Susceptibilidad de Helicobacter pylori a los antimicrobianos.

Antimicrobial susceptibility of Helicobacter pylori.

Urrestarazu MI¹, Serrano N¹, Piñero R2, Cavazza ME³.

1. Sección de Microbiología, Instituto de Biomedicina, MSDS, UCV.

2. Servicio de Gastroenterología, Hospital Vargas de Caracas.

3. Sección de Histoquímica, Instituto de Biomedicina, MSDS, UCV.

 

RESUMEN

    El propósito de este estudio fue determinar el perfil de susceptibilidad de Helicobacter pylori a los antimicrobianos usados para el tratamiento de esta infección. Entre 1998 y 1999 se investigó la concentración inhibitoria mínima (CIM) para amoxicilina, claritromicina, tetraciclina y metronidazol a 45 cepas de Helicobacter pylori aisladas de pacientes del Servicio de Gastroenterología del Hospital Vargas de Caracas, encontrándose los siguientes resultados: 30 cepas (67%) resistentes a metronidazol, 3 (7%) resistentes a claritromicina, 3 (7%) resistentes a tetraciclina, 4 (9%) fueron multirresistentes y el resto de las cepas fueron sensible a todos los antibióticos probados. Ninguna cepa mostró resistencia a amoxicilina. Este patrón de resistencia, parecido al reportado por otros países en desarrollo, confirman la necesidad de realizar pruebas de susceptibilidad para la elección de una adecuada combinación de antibióticos que permita la erradicación y control de la infección por Helicobacter pylori en nuestro país.

ABSTRACT

    The aim of this study was to determine the profile of susceptibility of Helicobacter pylori to the antimicrobial agents used for the treatment of the infection. Between 1998 and 1999 CMI for amoxicillin, clarithromycin, tetracycline and metronidazole to 45 Helicobacter pylori isolated from patients of the Service of Gastroenterology of the Hospital Vargas of Caracas, were investigated. The results were: 30 strains (67%) resistant to metronidazole, 3 (7%) resistant to clarithromycin, 3 (7%) resistant to tetracycline, 4 (9%) were multiresistant, the rest of the isolates were sensible to all proven antibiotics. No H. pylori strains showed resistance to amoxicillin. This pattern of antibiotic resistance seemed to the reported by other developing countries and confirms the necessity to used tests of susceptibility for the election of a suitable antibiotic combination that allows the eradication and control of the infection by Helicobacter pylori in our country.

Palabras-clave: Helicobacter pylori, antibióticos, E-test, resistencia.

INTRODUCCIÓN

    Helicobacter pylori (H. pylori) es reconocido como un importante patógeno humano, con amplia distribución mundial. Se le atribuye la etiología de la gastritis crónica tipo B y se le relaciona con el desarrollo de úlcera duodenal y gástrica, el cáncer gástrico y el tumor de tejido linfoide asociado a mucosa (MALT).

    Se han ensayado varios esquemas de tratamiento para la erradicación de esta bacteria, que van desde monoterapia hasta la combinación de una variedad de medicamentos que incluyen bismuto, inhibidores de la bomba de protones y antibióticos como claritromicina, metronidazol, tetraciclina y amoxicilina. La aparición de cepas resistentes a los antibióticos usados comúnmente en el tratamiento constituye una de las principales causas de falla en la erradicación de H. pylori ^{(1, 2, 3)}.

    Tomando en cuenta que la susceptibilidad de H. pylori a los antimicrobianos varía entre países y entre regiones, dependiendo probablemente del uso de los antibióticos en la práctica médica general, es importante conocer el patrón de susceptibilidad de H. pylori en diferentes áreas geográficas, especialmente en zonas de alta prevalencia de infección, para seleccionar esquemas de erradicación adecuados^(1,4,5).

    El objetivo de este trabajo fue determinar el patrón de resistencia in vitro de H. pylori a los antimicrobianos usados comúnmente en las terapias de erradicación en aislados clínicos de pacientes de Caracas, Venezuela.

PACIENTES, MATERIALES Y MÉTODOS

    Se estudiaron 45 cepas de H. pylori aisladas entre 1998 y 1999 de biopsias de mucosa antral de pacientes atendidos en el servicio de Gastroenterología del Hospital Vargas de Caracas, Venezuela, 20 hombres y 25 mujeres, con edades comprendidas entre 16 y 79 años (x 50 años), quienes tenían indicación de endoscopia digestiva superior. Se obtuvo consentimiento informado de todos los pacientes.

    Para el aislamiento primario H. pylori se utilizó agar Brucella adicionado de sangre humana y antibióticos (vancomicina 10 mgr/mL, trimetoprim 5 mgr/mL y polimixina B 0,25 mgr/mL) y agar chocolate enriquecido con suplemento vitamínico (Vitox^TM), incubados en atmósfera microaerofílica y humedad durante 5 días a 37°C.

    Se investigó la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM), para los siguientes antibióticos: amoxicilina, claritromicina, tetraciclina y metronidazol, por el método de E-test^TM; para ello 0,1 mL de una suspensión de la bacteria en caldo Brucella, equivalente a 3 Mc Farland se inoculó en placas de agar Mueller-Hinton adicionado de 5% de sangre humana. Se utilizó 1 tira del antibiótico por placa de 90 mm. Se incubaron a 37°C en atmósfera microaerofílica por 72 horas. Los criterios de resistencia usados fueron los siguientes: amoxicilina >2 mg/L; claritromicina >2 mg/L; tetraciclina >4 mg/L y metronidazol >8 mg/L.

Análisis estadístico: Se utilizó la prueba exacta de Fisher.

RESULTADOS

    De los 45 pacientes estudiados, 15 (33%) presentaban al estudio endoscópico gastritis crónica, 13 (29%) úlcera duodenal, 8 (18%) gastritis aguda, 4 (8%) úlcera gástrica, 4 (8%) gastritis erosiva, y 1 paciente presentó mucosa de apariencia normal.

    En la tabla 1 se muestran los valores de la CIM de los cuatro antibióticos probados. Los valores de CIM₅₀ y CIM₉₀ para amoxicilina fueron <0,016 mg/L y 0,023 mg/L, respectivamente; para claritromicina <0,016 mg/L y 0,125 mg/L, respectivamente; para tetraciclina <0,016 mg/L y 0,19 mg/L, respectivamente, mientras que para metronidazol, tanto la CIM₅₀ como la CIM₉₀ fue mayor de 32 mg/L. Treinta cepas (67%) fueron resistentes a metronidazol, 3 (7%) a claritromicina y 3 (7%) a tetraciclina. Ninguna cepa mostró resistencia a amoxicilina. Cuatro cepas presentaron multirresistencia, 1 a metronidazol y claritromicina, 1 metronidazol y tetraciclina y 2 presentaron resistencia a metronidazol, claritromicina y tetraciclina. No se encontraron diferencias en la resistencia a metronidazol entre hombres y mujeres, así como tampoco según la patología presentada.

DISCUSIÓN

    La resistencia bacteriana a los antibióticos representa uno de los problemas más graves que debe enfrentar el médico hoy en día, por lo que la selección y el uso racional de los agentes antimicrobianos constituye una tarea, por lo general, difícil y compleja.

    En el caso particular de H. pylori, las principales causas de fracaso en la terapia de erradicación lo constituye la falta de cumplimiento del tratamiento por parte de los pacientes y la resistencia de la bacteria a los antibióticos usados comúnmente en estas terapias ⁽⁶⁾.

    En este trabajo se encontró un alto nivel de resistencia a metronidazol, 67%, que coincide con lo descrito en otros países en desarrollo^{(3, 7, 8)}, esta alta resistencia está probablemente asociada al uso masivo de este producto para el tratamiento de diferentes parasitosis intestinales y en infecciones ginecológicas. Resistencia de H. pylori a claritromicina ha sido reportada en varios países: Japón 10%, Nigeria 13%, Italia 8-10%, México 24%, Francia 11%^{(1,4,5,7,9,10)}. La resistencia a claritromicina encontrada en este trabajo fue del 7%. Pocos trabajos reportan resistencia a tetraciclina; en este trabajo encontramos una resistencia del 7%, algo menor a la encontrada por Ani y col. en Nigeria⁽⁴⁾.

    La amoxicilina es uno de los antimicrobianos más usados en el tratamiento de la infección por H. pylori, ya que no se había descrito resistencia a este antibiótico. Sin embargo, recientemente, en el mundo han aparecido publicaciones donde se reporta tolerancia e inclusive resistencia a la amoxicilina, y donde se recomienda la realización de la CMB en pacientes que fallan a esta terapia ^{(11, 12)}. En este trabajo, todas las cepas fueron susceptibles a amoxicilina.

    Estos resultados confirman la necesidad de hacer pruebas de susceptibilidad a los antimicrobianos, que permitan la elección de una racional combinación de antibióticos para la erradicación de la bacteria, y de esta manera contribuir al control de la propagación de la resistencia de H. pylori a los agentes antimicrobianos.

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen a FONACIT por el financiamiento de este estudio (Proyecto S1-96001408).

REFERENCIAS:

1. Gotoh A, KawaKami Y, Akahane T, et al. Susceptibility of Helicobacter pylori isolates against agents commonly administered for eradication therapy and the efficacy of chemotherapy. Microbiol Immunol 1997; 41:7-12.        [ Links ]

2. Mégraud F, Doermann HP. Clinical relevance of resistant strains of Helicobacter pylori: a review of current data. Gut 1998; 43:S61-65.        [ Links ]

3. Al-Qurashi AR, El-Morsy F, Al-Quorain AA. Evolution of metronidazole and tetracycline susceptibility pattern in Helicobacter pylori at a hospital in Saudi Arabia. Int J Antimicrob Agents 2001; 17:233-236.        [ Links ]

4. Ani AE, Malu AO, Onah JA, Queiroz DM, Kirschner G, Rocha GA. Antimicrobial susceptibility test of Helicobacter pylori isolated from Jos, Nigeria. Trans R Soc Trop Med Hyg 1999; 93:659-661.        [ Links ]

5. Iovene MR, Romano M, Pilloni AP, et al. Prevalence of antimicrobial resistance in eighty clinical isolates of Helicobacter pylori. Chemotherapy 1999; 45:8-14.        [ Links ]

6. Mégraud F. Antibiotic resistance in Helicobacter pylori infection. Br Med Bull 1998; 54:207-216.        [ Links ]

7. Torres J, Carmolinga-Ponce M, Pérez-Pérez G, et al. Increasing multidrug resistance in Helicobacter pylori strains isolated from children and adults in Mexico. J Clin Microbiol 2001; 39:2677-2680.        [ Links ]

8. Yakoob J, Fan X, Hu G, Liu L, Zhang Z. Antibiotic susceptibility of Helicobacter pylori in the Chinese population. J Gastroenterol Hepatol 2001; 16:981-985.        [ Links ]

9. Franzin L, Pennazio M, Cabodi D, Paolo Rossini F, Gioannini P. Clarithromycin and amoxicillin susceptibility of Helicobacter pylori strains isolated from adult patients with gastric or duodenal ulcer in Italy. Curr Microbiol 2000; 40:96-100.        [ Links ]

10. Mégraud F, Lehn N, Lind T, et al. Antimicrobial susceptibility testing of Helicobacter pylori in a large multicenter trial: The MACH 2 study. Antimicrob Agents Chemother 1999; 43:2747-2752.        [ Links ]

11. Dore M, Osato M, Realdi G, Mura I, Graham D, Sepúlveda A. Amoxycillin tolerance in Helicobacter pylori. J Antimicrob Chemother 1999; 43:47-54.        [ Links ]

12. Dore M, Kwon D, Sepúlveda A, Graham D, Realdi G. Stable amoxicillin resistance in Helicobacter pylori. Helicobacter 2001; 6:79.        [ Links ]