Resumen

OSORIO DELGADO, Martha; VEGAS GARCIA, Ariadne; MARQUES URDANETA, Alexis  y  GONZALEZ PEREZ, Lourdes. Condiciones para la amplificación de microsatélites en cultivares de papa. Agronomía Trop. [online]. 2011, vol.61, n.2, pp.159-165. ISSN 0002-192X.

La identificación de cultivares de papa, Solanum tuberosum L., es de suma importancia para el manejo de bancos de germoplasma, programas de mejoramiento genético, análisis de diversidad genética, procesos de micropropagación y producción de semilla. Por su alto grado de polimorfismo, los microsatélites (SSR) han demostrado ser una herramienta muy poderosa para análisis de variabilidad, ademas es reproducible. El objetivo del trabajo fue estandarizar las condiciones para la amplificación de ADN utilizando cuatro accesiones provenientes del Banco de germoplasma del INIA-Mérida usando marcadores microsatélites. La extracción del ADN se realizó con un rápido, económico y confiable método. De los 24 iniciadores propuestos para estudios de diversidad se seleccionaron por su mayor contenido polimórfico12 marcadores. Los productos amplificados se resolvieron en geles de agarosa al 3%, teñido con bromuro de etidio. Se probaron diferentes metodos utilizados en estudios previos para diversidad genética e identidad en papa, siendo la de reducciones en las concentraciones de Taq polimerasa, cloruro de magnesio e iniciadores, así como en los tiempos del perfil térmico, la que permitió obtener patrones de fragmentos de ADN nítidos, precisos y reproducibles. Se establecieron concentraciones óptimas de 0,2 U de Taq polimerasa, 1,5 mM de MgCl2 y 0,2 μMM de iniciadores y se redujo 30 min en cada amplificación, obteniéndose una mayor eficiencia por reacción. De los 12 iniciadores, cuatro fueron seleccionados basados en su polimorfismo y la calidad de los fragmentos de ADN amplificados.

Palabras clave : Solanum tuberosum L; marcadores moleculares; banco de germoplasma; SSR; diversidad.

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