Evaluación de variables agronómicas en el cultivo de limonaria (Cymbopogon Citratus Stapf) para la producción de aceite esencial.

Juan Carlos Antolinez González, Nélida G. de Colmenares, Alfredo Usubillaga, Enrique Darghan y Sonia Linares

Juan Carlos Antolinez González. Magíster en Agronomía, Universidad Nacional Experimental del Táchira (UNET), Venezuela. Profesor UNET, Venezuela. Dirección: UNET-Departamento de Agronomía. Apartado Postal 5001. Estado Táchira, Venezuela. e-mail: jantolin63@gmail.com

Nélida G. de Colmenares. Magíster en Química, IVIC. Venezuela. Investigadora y Profesora, UNET, Venezuela.

Alfredo Usubillaga. Doctor en Farmacia, Universidad de Illinois, EEUU. Profesor Universidad de los Andes (ULA) Mérida, Venezuela.

Enrique Darghan. Magíster en Estadística, ULA, Mérida, Venezuela. Profesor UNET, Venezuela.

Sonia Linares. Magíster en Agronomía, UNET, Venezuela. Profesora, UNET, Venezuela.

RESUMEN

Cymbopogon citratus Stapf es una hierba perenne de la familia Poaceae, utilizada para la producción de aceite esencial, rico en citral, útil en las industrias perfumística, alimenticia y farmacéutica. En Venezuela no existen cultivos comerciales de esta especie, conocida comúnmente como limonaria. Se llevó a cabo un experimento entre abril 2004 y mayo 2005, a fin de evaluar el efecto de tres dosis de nitrógeno (DN) de 60, 120 y 180kg·ha^-1 y tres periodos de crecimiento del rebrote (PCR) de 45, 60 y 75 días, utilizando un ensayo bifactorial con arreglo en bloques completos aleatorizados. Solo hubo efecto significativo (P<0,05) sobre el rendimiento en aceite esencial debido al PCR, alcanzándose los mayores valores con PCR de 60 y 75 días, sin diferencias significativas entre ellos. La calidad del aceite, medida como porcentaje de citral, no fue afectada significativamente por los tratamientos y los contenidos promedio de citral resultaron por encima del 73% requerido por la industria. No se observó daño por plagas de insectos. Se registró el ataque del hongo Puccinia sp. con incidencia de 100% y severidad entre 9 y 17% en la mayoría de las parcelas, sin afectar la calidad del aceite. Se propone un manejo sencillo del cultivo, basado en fertilización nitrogenada media, con periodos de crecimiento del rebrote y control químico de malezas para la obtención de alto rendimiento y calidad de aceite esencial.

Evaluation of agronomical variables in the cultivation of lemon grass (Cymbopogon Citratus Stapf) for the production of essential oil.

SUMMARY

Cymbopogon citratus Stapf (lemon grass) is a perennial herb of the Poacea family, which is used for the production of essential oil with high citral content, useful for the perfume, food and pharmaceutical industries. In Venezuela, there is no commercial production of this species, known as "limonaria". An experiment was carried out from April 2004 to May 2005, so as to evaluate three nitrogen application rates (60, 120 and 180kg·ha^-1) and three re-growth periods (45, 60 and 75 days) were evaluated. The experimental design was bifactorial, with a completely randomized block arrangement. The yield of essential oil was only found to differ significantly (p<0.05) in at 60 and 75 days re-growth periods, when the highest values were obtained, without significant differences among them. Oil quality, measured as the percentage of citral, was not affected by the treatments. The average percentage of citral was higher the 73% required by the industry. No damage by insects was observed. Puccinia sp. fungi were observed in 100% of the plots, with 9-17% severities, but it did not affect the oil quality. A simple handling is proposed for this species, based on medium nitrogen fertilization, appropriate re-growth periods and weed control, in order to obtain higher production and quality of the essential oil.

Avaliação de variáveis agronômicas no cultivo de capim-limão (Cymbopogon Citratus Stapf) para a produção de oleo essencial.

RESUMO

Cymbopogon citratus Stapf é uma erva perene da família Poaceae, utilizado para a produção de óleo essencial, rico em citral, útil nas indústrias perfumista, alimentícia e farmacêutica. Na Venezuela não existem cultivos comerciais desta espécie, conhecida comumente como Capim-Limão. Realizou-se um experimento entre abril de 2004 e maio de 2005, a fim de avaliar o efeito de três doses de nitrogênio (DN) de 60, 120 e 180kg·ha^-1 e três períodos de crescimento do rebrote (PCR) de 45, 60 e 75 dias, utilizando um ensaio bifatorial com arranjo em blocos completos aleatorizados. Somente houve efeito significativo (P<0,05) sobre o rendimento em óleo essencial devido ao PCR, alcançando-se os maiores valores com PCR de 60 e 75 dias, sem diferenças significativas entre eles. A qualidade do óleo, medida como porcentagem de citral, não foi afetada significativamente pelos tratamentos e, os conteúdos médios de citral resultaram acima do 73% requerido pela indústria. Não se observou danos por pragas de insetos. Registrou-se o ataque do fungo Puccinia sp. com incidência de 100% e severidade entre 9 e 17% na maioria das parcelas, sem afetar a qualidade do óleo. Propõe-se um manejo simples do cultivo, baseado em fertilização nitrogenada média, com períodos de crescimento do rebrote e controle químico do mato para a obtenção de alto rendimento e qualidade de óleo essencial.

PALABRAS CLAVE / Aceite Esencial / Citral / Cymbopogon citratus / Limonaria / Manejo Agronómico /

Recibido: 05/10/2006. Modificado: 04/08/2008. Aceptado: 06/08/2008.

Introducción

Cymbopogon citratus Stapf es una hierba perenne, robusta, de tallos muy ramificados de 1-2m de altura, con nudos ceríferos. Sus ramas son alargadas y un tanto penduladas, con hojas aromáticas amontonadas cerca de la base, glaucas, de 60-100cm de largo. Presenta inflorescencia amarilla en espiga. No florece o lo hace muy rara vez en el trópico (Soto et al., 2002). El periodo de brotación, al realizar la plantación, es de 10-15 días, comenzando el ahijamiento a los 20-30 días y alcanzando maduración fisiológica a los 180 días, siempre que la plantación haya recibido fertilización, control de malezas, riego y control fitosanitario (Soto et al.,1984).

Esta planta, conocida comúnmente como limonaria, es un cultivo de origen tropical, que requiere calor y clima húmedo con plena exposición solar y lluvia de 2500-2800mm al año, uniformemente distribuida. Algunos autores (Nair, 1982; Soto et al., 2002) han encontrado que la mejor adaptación se da entre 24 y 26ºC, mientras que el crecimiento se ve afectado a temperaturas <21ºC o >35ºC.

Aun cuando C. citratus es originaria de La India, hoy se cultiva comercialmente en China, Madagascar, Islas Comoro, Brasil, Guatemala, Argentina y Cuba, entre otros (Soto et al., 2002; Linares et al., 2005). C. citratus se utiliza en medicina tradicional como expectorante y antigripal, y sus preparados se utilizan por sus efectos ansiolíticos, hipnóticos, analgésicos y diuréticos, habiendo sido estudiada en Cuba (Silva et al., 1991; Arencibia, 2001) y en Brasil (Hernández et al., 1998). Cheel et al. (2005) ensayaron extractos en metanol-agua, infusiones y decocción de hojas de C. citratus y demostraron sus efectos como antioxidante y secuestrador de radicales libres. Adegoke y Odesola (1996) estudiaron el efecto antimicrobiano del polvo y el aceite esencial en el almacenaje de granos de maíz y arvejas, y Oyedele et al. (2002) comprobaron su eficacia en ungüentos y cremas repelentes al mosquito Aedes aegypti. Viana et al. (2000) comprobaron en ratas que el aceite esencial de C. citratus presenta efecto antinociceptivo, inhibiendo tanto al sistema nervioso central como al periférico. Por otra parte, la potencialidad como herbicida natural de C. citratus fue comprobada por Cruz et al. (2002) en semillas de Bidens pilosa.

Los miembros del género Cymbopogon destacan por su contenido de aceites esenciales, los cuales varían en su composición y concentración dependiendo de la especie y las condiciones de crecimiento de los cultivos (Wijesekera, 1981; Rao y Sunita, 1992; Chisowa et al., 1998; Rhaman et al., 1992; Kulcarni et al., 1997).

Los aceites esenciales son productos volátiles de composición química compleja ampliamente difundidos en el reino vegetal (Mizrahi, 1967; Bruneton, 1999; Bandoni, 2000). En el aceite esencial de C. citratus predomina el aldehído citral (mezcla de geranial y neral) alcanzando concentraciones de 75% (Quintero et al., 1999, 2000; González, 2003). El citral es precursor de iononas, vitamina A, metilionona y citronellol (Theaganajar y Kumar, 1995; Wijeskera, 1981). Estos metabolitos secundarios se extraen de las plantas por diversos métodos según su naturaleza y el órgano vegetal donde se encuentran; así por ejemplo, el aceite de cáscaras de cítricos se puede extraer por prensado mecánico y arrastre de vapor, otros se extraen por medio de solventes, aplicando fluidos supercríticos y, en el caso de C. citratus, es recomendable realizar la extracción por hidrodestilación (Mizrahi, 1967; Bandoni, 2000; Ming et al., 2000).

Hay antecedentes en cuanto al manejo agronómico y evaluación de los procesos extractivos tendientes a optimizar los rendimientos y calidad del aceite esencial de algunas especies de Cymbopogon. En la provincia de Jujuy, Argentina (Viturro et al., 1997), se evaluó el comportamiento de la limonaria sembrada bajo tres marcos de plantación y dos tipos de fertilización química durante tres cortes sucesivos. Los resultados muestran que la mejor relación productiva se obtuvo para el marco de 0,70´0,70m, con fertilización completa en base a triple 15 NPK, y las diferencias en rendimiento y calidad se incrementaron en los cortes sucesivos. Para todos los tratamientos hubo disminución en los rendimientos de follaje al realizarse los cortes trimestrales.

Beech (1990) encontró respuesta de C. citratus al incremento de la fertilización nitrogenada hasta los 600kg·ha^-1 obteniendo rendimientos para materia fresca y materia seca de 115 y 28,4ton·ha^-1, respectivamente, y para aceite esencial de 433·l·ha^-1. Con periodos de 60 días entre cortes y alturas de corte de 20cm encontró altos rendimientos de aceite esencial (419· l·ha^-1; Beech, 1977).

Munsi y Mukherjee (1981) evaluaron cuatro dosis de fertilización nitrogenada y dos intervalos de cosecha (4 y 2 meses) en un cultivo de citronella (Cymbopogon winterianus jowitt), obteniendo incrementos significativos, debidos a la aplicación de fertilizantes, en la cantidad y calidad de aceite extraído. Igualmente registraron incrementos en cantidad de biomasa y aceite esencial al aumentar el intervalo entre cortes, lográndose un cambio en la composición del aceite por incremento de geranial. El mejor resultado se obtuvo con 120kg·ha^-1 de N e intervalos de 4 meses, lo que rindió 36763kg·ha^-1 de materia verde y 371kg·ha^-1 de aceite esencial, con un 87,8% de geranial. En ensayos realizados con C. winterianus jowitt durante tres años, se evaluó el efecto de las condiciones edafoclimáticas sobre los rendimientos, determinándose que la máxima cosecha de materia verde se obtuvo durante los meses de lluvia con alta temperatura (mayo, junio, julio), determinándose que lluvia de 100-200mm, 5-6h de sol, temperaturas moderadas (25-30ºC) y alta humedad (95-96%) son favorables para la síntesis de citronelal, el cual es determinante en la calidad del aceite extraído de esta especie (Sarma, 1997). En Brasil, De Figueredo y Ming (2002) no lograron incrementar el contenido de citral del aceite esencial de C. citratus utilizando aspersiones foliares con reguladores de crecimiento.

En La India fue realizado un experimento de campo sembrando Cymbopogon flexousus con tres regímenes de humedad del suelo y cuatro dosis de N. La mejor dosis de fertilización nitrogenada correspondió a 100kg·ha^-1 de N, mientras que los contenidos de citral y geranial no variaron por los tratamientos (Singh et al., 1997). En Bangladesh fueron comparadas cinco especies del género Cymbopogon (C. martinii var. motia, C. citratus, C. pendulus, C. flexuosus y C. winterianus) en cuanto a su capacidad de producción de materia verde y aceite esencial. Durante los tres años que duró el ensayo de campo C. martinii var motia superó ampliamente a las otras cuatro, mientras que C. citratus ocupó el segundo lugar tanto en producción de aceite como de materia verde (Rahman et al., 1992).

Referente a plagas y enfermedades, el ataque del hongo Puccinia nakanishikii en plantaciones comerciales de C. citratus en India, ocasionó perdidas importantes tanto de material verde como de aceite esencial extraído, reportándose reducciones de 37% en la extracción cuando el índice de enfermedad porcentual (PDI) alcanzo 76% (Boruah et al., 1995). Helminthosporium cymbopogon, Puccinia cymbopogonis, Helminthosporium sacchari y Curvularia lunata han sido reportadas causando serios daños a C. citratus en Centroamérica (Wijesekera, 1981).

Para el caso de Venezuela no existen reportes de cultivos comerciales de C. citratus. Sin embargo, en ensayos realizados en el Estado Táchira (Linares et al., 2005), bajo condiciones de bosque húmedo premontano sobre un suelo pobre y con manejo agronómico de bajos insumos, se obtuvieron rendimientos aproximados a 17·l·ha^-1 con alta calidad perfumística (75% de citral y 82,42% de fitoconstituyentes fragantes), lo que indica potencialidad para su cultivo comercial, a fin de disminuir las importaciones de aceites y fragancias con alto valor agregado para diversas industrias.

El presente trabajo fue llevado a cabo con el propósito de determinar el periodo de crecimiento del rebrote de limonaria más recomendable y la mejor dosis de fertilización nitrogenada para maximizar los rendimientos de aceite esencial. También se registró el ataque de plagas y enfermedades en un cultivo semicomercial de esta especie de fácil manejo agronómico y de alto rendimiento en cantidad y calidad de aceite esencial.

Materiales y Métodos

El ensayo se realizó en un lote de 4000m² en la Unidad Académica La Tuquerena de la Universidad Nacional Experimental del Táchira (UNET), ubicada en el Municipio Junín, Estado Táchira, Venezuela, en un suelo franco-arcillo-arenoso con bajo contenido de materia orgánica, P, K, N, y pH de 4,87. La temperatura promedio mensual es de ~24ºC (20-30ºC). La siembra se llevó a cabo en abril 2004 (entrada de lluvias) y el ensayo se desarrolló hasta mayo 2005. En la misma finca, durante los ocho meses anteriores al inicio del ensayo de campo, se sembró el semillero con plantas procedentes del jardín botánico de la UNET, del cual se tomaron los macollos para el establecimiento del cultivo.

Establecimiento y manejo del cultivo

El terreno se preparó con un manejo tradicional (arado-rastreo y surcado) con tractor. La densidad de plantas fue de 20400ind·ha^-1, con un distanciamiento de 0,70m entre plantas e hileras. Al suelo se le realizó enmienda con cal (900kg·ha^-1 de CaCO₃) y materia orgánica (3ton·ha^-1). Se aplicó fertilización de fondo (15g de 15-15-15 NPK por planta) para favorecer el establecimiento del cultivo.

La siembra manual se efectuó colocando un macollo de limonaria por punto en el lomo del surco. Quince días después se realizó la reposición de plantas muertas, las cuales alcanzaron ~5% del total sembradas.

El control de malezas con asperjadora manual se llevó a cabo dos meses después de la siembra mediante aplicación de 2,4,D-Amina en dosis de 2·l·ha^-1. Un mes después se agregó un refuerzo sobre malezas resistentes con Picloram+Metsulfuron metil al mes de la primera aplicación de 2,4,D-Amina, y una limpia posterior con escardilla inmediatamente antes de iniciar la aplicación de los tratamientos con fertilizantes según el periodo de crecimiento del rebrote (cinco meses después de la siembra).

No se practicaron labores de control de plagas puesto que no se presentaron, así como tampoco se controló enfermedades a fin de registrar su incidencia y severidad. Tampoco se aplicaron riegos, ya que el ensayo se desarrolló en el periodo lluvioso. La fertilización de cobertura se cumplió de acuerdo con los tratamientos del trabajo.

El experimento de campo fue bifactorial con arreglo en bloques completos aleatorizados (Montgomery, 1991). El primer factor es el periodo de crecimiento del rebrote (PCR) con tres niveles (45, 60 y 75 días) y el segundo factor la dosis de nitrógeno con tres niveles (60, 120 y 180kg·ha^-1).

El criterio para establecer los bloques fue el porte de la planta luego de transcurrida la fase de establecimiento (primeros cinco meses) según su tamaño y estado de desarrollo, encontrándose tres grupos homogéneos que diferían uno del otro.

La unidad experimental fue la parcela de 185m², con 27 parcelas en total. En cada una de las parcelas se sembró 377 plantas a las que se les aplicó los tratamientos. Posteriormente y según correspondía a cada tratamiento (45, 60 o 75 días), se tomaron submuestras de 10 plantas en cada parcela para medir altura de plantas, número de macollos, materia verde y rendimiento de aceite esencial.

Para nivelar el inicio del periodo de crecimiento del rebrote, a los cinco meses luego de la siembra (periodo de establecimiento) se efectuó el corte del follaje de las plantas de todas las parcelas, cosechándose posteriormente en el momento que correspondía a cada periodo (45, 60 o 75 días) con cortes con machete a una altura de 15cm del suelo.

Como fuente de fertilizante nitrogenado se aplicó urea (46% N), en forma granulada, colocada manualmente a 10cm de la planta, en agujero y tapada. Cada aplicación se hizo coincidir con los 20 días anteriores al corte respectivo.

Variables biométricas registradas

Altura de la planta. Este parámetro se midió antes de la cosecha, utilizando como criterio la longitud (cm) de la hoja mas larga medida a partir del nivel del suelo en la base de la planta.

Número de tallos por macollo. Luego de cosechadas las plantas, se procedió a contar los macollos útiles de cada planta para posteriormente obtener el número promedio de macollos por planta.

Rendimiento en peso fresco. Se cosecharon 10 plantas representativas por parcela, se pesó el total de la masa colectada y se calculó el peso promedio por planta para la parcela. Con este procedimiento se lograron submuestras de aproximadamente 1500g para realizar las subsecuentes determinaciones de rendimiento en materia seca y de aceite esencial.

Rendimiento en aceite esencial. Este producto se extrajo por hidrodestilación, calentando durante 2h en un balón de vidrio de 12 litros el material vegetal cortado (1,2kg.) y agua destilada (8 litros). En la tapa del balón se colocó una columna de destilación (1m) y trampa de Clevenger, que facilita la separación del aceite esencial de la fase que condensa. Se midió el volumen de aceite separado con una pipeta graduada para obtener el rendimiento en ml extraidos por peso de material fresco. Se realizaron un total de 27 extracciones de aceite esencial correspondientes a las muestras de follaje de C. citratus cosechadas en las 27 parcelas del ensayo. El rendimiento de aceite esencial por ha sembrada se calculó como

donde RAE: rendimiento en litros de aceite esencial producido en una hectárea por corte, PF: cantidad de materia fresca (kg) producida por planta, CA: volumen (ml) de aceite esencial extraído por kg de material fresco, y DS: número de plantas (20400) por ha.

Calidad de aceite esencial extraído. El análisis se llevó a cabo en un cromatógrafo de gases HP5973 acoplado a detector de masas (CG-MS). La columna cromatográfica utilizada fue una HP-5 (30m´0,25mm´0,25µm). El programa de temperaturas se inició a 60ºC (5min), se incrementó a 200ºC a razón de 4ºC·min^-1, manteniéndose a esa temperatura durante 1min. Luego se aumentó (10ºC·min^-1) a 280ºC, permaneciendo isoterma durante 20min. El volumen de muestra inyectado fue de 1μl y el gas de arrastre fue He a 0,9ml·min^-1, relación split 100:1 y temperatura del bloque de inyección de 200ºC.

La identificación de los constituyentes del aceite se realizó por comparación de sus espectros de masas con los reportados por Adams (2001).

Ataque de plagas y enfermedades. No se detectó el ataque de ninguna plaga durante el ensayo y se determinó la incidencia de enfermedades obteniendo la cantidad de plantas afectadas vs plantas totales y estimando la severidad por apreciación visual del grado (porcentaje) de daño en las plantas.

Procesamiento de la información

Los datos obtenidos fueron procesados con el software Statgrafics Plus 5.1 Se realizó análisis de varianza para las variables rendimiento de aceite esencial y calidad del aceite esencial. En cuanto a las demás variables (altura de planta, número de tallos por macolla y ataque de plagas y enfermedades) se realizaron análisis descriptivos tales como tablas de frecuencia, gráficas de barras y gráficas de medias.

Resultados y Discusión

El rendimiento de aceite esencial (ml·g^-1) en base a peso fresco hidrodestilado alcanzó un valor promedio de 0,52% para los diferentes tratamientos. Resultados similares obtuvieron Rahman et al. (1992) quienes reportan un rendimiento promedio de 0,49% para el aceite esencial de C. citratus cultivado en Bangladesh. Otros autores reportan valores ligeramente inferiores: 0,44% (Viturro, 1997); 0,40% (Linares, 2005) y 0,20-0,40% (Wijesekera, 1981).

En la Figura 1 se observan los valores de aceite esencial producido por ha de limonaria en el primer corte, en relación a los diferentes tratamientos (tres periodos de tiempo de crecimiento del rebrote (PCR) y tres dosis de nitrógeno (DN) aplicado). Los valores oscilan entre 40,3 y 74·l·ha^-1, coincidiendo los menores rendimientos (40,6; 40,3 y 50,7·l·ha^-1) con los tratamientos T1, T2 y T3, correspondientes al menor periodo de crecimiento del rebrote PCR (45 días) con 60, 120 y 180kg·ha^-1 de N, respectivamente, mientras que el mayor rendimiento (74·l·ha^-1) fue alcanzado en los tratamientos T8 y T9, coincidentes con el tercer PCR (75 días) y aportes de 120 y 180kg·ha^-1 de N.

Estos valores de 74·l·ha^-1 implican rendimientos de aceite esencial de >300·l·ha^-1 al año, considerando 6 cosechas anuales, que son inferiores a los reportados por Beech (1990, 1977) de >400·l·ha^-1, utilizando fertilización nitrogenada de hasta 600kg·ha^-1, intervalos entre cortes de 60 días y riego. Por otra parte, los resultados obtenidos en este ensayo superan los rendimientos reportados por Soto et al. (2002) quienes indican rendimientos anuales de 60ton·a^-1 de masa verde, equivalentes a 240·l·ha^-1 de aceite esencial al año, realizando cortes cada tres meses. Wijesekera (1981) reporta valores de 75-100kg·ha^-1 de aceite esencial basado en 0,40% de la masa verde, mientras que Linares et al (2005) obtuvieron rendimientos de 17l·ha^-1 en un corte, lo que extrapolado a seis cortes al año es ~102·l·ha^-1, es decir un tercio de lo obtenido en el presente trabajo (300·l·ha^-1)

En la Tabla I se observa que no se hubo efecto significativo de la interacción entre los factores PCR y dosis de N (P-valor= 0,97), por lo cual se discutirá cada efecto principal por separado. No existe efecto estadísticamente significativo para la variable dosis de N (P-valor= 0,58), mientras que sí hubo efecto con significación estadística (P-valor= 0,023) para la variable periodo de crecimiento del rebrote (PCR), con un intervalo de confianza de 95%, lo que implica diferencias entre los tratamientos debidas al PCR.

La Figura 2 muestra un incremento del rendimiento de aceite esencial al aumentar la dosis de N. Para la mayor dosis aplicada (180kg·ha^-1) este incremento se mantiene para todos los PCR. Para las dosis de 60 y 120kg·ha^-1, el incremento en el rendimiento debido al N suministrado no es constante; no obstante, según lo ya comentado el efecto de la DN sobre el RAE no mostró efecto estadísticamente significativo. Respuestas no significativas a los aportes de N que superan los 100kg·ha^-1 como los encontrados en este trabajo fueron reportados en especies del género Cymbopogon por Soto et al., (2002) trabajando en C. citratus y por Singh et al., (1997), quienes concluyen luego de evaluar tres dosis de N que no hubo respuesta significativa por encima de 100kg·h^-1. En Poaceas forrajeras Manrique et al. (2003) evaluaron varias dosis de N en Andropogun gayanus, determinando que la mayor eficiencia del N se alcanzó con 100kg·ha^-1. Similarmente, Rocha et al. (2000) reportan como convenientes las aplicaciones de 100kg·ha^-1 en Poaceas tropicales.

La calidad del aceite esencial está determinada por las cantidades relativas de sus constituyentes. En los análisis cromatográficos (CG-MS) de las muestras fueron identificados 21 componentes con distintas abundancias relativas. De estos compuestos fueron seleccionados mirceno, linalool, neral, geraniol y geranial, considerando que su abundancia relativa es >0,5%, o sea que no constituyeran trazas y que el porcentaje de certeza en su identificación supera el 90% (Adams, 2001).

En la Figura 3 se observa que E-citral (geranial) es el componente con mayor abundancia relativa para todos los tratamientos, con valores que van de 43,52% para T3 a 38,68% en T6. Z-citral (neral) es el componente que ocupa el segundo lugar en abundancia para todos los tratamientos, (35,05 y 31,39% para T3 y T6, respectivamente). La suma de estos dos isómeros (78,57 y 70,07% para T3 y T6, respectivamente) es el total de citral.

Los promedios de citral para el mayor número de tratamientos (7 de 9) se ubican de acuerdo al programa estadístico utilizado en las clases 3, 4 y 5 con más de 73% de citral (Tabla II). Estos valores superan a los reportados por Chisowa et al. (1998), quienes indican valores de 68,40%, y se aproximan a la concentración de 75,17% reportados por Quintero et al., (1999). El contenido relativo de citral es usado como estándar de calidad en aceites esenciales, considerándose buenos los valores de ~75% (Gaydou et al., 1988).

Para la industria de perfumes la calidad del aceite de limonaria, medida como contenido porcentual de citral, no mostró diferencias estadísticamente significativas entre los periodos de crecimiento del rebrote, dosis de N, o interacción entre ambas variables (Tabla III). Estos resultados coinciden con los de Singh et al., (1997) quienes concluyen, luego de evaluar cuatro dosis de N en C. fluxuosus, que las mismas no afectaron significativamente la proporción de neral ni de geranial. Resultados diferentes fueron obtenidos por Munsi y Mukherjee (1981) cuando evaluaron cuatro dosis de N en C. winterianus, pues encontraron incrementos significativos en la concentración de geranial al aumentar la dosis. Asimismo, Linares et al (2005) reportaron variación en la calidad del aceite esencial cuando se aplicó fertilización química u orgánica vs parcelas de C. citratus no fertilizadas.

Durante el presente ensayo no se observó el ataque de plaga alguna en el cultivo, aun cuando se detectaron individuos aislados del género Aenolamia (4 adultos en hojas) y del género Diatrea (8 larvas en macolla), ambos conocidos como plagas en Poaceas, las poblaciones observadas no alcanzaron niveles de importancia.

En cuanto a enfermedades, se comprobó el ataque de la roya Puccinia sp., con una incidencia de 100% y una severidad variable en los tratamientos. En la Tabla IV se muestra la frecuencia de los porcentajes de severidad de daño del hongo en las parcelas del ensayo; el 89% de las parcelas se ubican en las clases 1 y 2 con rango entre 9 y 17% y solo tres parcelas superaron el 17% de severidad de daño. El ataque del hongo no influyó en la calidad del aceite ni en su rendimiento, posiblemente porque la severidad no superó un valor crítico sobre el cual se afectase la integridad metabólica de las plantas. En contraste, Boruah et al., (1995) reportan reducciones del 37% en el rendimiento de aceite de C. citratus cuando el índice de enfermedad alcanzó el 76% por ataque de Puccinia sp. Daños al cultivo de C. citratus por Puccinia sp. fueron reportados por Wijesekera (1981) en Centroamérica.

Conclusiones

El rendimiento de aceite esencial de limonaria fue afectado por la duración del periodo de crecimiento del rebrote, encontrándose diferencias entre el corte a 45 días vs los otros dos tratamientos (60 y 75 días) por lo que se recomienda 60 días como periodo de descanso suficiente para efectuar un nuevo corte sin comprometer significativamente los rendimientos. Las dosis de N evaluadas no ocasionaron diferencias significativas (95%) en el rendimiento de aceite, por lo que en condiciones similares y considerando la aplicación de la fertilización de arranque equivalente a 50kg·ha^-1, aplicada en todos los tratamientos ocho meses antes de iniciar el ensayo, se sugiere fertilizar con 60kg·ha^-1 de N.

Con este manejo agronómico se consiguieron rendimientos de aceite esencial substancialmente superiores a los reportados en la bibliografía. Asimismo, la calidad del aceite esencial, medida como porcentaje de citral contenido, no varió significativamente según los tratamientos del ensayo, lo que permite aseverar que aun con la menor dosis de fertilización nitrogenada probada, en el menor período de crecimiento del rebrote evaluado, puede obtenerse un aceite que cumpla con el estándar de calidad. El ataque del hongo Puccinia sp. es una razón para aumentar la frecuencia de los cortes a fin de mantener bajo el inóculo y disminuir la velocidad de avance de la enfermedad, si bien las esporas del hongo presentes en las muestras a las que se extrajo el aceite no afectaron su calidad.

Se propone un manejo del cultivo sencillo, basado en fertilización nitrogenada media, con períodos relativamente breves entre cosechas y control químico de malezas para la obtención de alto rendimiento y calidad de aceite esencial de esta especie aromática que se adapta en Venezuela a diferentes condiciones climáticas.

AGRADECIMIENTOS

Al Decanato de Docencia y al Consejo de Decanato de Investigación de la Universidad Nacional Experimental del Táchira por el financiamiento de esta investigación.

REFERENCIAS

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