CM López-Benítez¹, FA Pláceres U¹, EJ Alonzo¹ y MA Rodríguez B¹.

Desde un punto de vista patogénico la membrana sinovial de pacientes con artritis reumatoide combina dos procesos mutuamente relacionados: 1. Un proceso inflamatorio crónico, de base autoinmune, caracterizado por el predominio de linfocitos T del fenotipo cooperador/inductor (CD4⁺), y 2. Un proceso proliferativo del tejido sinovial, denominado pannus, en el cual participan sinoviocitos de estirpe mielomonocítica, los monocitos/macrófagos y sinoviocitos de estirpe mesenquimal, los fibroblastos. Esta última subpoblación celular muestra un fenotipo transformado, y es probablemente responsable del desarrollo incontrolado del pannus, contribuyendo junto a los monocitos/macrófagos a la invasión y destrucción del cartílago y hueso articular. En este artículo se revisan las evidencias que indican trastornos en la regulación de la activación y proliferación de los sinoviocitos tipo fibroblasto en pacientes con artritis reumatoide y se plantea la hipótesis de una posible disregulación funcional de estas células debido a alteraciones en sus mecanismos de señalización post-membrana. La identificación de defectos funcionales a este nivel podría abrir posibilidades terapéuticas novedosas, basadas en la corrección, por métodos farmacológicos, de las posibles alteraciones en la respuesta de los fibroblastos a estímulos ambientales en la sinovial reumatoide.

Palabras Claves: Artritis reumatoide, Fibroblastos, Pannus, Señalización intracelular.

Inflammatory process, of an autoimmune basis, predominantly driven by T lymphocytes of the cooperative/inductor phenotype (CD4⁺), and 2. A proliferative process of the synovial membrane, termed pannus, with two participating cell types, monocytes/macrophages (synoviocytes of myelomonocytic lineage) and fibroblasts (synoviocytes of mesenchimal origin). The latter cell population shows a transformed phenotype and it is probably involved in the unchecked pannus growth. They contribute along with monocytes/macrophages, to the unrelated invasion and destruction of articular cartilage and subchondral bone. In this article we discuss the reported evidences of abnormalities in the regulation of activation and proliferation of rheumatoid fibroblasts and formulate a hypothesis of potential defects in post-receptor signaling of these cells as the basis for their disregulated functional response. The identification of critical abnormalities in fibroblast post-receptor signaling cascades may lead to the development of alternative treatment modalities in patients with rheumatoid arthritis.

Key Words: Rheumatoid arthritis, Fibroblasts, Pannus, Signal transduction.

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La artritis reumatoidea (AR) es una enfermedad inflamatoria crónica de origen autoinmune y de etiología desconocida, que afecta aproximadamente el 1% de la población general⁽¹⁾. Histológicamente se caracteriza por hiperplasia invasiva de la membrana sinovial, neoangiogénesis y un infiltrado de células mononucleares que conduce a la destrucción articular progresiva^(1,2,3). Aunque es considerada una enfermedad de las articulaciones, puede exhibir una variedad de manifestaciones extra-articulares, por lo que puede considerarse una enfermedad sistémica⁽¹⁾. La membrana sinovial es el asiento primario del proceso inmunopatogénico en la AR. Este tejido contiene células que se cree pueden servir como fuente de antígenos para el ataque del sistema inmunitario o de blanco para agentes infecciosos disparadores de la enfermedad^(1,3). La membrana sinovial se compone de una capa interna o íntima sinovial y una capa externa o subíntima. En condiciones normales contiene fibras de colágeno, elastina y varios tipos celulares que incluye sinoviocitos, mastocitos, histiocitos y un escaso infiltrado de células mononucleares^(1,2).

Los receptores de moléculas de adhesión son expresados en la íntima sinovial reumatoidea en cantidades mayores que en el tejido sinovial normal, lo que probablemente ayuda al anclaje de estás células a la matriz extracelular. Igualmente hay una expresión incrementada de estas moléculas en el tejido endotelial de las vénulas poscapilares lo que acelera el influjo de otras células inflamatorias hacia el tejido sinovial reumatoideo⁽⁴⁾. A su vez los linfocitos T se organizan en agregados, predominando los linfocitos T de memoria, CD4⁺ CD45RO⁺ y se distribuyen en focos alrededor de macrófagos, células endoteliales y células dendríticas⁽¹⁾.

Cada vez existen más evidencias que apoyan la hipótesis de que los FLS de los pacientes con AR juegan un papel crítico en la patogenia de la enfermedad. Estas células exhiben características en su fenotipo y compartimiento compatible con el de células transformadas, tales como: crecimiento independiente de anclaje, expresión incrementada de proto-oncogenes (c-myc, c-fos y p53 mutado) y una conducta invasiva. Se han identificado mutaciones somáticas en el gen de la proteína antiproliferativa p53 en sinoviocitos tipo fibroblasto, procedentes de pacientes con AR⁽¹⁹⁾. Este defecto podría contribuir al patrón aberrante de proliferación incontrolada característico de las células de estos pacientes. Los FLS están directamente involucrados en el proceso destructivo del cartílago y el hueso, al expresar altos niveles de citocinas pro inflamatorias y de metaloproteinasas^(4,5,6,7,11). Además, favorecen la neo angiogénesis y pueden también interaccionar con otras subpoblaciones celulares como, por ejemplo con las células T, a través de la expresión de moléculas de adhesión y con osteoclastos mediante la producción de IL–6, contribuyendo al proceso de resorción ósea⁽⁶⁾. Los FLS son una importante fuente de la interleucina 15 (IL-15) y la interleucina 7 (IL-7) en la sinovial reumatoidea, las cuales son citocinas con actividad tipo interleucina 2 (IL-2), las cuales pueden contribuir de manera directa a la activación y expansión local de células T⁽⁷⁾. A través de la producción de IL-8 pueden también contribuir a activar neutrófilos y macrófagos, y a amplificar el proceso inflamatorio local⁽⁶⁾. Adicional a estos efectos en la respuesta inflamatoria celular, los FLS reumatoideos son capaces de inducir la diferenciación de células B hacia células plasmáticas⁽²⁰⁾, contribuyendo así a la producción aumentada de inmunoglobulinas y factores reumatoideos que activan el sistema del complemento y contribuyen a la perpetuación de la reacción inflamatoria local. Más aun, se ha demostrado que los FLS pueden comportarse como las células dendríticas de los folículos linfoides⁽²¹⁾ y por lo tanto, incrementar la presentación antigénica y en consecuencia la respuesta inflamatoria celular.

Los factores de crecimiento son componentes cruciales para el desarrollo y la diferenciación de muchas células. La mayoría de estos factores solubles median acciones pleiotrópicas en muchos grupos celulares, al unirse y activar receptores en la superficie celular con actividad proteína tirosina quinasa (PTK)^(22,23,24). Dentro de ellos, los factores de crecimiento de fibroblastos (FGFs) constituyen una familia de al menos nueve miembros, los cuales comparten homologia de 30-70% en una secuencia primaria de aminoácidos. Estos factores pueden activar diferentes subtipos de receptores específicos (FGFR), dependiendo de su capacidad para unirse con alta afinidad a cada uno de ellos. Se han descrito cuatro variantes del FGFR denominados FGFR del 1 al 4, con una estructura general común⁽²³⁾ caracterizada por poseer un dominio extracelular que une al ligando, una región transmembrana y una porción citosólica que posee un dominio catalítico tirosina quinasa^(25,26).

Anormalidades en la regulación de la transmisión de señales a partir del receptor FGF posiblemente están implicados en la transformación de los FLS de la sinovial reumatoidea. En otras palabras, la señalización intracelular alterada por defectos en la estructura o función de las moléculas que engranan la cascada de señalización, podría modificar el funcionamiento y la regulación normal de los FLS en la sinovial reumatoidea. Al comportarse como células transformadas, los FLS pueden ser agresores autónomos en este tejido y responder poco a los recursos terapéuticos actualmente disponibles. Hasta los momentos el mecanismo íntimo responsable de esta transformación no esta definido. Nuestro grupo se ha planteado que los FLS presentes en la membrana sinovial de pacientes con AR podrían tener un defecto de los mecanismos de regulación de su proliferación y actividad funcional, debido a anormalidades en los mecanismos de señalización intracelular. Estas alteraciones en los mecanismos que regulan la transmisión de señales de la membrana al núcleo podrían alterar salidas fisiológicas de estas células como la apoptosis, deprivando a la membrana sinovial de un potencial mecanismo de regulación negativa del crecimiento celular. Sobre la base de esta hipótesis hemos comenzado a evaluar eventos de señalización tempranos que ocurren luego la unión del FGF–2, a sus receptores correspondientes en los FLS de pacientes con AR, y a compararlos con los que suceden en fibroblastos de pacientes con osteoartritis. En esta artropatía, los fibroblastos no muestran evidencias de transformación anormal. En la Figura 2 mostramos un experimento representativo de la fosforilación en tirosina en condiciones basales y luego de estimulación a través del FGF-2 en fibroblastos obtenidos de un paciente con osteoartritis. Estos son los eventos bioquímicos más tempranos que ocurren luego del ligado del FGF por sus receptores específicos. A partir de allí iremos examinando la secuencia de eventos de señalización más dístales, hasta la ruta de las MAPKs y la activación del factor de transcripción AP-1 (Figura 1). El develar posibles alteraciones en las rutas de señalización de la membrana al núcleo en FLS de pacientes con RA podría abrir las puertas para el diseño de estrategias terapéuticas más racionales, que permitirán incidir de manera más específica y con menos efectos tóxicos sobre esta, hasta ahora intocable, subpoblación celular.

A la Sra. Mayra Mayora por su eficiente apoyo secretarial, a la Dra. Ana M. Blasini por la revisión del manuscrito y al equipo de cirujanos que nos proveen para este proyectos con la membrana sinovial de los pacientes. Financiado por proyecto CONICIT G-97000808.