Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología

Centenario del descubrimiento de la enfermedad de Chagas

Pilar Hernández

Alcances y limitaciones de los métodos de epidemiología molecular basados en el análisis de ácidos nucleicos

La Epidemiología es la rama de la ciencia que se dedica al estudio del origen, la distribución y el control de las enfermedades que afectan a las poblaciones. La Epidemiología Molecular es una nueva rama de la ciencia en la cual se implementan técnicas moleculares en los estudios epidemiológicos. Diversos métodos de genotipificación molecular pueden ser empleados para clasificar a los microorganismos en grupos estrechamente relacionados o divergentes. Entre los métodos de genotipificación más usados están: la electroforesis de campo pulsado, la prueba de PCR, la secuenciación del genoma y la hibridación con sondas de DNA. Cada técnica ha ofrecido una alternativa para la investigación epidemiológica; sin embargo, también tienen aplicabilidades limitadas. El presente trabajo tiene como objetivo la revisión de las fortalezas y debilidades de éstas técnicas moleculares utilizadas para la genotipificación

Epidemiology is a science dedicated to the study of the origin, distribution and control of diseases that affect populations. Molecular Epidemiology is a new branch of science that uses molecular techniques in epidemiological studies. Several molecular genotyping methods can be used to classify microorganisms in closely related or divergent groups. Pulsed-field gel electrophoresis, the PCR test, genomic sequencing, and DNA probe hybridization are the most used techniques in genotyping. Each technique offers an alternative for epidemiological investigation; nevertheless, they also have limited applications. The objective of this work was to review the strengths and weaknesses of these molecular techniques used for genotyping

Escherichia coli shigatoxigénica: Patogénesis, diagnóstico y tratamiento

Escherichia coli shigatoxigénica (ECST) pertenece al grupo de las bacterias productoras de diarrea, patología que aún constituye una de las principales causas de morbilidad en niños a nivel mundial. ECST produce una o más toxinas shiga (Stx1, Stx2 y sus variantes), que es su principal factor de patogenicidad, responsable de las complicaciones intestinales y sistémicas. La transmisión puede ocurrir de persona a persona, o a través de agua o alimentos contaminados. Su capacidad de producir brotes epidémicos y la gravedad de las complicaciones de la enteritis, es lo que le confiere a este microorganismo gran importancia en salud pública. Este patógeno no se detecta habitualmente en los laboratorios clínicos por las similitudes bioquímicas y clínicas con otros patógenos entéricos, siendo necesario métodos serológicos y moleculares para su identificación y caracterización definitiva. En este trabajo, hemos revisado la información disponible acerca de la patogenicidad, diagnóstico y tratamiento de la infección producida ECST

Shigatoxigenic Escherichia coli (STES) belongs to the group of diarrhoea producing bacteria, pathology which still constitutes one of the main causes of morbility in children at a world wide level. STES produces one or more shiga toxins (Stx1, Stx 2 and their variants) which is their main pathogenicity factor, responsible for the intestinal and systemic complications. Transmission can occur person-to-person, or through contaminated water or food. Its capacity for producing epidemic outbreaks and the seriousness of the enteritis complications are what confers this microorganism great public health importance. This pathogen is not usually detected at clinical laboratories due to its biochemical and clinical similarities with other enterical pathogens, and it necessary to use serological and molecular methods for its definitive identification and characterization. In this paper, we have revised available information regarding pathogenicity, diagnosis and treatment of STES produced infections

Crecimiento de la cianobacteria marina Oscillatoria sp. MOF-06 en relación al pH en cultivos discontinuos

Se evaluó el crecimiento, contenido de pigmentos, carbohidratos, exopolisacáridos y proteínas en la cianobacteria marina Oscillatoria sp. a pH 6,7,8 y 9 en cultivos discontinuos. Todos los cultivos se realizaron por triplicado en medio de cultivo ALGAL, a 3,5% de salinidad, aireación constante, a 28 ± 2°C, iluminación a 156 μmol quanta m-2 s-1 y fotoperiodo 12:12h. Los cultivos a pH 9 y controles (pH 9-11), alcanzaron los valores más elevados de turbidez y masa seca. El contenido de clorofila a fue superior en fase exponencial, a pH 9 y control, con los valores más bajos a pH 6. La concentración de ficocianina también fue superior a pH 9 y en el control; mientras que a pH 6 y 7 se detectaron los valores más bajos. La concentración de proteínas y de carbohidratos también aumentó con el pH, en el siguiente orden control>9>8>7>6. En cambio, Oscillatoria produjo más exopolisacáridos a pH entre 6 y 8. Estos resultados demuestran que la cianobacteria marina Oscillatoria sp. MOF-06 incrementa la producción de biomasa, contenido de clorofila, proteínas y carbohidratos en condiciones alcalinas; mientras que, se induce una disminución en la producción de exopolisacáridos; pero sin afectar el contenido de carotenoides

Growth, pigment content, carbohydrates, exopolysacharides and proteins were evaluated in the marine cyanobacteria Oscillatoria sp. in discontinuous cultures at pH 6, 7, 8 and 9. All cultures were done in triplicate in ALGAL culture medium, at 3.5% salinity, constant airing, 28 ± 2ºC, 156 µmol m-2 s-1 illumination, and 12:12h photoperiod. Cultures at pH 9 and controls (pH 9-11), reached the highest turbidity and dry mass values. The α chlorophyll content was higher in the exponential phase, at pH 9 and control, while the lowest values were detected at pH 6 and 7. Protein and carbohydrate content also increased with pH in the following order: control>9>8>7>6. On the other hand, Oscillatoria produced more exopolysacharides at pHs between 6 and 8. These results show that the marine cyanobacteria Oscillatoria sp. MOF-06 increases its biomass production, and chlorophyll, protein and carbohydrate content under alkaline conditions, while this pH induces a decrease of exopolysacharide production, but without affecting the carotenoid content

Diagnóstico clínico presuntivo versus diagnóstico microbiológico en mujeres con leucorrea

El propósito de esta investigación fue evaluar el grado de concordancia entre el diagnóstico clínico presuntivo y el diagnóstico apoyado en estudios microbiológicos, en 164 pacientes atendidas consecutivamente en dos consultas ginecológicas de Maracaibo-Venezuela; a quienes se les practicó el examen clínico y estudios microbiológicos de las secreciones vaginales (examen al fresco, coloración de Gram y cultivo convencional). Los resultados evidenciaron: a) concordancia débil (56,7%) entre el diagnóstico presuntivo y el diagnóstico definitivo, la cual disminuyó a 38,2% al excluir los casos asintomáticos; b) diagnóstico clínico de vaginosis bacteriana (41,0%) y candidiasis vaginal (64,5%); c) dificultad para diagnosticar clínicamente las infecciones mixtas y los casos compatibles con vaginitis aeróbica o vaginosis citolítica. Estos resultados sugieren que, aunque la sintomatología y las características del flujo vaginal pueden ser orientadoras, el diagnóstico clínico presuntivo de las infecciones vaginales tiene un margen de error elevado y puede conllevar a manejos terapéuticos inadecuados

The purpose of this study was to evaluate the correlation degree between the presumptive clinical diagnosis and the diagnosis based on microbiological studies in 164 patients attended consecutively in two outpatient gynecological clinics in Maracaibo, Venezuela, who were studied through clinical examination and microbiological examination of vaginal secretions (fresh smear, Gram staining and conventional culture). The results showed: a) a weak correlation (56.7%) between the presumptive diagnosis and the final diagnosis, which decreased to 38.2% when asymptomatic cases were excluded; b) clinical diagnosis of bacterial vaginosis (41.0%) and vaginal candidiasis (64.5%); and c) difficulty for clinically diagnosing mixed infections and cases compatible with aerobic vaginitis or cytolytic vaginosis. These results suggest that, even though the symptoms and characteristics of the vaginal fluid can offer some orientation, the presumptive clinical diagnosis of vaginal infections has a high margin of error and can lead to inadequate therapy

Efecto antagónico de Trichoderma harzianum sobre algunos hongos patógenos postcosecha de la fresa (Fragaria spp)

La podredumbre blanda (Rhyzopus stolonifer), la podredumbre negra (Mucor spp., Aspergillus niger y Pythium spp.) son las enfermedades postcosecha más comunes de la fresa (Fragaria spp.) y generan grandes pérdidas de estas. Durante muchos años se han utilizado fungicidas sintéticos para controlar a estos patógenos, pero se ha demostrado que se hacen resistentes a dichos productos, además de representar un riesgo potencial al ambiente y la salud humana. Todo esto ha conllevado a la búsqueda de alternativas naturales como el empleo de extractos vegetales y antagonistas microbianos, siendo Trichoderma harzianum el antagonista mas utilizado como control biológico. El objetivo de este estudio fue determinar el efecto antagónico de T. harzianum sobre algunos hongos patógenos postcosecha en fresa y conocer su mecanismo de acción. Las muestras de fresa fueron transportadas al laboratorio en los mismos empaques de venta, y posteriormente las fresas fueron colocadas en cámaras de germinación controlando la humedad para el desarrollo rápido de hongos presentes en la fruta. Se identificaron los hongos Rhyzopus stolonifer, Mucor spp., Penicillium digitatum, Rhizoctonia solani, Aspergillus niger y Pythium spp., sobre los cuales se realizó la prueba de antagonismo usando al hongo T. harzianum. La velocidad de crecimiento del biocontrolador fue mayor que el crecimiento de los hongos postcosecha (p<0,01) y a las 96 horas de incubación la caja de Petri estaba completamente cubierta y en la zona de encuentro entre éstos se observó que el mecanismo de acción del biocontrolador fue de tipo micoparasítico. T. harzianum resultó ser un excelente controlador in vitro de hongos postcosecha de frutos de fresa

Soft rotting (Rhyzopus stolonifer) and black rotting (Mucor spp., Aspergillus niger and Pythium spp.) are the most common post harvesting strawberry (Fragaria spp.) diseases, generating great losses. During many years synthetic fungicides have been used to control these pathogens, but their development of resistance to these products has been demonstrated, following to the fact that they represent a potential environmental and human health risk. This has lead to the search of natural alternatives such as the use of vegetal extracts and microbial antagonists, being Trichoderma harzianum the antagonist most widely used as biological control. The purpose of this study was to determine the antagonist effect of T. harzianum over some post strawberry harvesting pathogens and determine their mechanism of action. The strawberry samples were transported to the laboratory in the same packages in which they were sold, and then were placed in germination chambers, controlling humidity to obtain a rapid development of the fungi present in the fruit. We identified the following fungi: Rhyzopus stolonifer, Mucor spp., Penicillium digitatum, Rhizoctonia solani, Aspergillus niger and Phytium spp., which were tested for antagonism, using the T. harzianum. The growth speed of the biocontroller was greater than that of the post harvest fungi (p<0,01) and at 96 hours of incubation the Petri dish was completely covered, and the encounter area between them showed that the action mechanism of the biocontroller was of the mycoparasitic type. T. harzianum turned out to be an excellent in vitro controller of post strawberry harvest fungi

**Genotipos vacA de Helicobacter pylori en una población venezolana**

La infección por Helicobacter pylori está asociada con gastritis, úlcera gastroduodenal, linfoma tipo Maltoma, y es considerado un importante factor de riesgo para el desarrollo de cáncer gástrico. El objetivo de este estudio fue caracterizar los genotipos vacA de cepas de H. pylori provenientes de biopsias gástricas de una población venezolana. Se evaluaron 128 pacientes con indicación de endoscopia, por enfermedad de las vías digestivas superiores. Se obtuvieron biopsias gástricas de cada uno de ellos para la amplificación de glm y tipificación de las formas alélicas de vacA, empleando la reacción en cadena de la polimerasa. Los resultados demostraron que 82 (64%) de las muestras fueron positivas para la amplificación de glm. De estos, 51 (62%) de las cepas tenían el genotipo vacA, forma alélica S1 (17 s1a, 29 s1b, 5 s1a+s1b, 10 fueron no tipificables) y 21 (26%) tenían el subtipo S2. El análisis de la región media de vacA reveló que 42 (51%) fueron vac A m1, 26 (32%) m2 y 14 (17%) no tipificaron para m1 o m2. Los resultados de la presente investigación demostraron una alta frecuencia de infección por H pylori genotipo vac A variante alèlica s1/ m1

Helicobacter pylori infection is associated with gastritis, gastroduodenal ulcer, and Maltoma type lymphoma, and is also considered an important risk factor for the development of gastric cancer. The purpose of this study was to characterize vacA genotypes of H. pylori strains from gastric biopsies from a Venezuelan population. One hundred and twenty eight patients who required endoscopy due to disease of the upper digestive system were evaluated. A gastric biopsy was taken from each of them for glm amplification and typing of the allelic vacA forms, using the polymerase chain reaction assay. Results showed that 82 (64%) of the samples were positive for glm amplification. Of these, 51 (62%) of the strains had the vacA genotype, S1 allelic form (17 sla, 29 slb, 5 sla+slb, 10 were not typable) and 21 (26%) had the S2 subtype. The analysis of the vacA mid region revealed that 42 (51%) were vacA m1, 26 (32%) m2, and 14 did not type for m1 or m2. The results of this investigation showed a high frequency of H. pylori vacA genotype infections, s1/m1 allelic variants

Leishmaniosis visceral (1942-2006) y seroprevalencia en dos comunidades del estado Bolívar, Venezuela

La leishmaniosis visceral (LV) es una enfermedad infecciosa sistémica causada por protozoos del complejo Leishmania donovani, que puede ser fatal si no es tratada. Afecta fundamentalmente al hombre y los caninos. El perro es un reservorio importante y es responsable de la naturaleza endémica/epidémica de la enfermedad. El objetivo de este estudio fue conocer la casuística de Leishmaniosis Visceral (LV) humana en el estado Bolívar, Venezuela, desde la ocurrencia del primer caso hasta el año 2006, y determinar la seroprevalencia de LV humana y canina en dos poblaciones del mismo. Se revisaron los casos con diagnóstico confirmado de LV y la bibliografía publicada al respecto; se aplicó una encuesta y se determinaron anticuerpos específicos contra la proteína K39 recombinante de LV, a humanos y caninos en comunidades de Las Bombitas y Los Tanques. Se registraron 54 casos de LV humana. El estudio seroepidemiológico mostró anticuerpos específicos en 3 casos humanos y en 8 caninos. La LV en el estado Bolívar es endémica en la mayoría de los municipios y afecta principalmente a jóvenes y niños. La aparición de casos nuevos y la presencia de caninos seropositivos para LV en Las Bombitas y Los Tanques muestran el carácter esporádico y endémico de esta enfermedad en estas localidades del estado Bolívar

Visceral leishmaniasis (VL) is a systemic infectious disease produced by protozoa of the Leishmania donovani complex, which can be fatal if not treated. It basically affects man and canine species. The dog is an important reservoir and is responsible for the endemic/ epidemic nature of the disease. The purpose of this study was to determine the human Visceral Leishmaniasis casuistic in Bolivar State, Venezuela, since the occurrence of the first case until 2006, and determine human and canine VL seroprevalence in two populations from this state. We revised cases with a confirmed VL diagnosis and bibliography published in this respect; we carried out a survey and determined specific anti VL recombinant protein K39 antibodies in humans and canines from Las Bombitas and Los Tanques villages. We registered 54 human and 8 canine VL cases. VL is endemic in Bolivar State at most municipalities and affects mainly young persons and children. The occurrence of new cases and the presence of VL seropositive canines at Las Bombitas and Los Tanques shows the sporadic and endemic nature of this disease at these Bolivar State localities

Seroprevalencia de la toxoplasmosis en mujeres que asistieron al Hospital Dr. Rafael Gallardo. Coro, estado Falcón

En Falcón, no se han realizado estudios relacionados con la toxoplasmosis. La finalidad de este estudio es determinar la prevalencia de anticuerpos anti-Toxoplasma gondii tipo IgM e IgG, en mujeres no embarazadas que acudieron al hospital Dr, Rafael Gallardo. El diagnóstico se hizo a través de inmunoensayo enzimático. El 85,5% resultaron negativas para la presencia de ambos anticuerpos, 14,3% mostraron valores positivos de IgG y 0,37% tuvo valores positivos para IgM. Se descartó la presencia de infección activa en los pacientes que resultaron IgG(+). La paciente IgM(+) se manejó como primoinfección. La baja prevalencia encontrada puede deberse a escasa exposición a factores de riesgo o al subregistro. Hacer el diagnóstico precoz permite iniciar medidas profilácticas que reduzcan la transmisión. El estudio serológico debe ser extendido a mujeres embarazadas y complementado con los datos epidemiológicos

Studies related with toxoplasmosis have not been done at Falcon State, Venezuela. The aim of this study was to determine the IgM and IgG type anti-Toxoplasma gondii antibody prevalence in non pregnant women who attended the Dr. Rafael Gallardo Hospital. Diagnosis was made through an immune-enzymatic assay. Of the sera tested, 85.5% were negative for both antibodies; 14.27% of the sera were positive for IgG and 0.37% for IgM. The presence of active infection was rejected in the IgG(+) patients. The one patient who was IgM positive was considered as recently infected. The low prevalence found may be due to scarce exposure to risk factors, or to a sub registration. An early diagnosis will allow initiating prophylactic measures that reduce transmission. Serologic studies should be extended to pregnant women and complemented with epidemiological data

Indicadores entéricos en vegetales frescos que se comercializan en mercados populares de Maracaibo

Se analizó la calidad microbiológica de 300 vegetales (100 lechugas, 100 cilantros y 100 perejiles) en dos mercados de la ciudad de Maracaibo. Se determinó coliformes totales (CT), coliformes fecales (CF) y Escherichia coli por la técnica del número más probable. Los CT oscilaron entre 10³-10(9) NMP/gr en más del 80% de las lechugas adquiridas en ambos mercados; mientras que los CF se ubicaron entre 10¹-10(7) NMP/gr en 90% de las muestras del mercado 2. Para 96% de los cilantros los CT estuvieron entre 10(4)-10(9) NMP/gr. Los CF se ubicaron entre 10(4)-10(9) NMP/gr en 88% y 84% de las muestras del mercado 1 y 2. Los CT oscilaron entre 10(4)-10(9) NMP/gr en 90% o más de los perejiles. Se obtuvieron valores de CF entre 10³-10(9) NMP/gr en 82% y 60% de los especímenes recolectados en el mercado 1 y 2, respectivamente. 52% de las muestras de perejil adquiridas en el mercado 1 presentaron recuentos elevados para E. coli (10(4)-10(7)NMP/gr). Según los criterios microbiológicos para E. coli, 84,7% de los vegetales fueron satisfactorios y 15,3% insatisfactorios. Debido a la variabilidad de los niveles de coliformes y E. coli en los vegetales frescos, es recomendable establecer normas locales para evaluar la calidad microbiológica de estos alimentos

The microbiological status of 300 vegetables (100 lettuces, 100 corianders, and 100 parsley) from two food markets in Maracaibo city was analyzed. Total coliforms (TC), fecal coliforms (FC) and Escherichia coli were determined by the most probable number technique. TC oscillated between 10³-10(9) MPN/gr in over 80% of the lettuces bought at both markets, while FC oscillated between 10-10(7) MPN/gr in 90% of the samples from Market 2. In 96% of the corianders, TC varied between 10(4)-10(9) MPN/gr, and FC varied between 10(4)-10(9) in 86% and 84% of the samples from Markets 1 and 2 respectively. In parsley, TC oscillated between 10(4)-10(9) in 90% or more of the total samples, and FC varied between 10³-10(9) in 82% and 60% of the samples from Market 1 and 2 respectively. In 52% of the parsley samples obtained from Market 1 there were high E. coli counts (10(4)-10(7) MPN/gr). According to the microbiological criteria for E. coli, 84.7% of the vegetables were satisfactory and 15.3% non satisfactory. Due to the variability of the coliform levels in fresh vegetables, it is advisable to establish local norms to evaluate the microbiological quality of this food

Extracto de Citrus limon para el control de aflatoxinas y hongos aflatoxigénicos en alimentos concentrados para pollos de engorde producidos en Venezuela

Se evaluó la presencia de aflatoxinas totales en muestras de alimentos concentrados para pollos de engorde y se aplicaron técnicas de control para los hongos aflatoxigénicos y sus toxinas (aflatoxinas), utilizando un extracto comercial de Citrus limon. Para ello se recolectaron al azar 50 muestras de un lote de alimentos concentrados para pollos de engorde. Se cuantificaron las concentraciones de aflatoxinas a través del método de enzimoinmunoensayo competitivo (ELISA) y se aplicó un sistema de control contra aflatoxinas, utilizando un extracto de Citrus limon. Finalmente, se determinó la capacidad antifúngica del extracto sobre el crecimiento de los hongos aflatoxigénicos aislados de las muestras. Se detectó que el 90% de las muestras analizadas estaban contaminadas con aflatoxinas, encontrándose en el 54% de las mismas un rango de concentraciones entre 5 a 14 µg/kg. El extracto de Citrus limon resultó ser un potente antiaflatoxigénico y antifúngico, reduciendo las concentraciones de aflatoxinas en las muestras de alimentos para pollos de engorde hasta en un 73,6%, e inhibiendo por completo el crecimiento de los hongos descritos como aflatoxigénicos

The presence of total aflatoxins in samples of concentrated chicken feed was evaluated, and control techniques for aflatoxigenic fungi and their toxins (aflatoxins) using a Citrus limon commercial extract were applied. For this purpose, 50 samples were collected randomly from a lot of concentrated chicken feed. The aflatoxin concentrations were quantified through a competitive enzyme-linked-immunosorbent-assay (ELISA), and an aflatoxin control system was applied using a Citrus limon extract. Finally, the antifungal capacity of the extract over the growth of the aflatoxigenic fungi isolated from the samples was determined. It was established that 90% of the analyzed samples were contaminated with aflatoxins, and 54% of them had a 5-14 µg/kg concentration range. The Citrus limon extract was a potently antiaflatoxigenic and antifungal, reducing the aflatoxin concentrations in the chicken feed samples in up to 73.6%, and totally inhibiting the growth of fungi described as aflatoxigenic

Co-infección cerebral grave por Cryptococcus neoformans y Mycobacterium tuberculosis en un paciente con tuberculosis pulmonar no bacilífera

An exceptionally rare case of concurrent central nervous system infection by Cryptococcus neoformans and Mycobacterium tuberculosis in a 25-year-old otherwise healthy Chinese student who very recently joined Italian post-doctoral courses is described, together with diagnostic and therapeutic difficulties encountered in a six-month-long hospitalization period, when only transient and/or negligible immune system impairments were detected. A non-bacillary pulmonary tuberculosis probably preceded both brain complications. This episode of very infrequent concurrent infections, should enforce the need of maintaining an elevated clinical suspicion for opportunistic infections and tuberculosis, even in absence of an obvious immunodeficiency, and related epidemiological clues

Se describe un caso excepcionalmente raro de una co-infección del sistema nervioso central por Cryptococcus neoformans y Mycobacterium tuberculosis en una estudiante china de 25 años de edad, sin ningún otro tipo de enfermedad, que recientemente participó en un curso post-doctoral en Italia, junto con las dificultades diagnósticas y terapéuticas encontradas durante un período de seis meses de hospitalización, durante el cual se detectaron alteraciones transitorias y/o insignificantes del sistema inmune. Probablemente, ambas complicaciones cerebrales fueron precedidas por una tuberculosis pulmonar no bacilífera. Este episodio de infecciones simultáneas muy poco frecuentes debe reforzar la necesidad de mantener una elevada sospecha clínica de tuberculosis e infecciones oportunistas, aún en ausencia de una evidente inmunodeficiencia e indicios epidemiológicos relacionados

Modalidades de la Prueba del Tubo Germinal

Las infecciones por levaduras del género Candida, en la actualidad son cada vez más frecuentes, particularmente cuando se presentan condiciones que inmunosuprimen al paciente, como el Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida y el uso de quimioterápicos e inmunomoduladores, entre otros. Candida albicans es la especie del género que se aísla con mayor frecuencia. Entre las pruebas de identificación para las especies de levaduras del género Candida se encuentran la evaluación de las características macroscópicas de las colonias, pruebas físiológicas, como la prueba del tubo germinal, termotolerancia, auxanograma, zimograma, ureasa y resistencia a la cicloheximida, entre otras. De estas, la prueba del tubo germinal es una prueba sencilla y rápida que puede ejecutarse de varias formas. De manera tradicional se ha realizado en tubo y con suero, aunque también se puede realizar en placa. En este trabajo se revisan las diversas formas de realizar esta prueba y se describe una modalidad adicional, producto de la experiencia diaria en el trabajo de laboratorio, con la ventaja del ahorro de material de vidrio y tiempo

At the present time, the infections by yeasts of the genera Candida, are more and more frequent, particularly when exists inmunosuprimen conditions, like the Acquired Immunodeficiency Syndrome, the use of quimioterapics and inmunomodulators, among others. Candida albicans is the species most frequently isolated from clinical samples. Among the identification tests of the yeasts species of the genera Candida are the evaluation of colony characteristics, physiological and biochemical tests like the germ tube, termotolerancy, auxonogram, zimogram, urease, resistance to cicloheximide, among others. The germ tube test is a simple and fast test, of which several forms exist to carry out it. The traditional way has been made in tube, with serum, although it´s possible to be made in plate. Here we present the modality to directly make the test of the germ tube between slide and slide cover, with advantage of time saving and glass material saving