Resumen

GONZALEZ M, Eglys B et al. Estandarización de la técnica de reacción en cadena de la polimerasa para el diagnóstico de la tripanosomosis animal causada por trypanosoma evansi. Agronomía Trop. [online]. 2006, vol.56, n.4, pp.495-500. ISSN 0002-192X.

Existen varios métodos para el diagnóstico de la tripanosomosis equina, Trypanosoma evansi, cuya sensibilidad varía según la etapa de la enfermedad. Recientemente, métodos moleculares como el PCR, basado en la detección de ADN, han mejorado el diagnóstico de las parasitosis. El objetivo de este trabajo fue estandarizar, comparar y evaluar la técnica de PCR para el diagnóstico de T. evansi en un modelo experimental múrido. Para ello, se infectaron ratones con el aislado TEVA1. Luego de 48 (horas) se realizó la evaluación parasitológica por cuantificación de Brener y por la técnica de microhematocrito Woo. Para el diagnóstico molecular se purificó el ADN genómico y se amplificó por PCR, empleando los cebadores específicos para T. evansi, ESAG 6/7, TEV1/2 y TBR1/2. Todos los cebadores evaluados rindieron el producto de amplificación esperado, excepto en los animales sanos. Los cebadores ESAG 6/7 presentaron una sensibilidad de 1ng de ADN proveniente de parásitos purificados, y de 10ng para muestras proveniente de sangre completa. Del total de ratones infectados, 47% (n=8) resultaron positivos por el método de Brener, 70% (n=12) por Woo y todos por PCR (100%). Estos resultados demostraron que la PCR es más eficiente y sensible que los métodos parasitológicos para la detección de T. evansi en modelo múrido, cuando se presentan parasitemias muy bajas.

Palabras clave : Trypanosoma evansi; diagnóstico; PCR.