mainly in the hypothalamus a thirst signal, but given its closed connections with inflammatory and endothelial systems, also has been described that it may exert a regulatory control over blood pressure (BP), interacting with NO (nitric oxide) and CRP (C reactive protein). The CPT (cold pressor test) is a simple test that indirectly determines endothelial dysfunction. Objectives: In this work, biochemical indicators (CRP, leptin and ON) and hemodynamical indicators (systolic and diastolic BP) were performed and evaluated in hypertensives, type 2 diabetics and control subjects, during a single CPT for assessment of endothelial dysfunction. Methods: A total of 43 subjects, males and females aged 25-60 years and divided in three groups: 15 healthy volunteers, 13 hypertensives and 15 patients with type 2 diabetes were included in the study. A complete clinical history was obtained from each subject and a complete physical examination, including an electrocardiogram was carried out. During the assay of 30 minutes, 0.9% saline was infused intravenously. CPT was performed to assess the cardiovascular reactivity at minute 15. The cardiovascular variables (systolic and diastolic BP) were measured in minute 0, 16 and 30. In addition, serum variables were extracted at the beginning and in the end of the experiment and statistical analysis was performed. Results: CPT caused in all subjects a significant increase of BP and pulse. There were no significant differences to CPR and leptin in all groups, although we observed significant differences for nitric oxide (p < 0.05). Sensibility and specificity for all biochemical variables resulted in non significant statistical or clinical importance as markers of endothelial dysfunction, however a positive association was found when leptin and NO were evaluated together (sensibility: 20%; specificity: 80%). Conclusion: CRP, leptin and NO did not shown any direct and significant association with the hemodynamical variables in this study, although a relationship was noted between NO according to group and biochemical variables when studied altogether.

Determinación del colesterol no-HDL, en pacientes diabéticos e hipertensos

Recientemente se ha sugerido el uso del colesterol no-HDL (no-HDL-C) como una herramienta para evaluar el riesgo de muerte por enfermedad cardiovascular. El no-HDL-C se define como la diferencia entre el valor de colesterol total y el colesterol de las HDL, y comprende las fracciones de lipoproteínas: LDL, IDL, y VLDL, e incluye partículas altamente aterogénicas como los remanentes de VLDL. El objetivo del siguiente trabajo, fue el de comparar los valores de colesterol no-HDL, como marcador de riesgo cardiovascular en una población control, diabética e hipertensa. Se evidencio que los valores promedios del no-HDL-C de los grupos con alteraciones fueron mayores que en el grupo control, mientras que las LDL no presentaron una variación tan marcada, en pacientes de alto riesgo. El colesterol no-HDL demostró ser una forma rápida y sencilla de estimar el riesgo a desarrollar enfermedad cardiovascular.

Recently it has been suggested the use of non HDL cholesterol as a tool to evaluate the mortality risk for cardiovascular disease. Non HDL cholesterol is defined as the difference between total cholesterol and HDL and includes the lipoproteins fractions: LDL, IDL and VLDL and partides highly atherogenicas remnants of VLDL. The objetive of this study was to compare the non HDL cholesterol as marker of cardiovascular risk in a population healthy, diabetic and hypertensive. We observed that non HDL cholesterol values were greater in control group, whereas LDL did not show a marked variability in patients with high risk. Non HDL cholesterol showed to be a single and rapid way to estimate the risk for cardiovascular disease.

Cinética de la potenciación post-reposo en tiras de ventrículo derecho aislado de rata, después de varias maniobras inotrópicas

En este trabajo se realizaron maniobras inotrópicas positivas (disminución de [Na+]e, [K+]e y cambios de la frecuencia), y maniobras inotrópicas negativas (disminución de [Ca2+]e y adición de rianodina) en tiras del ventrículo derecho de ratas machos anestesiadas y estimuladas bipolarmente a 1 ó 3 Hz. La máxima potenciación se obtuvo a los 32 s, y disminuyó en las siguientes contracciones monotónicamente hasta alcanzar nuevamente el estado estable. La disminución de [Na+]e produjo un efecto inotrópico positivo ( p<0,05) hasta 16 s de reposo. Con reposo de 64 s y 3 Hz, la fuerza de contracción de los latidos fue menor, quizás por una mayor actividad del intercambiador Na+/Ca2+. La disminución de [Ca2+]e produjo un efecto inotrópico negativo hasta 16 s de reposo. La rianodina fue la única maniobra inotrópica que cambio la cinética de la potenciación post-reposo y del estado estable, lo que indica que la potenciación depende del Ca2+ liberado del retículo sarcoplásmico.

In this work, positive inotropics maneuvers (diminution of [Na+]e, [ K+]e and changes of the frequency), and negative inotropics maneuvers (diminution of [Ca2+]e and adition of ryanodine) were made in right ventricle strip of male anaesthesia rats, stimulated bipolar to 1 or 3 Hz. The maxim potentiation was to the 32 s, with monotonic diminution until the stable state. The diminution of [ Na+]e produced a positive inotropic effect ( p<0,05) up to 16 s rest. With of 64 s rest and 3 Hz, the force of contraction of the beats was smaller, perhaps by a greater activity of Na+/Ca2+ interchanger. The diminution of [ Ca2+]e produced a negative inotropic effect up to 16 s rest. The ryanodine was only inotropic maneuver that change kinetic of potentiation the post-rest and of the stable state, which indicates that the potentiation depend of the Ca2+ released of the sarcoplasmic reticulum.

Diseminación tisular de Cryptosporidium SPP en hospedadores murinos experimentalmente inmunosuprimidos

Cryptosporidium spp. es un protozoario parásito perteneciente al Phylum Apicomplexa, el cual ha sido estudiado ampliamente a nivel humano y veterinario por ser el causante de la criptosporidiosis. En este trabajo estudiamos la diseminación tisular del parásito utilizando dos grupos de hospedadores murinos: uno constituido por ratones infectados y tratados con ciclofosfamida (CPA) por su efecto inmunosupresor y el segundo por animales infectados, no tratados. El análisis de las muestras del grupo parasitado y tratado presentó una amplia diseminación en el intestino, la tráquea, el pulmón, el bazo, en ganglios linfáticos, glándula tiroides, además del hígado, mientras que el grupo control mostró diseminación solamente en el intestino. Los resultados obtenidos en los roedores inmunosuprimidos sugieren resultados semejantes en cuanto a diseminación en el humano inmunodeficiente y la importancia de enfocarse hacia la prevención de la infección intestinal por este Coccidia en individuos con alteraciones del sistema inmune.

Cryptosporidium spp. is a protozoan parasite icluded in the Phylum Apicomplexa, that has been well studied in humans and animals for being the agent that causes cryptosporidiosis. In this experiment we studied the parasite dissemination to organs and systems in two groups of murine hosts: one constituted by infected mice treated with cyclophosphamide (CPA) to produce immunosuppression and the group control, which included infected animals not treated with CPA. The analysis of tissue specimens pertaining to the group of infected and treated animals, showed wide dissemination of the parasite in intestine, trachea, lung, spleen, lymph nodes, thyroid gland and liver, while tissue specimens from controls showed scarce dissemination to the intestine. Observations in organs and systems of the immunosuppressed mice suggest similar parasite behaviour in the immunodeficient human being, therefore the importance for the application of the preventive measures for the infection by this Coccidia in cases of immunodeficient individuals.

Eficacia comparativa de dos presentaciones de clopidogrel en la inhibición de la agregación plaquetaria

Propósito: Comparar la eficacia de dos presentaciones de clopidogrel en la Inhibición de la Agregación Plaquetaria (IAP). Métodos; Estudio prospectivo, secuencial, en 22 voluntarios sanos, 8 mujeres y 14 hombres, con edades entre 21 y 55 años, mediana 30 años. Se les realizó agregación plaquetaria (AP), con ADP 4µM y 10µM, para excluir patología plaquetaria. Todos recibieron clopidogrel (Cirgrel®), 75 mg diarios por 15 días y se les realizó AP. Posteriormente a los 30 días, recibieron clopidogrel (Plavix®) por 15 días y se les realizó AP para comparar los efectos. Resultados: Los promedios de AP basales fueron: 66,45±7.00% y 66,45±7.88%, respectivamente para cada concentración utilizada. Los promedios de IAP fueron: con clopidogrel (Cirgrel®), 30,21±19.51% y 28,96±21.75%, y con clopidogrel (Plavix®) 35,64±24.84% y 30,91±27.4% (p=0.45 y 0.81), respectivamente para cada concentración de ADP. Conclusiones: No hubo diferencias significativas, por lo que podemos concluir que estas dos presentaciones de clopidogrel son equivalentes.

Objective: To compare the efficacy of two presentations of clopidogrel in the Inhibition of Platelet Aggregation (IPA). Methods: Prospective study, sequential, in 22 healthy volunteers, 8 women and 14 men, aged between 21 and 55 years, median 30 years. We tested Platelet Aggregation (PA), with ADP 4µM and 10 µM, to exclude platelet disease. All received clopidogrel (Cirgrel ®), 75 mg daily for 15 days and PA was tested. After 30 days, they received clopidogrel (Plavix ®) for 15 days and PA was tested to compare the effects. Results: Means PA baseline were 66.45±7.00% and 66.45±7.88% respectively for each concentration. The averages of IPA with clopidogrel (Cirgrel®), were 30.21±19.51% and 28.96±21.75%, and clopidogrel (Plavix®) 35.64±24.84% and 30.91±27.4% (p = 0.45 and 0.81) respectively for each concentration of ADP. Conclusion: There were no significant differences, so that we can conclude that these two clopidogrel presentations are equivalents.