Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología

Continuidad institucional

Francisco Yegres

Cryptosporidium spp. y Criptosporidiosis

Cryptosporidium spp. es un protozoario parásito intracelular obligado perteneciente al Phylum Apicomplexa. El género Cryptosporidium, incluye aproximadamente 15 especies y es el causante de la criptosporidiosis, enfermedad considerada principalmente como una parasitosis gastrointestinal cuya principal vía de contagio es la oral, siendo el agua un importante agente para su diseminación. Otros factores de riesgo son el estado inmunológico, la edad y estado nutricional del individuo, así como el número de parásitos causantes de la infección y de las condiciones del medio ambiente, ya que los ooquistes mantienen su infectividad durante un tiempo relativamente largo y son muy resistentes a los desinfectantes. En esta revisión se incluyen aspectos históricos del agente causal y de la enfermedad infecciosa, su epidemiología, fisiopatología, respuesta inmunitaria del hospedador, manifestaciones clínicas, métodos diagnósticos, tratamiento y medidas de prevención.

Abstract Cryptosporidium spp. is a protozoan intracellular obligatory parasite of the Phylum Apicomplexa. Approximately fifteen named Cryptosporidium species are recognized to date. Cryptosporidium produces cryptosporidiosis an enteric infectious disease causing diarrhoea, transmitted mainly by drinking water and recreational water facilities. Other risk factors for this parasitic disease are the host immune response, age and nutritional condition, also the number of infecting parasites and environmental conditions as the oocyst stage can remain infective under cool, moist conditions for many months and are very resistant to disinfectants. In this revision we include historical aspects related to the parasite and the infectious disease, epidemiology, physiopathology, host immune response, diagnostic procedures, treatment and prevention strategies.

Importancia de la identificación de levaduras

En esta revisión se hace referencia a las principales levaduras patógenas en humanos, que afectan principalmente a pacientes inmunocomprometidos. Se destaca la importancia que tiene el proceso de aislamiento e identificación a nivel de género y especie, que permite enriquecer, de manera más precisa, los datos sobre la casuística y epidemiología de las micosis causadas por levaduras, principalmente en el grupo de mayor impacto, referido como levaduras emergentes. También se señalan diversas técnicas y medios de cultivos, descritos en la literatura, para llevar a cabo los ensayos de identificación, los cuales podrían ser aplicables a muchos laboratorios de rutina y de especialización.

Abstract This review refers to the main pathogen yeasts in humans, affect mainly immunocompromised patients. It stands out the importance of the isolation and identification process to the genus and species level, that allows to enrich, in a more precise way, the data about the casuistry and epidemiology of mycoses caused by yeasts, mainly in the group of greatest impact, referred as emergent yeasts. They are also pointed out diverse technical and cultivation media described at the literature, to carry out the identification assays, which could be applicable to several routine and specialization laboratories.

Evaluación de los niveles de IgA secretora anti-Helicobacter pylori en oblación infantil venezolana

Helicobacter pylori está íntimamente asociado con el desarrollo de enfermedad úlcero-péptica y es un factor de riesgo en cáncer gástrico y MALToma. La IgA secretora es el principal anticuerpo en el sistema de las mucosas, jugando un papel importante como primera línea de defensa contra diferentes antígenos. El objetivo de este trabajo fue evaluar los niveles de IgA secretora específica anti-H. pylori en saliva de un grupo de niños con gastritis crónica histológica. Se evaluaron 30 niños con dolor abdominal recurrente (13 hembras y 17 varones con edad de 2 -15 años, media 7,3 años) provenientes de una consulta privada de la ciudad de Caracas y 30 niños asintomáticos del ambulatorio de la Colonia Tovar. En ambos grupos se realizó evaluación clínica, determinación de IgG anti- H. pylori en suero y de IgAs anti-H. pylori en saliva (ELISA). En el grupo sintomático se obtuvieron biopsias gástricas para evaluación histopatológica y prueba rápida de ureasa. En este grupo 53% de los niños presentaron gastritis crónica. 30% fueron H. pylori positivo y 23% H. pylori negativo, 17% de los niños presentó gastritis crónica activa H. pylori positivo. Se observó una tendencia al aumento de los niveles de IgAs relacionado con la severidad del hallazgo histológico; siendo estos niveles significativamente (p=0,0307) más elevados en pacientes con gastritis crónica activa H. pylori positivos que en el resto del grupo estudiado. Además; estos valores fueron significativamente más altos (p=0,0408) en pacientes H. pylori positivos con gastritis crónica activa que en pacientes con gastritis crónica. Estos resultados sugieren que los anticuerpos IgA secretores en saliva pueden jugar un papel importante en la inmunidad gástrica frente a la infección por H. pylori, asociado a la cronicidad y fase activa de la gastritis.

Abstract Helicobacter pylori is associated with peptic ulcer disease and represents a risk factor in gastric cancer and maltoma. Secretory IgA, is the predominant gastrointestinal mucosal antibody, with an important effect against different antigens. The objetive of this study was to meassure the salival specific secretory IgA anti-H.pylori value in 30 children with chronic abdominal pain (13 female; 17 male, range 2-15 years old mean 7,3 years)and 30 children asymptomatic. Each child of the symptomatic group underwent clinical evaluation, serum IgG anti- H. pylori, salival IgAs anti-H. pylori (ELISA), gastric biopsy for histology, rapid urea test. Chronic gastritis was found in 53% (30% positive H. pylori, 23% negative H. pylori). Chronic active gastritis was detected in 17%, all positive for H. pylori. A significant tendency to increase secretory IgA levels, related to the severity of the histological gastric finding was observed (p=0,0307); which was significatly higher in children with positive H. pylori and chronic active gastritis than chronic gastritis (p=0,0408). These results probably reflect an important effect of the salival secretory IgA antibody in the gastric immunity against H. pylori infection associated with chronicity and activity of gastric infection.

Caracterización de plásmidos de resistencia a antibióticos en aislados nosocomiales del Hospital Universitario de Caracas

La presencia de plásmidos transmisibles confiere a las bacterias propiedades que complementan su capacidad para colonizar ambientes adversos, favorece el intercambio genético intracelular, y garantiza la diseminación horizontal de genes de resistencia a antibióticos, y de otras funciones, entre géneros distintos. En este trabajo se determinó, en aislados nosocomiales, la presencia de plásmidos auto-transmisibles y co-transferibles que exhiben complejos patrones de resistencia a antibióticos. El análisis del contenido plasmídico reveló la coexistencia de moléculas de diferentes tamaños. Entre las de mayor tamaño se establecieron cinco patrones de restricción diferentes, dos de los cuales se encontraron con alta frecuencia. Estos resultados sugieren que, entre los plásmidos identificados, un grupo bien definido es responsable de la diseminación de un amplio conjunto de genes de resistencia entre la muestra nosocomial estudiada. Plásmidos como los descritos permiten explicar el flujo de genes entre bacterias, y la adaptabilidad de las poblaciones para colonizar nuevos ambientes.

Plasmids confers to bacteria properties that allow them to colonize adverse environments and to facilitate gene exchange. Plasmids are responsible for horizontal dissemination of resistance genes between bacteria from different genus. In this work auto and co-transferable plasmids exhibiting complex antibiotic resistance patterns were found in nosocomial isolates. Presence of plasmid of diverse sizes was found. The existence of five different plasmid restriction patterns was confirm being two of them the most frequently identified. These results suggest that plasmids carrying antibiotic resistance determinants are responsible for resistance genes dissemination between the nosocomial populations. Presence of these plasmids could explain gene flow among bacteria as well as adaptability to colonize new environments.

Mantenimiento y preservación de hongos en agua destilada y aceite mineral

Mantener y conservar una colección de hongos es una tarea que demanda constante dedicación y vigilancia. Requiere conocer las características morfológicas, fisiológicas y bioquímicas de los hongos, así como sus requerimientos en cuanto a los métodos de preservación. El objetivo principal de este trabajo fue evaluar la viabilidad, pureza y estabilidad morfológica macroscópica y microscópica de hongos levaduriformes y filamentosos, preservados en agua destilada y aceite mineral durante largos períodos de tiempo. Se escogieron al azar 411 hongos (170 levaduriformes y 241 filamentosos), todos ellos preservados por duplicado bajo capa de aceite mineral y agua por Castellani. Para la evaluación de las levaduras se realizaron pruebas rápidas, bioquímicas y fisiológicas y para los hongos filamentosos pruebas bioquímicas y cultivos en lámina. El análisis estadístico se realizó utilizando medidas de tendencia central y análisis de varianza (ANOVA). De 170 levaduras, 100% se conservaron viables, puras y estables morfológicamente por los dos métodos de preservación, durante un período de tiempo entre 2 - 48 años. De 241 hongos filamentosos, 100% se conservaron puros y viables, mientras que 95,4% se mantuvieron estables morfológicamente, por ambos métodos usados, durante un período de tiempo entre 3 - 47 años. No se encontraron diferencias estadísticamente significativas al comparar ambos métodos de conservación. Los métodos de conservación de agua por Castellani y capa de aceite mineral garantizan la preservación adecuada de hongos levaduriformes y filamentosos durante largos períodos de tiempo, asegurando viabilidad, pureza y estabilidad morfológica.

Abstract To maintain and to conserve a fungal culture collection is a task that demands constant dedication and surveillance. It requires to know morphological, physiological and biochemical characteristics of fungi, as well as their requirements for preservation methods. The main objective of this work was to evaluate viability, purity and morphological stability of yeasts and moulds, long-term preserved under mineral oil and distilled water. 411 fungi were random chosen (170 yeasts and 241 moulds), all of them kept in duplicate under mineral oil and distilled water method described by Castellani. The yeasts evaluation was carried out by physiological, biochemical and quick tests. For filamentous fungi, biochemical and thin plate cultures were done. The statistical analysis was carried out using central tendency measures and variance analysis (ANOVA). 170 (100%) of the yeasts were conserved viable, pure and morphologically stables for the two preservation methods, during 2-48 years. From 241 filamentous fungi, 100% were conserved pure and viable, while 95,4% stayed morphologically stable, for both methods used, during 3-47 years. No statistically significant differences were found when comparing both conservation methods. Preservation methods like distilled water and under mineral oil guarantee long-term appropriate conservation of yeasts and moulds, assuring viability, purity and morphological stability.

Evaluacion de la calidad sanitaria y detección de Salmonella spp., en cremas de leche no pasteurizadas expendidas en el eje costero arabobo-Falcón. Venezuela, 2003

Se evaluó la Calidad Sanitaria y presencia de Salmonella spp. en cremas de leche no pasteurizadas expendidas en el eje costero Carabobo-Falcón, según Metodología por la APHA. Se obtuvo 93,7% de las muestras con contajes de Bacterias Aerobias Mesófilas no aceptables de acuerdo a la normativa Venezolana (COVENIN 3046 - 93), según este indicador sólo 6,7% de las muestras estuvo dentro de los límites microbiológicos. De las cremas analizados 93,3% presentó carga de mohos fuera del rango de aceptación y según contaje de levaduras 96,7% son rechazables. Se recomiendan posteriores estudios con una muestra mayor sin embargo, las muestras de crema de leche analizadas, pueden considerarse de pobre calidad sanitaria y por ende susceptibles de sufrir alteraciones y causar enfermedades, sugiriendo posibles fallas en las condiciones sanitarias de producción.

Abstract The Sanitary Quality and Salmonella spp presence was evaluated in sold not pasteurized milk creams in the coastal axis Carabobo-Falcon, according to Methodology by the APHA. 93,7 % of the samples presented not acceptable recounts of Aerobic Mesophiles of agreement to the Venezuelan regulation (COVENIN 3046 - 93), according to this indicator only 6,7 % of the samples was inside the microbiological limits. Of the analyzed creams 93,3 % presented load of moulds out of the acceptance range and according to yeasts recounts 96,7 % is rejectable. Later studies are recommended with a major sample nevertheless, the analyzed milk creams samples, can be considered of poor sanitary quality and therefore capable of suffering alterations and causing diseases, suggesting possible faults in the sanitary conditions of production.

Determinación de anticuerpos contra Chlamydia trachomatis en pacientes del Servicio de Infertilidad del Centro Médico Dr. Rafael Guerra Méndez, Valencia, Venezuela

Chlamydia trachomatis, es una bacteria intracelular obligada, que afecta las células epiteliales y macrófagos, multiplicándose en su interior. Ataca a ambos sexos y puede producir una alteración del tracto reproductor por lo que es un patógeno importante en humanos y animales, sin embargo, los métodos para el diagnóstico de infección por Chlamydia son aun inadecuados. En el presente estudio se identificó mediante el uso de la técnica InmunoComb Chlamydia bivalente la presencia de anticuerpos contra Chlamydia trachomatis en 34 muestras de sueros de pacientes sospechosos de infección (23 pacientes femeninos, 11 pacientes masculinos) que asistieron al Servicio de Infertilidad (Embriogen). Del total de muestras estudiadas, 9 pacientes resultaron positivos (26.4%) [8 pacientes femeninos (88.8%) y 1 paciente masculino (11.1%)]. En conclusión, la detección de anticuerpos específicos IgG facilita el diagnóstico de infecciones por Chlamydia, por ser rápido, sensible y específico.

Abstract Chlamydia trachomatis, is an intracellular bacteria that affects macrophages and epithelial cells, multiplying in their interior. It attacks both sexes and it can produce an alteration of the reproductive tract, for what is an important human and animal pathogen. However, the methods for Chlamydia diagnosis are even inadequate. In the present study, antibodies against Chlamydia were identified by "ImmunoComb bivalent Chlamydia" technique, in 34 serum samples of infection suspicious patients' (23 female patients, 11 male patients), that attended at the Infertility Service (Embriogen). 9 patients were positive (26.4%) [8 feminine patients (88.8%) and 1 masculine patient (11.1%)] of the studied samples. In conclusion, the detection of specific Ig G antibodies facilitates the diagnosis of Chlamydia infections, because is fast, sensitive and specific.

Nivel 4 de Bioseguridad (I)

El nivel 4 de bioseguridad debe utilizarse para trabajar con microorganismos exóticos de alta peligrosidad, capaces de producir infecciones graves y hasta mortales en el personal del laboratorio. Para todas las actividades a este nivel, se requieren cabinas de seguridad biológica clase III, prácticas microbiológicas rigurosas y un laboratorio con diseño especial, para evitar la diseminación de microorganismos en el medio ambiente.

Abstract The biosecurity level 4 should be applied to work with exotic microorganisms of highly hazardous, able to produce serious and mortal infections in the laboratory personnel. For all the activities at this level, class III security biological cabinets, rigorous microbiological practices and a special laboratory design are required, to avoid microorganisms dissemination in the environment.

Charles Chamberland

Rosandra Mazzali de Ilja (Compiladora)